天麻种内变异不同类型的过氧化物酶同工酶及可溶性蛋白的电泳研究

对天麻种内变异不同类型在不同发育阶段的过氧化物酶同工酸及可溶性蛋白进行了聚丙烯酸胶凝胶电泳研究，探讨了天麻在不同发育阶段生理生化的相关性和差异性，结果发现天麻种内表型变异尚未在遗传上固定下来。本文的研究为天麻的种下分类提供了科学的证据。     

远志与卵叶远志的鉴别研究

目的：对不同时期采集的远志与卵叶远志及远志炮制品、伪品进行对比鉴别研究,为临床合理用药提供依据。方法：应用性状鉴别、薄层色谱法和紫外光谱法进行鉴别实验。结果：远志与卵叶远志基源、性状相同与远志炮制品薄层色谱主斑点一致,紫外光谱吸收图谱一致,远志及卵叶远志地上部分与地下部分,薄层色谱主斑点一致,其他斑点差异较大,紫外图谱也有明显差别;伪品远志薄层色谱图及紫外光图谱与正品明显不一致。结论：该方法可用于远志不同品种、不同采集期、不同制品及其伪品的定性鉴别,可将卵叶远志作为远志的开发品种之一。     

不同寄主的管花肉苁蓉可溶性蛋白的电泳分析

目的:对5个管花肉苁蓉材料进行鉴别,探索可溶性蛋白电泳指纹图谱与鉴定之间的关系,同时为建立中药材电泳图谱库提供材料。方法:研究了不同寄主的5个管花肉苁蓉材料的可溶性蛋白在SDS-PAGE条件下的电泳特性。结果:不同寄主的管花肉苁蓉可溶性蛋白的SDS-PAGE图谱分辨率高,重现性强,其多态性条带为55.56%。结论:各个材料的电泳图谱可以相互区别。不同寄主管花肉苁蓉可溶性蛋白的SDS-PAGE图谱可作为种间鉴定的依据。     

苦豆子等位酶遗传多样性研究

目的 探讨苦豆子不同种群的等位酶特性,从生化水平上分析其遗传变异。方法 采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,研究来源不同的24个苦豆子（Sophora alopecuroides L.）种群720个样本的遗传多样性,应用POPGEN 32分析数据,UPGMA绘制聚类图。结果 5个酶系统共检测到26个酶位点,多态位点百分数（P）为73.08%,平均期望杂合度（He）为0.337;Shannon信息指数（I）为0.517;各种群间基因分化系数（F_ST）为0.427;基因流（Nm）的平均值为0.687;种群间的遗传一致度为0.581 5~0.926 1,平均为0.769 0。聚类分析显示,种群间存在遗传分化。结论 苦豆子具有较高的遗传多样性,种群间的遗传分化是其遗传多样性的主要来源;各种群间的遗传距离与地理距离间没有明显的关系。     

不同居群蒙古扁桃的等位酶变异及遗传多样性分析

目的:在等位酶水平上对蒙古扁桃4个不同野生居群的遗传多样性进行分析。方法:采用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳技术。结果:多态位点百分率P=77.78%,等位基因平均数A=1.7916,平均观察杂合度(Ho)=0.4009,平均期望杂合度(He)=0.4898;蒙古扁桃居群间的遗传分化系数(GST)为0.0693,说明其6.93%的遗传变异来自于居群间;基于遗传分化系数计算的基因流(Nm)为3.3576,说明居群间存在适度的基因流;固定系数(F)为0.0896,显示蒙古扁桃居群纯合体轻微过量,杂合体略显不足。结论:蒙古扁桃种群仍具有较高的遗传多样性并且在适宜的生境中可以完成自然更新,应采取就地保护的保育措施。     

肉苁蓉属4种肉苁蓉可溶性蛋白的SDS-PAGE电泳分析

目的对肉苁蓉属4个种进行鉴别。方法采用可溶性蛋白质SDS-PAGE凝胶电泳。结果肉苁蓉属4个种的SDS-PAGE图谱存在显著差异,其多态性条带为81.82%。结论各个种的电泳图谱可以相互区别,肉苁蓉属可溶性蛋白的SDS-PAGE图谱可作为种间鉴定的蛋白指纹图谱。     

不同产地红曲中可溶性蛋白和2种同工酶的凝胶电泳研究

目的：考察各地红曲产生菌株间以及本实验室诱变育种所得红曲霉属真菌ＭＳ１８号菌株的亲缘关系。方法：对从各地红曲药材样品中分离纯化到的１２株红曲霉属真菌（ＭＳ０１～１２号）及ＭＳ１８号菌株进行可溶性蛋白、酯酶和超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）的凝胶电泳分析。结果：ＭＳ０１～１２号菌株的３种电泳图谱完全一致,而ＭＳ１８号菌株的电泳图谱发生了较大变化,这与形态学研究结果是一致的。结论：ＭＳ０１～１２号菌株为同１个种,而ＭＳ１８号菌株与ＭＳ０１～１２号不是同１个种或是它们的１个变种。     

远志皂苷元调控tau蛋白磷酸化的实验研究

目的观察远志皂苷元对阿尔茨海默（AD）大鼠模型海马tau蛋白磷酸化相关酶类表达的影响,并探讨其机理。方法清洁级SD雄性大鼠60只,随机分为对照组、模型组、多奈哌齐组及远志皂苷元低、中、高剂量组,每组10只。侧脑室注射寡聚体形式的β淀粉样蛋白（Aβ）1-42制备AD大鼠模型,术后给药组给予不同剂量远志皂苷元和多奈哌齐灌胃,对照组和AD模型组给予等量生理盐水灌胃。应用免疫组织化学方法和蛋白印迹法检测海马tau蛋白激酶（GSK-3β、CDK-5）和磷酸酯酶（PP-1、PP-2A）的表达水平。结果与对照组比较,模型组tau蛋白激酶表达明显升高,磷酸酯酶表达明显降低（P〈0.01）;与模型组比较,远志皂苷元各剂量组蛋白激酶表达明显降低,磷酸酯酶表达明显升高（P〈0.01）。结论远志皂苷元能调节AD大鼠模型蛋白激酶和磷酸酯酶之间的平衡失调。     

远志寡糖酯类化合物及远志NFDE8酮Ⅲ对CYP450酶的活性影响研究

该研究采用人肝微粒体体外孵育的方法,通过特异性探针反应评价从远志中分离得到的寡糖酯类化合物tenuifoliside C,tenuifoliside D,telephiose A,telephiose C和远志酮Ⅲ对8个CYP450酶亚型的抑制作用。分别以非那西丁(CYP1A2)、香豆素(CYP2A6)、紫杉醇(CYP2C8)、双氯芬酸(CYP2C9)、右美沙芬(CYP2D6)、氯唑沙宗(CYP2E1)、咪达唑仑(CYP3A4)、S-美芬妥因(CYP2C19)作为评价CYP450酶活性的体外探针药物,以高效液相色谱法(HPLC)分别测定其代谢产物对乙酰氨基酚、7-羟基香豆素、6α-羟基紫杉醇、4’-羟基双氯芬酸、右啡烷、6-羟基氯唑沙宗、1’-羟基咪达唑仑、4’-羟基美芬妥因的生成量,评价5个单体化合物对CYP450酶活性的影响。研究结果表明,4个寡糖酯类化合物和远志酮Ⅲ对CYP2E1有显著的抑制作用(抑制率>50%),对其他7个亚型CYP1A2,CYP2A6,CYP2C8,CYP2C9,CYP2C19,CYP2D6,CYP3A没有明显抑制作用。IC50分别为38.73,54.14,61.77,62.22,50.56μmol·L-1。     

航天搭载丹参的可溶性蛋白及CAT、POD、SOD同工酶分析

目的:探讨航天搭载处理对丹参植株生理特性的影响。方法:以航天搭载丹参和未搭载的丹参植株为材料,利用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳技术对丹参植株进行了可溶性蛋白、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)同工酶分析。结果:与未搭载的丹参比较,航天搭载丹参的可溶性蛋白、CAT、POD、SOD同工酶酶带数、酶带迁移率、酶活性强度均表现出差异,可溶性蛋白的总量明显高于对照组,同工酶的酶活性强度增强。结论:空间环境对丹参种子产生了一定的诱变作用,搭载后的丹参抗逆性增强。     

远志不同炮制品的急性毒性比较研究

目的比较生远志、制远志、蜜远志60%乙醇提取液及水提取液对小鼠的急性毒性,为远志的毒性研究及临床安全用药提供科学依据。方法分别制备生远志、制远志、蜜远志的60%乙醇提取液及水提取液,测定其总皂苷含量,并采用灌胃给药,观察14天内小鼠的中毒情况及死亡情况,用改良寇氏法分别测定其半数致死量及95%可信限。结果制远志乙醇提取液中总皂苷含量最高,其毒性最大;而蜜远志水提取液中的总皂苷含量最低,其毒性最低。结论不同炮制方法能改变远志皂苷类成分的含量,远志的毒性与总皂苷的含量成正比,总皂苷含量越高,其毒性越大。     

远志炮制历史沿革及研究进展

对远志的炮制方法和现代研究进行归纳和总结,详细介绍了远志的净制、不加辅料炮制、加辅料炮制法,概述了远志去心、炮制对远志化学成分、药理作用及毒副作用的影响等现代研究,并探讨了远志炮制的机理及其存在的问题。     

远志及其不同蜜炙品的急性毒性及其对胃肠运动的影响

目的:考察远志生品与不同蜜炙品(1、2、3、6号)的急性毒性及对小鼠胃肠运动的影响。方法:采用急性毒性LD50法、胃排空甲基橙比色法及小肠炭末推进法,对比远志不同蜜炙品与生品对小鼠全身毒性及胃肠靶器官的毒性。结果:蜜远志1、2、3号的急性毒性均小于生远志(P<0.05,P<0.01);生远志、蜜远志1号、2号、6号8g/kg组与空白组比较,能显著抑制胃排空(P<0.01),而蜜远志3号8g/kg、4g/kg组对胃排空则无明显影响;生远志8g/kg组能显著抑制小肠推进率,且与其余各组比较,均存在显著差异(P<0.05;P<0.01)。结论:蜜远志3号对全身及胃肠运动的毒副反应较小,安全性相对较高。     

晋产远志种质资源皂苷元含量测定

目的：研究晋产远志皂苷元含量。方法：采用高效液相色谱法测定。结果：山西不同气候区远志资源皂苷元含量具有明显差异。结论：晋产远志种质资源皂苷元含量与该资源所分布的农业气候区具有一定相关性。     

生远志及其皂苷与蜜远志对家兔离体肠平滑肌运动作用机制的实验研究

目的探讨生远志及其皂苷与蜜远志对家兔离体十二指肠平滑肌的作用机制。方法采用离体肠肌实验,用生物机能分析系统记录生远志及其皂苷与蜜远志对正常肠肌及工具药乙酰胆碱、组胺、氯化钡所致离体肠肌收缩的影响,采集肠肌的振幅与频率,计算出各抑制率。结果生远志和远志皂苷均能显著抑制正常肠肌运动,其抑制率显著高于蜜远志(P<0.01);且生远志与总皂苷还能显著抑制乙酰胆碱(Ach)、组织胺、氯化钡所致的肠肌收缩,并与蜜远志相比有极显著差异(P<0.01);蜜远志对正常肠肌和氯化钡所致的离体肠肌兴奋性收缩也有抑制作用(P<0.05)。结论生远志及其所含的总皂苷对家兔离体肠平滑肌运动具有抑制作用;其抑制机制,可能系其与乙酰胆碱、组胺竞争,阻断M,H1受体以及直接抑制肠肌兴奋有关,且其抑制作用是不可逆的。蜜远志对正常肠肌运动有直接抑制作用,但显著小于生远志及其皂苷。     

大孔吸附树脂纯化远志总皂苷工艺研究

目的 :研究大孔吸附树脂纯化远志总皂苷的工艺条件及参数。方法 :以远志总皂苷的洗脱率、精制度为指标 ,考察大孔吸附树脂对远志总皂苷的吸附性能和洗脱参数。结果 :12mL远志总皂苷样品液 (生药 0 2 5g/mL)上大孔吸附树脂柱 (Φ15mm×H90mm ,干重 2 5g) ,用蒸馏水、30 %乙醇、70 %乙醇各 3BV依次洗脱 ,远志总皂苷富集于 70 %乙醇洗脱液部位。结论 :通过大孔吸附树脂富集与纯化 ,远志总皂苷洗脱率为 89 8% ,精制度为 2 39 6 %。该法可较好地纯化远志总皂苷     

基于HPLC-DAD指纹图谱的远志质量评价研究

目的:建立远志HPLC指纹图谱,评价远志药材、远志根心与不同采收或生长时间远志质量。方法:采用Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈和0.05%磷酸水溶液,梯度洗脱,流速1.0 m L·min-1,检测波长314 nm,柱温30℃。采用相似度计算、聚类分析、主成分分析和神经网络模型对远志药材质量进行判别分析。结果:26批不同产地远志药材中,相似度大于0.8的有24批;5批不同采收月份或生长时期的栽培远志药材中,相似度大于0.8的有4批;8批远志根心相似度均大于0.875。聚类分析、主成分分析和神经网络模型对远志药材质量判别分析结果与相似度分析结果一致。结论:指纹图谱结合化学模式识别技术可以有效评价远志质量,在栽培远志、野生远志、不同采收月份或生长时期的远志与远志根心中,有效物质种类均相似,但各色谱峰面积不同,远志野生变家栽后,有效物质群含量与野生药材相似,远志根心各色谱峰峰面积远小于远志药材,远志有效物质群积累主要与采收月份有关,与生长月数关系不明显。     

高效液相色谱-飞行时间质谱法快速鉴定远志生、制饮片的化学成分

目的:采用高效液相色谱-飞行时间质谱(HPLC-TOF/MS)联用技术快速鉴定远志生、制饮片的化学成分,探讨远志炮制前后化学成分的变化规律。方法:高效液相色谱采用HaloC18色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.7μm),流动相乙腈-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱;质谱使用电喷雾离子源,在正离子模式下扫描,获得远志生、制饮片总离子流图和离子峰质谱数据;通过对照品定位、质谱数据和文献参照对各离子峰进行归属,比较远志炮制前后离子峰数目和峰强度的变化。结果:从生远志中鉴定了21个化合物,其中13种寡糖酯类成分,8种皂苷类成分。从制远志中鉴定了20种化合物,其中11种寡糖酯类成分,9种皂苷类成分。远志经甘草汁煮制后,tenuifoliose C或tenuifoliose E,tenuifoliose K的分子离子峰消失,而西伯利亚远志糖A5,西伯利亚远志糖A6,tenuifoliside A,tenuifoliside B,tenuifoliside C,3,6'-二芥子酰基蔗糖,tenuifoliose A,tenuifoliose B或tenuifoliose D,tenuifoliose H,远志皂苷Vg,远志皂苷Wg及远志皂苷Gg的分子离子峰强度显著降低,且产生新成分细叶远志皂苷。结论:远志经甘草汁煮制后,部分寡糖酯类成分和多种皂苷类成分含量变化显著。     

远志药材及其混伪品的DNA条形码鉴定

目的：对中药材远志及其混伪品进行分子鉴定,保障药材质量及用药安全。方法：对46份样品进行DNA提取,通过聚合酶链式反应（PCR）扩增其psbA-trnH序列并双向测序,应用CodonCode Aligner V3.7.1对测序峰图校对拼接,去除低质量区和引物区,得到psbA-trnH序列,用MEGA 6.0对序列进行比对分析,基于K2P遗传距离构建系统聚类树。结果：通过相似性搜索法能准确鉴别远志及其混伪品,远志两个基原的种内最大K2P距离分别为0.004和0,均小于其与混伪品的种间最小K2P遗传距离（0.010 和0.005）,基于psbA-trnH序列的系统发育树可将远志药材及其混伪品明显区分开。结论：psbA-trnH序列能有效鉴别远志药材及其混伪品,为中药材的质量控制提供新方法。     

晋产远志种质资源溶血性研究

目的：研究晋产远志种质资源溶血特性，借以间接反映其品质状况。方法：采用溶血试验测定红细胞半数致死量（LD50）。结果：山西不同气候区远志资源具有明显差异。结论：晋产远志种质资源溶血特性与该资源分布的农业气候区具有一定相关性。