黄芪对自然衰老小鼠皮肤中ATP酶活力影响的实验研究

[目的]本项研究旨在观察黄芪提取波对自然衰老小鼠皮肤中ATP酶活力的影响,检测黄芪提取液在延缓小鼠皮肤自然衰老方面的作用。[方法]昆明种4月龄雌性小鼠12只作为青年对照组(A),18月龄雌性小鼠36只作为老年组,再随机分为3组,每组12只:老年空白对照组(B),老年阳性对照组(C),黄芪组(D)。用药30天,第31天处死动物并取材。[结果]与老年空白对照组(B)相比,黄芪组(D)小鼠皮肤组织中的ATP酶活力均明显升高(P<0.01)。[结论]中药黄芪提取液可以有效增加ATP酶的活性,达到延缓皮肤组织衰老的作用。     

外用绞股蓝对自然衰老小鼠皮肤组织中CAT活性、MDA含量影响的实验研究

[目的]观察绞股蓝提取液对自然衰老小鼠皮肤组织中过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)含量的影响,并研究不同的给药途径对自然衰老小鼠皮肤组织的改善作用。[方法]昆明种3月龄雌性小鼠10只,作为青年对照组(A);昆明种12月龄雌性小鼠40只,随机分为4组,每组10只:老年外用空白组(B)、老年外用阳性对照组(C)、老年外用绞股蓝组(D)、老年(外用+内服)绞股蓝组(E)。A、B组外涂赋型剂0.5g/t,C组外涂维生素E20mg/t,D组外涂绞股蓝霜剂0.5g/t,E组外涂绞股蓝霜剂(剂量同D组),同时灌胃绞股蓝提取液0.8mL/t。30天后以生化分析方法测定皮肤组织中CAT活性、MDA含量,并观察皮肤组织结构改变。[结果]与A组比较,B、C、D、E组小鼠皮肤组织CAT活性均明显降低(P<0.01),MDA含量明显增加(P﹤0.01);与B组比较,C、D、E组CAT活性提高(P﹤0.05),MDA含量降低(P﹤0.01);与D组相比,E组CAT活性明显提高(P﹤0.05),MDA含量明显降低(P﹤0.05)。[结论]绞股蓝提取液具有拮抗小鼠皮肤自然衰老的作用;外用配以灌胃绞股蓝提取液该种给药方式能更好的起到延缓自然衰老对小鼠皮肤的损害。     

灌胃绞股蓝提取液对自然衰老小鼠皮肤组织中SOD活性、MDA含量影响的实验研究

[目的]研究绞股蓝提取液对自然衰老小鼠皮肤组织的影响及不同给药途径对自然衰老小鼠皮肤的改善作用。[方法]昆明种3月龄雌性小鼠10只,作为青年对照组(A);昆明种12月龄雌性小鼠40只,随机分为4组,每组10只:老年灌胃空白组(B)、老年灌胃阳性对照组(C)、老年灌胃绞股蓝组(D)、老年(灌胃+外用)绞股蓝组(E)。灌胃绞股蓝提取液,同时外涂绞股蓝霜剂。采用病理组织切片制片技术,HE染色以100倍光镜观察真皮结构改变,并以生化分析法测定SOD活性及MDA含量。[结果]与A组比较,B、C、D、E组小鼠皮肤组织SOD活性均明显降低(P<0.05),MDA含量明显增加(P(0.01);与B组比较,C、D、E组SOD活性提高(P(0.01),MDA含量降低(P(0.01);与D组相比,E组SOD活性明显提高(P(0.05),MDA含量明显降低(P(0.05)。[结论]绞股蓝提取液具有拮抗小鼠皮肤自然衰老的作用;灌胃配以外用绞股蓝提取液该种给药方式能更好的起到延缓自然衰老对小鼠皮肤的损害。     

松花粉对衰老小鼠肾脏线粒体DNA缺失突变的影响

目的:研究松花粉对衰老小鼠肾脏线粒体DNA(mtDNA)缺失突变的影响。方法:取昆明种衰老小鼠随机分为松花粉处理组和老年对照组,同时随机选取1组为青年对照组。松花粉处理组每天给予750 mg.kg-1的松花粉灌胃;青年对照组与老年对照组以等体积的0.9%氯化钠注射液灌胃。连续60 d后,采用聚合酶链反应(PCR)技术和光密度扫描检测3组mtDNA的缺失突变情况;测定小鼠肾脏组织中SOD活性、MDA含量。结果:老年对照组小鼠肾脏mtDNA含量及mtDNA缺失明显增多(P<0.05);与老年对照组比较,松花粉组能显著减少衰老小鼠肾脏mtDNA的缺失(P<0.05)。松花粉能明显增加衰老小鼠肾脏组织中SOD活性及减少衰老小鼠肾脏MDA含量(P<0.05)。结论:松花粉可以抑制衰老小鼠肾脏mtDNA的缺失突变,提示松花粉能减少mtDNA的氧化损伤,对mtDNA有保护作用,从而从分子水平提供了松花粉延缓衰老的可能机制。     

枸杞多糖对衰老小鼠皮肤组织总抗氧化能力及脂褐质的影响

目的:观察枸杞多糖对D-半乳糖致小鼠衰老的影响。方法:将50只1月龄昆明种雌性小鼠随机分为空白对照组、模型组、枸杞多糖低、中、高剂量组,每组10只。除空白组外其余各组均每日注射D-半乳糖造成亚急性衰老模型,给药组同时给予不同剂量的枸杞多糖。6周后检测小鼠皮肤组织中总抗氧化能力(T-AOC)活性和脂褐质(LF)含量。结果:枸杞多糖可增强衰老模型小鼠皮肤组织T-AOC活性(P<0.05),降低LF含量(P<0.05)。结论:枸杞多糖可通过提高衰老皮肤抗氧化物酶活性,降低氧化产物含量,从而达到延缓衰老的作用。     

四君子汤对衰老模型小鼠mtDNA缺失的影响

目的 探讨四君子汤对衰老模型小鼠mtDNA缺失的影响及其分子生物学作用机制.方法 取昆明种小鼠,按体重随机分为6组,即正常对照组,模型对照组,四君子汤高、中、低剂量组(灌胃20,10,5 g·kg-1)和维生素E组(灌胃250 mg·kg-1),每组20只,分笼饲养.以D-半乳糖法制备小鼠衰老模型,运用水迷宫实验,通过对小鼠空间辨别性学习能力进行训练来评估其学习记忆能力,观察四君子汤对衰老模型小鼠mtDNA(Mitochondrial DNA,线粒体DNA)缺失的影响.结果 模型对照组和四君子汤低剂量组(5 g·kg-1)小鼠海马mtDNA中存在着约3.87 kb片断缺失.四君子汤高、中剂量组(20,10 g·kg-1)未见缺失片断.结论 四君子汤具有防御模型小鼠脑mtDNA缺失突变的作用,可能是其延缓衰老的分子生物学作用机制.     

康欣口服液对老年小鼠脑线粒体DNA缺失突变影响的实验研究

目的:研究康欣口服液对Balb/c小鼠脑线粒体DNA(mtDNA)缺失突变的影响。方法:近交系Balb/c小鼠,分为青年组(6周),中年组(6个月),老年组(14个月)各10只,提取小鼠脑组织的mtDNA,采用聚合酶链反应(PCR)技术扩增缺失型的mtDNA片段,以证实老年组小鼠脑组织中存在mtDNA缺失。近交系Balb/c老年小鼠分别灌胃给予生理盐水(老年空白对照组),康欣口服液(老年康欣口服液组),连续四个月后处死,提取脑组织的mtDNA,PCR技术分别扩增野生型和缺失型的mtDNA片段,运用凝胶成像仪进行光密度扫描,比较两组缺失型mtDNA/野生型mtDNA的光密度比值。结果:近交系老年Balb/c小鼠脑mtDNA中存在明显的片段缺失,而在中年组与青年组中未检测到相同片段的缺失。与老年空白对照组相比,康欣口服液能显著降低老年Balb/c小鼠mtDNA的缺失率(P<0.001)。结论:mtDNA的缺失突变随年龄而积累,康欣口服液可以抑制老年小鼠脑mtDNA的缺失。     

润肠丸延缓衰老的实验研究

目的探讨润肠丸延缓衰老的作用机制。方法昆明种自然衰老小鼠45只随机分为老年空白对照组、老年阳性对照组、老年润肠丸组;昆明种青年小鼠30只随机分为青年空白对照组、青年润肠丸组各15只。均连续灌胃30日,检测各组小鼠的胸腺指数、脾脏指数、血清超氧化物歧化酶(SOD)活性(黄嘌呤氧化酶法)、丙二醛(MDA)(硫代巴比妥酸法)含量、胆碱酯酶(ACHE)活力。结果SOD、MDA、ACHE及胸腺指数、脾脏指数,老年润肠丸组与老年空白对照组、老年阳性对照组比较均有显著性差异(P<0.05或P<0.01);青年空白对照组与青年润肠丸组比较无显著性差异(P>0.05)。结论润肠丸具有明显的延缓衰老作用,为“六腑以通为用”延缓衰老提供了科学依据。     

补肾健脾养血活血方对老年小鼠肾线粒体DNA缺失突变的影响

目的:研究补肾健脾养血活血方对老年Balb/c小鼠肾线粒体DNA缺失突变的影响。方法:老年Balb/c小鼠随机分为老年空白组和老年给药组,分别给予生理盐水和补肾健脾养血活血方4个月。采用聚合酶链反应(PCR)技术和光密度扫描检测两组线粒体DNA的缺失突变情况。结果;与老年空白组比较,补肾健脾养血活血方能显著减少老年Balb/c小鼠肾mtDNA的缺失(P<0.001)。结论:补肾健脾养血活血方可以抑制老年小鼠mtDNA的缺失突变,提示补肾健脾养血活血法组方能减少mtDNA的氧化损伤,对mtDNA有保护作用,从而从分子水平提供了本方延缓衰老的可能机制。     

绞股蓝抗小鼠皮肤衰老的实验研究

目的：探讨绞股蓝提取液是否具有延缓小鼠皮肤老化的作用。方法：昆明种3月龄小鼠10只为青年对照组（A）;昆明种12月龄小鼠40只随机分成4组：老年外用空白对照组（B）、老年阳性外用对照组（C）、老年给药外用组（D）、老年内服＋外用给药组（E）,分别对不同的组给予不同的药物,并以生化分析方法测定T-AOC及H2O2含量。结果：老年外用空白对照组与青年对照组比较,小鼠皮肤组织中的H2O2含量明显增加（P〈0.01）,T-AOC含量明显减少（P〈0.01）。老年内服＋外用绞股蓝组与老年外用空白对照组比较,小鼠皮肤中的H2O2含量明显降低（P〈0.01）、T-AOC的含量显著提高（P〈0.01）。老年外用给药组和老年外用阳性对照组与老年外用空白组比较,小鼠皮肤组织中的H2O2含量降低（P〈0.05）、T-AOC的含量提高（P〈0.05）。结论：绞股蓝提取液对自然衰老小鼠的皮肤具有抗衰老的作用。     

葛根素对2型糖尿病大鼠脂肪组织ADRP基因表达的影响

目的：观察葛根素(Pue)对实验性2型糖尿病(2-DM)大鼠脂肪组织中脂肪分化相关蛋白(ADRP)基因mRNA表达的影响。方法：Wistar大鼠喂以高糖高脂饮食伴尾静脉注射小剂量链脲佐菌素(STZ)25 mg·kg^-1复制2-DM大鼠模型，将造模大鼠随机分为模型组(腹腔注射丙二醇)和3个Pue治疗组(腹腔注射40，80，160 mg·kg^-1)，另选10只大鼠为正常组。各组大鼠连续腹腔注射6周后，空腹取材，测定空腹血糖(FBG)、血清胰岛素(FINS)水平，并计算胰岛素抵抗指数(IR)；同时以RT-PCR法检测脂肪组织ADRP基因mRNA的表达。结果：与2-DM模型组比较，Pue高、中剂量组大鼠脂肪组织ADRP基因 mRNA表达显著降低(P<0.05)；Pue高、中、低剂量组大鼠FBG，IR及Pue高、中剂量组大鼠FINS显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论：Pue可通过降低2-DM大鼠ADRP基因mRNA表达，降低胰岛素抵抗水平，从而降低2-DM大鼠血糖。     

葛根素对钴60-γ射线致小鼠睾丸支持细胞急性损伤的保护作用

目的探讨中药单体葛根素对钴60(60Co)-γ射线致小鼠睾丸支持细胞急性损伤的保护作用及机制。方法 40只健康雄性Wistar小鼠随机分为正常组,模型组及低、高剂量组,每组10只。模型组及低、高剂量组给予60Co-γ8.0Gy下腹部均匀照射517s。造模24h后,低、高剂量组分别给予葛根素230、450mg/(kg·d)灌胃,正常组和模型组给予等量生理盐水灌胃,均每天1次,连续2周。观察小鼠睾丸组织形态学变化;采用酶联免疫吸附法测量血清卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)、促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)及抑制素β(Inhibinβ)水平;应用实时定量PCR法测定睾丸组织中Inhibinβ mRNA相对表达量。结果模型组小鼠睾丸支持细胞和生精细胞发生不同程度的损伤,低、高剂量组小鼠有不同程度的改善,以高剂量组改善最为明显。与正常组比较,模型组血清FSH水平显著提高,血清Inhibinβ水平及睾丸组织Inhibinβ mRNA表达水平显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,低、高剂量组小鼠血清FSH、Inhibinβ水平及睾丸组织Inhibinβ mRNA表达显著改善(P<0.05),以高剂量组改善最明显(P<0.01,P<0.05)。结论中药单体葛根素对60Co-γ射线致小鼠睾丸支持细胞急性损伤有一定的保护作用。     

葛根素对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用

目的:观察葛根素(Pue)对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用.方法:建立大鼠全肝缺血再灌注模型,比较Pue处理对再灌注血ET-1、NO和ALT水平,肝组织中MDA、细胞总钙含量和SOD活性,以及肝组织光镜下的形态学改变.结果:Pue处理可使血NO含量、肝组织SOD活性明显增高;而血ET-1、ALT含量及肝组织MDA、细胞总钙含量明显降低.肝组织形态损伤也明显减轻.Pue保护效应与剂量大小明显相关.结论:葛根素对肝缺血再灌注损伤有显著的药物预适应作用,其主要机制是清除氧自由基、减轻细胞内Ca 超载以及改善微循环.     

截哮口服液对RSV感染小鼠IL-4,IL-5的影响

目的：观察截哮口服液对RSV感染小鼠血清中IL-4、IL-5的影响。方法：将70只小鼠随机分成截哮口服液高剂量组、中剂量组、低剂量组、病毒唑组、模型组、正常组，用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）测定各组小鼠血清中IL-4、IL-5的水平。结果：截哮口服液各剂量组与病毒唑组比较IL-4均有显著差异（P〈0．05）；中剂量组、病毒唑组与模型组比较IL-4有显著差异（P〈0．05）。中剂量组与病毒唑组比较IL-5有显著差异（P〈0．05），中剂量组和病毒唑组与正常组比较IL-5有显著差异（P〈0．05），中剂量组与高剂量组、低剂量组、模型组比较IL-5有显著差异（P〈0．05）；高剂量组和低剂量组比较IL-5无显著差异。结论：截哮口服液对呼吸道合胞病毒感染小鼠血清中IL-4、IL-5有降低作用。     

红景天提取物对雄性小鼠性行为的影响

目的：探讨红景天提取物对雄性小鼠性行为的影响。方法将50只雄性小鼠按体重随机分为红景天低、中、高剂量组,男宝胶囊组,正常对照组,每组10只。红景天低、中、高剂量组灌胃红景天提取物稀释液0.05、0.20、0.80 g/kg,男宝胶囊组灌胃男宝胶囊混悬液2.00 g/kg,正常对照组灌胃等体积生理盐水。2次/d,连续21 d。末次给药后,各组雄性小鼠进行交配实验及抗疲劳实验;处死后取睾丸、脾脏,计算脏器指数,并分别检测睾丸、肝组织 SOD、MDA 水平。结果与正常对照组比较,红景天低、中剂量组雄性小鼠扑捉潜伏期[(20.88±19.94)s、(35.40±22.02)s 比(78.11±43.33)s]缩短(P＜0.05或P＜0.01);红景天中剂量组雄性小鼠睾丸系数[(0.72±0.10)%比(0.64±0.08)%]增加(P＜0.05);红景天中、高剂量组、男宝胶囊组睾丸 SOD[(152.71±38.10)U/mg、(122.32±52.76)U/mg、(94.38±22.20)U/mg 比(25.30±14.21)U/mg]水平升高(P＜0.01);红景天中剂量组及男宝胶囊组肝组织SOD[(77.71±26.35)U/mg、(74.10±26.04)U/mg)比(57.92±17.17)U/mg]水平升高(P＜0.05)。结论红景天提取物可提高雄性小鼠的性行为能力及小鼠睾丸和肝组织的抗氧化能力。     

四乙酰葛根素抗炎作用及机制研究

目的:探讨四乙酰葛根素的抗炎作用并初步研究其作用机制.方法:将雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和四乙酰葛根素高、中、低剂量( 80,40,20 mg· kg-1)组以及吲哚美辛(5 mg·kg-1)组,四乙酰葛根素尾iv给药4d,末次给药30 min后予以造模,观察四乙酰葛根素对角叉菜胶所致大鼠急性足肿胀、炎性组织中前列腺素E2( PGE2)和血清中肿瘤坏死因子α( TNF-α)、白介素1β(IL-1β)含量的影响.结果:四乙酰葛根素(80 mg·kg-1)能明显抑制模型大鼠的足肿胀(P＜0.01),降低肿胀足爪组织中PGE2(P＜0.05)及血清中TNF-α(P＜0.05),IL-1β(P ＜0.05)的含量.结论:四乙酰葛根素可能通过影响炎性因子释放而起到抑制大鼠炎性足肿胀的作用.     

四物汤对非酒精性脂肪性肝病小鼠的作用机制研究

目的研究四物汤对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)小鼠的作用机制。方法将60只C57健康雄性小鼠适应性喂养5 d后,按照随机数字表法分为5组,分别为正常对照组,模型组,四物汤低、中、高剂量组,每组各12只。正常对照组小鼠予正常饲料喂养,其余4组小鼠予高脂饲料喂养,自由进食,连续4周,建立NAFLD模型。造模成功后,正常对照组及模型组小鼠予0.9%氯化钠注射液0.2 m L/100 g灌胃,四物汤低、中、高剂量组小鼠分别予0.05、0.10、0.20 m L/100 g四物汤药液灌胃,均每日2次,连续6周。然后取各组小鼠血清标本,检测血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平;取肝组织,检测游离脂肪酸(FFA)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及超氧化物歧化酶(SOD)活性,并对肝脏组织形态学进行观察。结果与正常对照组相比,模型组小鼠血清TG、TC、ALT、AST水平均增高(P0.05),HDL-C水平降低(P0.05)。与模型组相比,四物汤低、中、高剂量组小鼠血清TG、TC、ALT、AST水平均显著降低(P0.05),HDL-C水平增高(P0.05),且与正常对照组比较差异均无统计学意义(P0.05)。与正常对照组相比,模型组肝组织MDA、FFA活性均升高(P0.05),GSH-Px、SOD活性均降低(P0.05);与模型组相比,四物汤低、中、高剂量组肝组织MDA、FFA活性均降低(P0.05),GSH-Px、SOD活性均增高(P0.05),且与正常对照组比较差异均无统计学意义(P0.05)。结论四物汤可通过调节血脂水平,改善脂质代谢紊乱,提高肝脏抗氧化能力,从而起到控制NAFLD进展以及其恶化程度的作用。     

柿树寄生总提取物对链脲佐菌素致小鼠糖尿病的保护作用及机制的影响

目的:观察柿树寄生总提取物对链脲佐菌素(STZ)所致小鼠糖尿病的影响。方法:制备柿树寄生总提取物;小鼠尾静脉注射STZ(120 mg·kg-1)建立糖尿病小鼠模型。糖尿病小鼠随机分为5组:柿树寄生总提取物高、中、低剂量(10,5,2.5 g·kg-1)组,模型组,二甲双胍组;另设10只正常小鼠作为空白组。各组小鼠均以连续给药14 d后,分别测定各小鼠空腹血糖(FBG),肝组织和血清中丙二醛(MDA)水平及超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力值,以及血脂代谢情况;并通过HE染色观察胰腺组织的病理学变化。结果:与模型组比较,柿树寄生总提取物对STZ所致糖尿病小鼠有明显降低血糖的作用,明显提高肝组织和血清的SOD,GSH-Px活力,降低MDA含量(P0.05);降低血清总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),低密度脂蛋白(LDLC)水平和提高高密度脂蛋白(HDLC)含量(P0.05);改善胰腺组织病理学变化。结论:柿树寄生总提取物能明显降低STZ致小鼠糖尿病模型的血糖水平,增强机体的抗氧化能力以及改善血脂代谢异常情况。     

葛根素与葡萄糖耐量因子分子水平配伍对肥胖大鼠体质量及血脂的影响

目的:中药葛根提取物葛根素与葡萄糖耐量因子(GTF)均参与并调节糖代谢和脂代谢,本实验旨在观察葛根素与GTF分子水平络合物对饮食诱导肥胖大鼠的影响。方法:将肥胖模型大鼠按体质量随机分为5组,每组12只。分为肥胖模型组、阳性药组、葛根素+GTF小、中、大剂量组,另设正常对照组。同时给药4周,测定每周体质量及血脂水平。结果:给予葛根素与GTF分子水平络合物4周后,肥胖大鼠的体质量增长减慢,甘油三酯、总胆固醇水平降低,高密度脂蛋白水平升高,与肥胖模型组比较有差异(P<0.05)。结论:中药葛根提取物葛根素与GTF分子水平配伍后可缓解肥胖大鼠的体质量增长,降低血脂水平。     

硒对酒精性肝损害小鼠保护作用的研究

目的研究富硒胶囊对酒精性肝损害小鼠的保护作用。方法将50只健康昆明种小鼠(均为雄性)随机分为空白对照组,白酒对照组和硒低、中、高剂量组,每组10只。空白对照组和白酒对照组饮用自来水;其他各组分别饮自由溶于水的不同剂量富硒胶囊的硒溶液。第30天时对小鼠进行空腹白酒灌胃实验,16 h后处死小鼠,然后测定肝匀浆中谷胱甘肽过氧化物酶、丙二醛,血谷草转氨酶、谷丙转氨酶含量。结果与空白对照组相比,白酒对照组AST、ALT明显升高。与白酒对照组相比,高剂量硒组AST、MDA下降明显。与空白对照组相比,白酒对照组MDA明显升高,GDH-Px活力下降。结论白酒可造成肝组织酶异常,但对于酒精性肝损害小鼠,高剂量硒可起到保护作用,低、中剂量硒对其影响尚需进一步研究。