凉血解毒方及拆方对活化T淋巴细胞致角质形成细胞增殖及分泌细胞因子的影响

目的: 观察凉血解毒方全方及拆方对活化T淋巴细胞致角质形成细胞增殖和分泌细胞因子的影响。 方法: 制备大鼠含药血清;将PDB刺激后的T淋巴细胞与Colo-16细胞共同培养,同时加入含药血清作用24 h,采用MTT法检测细胞增殖,采用ELISA法检测细胞因子TNF-α,sICAM-1和IFN-γ。 结果: 凉血解毒方对活化T淋巴细胞诱导的Colo-16细胞增殖具有明显的抑制作用,其中全方组和凉血组差异显著(P<0.01)。活化T淋巴细胞作用于Colo-16细胞24 h后,sICAM-1,TNF-α,IFN-γ均明显升高,凉血解毒全方和凉血方、解毒方可明显降低sICAM-1,TNF-α,IFN-γ,而全方组药效最为显著。 结论: 临床治疗银屑病有效中药复方凉血解毒方能够显著抑制活化T淋巴细胞介导的角质形成细胞增殖及细胞因子的分泌。     

紫草素对银屑病T淋巴细胞增殖、活化的影响

目的:研究具有凉血、解毒作用的中药单体紫草素对银屑病病理状态下异常活化的T淋巴细胞功能及相关信号转导通路的影响。方法:选取Jurkat E6-1 T淋巴细胞,以佛波醇酯和离子霉素活化Jurkat E6-1 T淋巴细胞,同时将0. 5～2μg/m L浓度的紫草素作用于细胞,采用CCK-8法检测T淋巴细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞膜CD69的表达及细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的变化;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测T淋巴细胞释放白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平;用Realtime-PCR和Western blotting法分别观察核转录因子mRNA及蛋白的表达影响。结果:不同浓度的紫草素均可明显抑制细胞增殖、CD69表达及Th1类细胞因子分泌;均可有效降低[Ca2+]i和蛋白激酶C(PKC)磷酸化蛋白的水平;显著降低核转录因子NF-AT mRNA的表达,下调c-Jun的mRNA及蛋白表达并可抑制核因子-κB蛋白的表达。以上各项指标均有一定量效关系。结论:紫草素可以通过抑制过度活化的T淋巴细胞功能从而发挥免疫调控作用,为紫草素治疗银屑病的作用机制及应用前景提供实验依据。     

凉血解毒汤对寻常型银屑病对患者血液流变学及T淋巴细胞亚群的影响

目的 探讨凉血解毒汤治疗寻常型银屑病对患者血液流变学及T淋巴细胞亚群的影响.方法 选择100例寻常型银屑病患者,通过随机数字表法分为对照组与观察组,各50例.对照组予阿维A胶囊治疗,观察组在对照组的基础上予凉血解毒汤治疗,2组均持续治疗2个月.比较2组治疗后的临床疗效,治疗前后的皮损情况、血液流变学及T淋巴细胞亚群.结...     

清热凉血方对血热型银屑病外周血CD4+T细胞表面TIGIT表达的影响

目的 探究清热凉血方对血热型银屑病患者外周血CD4+T细胞表面TIGIT表达及其相关炎症因子表达的影响.方法 选取血热型银屑病患者28例及健康对照组14例作为研究对象.在血热型银屑病组中选取PASI评分＞ 10分的8例患者进行清热凉血方干预,治疗2个月.观察血热型银屑病患者外周血TIGIT、IFN-g、 IL-17、I...     

凉血解毒饮治疗血热型银屑病疗效观察及对人血清P物质的影响

目的:探讨自拟方凉血解毒饮治疗血热型银屑病患者的疗效观察及对人血清P物质的影响。方法:将220例血热型银屑病患者随机分为治疗组和对照组各110例,两组除均外用卡泊三醇软膏外,治疗组予口服凉血解毒饮,对照组口服复方青黛丸,根据PASI评分方法判定疗效,以双抗夹心ELISA方法检测人血清中P物质的浓度来评定药物对血清P物质的影响。结果:两组总有效率分别为88.2%与81.8%,差异虽无统计学意义(P>0.05),但治疗组在有效改善患者病情的同时,降低了人血清中P物质的浓度,效果优于对照组(P<0.05)。结论:凉血解毒饮对血热型银屑病有一定疗效,其作用可能涉及到对患者血清P物质浓度的影响。     

活血解毒方对糖尿病视网膜病变细胞凋亡及相关细胞因子的影响

目的观察中药复方活血解毒方(HXJD)对糖尿病大鼠视网膜细胞凋亡及凋亡相关因子NF-κB和Caspase-3 mRNA和蛋白表达的影响。方法采用链脲佐菌素(65 mg/kg)一次性腹腔注射的方法,建立糖尿病大鼠模型,将50只SD大鼠随机分为模型组和HXJD高剂量组(15.4 g/kg)、中剂量组(7.70 g/kg)、低剂量组(3.85 g/kg)及导升明组(0.167 g/kg),每组10只,另设10只正常对照组。造模成功后,灌胃给药,20周后处死动物。应用TUNEL法检测细胞凋亡程度,免疫组化和蛋白印迹技术检测视网膜全层中NF-κB和Caspase-3的表达;采用Real-time PCR法检测视网膜NF-κB和Caspase-3 mRNA的表达。同时,体外培养大鼠视网膜神经节细胞株(RGC-5),制备HXJD含药血清。利用55.5 mmol/L葡萄糖浓度模拟高糖环境诱导,将细胞分为5组:空白组、高糖组、含药血清低剂量组、含药血清中剂量组、含药血清高剂量组。采用CCK-8和AnnexinⅤ-FITC法检测不同血清干预高糖诱导下RGC细胞24 h增殖活性及细胞凋亡的影响。结果与正常对照组比较,模型组凋亡细胞增加,大鼠视网膜组织NF-κB和Caspase-3蛋白及mRNA的表达明显升高(P0.05);与模型组比较,活血解毒方各剂量组和导升明组视网膜细胞凋亡的程度、视网膜NF-κB和Caspase-3蛋白和mRNA的表达量均降低(P0.05)。与空白组比较,高糖组细胞活性降低,细胞凋亡比例增加(P0.05)。与高糖组比较,含药血清高、中剂量组细胞活性增高(P0.05),含药血清各剂量组细胞凋亡比例减少(P0.05,P0.01)。结论活血解毒方可能通过改善糖尿病大鼠视网膜中细胞凋亡的相关细胞因子NF-κB和Caspase-3的表达,同时调节视网膜神经节细胞活力,改善高糖条件下RGC细胞的凋亡程度。     

黄芪糖蛋白对T细胞增殖与活化的影响

目的:探讨黄芪糖蛋白对大鼠T细胞增殖与活化的影响。方法:无菌制备大鼠脾脏悬浮细胞,分离淋巴细胞,接种后加入黄芪糖蛋白共培养,采用MTT法和流式细胞术分别检测T细胞增殖情况和T细胞亚群分布。结果:MTT实验结果显示黄芪糖蛋白显著抑制了T细胞的增殖(P0.05或P0.01)。流式检测结果显示黄芪糖蛋白显著降低了T细胞中CD3+CD28+、CD3+CD278+细胞的比例(P0.01)。结论:黄芪糖蛋白可有效抑制T细胞的增殖与活化,且主要通过抑制CD278在T细胞表面表达来阻止T细胞的活化。     

活血解毒方含药血清对银屑病角质形成细胞增殖及细胞周期的影响

目的观察活血解毒方对体外培养的银屑病角质形成细胞增殖及细胞周期的影响。方法根据血清药理学方法 ,用清洁级SD大鼠制备大、中、小剂量活血解毒方含药血清、地塞米松含药血清及空白血清,分别加入角质形成细胞培养体系中。培养48h后,用MTT法观察COLO-16细胞增殖情况;用流式细胞仪检测细胞周期分布。结果不同浓度活血解毒方明显抑制COLO-16角质形成细胞株的增殖,同时可改变细胞分裂周期各时相分布比例。结论中药活血解毒方通过抑制角质形成细胞的异常增殖对银屑病有治疗作用。     

凉血活血胶囊含药血清对鸡胚绒毛尿囊膜血管新生的影响

目的探讨凉血活血胶囊含药血清对鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）新生血管抑制作用的机制。方法在8日龄鸡胚CAM上植入凉血活血胶囊空白血清、含药血清,以及生理盐水、不完全1640制备的明胶海绵药膜,孵化72h。解剖显微镜下放大10倍计数给药组和对照组载体周围5mm范围内的大、中、细小血管数目,观察药物对CAM血管新生的影响。结果CAM正常状态的血管呈非特异性的贯穿、包绕、叶脉样、平行生长。解剖显微镜下放大10倍计数载体周围5mm范围内的大、中、细小血管数目。实验结果显示：不同浓度的给药组均出现无血管区或血管断裂现象,与生理盐水组、不完全1640组比较差异有统计学意义（分别P〈0.01）;凉血活血胶囊含药血清对CAM大血管生成未显示明显抑制作用（分别P〉0.05）;但3个浓度对CAM中血管均有一定的抑制作用（分别为P〈0.05、P〈0.01、P〈0.01）;对CAM细小血管均有明显的抑制作用（分别P〈0.01）;不同浓度给药组总血管数与其相应浓度空白组比较,差异均有统计学意义（P〈0.01）。结论凉血活血胶囊含药血清对CAM血管新生有显著的抑制作用。     

凉血活血胶囊含药血清对鸡胚绒毛尿囊膜血管新生的影响

目的探讨凉血活血胶囊含药血清对鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）新生血管抑制作用的机制。方法在8日龄鸡胚CAM上植入凉血活血胶囊空白血清、含药血清,以及生理盐水、不完全1640制备的明胶海绵药膜,孵化72h。解剖显微镜下放大10倍计数给药组和对照组载体周围5mm范围内的大、中、细小血管数目,观察药物对CAM血管新生的影响。结果CAM正常状态的血管呈非特异性的贯穿、包绕、叶脉样、平行生长。解剖显微镜下放大10倍计数载体周围5mm范围内的大、中、细小血管数目。实验结果显示：不同浓度的给药组均出现无血管区或血管断裂现象,与生理盐水组、不完全1640组比较差异有统计学意义（分别P〈0.01）;凉血活血胶囊含药血清对CAM大血管生成未显示明显抑制作用（分别P〉0.05）;但3个浓度对CAM中血管均有一定的抑制作用（分别为P〈0.05、P〈0.01、P〈0.01）;对CAM细小血管均有明显的抑制作用（分别P〈0.01）;不同浓度给药组总血管数与其相应浓度空白组比较,差异均有统计学意义（P〈0.01）。结论凉血活血胶囊含药血清对CAM血管新生有显著的抑制作用。     

银杏叶制剂对哮喘大鼠T淋巴细胞体外增殖和凋亡的影响

目的探讨银杏叶制剂治疗哮喘的部分机理。方法将14只大鼠分成2组(健康对照组7只,哮喘组7只),分别采集外周血,并分离出T淋巴细胞体外分组培养(分空白组、银杏叶制剂BN-52021组、银杏叶制剂EGb761组),各组分别以不同浓度的BN-52021和EGb761干预不同时间。用MTT法分别测定各组细胞的增殖情况,用Annexin V/PI双染法流式细胞仪测定BN-52021不同浓度组的细胞凋亡情况。结果与空白组比较,EGb761在低浓度时促进T淋巴细胞增殖,而高浓度时则起抑制作用(均P＜0．05)；BN- 52021对体外培养的哮喘和健康大鼠T淋巴细胞的增殖均有抑制作用,其作用强度(在一定的范围内)随剂量的增加和时间的延长而加强(均P＜0．05)；但对哮喘大鼠的抑制作用明显强于健康大鼠(P＜0．05)；T淋巴细胞凋亡率随BN-52021浓度增加而增加(P＜0．01)。结论银杏叶制剂因其成分和干预浓度的不同而对体外培养的大鼠T淋巴细胞增殖活性的影响不同,对哮喘与健康大鼠T淋巴细胞的作用也有差异。银杏内酯B是抑制T淋巴细胞增殖的主要活性成分,其不仅可抑制T淋巴细胞的体外增殖,而且还可增加T淋巴细胞凋亡率。     

活血胶囊对兔动脉粥样硬化斑块血管内皮细胞生长因子和血管细胞黏附分子-1表达的影响

目的:探讨活血胶囊对兔动脉粥样硬化斑块的作用及其稳定动脉粥样硬化斑块的机制。方法:53只健康雄性日本大耳白兔随机分为空白组及实验组。空白组喂普通饲料,实验组喂高脂饲料,10周末,检测血清总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C);随后将实验组兔分为4组:模型组,辛伐他汀(2.2 mg·kg-1·d-1),活血胶囊高(1.5 g·kg-1·d-1)、低剂量组(0.5 g·kg-1·d-1),同时继续喂高脂饲料。20周末,检测血清TC,TG,LDL-C,处死动物,取主动脉标本,测定内膜/中膜厚度比,用免疫组化法检测血管内皮细胞生长因子(VEGF),血管内皮细胞黏附分子-1(VCAM-1)在动脉斑块中的表达。结果:与正常组比较,模型组血清TC,TG,LDL-C,内膜/中膜厚度比,VEGF,VCAM-1在动脉斑块中的表达显著升高,差异具有显著性(P<0.01);与模型组比较,活血胶囊组TC,TG,LDL-C,主动脉内膜/中膜厚度比均明显低于模型组(P<0.05);高剂量组与低剂量组比较,差异具有显著性(P<0.05);免疫组化染色发现模型组、活血胶囊高、低剂量组、辛伐他汀组均可见染成黄褐色的VEGF,VCAM-1阳性表达信号,主要存在于粥样斑块区,空白组家兔主动脉VEGF及VCAM-1阳性表达几乎为零,积分吸光度结果提示3个药物干预组表达均比模型组减少(P<0.01,P<0.05)。结论:活血胶囊可抑制VEGF,VCAM-1在兔胸主动脉的表达,抑制血管新生和炎症反应,这可能是该药延缓AS进程,稳定斑块的作用机制之一。     

HIV/AIDS中医证型与T淋巴细胞凋亡相关性研究

目的:探讨HIV/AIDS中医证型与T淋巴细胞凋亡的相关性。方法:入组276例HIV/AIDS患者作为病例组,选择11个健康人作为对照组,将入选患者参考中医辨证分型标准分为六种常见证型,检测两组外周血细胞中CD+4、CD+8、CD4/CD95、CD8/CD95表达水平并进行对比分析。结果:各证型患者与健康人相比较,CD+4、CD4/CD95均低于健康人,而CD8/CD95均高于健康人,差异具有统计学意义(P<0.05);CD+8均高于健康人,但差异不具有统计学意义(P>0.05);两证型比较,痰湿内蕴组CD+4低于气血两虚兼血瘀和气血两虚组,痰湿内蕴组CD8/CD95高于气血两虚兼血瘀和阴虚火旺组,差异具有统计学意义(P<0.05),余比较差异均无统计学意义。结论:HIV/AIDS患者不同证型间T淋巴细胞凋亡存在差异,具有一定的相关性,当证型发生转化时,其T淋巴细胞凋亡水平发生变化。个别指标在辨证两种证型时具有辅助辨证的参考意义。     

蒲公英胶囊抗消化性溃疡复发及其对外周血T淋巴细胞亚群的调节作用

目的：观察蒲公英胶囊P消化性溃疡(PU)复发及对外周血T淋巴细胞亚群的调节作用。方法：将符合入选标准的PUl00例患者按随机对照单育法分为蒲公英胶囊组(A组)50例和三联疗法组(B组)50例。观察比较两组总有效率、显效率、幽门螺杆菌(HP)根除率和复发率以及对外周血T淋巴细胞亚群的调节作用。结果：A组总有效率和显效率分别为100％和98．00％；B组为94．00％和80．00％，两组比较，差异无显著性(P＞0．05)。治疗12个月，A组复发率为8．00％，B组复发率为66．00％，两组比较，差异有显著性(P＜0．01)。A组的HP值根除率为94．00％，B组为22．00％，两组比较，差异有显著性(P＜0．05)。A组治疗后能显著上调CD3^ 、CD4^ 均值和CD4^ ／CD5^ 比值，下调CD8^ 均值，尤其是CD4^ 均值，与B组比较，除CD8*外(P＞0．05)，差异有显著性(P＜0．05，0。01)。治疗后12个月，A组的CD3 、CD4^ 、CD8^ 、CD4^ ／CD8^ 略有回调，与治疗前比较，差异无显著性(均P＞0．05)，B组回调明显(均P＜0．01)。结论：蒲公英胶囊通过调节T淋巴细胞亚群表达，而降低PU的复发率，这可能是其PPU复发的机理之一。     

补肾活血方对大鼠成骨细胞增殖、分化及矿化的影响

目的观察中药补肾活血方对体外培养SD大鼠成骨细胞增殖、分化及矿化的影响。方法取新生的SD大鼠的颅骨,胶原酶法培养成骨细胞：应用MTT法,对硝基苯磷酸盐法（PNPP）及茜素红染色方法观察不同浓度补肾活血方对体外培养成骨细胞在24、48、72h不同时段的增殖、碱性磷酸酶（ALP）活性及矿化结节形成的影响。结果不同浓度的补肾活血方均可促进成骨细胞增殖率提高,以中、高浓度组的作用较为明显（P〈0．01）;不同浓度补肾活血方可使ALP活性增强（P〈0．01）;中、高浓度组补肾活血方矿化结节数量,显著多于对照组（P〈0．01）。结论补肾活血方具有促进成骨细胞的增殖、分化及矿化的作用。     

基于网络药理学探究补肾活血汤治疗肾虚血瘀型膝骨性关节炎的作用机制

[目的] 探究补肾活血汤（BHD）治疗肾虚血瘀型膝骨性关节炎（KOA）的关键靶点以及作用。[方法] 通过Swiss Target Prediction检索BHD中主要活性化合物的相关靶点;GeneCards数据库搜集KOA的疾病靶点,相交得出药物与疾病的共有靶点;将BHD中的主要靶点与活性化合物,使用STRING数据库绘制蛋白互作（ PPI）网络图,对关键靶点进行GO及KEGG通路富集分析。[结果] BHD主要有效活性成分82个,潜在靶点615个;KOA疾病靶点482个,药物基因靶点533个。GO富集分析得到细胞生物学条目119个,续用KEGG通路富集分析方法得到信号通路总数共95个。[结论] 阐述了BHD多成分、多途径、多靶点治疗KOA的分子作用机制,为后续研究及临床提供依据。     

蛭龙活血通瘀胶囊对老年高血压患者踝臂指数及高敏C反应蛋白、同型半胱氨酸的影响

目的:观察蛭龙活血通瘀胶囊对老年高血压患者踝臂指数(ABI)及高敏C反应蛋白(hs-CRP)、同型半胱氨酸(Hcy)的影响。方法:将202例高血压患者随机分为试验组104例、对照组98例。两组均给予常规抗高血压治疗,试验组给予蛭龙活血通瘀胶囊1.2 g,口服,每天3次。连续用药12周。检测两组患者血压、ABI、hs-CRP、Hcy的变化及观察有无不良反应。结果:两组患者ABI均较治疗前有所改善(P<0.01),与对照组治疗后比较,试验组ABI改善更为明显(P<0.05);两组hs-CRP、Hcy均较治疗前有所下降(P<0.01),试验组与对照组治疗后比较,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者治疗后血压均较治疗前降低(P<0.05),治疗后两组血压比较差异无统计学意义(P>0.05);两组患者均无明显不良反应。结论:蛭龙活血通瘀胶囊能降低老年高血压患者hs-CRP、Hcy水平,改善其动脉硬化程度。