脾阴虚证衰老大鼠心肌、脑组织mtDNA缺失及滋补脾阴方药作用机制的实验研究

目的：本项研究旨在通过对脾阴虚证衰老大鼠心肌、脑组织线粒体DNA(mtDNA)缺失及线粒体呼吸链酶复合体活力的研究，探讨脾阴虚衰老状态下mtDNA缺失及线粒体呼吸链酶复合体活力变化的规律，进一步揭示脾阴虚衰老的病理实质和滋补脾阴方药的作用机制，从而为脾实质的研究提供客观依据。方法：建立大鼠脾阴虚证衰老模型，观察脾阴虚证衰老大鼠心肌、脑组织mtDNA缺失及线粒体呼吸链酶复合体活力变化；观察滋补脾阴方药对脾阴虚证衰老大鼠心肌、脑组织mtDNA缺失及线粒体呼吸链酶复合体活力的调控。结果：脾阴虚衰老状态下，大鼠心肌、脑组织mtDNA缺失较青年组和正常老年组明显增多，线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ和Ⅳ活力较青年组和正常老年组明显下降，滋补脾阴方药可减少脾阴虚证衰老大鼠心肌、脑组织的mtDNA缺失，提高线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ和Ⅳ的活力。结论：脾阴虚衰老机体细胞mtDNA缺失及线粒体呼吸链酶复合体活力发生异常改变，滋补脾阴方药对脾阴虚衰老时机体mtDNA、呼吸链酶复合体活力有调控作用。     

脾阴虚证衰老大鼠心肌、脑组织mtDNA缺失及滋补脾阴方药作用机制的实验研究

目的:本项研究旨在通过对脾阴虚证衰老大鼠心肌、脑组织线粒体DNA(mtDNA)缺失及线粒体呼吸链酶复合体活力的研究,探讨脾阴虚衰老状态下mtDNA缺失及线粒体呼吸链酶复合体活力变化的规律,进一步揭示脾阴虚衰老的病理实质和滋补脾阴方药的作用机制,从而为脾实质的研究提供客观依据.方法:建立大鼠脾阴虚证衰老模型,观察脾阴虚证衰老大鼠心肌、脑组织mtDNA缺失及线粒体呼吸链酶复合体活力变化;观察滋补脾阴方药对脾阴虚证衰老大鼠心肌、脑组织mtDNA缺失及线粒体呼吸链酶复合体活力的调控.结果:脾阴虚衰老状态下,大鼠心肌、脑组织mtDNA缺失较青年组和正常老年组明显增多,线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ和Ⅳ活力较青年组和正常老年组明显下降,滋补脾阴方药可减少脾阴虚证衰老大鼠心肌、脑组织的mtDNA缺失,提高线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ和Ⅳ的活力.结论:脾阴虚衰老机体细胞mtDNA缺失及线粒体呼吸链酶复合体活力发生异常改变,滋补脾阴方药对脾阴虚衰老时机体mtDNA、呼吸链酶复合体活力有调控作用.     

吸附树脂对葛根中葛根素的分离研究

葛根为常用中药 ,具有调节血压、增加冠脉血流量 [1] 、改善脑循环[2 ] 、抑制血小板聚集[3 ] 、抗氧化自由基等作用。临床应用于冠心病、脑血栓[4,5] 均取得了明显的疗效。由于粉葛根中葛根素的含量远远低于野葛根 ,从而大大限制了粉葛根的药用。目前虽然也有利用野葛根分离得高含量葛根素的报道 ,但大多采用酸水解法 [6] 或溶剂萃取法 ,但酸水解法虽然得到了高含量葛根素 ,却破坏了药材中其他未知或已知药效成分 ,一定程度上损害了中药特色。本实验采用吸附树脂仅通过“吸附 -脱附”一步的简单工艺即可从粉葛根中得到较高含量的葛根素 ,并…     

葛根及葛根素对心血管系统的药用价值

葛根及葛根素对心血管系统的药用价值岳红文，胡小琴葛根［ＦＰｕｅｒａｒｉａｌｏｂｏｔａ（ｗｉｌｌｄ）Ｏｈｗｉ］为豆科葛属植物，全世界约有２０多种，主要分布在亚热带的亚洲。我国约１０多种，遍布全国。近二十年来对葛根及葛根素的研究较为详细（１～６）。葛根的...     

四君子汤对衰老模型小鼠mtDNA缺失的影响

目的 探讨四君子汤对衰老模型小鼠mtDNA缺失的影响及其分子生物学作用机制.方法 取昆明种小鼠,按体重随机分为6组,即正常对照组,模型对照组,四君子汤高、中、低剂量组(灌胃20,10,5 g·kg-1)和维生素E组(灌胃250 mg·kg-1),每组20只,分笼饲养.以D-半乳糖法制备小鼠衰老模型,运用水迷宫实验,通过对小鼠空间辨别性学习能力进行训练来评估其学习记忆能力,观察四君子汤对衰老模型小鼠mtDNA(Mitochondrial DNA,线粒体DNA)缺失的影响.结果 模型对照组和四君子汤低剂量组(5 g·kg-1)小鼠海马mtDNA中存在着约3.87 kb片断缺失.四君子汤高、中剂量组(20,10 g·kg-1)未见缺失片断.结论 四君子汤具有防御模型小鼠脑mtDNA缺失突变的作用,可能是其延缓衰老的分子生物学作用机制.     

复方葛根合剂及葛根中葛根素含量的高效液相色谱分析

 目的为了控制复方葛根合剂和葛根药材的质量,需要建立其中有效成分葛根素的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,考察了样品制备方法、流动相系统、检测波长等因素对分析结果的影响,色谱柱为Shim Pack CLC-ODS(6.0 mm×150 mm)不锈钢柱,以甲醇-水(29∶71)为流动相,流速1 mL·min^-1,检测波长306nm,进样量10μL。结果葛根素和其它组分可达基线分离,葛根素浓度在20.0～180.0 μg·mL^-1内线性关系良好(r=0.99998),合剂和生药的回收率分别为99.60%和100.4%,RSD＜1.6%,合剂经简单的稀释和过滤后即可直接进样测定。结论此法操作简便,结果准确可靠,精密度好。     

不同提取方法对葛根中葛根素提取率的影响

探讨不同提取方法和提取条件对葛根中葛根素提取率的影响,找到葛根素的最佳提取方法和条件,为葛根素产品的生产提供理论基础.研究表明:1.在4种提取方法中,醇加热回流法是最佳的葛根素提取方法;2.比较不同的提取条件,葛根素提取的最佳实验条件为:乙醇体积分数为60％,提取温度为80℃,提取时间为60min,料液比为1∶8,提取次数为3次.     

葛根中葛根素的提取工艺研究

目的：建立反相高效液相色谱法测定粉葛中的葛根素的含量，并以正交实验优选出最佳提取工艺。方法；采用RP-HPLC的方法，固定相为ODS；流动相为甲醇-水(30：70)；柱温25℃；流速1．0ml／min；检测波长250nm。结果：优选出最佳工艺为A1B3C3。结论：该方法简便，可靠。     

黄芪对自然衰老小鼠皮肤中ATP酶活力影响的实验研究

[目的]本项研究旨在观察黄芪提取波对自然衰老小鼠皮肤中ATP酶活力的影响,检测黄芪提取液在延缓小鼠皮肤自然衰老方面的作用。[方法]昆明种4月龄雌性小鼠12只作为青年对照组(A),18月龄雌性小鼠36只作为老年组,再随机分为3组,每组12只:老年空白对照组(B),老年阳性对照组(C),黄芪组(D)。用药30天,第31天处死动物并取材。[结果]与老年空白对照组(B)相比,黄芪组(D)小鼠皮肤组织中的ATP酶活力均明显升高(P<0.01)。[结论]中药黄芪提取液可以有效增加ATP酶的活性,达到延缓皮肤组织衰老的作用。     

葛根素联合二甲双胍对糖尿病小鼠应激能力的影响

目的探讨葛根素合用二甲双胍(P-M合剂,2:1)对糖尿病小鼠抗应激能力的影响。方法:四氧嘧啶腹腔注射造成小鼠糖尿病模型,分为P-M合剂高、中、低剂量组(400、200、100 mg/kg)、模型组、正常组。灌胃给药14 d后,分别通过爬绳、负重游泳、耐缺氧、耐高/低温试验,评价P-M合剂对小鼠应激能力的影响。结果 P-M合剂各剂量组均可显著延长糖尿病小鼠的爬绳时间(3.8~6.5 min)和游泳耗竭时间(13.9~18.0 min),与模型组比较有统计学意义(P<0.05或P<0.01);P-M合剂高、中剂量组可显著延长糖尿病小鼠常压耐缺氧下的生存时间至13.0~14.3 min(P<0.05或P<0.01);P-M合剂高剂量组可明显增强小鼠耐高温、耐低温能力,死亡率降低(P<0.05)。结论葛根素合用二甲双胍能提高糖尿病小鼠的抗应激能力。     

葛根素对酒醉小鼠行为学及抗氧化作用的研究

目的　通过研究葛根素对小鼠饮酒后行为学及体内超氧化物歧化酶、脂质过氧化物的影响 ,探讨葛根素的解酒功能和保护机体细胞、抗氧化作用。方法　分别给小鼠灌胃葛根素溶液和饮用酒后 ,观察小鼠醉酒潜伏期、睡眠时间及体内 SOD、MDA、GSH- PX、GSH等的变化。结果　给药组小鼠与对照组小鼠相比 ,醉酒潜伏期明显延长 ,睡眠时间显著缩短 ;小鼠醉酒后体内 SOD、MDA、GSH- PX、GSH发生异常变化 ,灌胃葛根素溶液后能够改变而接近于正常水平。结论　上述结果表明 ,葛根素对饮酒后小鼠的异常行为的改变和机体内氧化反应有明显的拮抗作用 ,起到保护机体细胞的作用     

葛根素对去卵巢小鼠学习记忆和突触结构的影响

 目的研究葛根素对雌激素剥夺小鼠学习记忆和突触结构的影响。方法卵巢摘除(Ovx)或假手术(Sham)后一周,雌性小鼠给予4周的葛根素(Pur,40,120mg·kg^-1,ip)或苯甲酸雌二醇(EB,4μg·d^-1,sc)治疗。分别用Morri′s水迷宫和穿梭箱检测小鼠的空间记忆和主动回避行为;通过制备超薄切片电镜观测学习记忆相关脑区海马CA1和前皮层的突触超微结构变化。结果Ovx小鼠经120mg·kg^-1 Pur治疗后,在水迷宫中搜寻平台的平均路径显著缩短(P<0.05),主动逃避电击的次数明显增多(P<0.01)。同时,葛根素增加Ovx小鼠海马和前皮层的突触后密度(PSD)厚度,并减小突触间隙宽度,但对突触界面曲度、突触活性带长度没有明显作用。结论长期Pur治疗可通过影响海马和前皮层突触结构改善雌激素剥夺小鼠的记忆损伤。     

葛根素对营养性肥胖大鼠的减肥作用及机制

 目的探讨葛根素(puerarin,Pur)的减肥作用。方法建立膳食诱导的营养性肥胖大鼠模型,对肥胖大鼠灌胃给药Pur混悬液6周,观察Pur干预前后体重、肥胖指数、睾肾周围脂肪质量、脂肪系数、脂肪细胞数量、脂肪细胞大小、血脂、血糖及胰岛素(INS)水平变化。结果给予Pur干预后,营养性肥胖大鼠体重、肥胖指数(Lee′s)、睾肾周围脂肪质量、脂肪系数及脂肪细胞大小均明显低于肥胖模型组(P<0.05或P<0.01);高、低剂量组血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)含量显著下降(P<0.05或P<0.01)。结论Pur对营养性肥胖大鼠有明显的减肥及改善脂质代谢的作用。     

葛根素抗D-半乳糖致衰老小鼠的脂质过氧化作用

目的 :探讨葛根素对D-半乳糖致衰老小鼠抗氧化能力的影响。方法 :用D-半乳糖制备衰老模型小鼠 ,同时腹腔注射不同剂量的葛根素给予治疗。六周后 ,用开阔行为模型检测小鼠在新异环境中的自发行为 ,用紫外分光光度计和荧光分光光度计分别检测衰老小鼠血清、脑和肝组织SOD ,MDA水平 ,以及脑和肝组织脂褐素含量。结果 :10 0mg·kg^-1和 5 0mg·kg^-1葛根素均可显著增加D-半乳糖致衰老小鼠在新异环境中的自发活动和探究行为 ,可以显著提高衰老小鼠血清、脑和肝组织SOD的活性 ,并使衰老小鼠体内MDA和脂褐素含量明显下降。结论 :葛根素可显著提高D-半乳糖致衰老小鼠的抗氧化能力。     

不同采收期和不同加工方法对葛根素含量的影响

目的研究葛根的最佳采收期和初加工技术。方法以葛根素的含量为指标,对不同采收期和不同加工方法的葛根,进行比较。结果多年生葛根的葛根素含量最高分别为1.60%,5.11%。在葛根素含量的比较过程中,发现XNY-1的烘干处理与风干处理相差不大,XNY-2的烘干处理比风干处理高出0.124%;XNY-1带皮处理比去皮处理高出0.236%,XNY-2带皮处理则比去皮处理高出0.708%。结论采收期应选在1月或更晚的月份进行,加工方法以带皮烘干为好。     

葛根素对周围神经再灌注损伤保护的实验研究

目的：探讨葛根素注射液对家兔周围神经缺血再灌注损伤的影响。方法：采用“髂总动脉夹闭法”建立家兔周围神经再灌注损伤模型。100只家兔随机分成5组：对照组、缺血组、再灌注组、葛根素治疗Ⅰ组、葛根素治疗Ⅱ组。动态观察坐骨神经运动神经传导速度（MCV）、动作电位波幅（Amp）、潜伏期（Lan）及神经组织形态学变化。结果：随缺血时间的延长，缺血组、再灌注组运动神经传导速度减慢，动作电位波幅降低，潜伏期延长（P〈0.05），组织病理学改变加重；葛根素治疗Ⅰ组相对于缺血组，葛根素治疗Ⅱ组相对于再灌注组运动神经传导速度增快，动作电位波幅增高，潜伏期缩短（P〈0.05），组织病理学变化减轻。结论：葛根素注射液对家兔周围神经缺血再灌注损伤具有保护作用。     

葛根素注射液对急性心梗溶栓后再通率的影响

目的观察葛根素注射液在急性心梗（AMI）溶栓后应用的疗效。方法选择59例AMI患者分成葛根素组及常规溶栓治疗组，比较两组对于血管再通的影响。结果葛根素组再通率达到61．8％，常规溶栓组32％。结论葛根素联合溶栓治疗急性心梗能够有效提高再通率，改善AMI病人的远期预后，提高病人的生存质量。     

葛根素对大鼠缺血/再灌注心肌细胞凋亡的影响

目的:探讨葛根素对大鼠缺血/再灌注心肌细胞凋亡的影响。方法:建立大鼠缺血/再灌注模型,并给予葛根素药物干预,观察各组心肌细胞凋亡的情况,以了解细胞凋亡及葛根素在再灌注损伤中所起的作用。结果:假手术组及单纯缺血组凋亡细胞无明显增多,而缺血/再灌注组凋亡细胞明显增多(P<0.01);在再灌注前给予葛根素治疗可减少因再灌注引起的细胞凋亡(P<0.05)。结论:缺血/再灌注后可见心肌细胞凋亡发生,再灌注可加速细胞凋亡的发生;葛根素可抑制心肌细胞凋亡。     

基于免疫-炎症-衰老探讨八子补肾胶囊对自然衰老小鼠老化过程的延缓作用

目的：探讨八子补肾胶囊延缓自然衰老小鼠老化过程的功效作用及作用机制。方法：以13月龄自然衰老小鼠为实验研究对象,将其按体质量随机分为4组,即自然衰老组,八子补肾低、高剂量组（1、2 g·kg-1）,雷帕霉素组（0.002 g·kg-1）。通过行为学实验检测小鼠的衰弱表征并测定其虚弱指数;流式细胞术检测小鼠脾脏T和B淋巴细胞、效应性T细胞（TE）、记忆性T细胞（TM）、幼稚性T细胞（TN）、辅助性T细胞（Th）、细胞毒性T细胞（Tc）、Th1细胞、Th2细胞和调节性T细胞（Treg）比例;细胞增殖与活性检测（CCK-8）试剂盒检测小鼠淋巴细胞的增殖能力;苏木素-伊红（HE）染色观察小鼠脾脏组织病理学变化;免疫组化法（IHC）检测细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2A(p16)和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(p21)的表达情况;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测衰老相关蛋白p16和p21的mRNA表达情况;Luminex检测小鼠外周血血清炎症因子：肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ干扰素（IFN-γ）、白细胞介素（IL）-1β、IL-2、IL-4、IL-10、IL-...