内皮祖细胞在大鼠外伤性视神经损伤中作用的研究

目的 探讨内皮祖细胞(EPC)在大鼠外伤性视神经损伤中的作用.方法 实验研究.采用液压冲击颅脑损伤仪制作外伤性视神经损伤动物模型,108只大鼠(108只眼)采用随机数字表法随机分为视神经损伤组和假手术对照组,每组54只;两组按照损伤前24h及损伤后3、12、24、48、72 h、1、2、3周时间点随机分为9个亚组,每个亚组6只.测定各组上述时间点外周血EPC数量并观察视神经HE染色、血管内皮标志物CD31免疫组织化学染色及闪光视觉诱发电位(F-VEP)变化.视神经损伤组与假手术对照组同一时间点的比较采用独立样本t检验;不同检测项目间的相关性分析采用Pearson积差相关检验.结果 正常大鼠外周血EPC数量为(46 ～52)个/200 000单个核细胞,大鼠外伤性视神经损伤后3、12、24、48、72 h及1、2、3周外周血EPC计数分别为(34±4、34±5、69±9、76±6、107±9、69±7、58 ±6、56±4)个/200 000单个核细胞,视神经损伤组与假手术对照组比较,3、12、24、48、72 h、1、2周时间点差异有统计学意义(t=5.29,2.90,-4.30,-7.61,- 14.17,-5.74,-2.79;P ＜0.05).正常大鼠视神经及周围组织CD31+细胞数为(7～9)个/5个高倍视野,视神经损伤后创伤区CD31+细胞计数分别为(8.36±1.52、7.17±1.10、10.41±1.92、11.43 ±1.58、14.29±2.03、17.33±1.47、17.86±1.22、18.13±1.40)个/5个高倍视野,视神经损伤组与假手术对照组比较,48、72 h、1、2、3周时间点差异均有统计学意义(t=4.31,-7.61,-8.17,- 10.08,- 10.79;P＜0.05).正常大鼠视神经及周围组织微血管数量为(6～9)个/5个高倍视野,视神经损伤后损伤区微血管数量分别为(7.54±2.01、8.52±2.21、11.02±1.62、15.40±2.04、18.39±1.96、23.21±1.50、22.78±2.40、24.13 ±2.51)个/5个高倍视野,视神经损伤组与假手术对照组比较,48、72 h、1、2、3周时间点差异均有统计学意义(t=4.25,-7.74,-8.26,- 10.28,-11.49;P＜0.05).视神经损伤后F-VEP中P波潜伏期于损伤后3h降低,24h反弹增高到正常水平以上,并趋于稳定,视神经损伤组与假手术对照组相比,3、12、24、48、72 h、1、2、3周差异均有统计学意义(=4.15,3.74,5.84,6.08,6.40,6.52,6.53,6.61;P ＜0.05);F-VEP中振幅于3h降低,12 h升高到接近基础水平,24h后逐渐降低至基础水平以下,实验组与对照组比较,3、24、48、72 h、1、2、3周差异有统计学意义(t=3.95,4.14,5.26,5.78,6.49,6.72,6.23;P＜0.05).外周血EPC数量变化与创伤区周围CD31+细胞、微血管及F-VEP变化存在相关性(r=0.43,0.41,0.43;P＜0.01).结论 外伤性视神经损伤后外周血内皮祖细胞明显增加,归巢到创伤区,参与了创伤区血管新生和组织损伤修复.     

隐匿外伤性视神经损伤10例

随着社会发展,交通事故、意外伤害增多,临床经常见到脑神经外伤及面部外伤患者合并视神经损伤。早期视力严重损害者,较易发现。但有些视神经损伤患者,早期视力下降不明显,随病程进展,视力持续下降,最后形成视神经萎缩,极易发生漏诊。邱怀雨等[1]称其为隐匿型间接视神经损伤。因为漏诊部分患者和医疗单位发生医疗纠纷,本人在司法鉴定门诊曾受理数例此类案例。为引起广大眼科及脑外科同仁的注意,现     

即早基因在视神经损伤大鼠初级视皮层的表达

目的 探讨大鼠急性视神经损伤早期即早基因c-jun、c-fos在初级视皮层的表达及其与视神经损伤程度的关系.方法 实验研究.为两因素析因设计,55只雄性SD大鼠随机入组.采用视神经钳夹和视神经离断的方法分别造成大鼠单眼急性部分视神经损伤和视神经完全性损伤的动物模型,分别于正常组和损伤后2 h、1 d、3 d、1周、1个月取脑组织行冰冻切片,以免疫荧光组织化学染色法检测损伤眼代表区初级视皮层的c-Jun、c-Fos蛋白表达并计算阳性神经元分布密度,统计学检验采用两因素析因设计计量资料的方差分析.结果 视神经钳夹组与视神经离断组的c-Jun表达差异有统计学意义(F=50.344,P=0.000).视神经钳夹组与视神经离断组的c-Jun表达差异有统计学意义(F=50.344,P=0.000).视神经损伤后2 h初级视皮层即出现c-Jun蛋白的表达升高,1 d达高峰;视神经离断组c-Jun升高幅度高于视神经钳夹组.视神经钳夹组与视神经离断组的c-Fos表达差异有统计学意义(F=62.232,P=0.000).c-Fos蛋白表达在视神经钳夹伤后2 h降低,3 d达谷底;视神经离断组降低幅度小于视神经钳夹组,且2 h时存在短暂表达升高.结论 大鼠急性视神经损伤早期初级视皮层即发生即早基因c-Jun、c-Fos的表达改变,且可能通过作用相反的途径在初级视皮层引起不同的效应.     

外伤性视神经损伤药物治疗临床分析

目的 探讨外伤性视神经损伤的药物治疗方法。方法 将38例(38眼)外伤性视神经损伤早期应用大剂量皮质类固醇、脱水剂、血管扩张剂、维生素及神经营养药物治疗结果进行分析。结果 外伤性视神经损伤应用此方法治疗后视力有明显恢复。结论 大剂量皮质类固醇和血管扩张剂等治疗外伤性视神经损伤有明显效果。     

大鼠神经损伤视网膜病理改变的实验研究

目的 研究神经损伤早期视网膜的病理改变。方法 采用大鼠球后视神经横断务和钳夹伤模型,观察视网膜组织学及超微铁改变。结果 １）光镜：早期表现为神经纤维层血管扩张,损伤后７、１４天可见散在的核染色质边聚。空化的节细胞。２）电镜：损伤后１天节细胞出现胞浆成分疏松,内质网扩张等变性样改变,横断作３天及钳夹伤７天可见节细胞坏死,部分节细胞凋亡。结论 视神经损伤导致节细胞出现迟发性死亡,提示早期治疗具有重要意     

应用液压冲击颅脑损伤仪建立大鼠外伤性视神经损伤动物模型

目的 观察应用液压冲击颅脑损伤仪(FPI)能否成功建立大鼠外伤性视神经损伤动物模型.方法 成年雌性Wister大鼠71只,随机选取5只为正常对照组,其余66只为模型组.模型组再随机分为3组.第1组8只大鼠,分别于损伤前、损伤后1、3 d、1、2、4、6、8周行双眼闪光视觉诱发电位(F-VEP)及视神经核磁共振成像(MRI)检查;第2组56只大鼠,随机分成7个亚组,每个亚组8只大鼠,分别于损伤后1、3 d、1、2、4、6、8周行视网膜组织病理学及末端脱氧核苷酸移换酶介导的dUTP缺口末端标记测定法(TUNEL)检测;第3组2只大鼠,分别于损伤后4、8周行视神经透射电子显微镜检测.根据打击力量不同.将损伤眼分为轻、重2组.重伤组打击锤以25.的预定角度打击视神经,平均打击力量(699.14±60.79)kPa,轻伤组以15°的预定角度打击,平均打击力量(243.18±20.26)kPa.每只大鼠右眼为重伤组,左眼为轻伤组.结果 重伤组损伤后1d主波潜伏期延长,与正常对照组比较,差异有统计学意义(t=2.06,P<0.05);F-VEP振幅在损伤后2周内逐渐降低,2周后趋于稳定(F=1.98,P>0.05).轻伤组损伤后1 d主波潜伏期延长,与正常对照组比较,差异有统计学意义(t=2.19,P<0.05);振幅在损伤后4周内逐渐降低,4周后趋于稳定(F=1.62,P>0.05).MRI检查显示,损伤后1 d视神经高信号,损伤后8周仍较明显.组织病理学检查发现,损伤后1 d视网膜神经节细胞层(GCL)可见毛细血管破裂出血;损伤后4周GCL内可见空化的视网膜神经节细胞.损伤后3 d视网膜各层均出现凋亡阳性细胞;TUNEL染色发现损伤后1、2周凋亡阳性细胞明显增多.结论 应用FPI能成功建立大鼠外伤性视神经损伤模型.     

大鼠视神经损伤视网膜病理改变的实验研究

目的研究现神经损伤早期视网膜的病理改变。方法采用大鼠球后视神经横断伤和钳夹伤模型,观察视网膜组织学及超微结构的改变。结果1）光镜：早期表现为神经纤维层血管扩张,损伤后7、14天可见散在的核染色质边聚。空化的节细胞。2）电镜：损伤后1天节细胞出现胞浆成分疏松,内质网扩张等变性样改变,横断伤3天及钳夹伤7天可见节细胞坏死,部分节细胞凋亡。结论视神经损伤导致节细胞出现迟发性死亡,提示早期治疗具有重要意义。     

大鼠视神经损伤后视网膜小胶质细胞表达的初步观察

目的 研究大鼠视神经损伤后视网膜中小胶质细胞的表达情况.方法 实验研究.选取30只成年雌性健康SD大鼠,按照随机数字表法分为实验组和对照组各15只,分别用于细胞计数、免疫组织化学及免疫印迹实验.实验组在眼球后约1.5 ～2.0 mm处行右眼视神经鞘内切断术,术后5d于视神经断端处用荧光金逆行标记视网膜节细胞,手术后7d处死取材.对照组小鼠右眼行视神经切断术并标记,2d后处死取材.视网膜做铺片用于计数.用免疫组织化学法于视网膜切片上行小胶质细胞的表面标记物Iba-1染色,观察小胶质细胞的形态及数量,同时应用免疫印迹法检测视网膜内Iba-1蛋白含量的变化.两组间比较采用非配对student t-检验进行统计学分析.结果 对照组视网膜中有少量小胶质(Iba-1阳性)细胞表达,并呈非活化状态.视神经切断7d后小胶质细胞明显增多且呈半活化状态,免疫印迹结果显示损伤后Iba-1蛋白表达量明显增加到对照组的2.3倍(t=7.669,P=0.001).视视神经切断7d后节细胞数量为(1182±64)个/mm2,明显减少至对照组的51％(t=23.850,P＜0.01).结论 大鼠视神经损伤后小胶质细胞表达增多且呈部分激活状态,可能是视网膜受损后自我保护的表现之一.     

脑活素治疗外伤性视神经损伤疗效分析

脑活素 (cetebrolgsin)在国内已广泛用于治疗神经内、外科多种疾病。我院自 2 0 0 0年 3月～ 2 0 0 2年 11月用于治疗外伤性视神经损伤 9例 ,效果满意。一、临床资料本组收集了我院自 2 0 0 0年 3月～ 2 0 0 2年 11月因外伤致视神经损伤的 9例患者 ,9例患者均为男性 ,12～ 4 3岁 ,伤后 1天内入院 5例 ,2～ 6天入院 2例 ,7～ 14天入院 2例。入院视力 ,0 .1～ 0 .3者 6例 ,0 .4～ 0 .6者 3例。全部病人均有瞳孔散大 ,光反射减弱或消失 ;眼球运动障碍及上睑下垂 2例。全部病人均行头颅及眼眶 CT检查 ,未见视神经断裂及视神经骨管骨折。头颅骨…     

大鼠视神经损伤视网膜碱性成纤维细胞生长因子的表达

碱性成纤维细胞生长因子(basicfibronlastgrowthfactor,bFGF)在神经组织的发育、营养、创伤修复及再生过程中具有重要的作用[1],其在视网膜中的含量较为丰富,对视网膜的神经元起支持营养作用,在视网膜光损伤时可保护光感受器细胞的存活[2],而在视神经损伤中视网膜bFGF的作用不明确,现将本研究报道如下。1　材料和方法健康Wistar大鼠28只,雌雄不拘,体重200±20g,由本院动物室提供,按处理方式随机分为4组,视神经横断8只(A组),视神经钳夹伤8只(B组),假伤对照组8只(C组),正常对照组4只(D组)1%戊巴比妥钠腹腔麻醉,切开左眼外眦,剪开并分离球…     

晶状体损伤对视神经损伤后再生影响的研究

目的观察单纯视神经损伤及视神经损伤联合晶状体损伤后视神经中Nogo-A mRNA及Nogo-A的表达,探讨晶状体损伤促进视神经损伤后再生的机制。方法 66只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(A组,6只)、单纯视神经损伤组(B组,30只)和视神经损伤联合晶状体损伤组(C组,30只)。分别于造模后7d、14d、21d处死大鼠2只(A组)、10只(B组)、10只(C组),光镜下观察视神经的病理变化,免疫组织化学染色检测Nogo-A表达情况,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、半定量分析不同组视神经Nogo-A mRNA的表达。结果大鼠正常视神经中表达Nogo-A mRNA及Nogo-A,但表达量较低;损伤视神经后7d Nogo-A mRNA的表达量显著升高,至伤后21d B组及C组均维持较高的水平。B组损伤后7d Nogo-A表达阳性的细胞数开始增多(136.80±3.94),与A组比较差异有统计学意义(P<0.05),并保持高表达;C组损伤后21d Nogo-A的表达较B组低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论视神经损伤后髓鞘相关抑制因子Nogo-A表达增高,晶状体损伤促进视神经再生的机制可能与Nogo-A有关。     

视神经挫伤轴浆运输和超微结构变化的实验研究

目的 研究实验性视神经挫伤轴浆运输与超微结构的变化。方法采用自行设计的弹簧冲击器对家兔视神经进行定量损伤，术后1、3、7、14d应用辣根过氧化物酶(HRP)顺行标记和透射电镜观察视神经轴浆运输以及超微结构的变化。结果 不同时间实验组HRP反应产物较正常对照组明显降低，差异有显著性，HRP反应产物随观察时间延长逐渐增加，但至术后14d仍明显低于正常。电镜观察见损伤后1d大部分轴突颗粒状变性，线粒体肿胀，髓鞘松解，3d时损伤最重，14d部分轴突恢复正常。结论 视神经挫伤后局部轴浆运输发生障碍，同时轴突变性，14d部分轴突功能恢复。     

Effect of topical dorzolamide on optic nerve head blood flow

· Purpose: The topical carbonic anhydrase inhibitor dorzolamide has proven effective in lowering intraocular pressure in glaucoma patients. Because an impaired blood supply of the optic nerve has to be regarded as a major pathogenic risk factor it seems important to examine the effect of this new antiglaucomatous drug on capillary optic nerve head blood flow. · Methods: In a double-masked, randomized clinical trial, dorzolamide eye drops were applied to both eyes of 15 healthy subjects (8 female, 7 male, mean age 30.6 years) three times daily for 3 days. The control group (15 healthy volunteers, 9 female, 6 male, mean age 30.8 years) received a placebo preparation according to the same protocol. Intraocular pressure (IOP), blood pressure, heart rate, capillary optic nerve head blood flow and retinal blood flow were measured at baseline (1D0), 90 min after single instillation (1D90), and after 3 days of therapy (3D). Scanning laser Doppler flowmetry (Heidelberg Retina Flowmeter) and laser Doppler flowmetry according to Riva (Oculix 4000) were used to measure optic nerve head blood flow. · Results: IOP dropped in dorzolamide-treated subjects from 12.5 mmHg to 11.0/10.5 mmHg (1D0, 1D90, 3DO) and in the control group from 13.0 mmHg to 12.5/12.5 mmHg. Optic nerve blood flow as measured by scanning laser Doppler flowmetry showed no significant changes in dorzolamide-treated volunteers (temporal 310/329/315 AU, nasal 387/402/399 AU) or in the placebo group (temporal 238/306/276 AU, nasal 356/382/379 AU). Also as measured by laser Doppler flowmetry optic nerve head blood flow did not show significant changes in dorzolamide-treated volunteers (temporal 12.98/12.6/11.7 AU, nasal 16.6/16.9/15.7 AU) or in the placebo group (temporal 11.9/12.4/12.4 AU, nasal 16.1/15.8/17.7 AU). The systemic parameters blood pressure and heart rate remained unchanged during the treatment period. · Conclusion: The results showed the expected drop in IOP. However, capillary optic nerve head blood flow, measured by two different techniques, did not change during therapy. This may be due to the effective autoregulation in human optic nerve head circulation, which seems not to be affected by dorzolamide. Received: 16 February 1998 Revised version received: 9 September 1998 Accepted: 12 October 1998     

Effect of brimonidine on optic nerve blood flow in rabbits

PURPOSE: Brimonidine is a highly selective alpha2-adrenoreceptor agonist that lowers intraocular pressure. The aim of the present study was to analyze in vivo the vasomotor effects and the influence of brimonidine on blood flow within the optic nerve, by means of intraluminal microvascular corrosion casting technique and intravascular injection of colored microspheres. METHODS: New Zealand white rabbits received either brimonidine tartrate 0.2% or placebo (vehicle) topical drops in one eye for 4 weeks. Intraocular pressures were measured at baseline and 4 weeks. The anterior optic nerve microvasculature of four rabbits was examined with corrosion castings for regions of focal vasoconstriction. Optic nerve blood flow was determined in 16 rabbits by means of nonradioactive colored microspheres. RESULTS: The vasoconstriction values of the short posterior ciliary arterial branches in the brimonidine eyes were 16.7%+/-3.7%. In the fellow untreated eyes, the mean vasoconstriction was 16.6%+/-2.4%. In the placebo-treated eyes, the average constriction was 15.9%+/-3.2%; the fellow eyes showed a mean constriction value of 16.1%+/-5.3%. There was no statistical difference between any of the groups (P = .2). The optic nerve blood flow in the brimonidine-treated rabbits was 0.18+/-0.06 ml/mg/min and 0.17+/-0.04 ml/mg/min in the treated and the fellow eyes, respectively. The difference between the optic nerve blood flow in the brimonidine-treated eyes and the optic nerve blood flow in all of the untreated eyes (0.19+/-0.06 ml/mg/min) also was not statistically different (P = .82). CONCLUSIONS: Long-term application of brimonidine 0.2% does not affect the blood flow or vasomotor activity of the anterior optic nerve.     

Dexanabinol (HU-211) has a beneficial effect on axonal sprouting and survival after rat optic nerve crush injury

Dexanabinol (HU-211) is a synthetic non-psychotropic cannabinoid and a non-competitive NMDA-receptor antagonist. The beneficial effect of dexanabinol on prevention of degeneration and promotion of regeneration was studied on the crush-injured rat optic nerve model. Sprague-Dawley rats were subjected to a calibrated crush injury of the optic nerve and treated with a single intraperitoneal injection of dexanabinol (7 mg/kg), its vehicle only or were untreated. Transmission electron microscopic analysis of the excised optic nerves was performed after 30 days. In the dexanabinol treated rats, the site of injury was traversed by unmyelinated and thinly myelinated axons, possibly indicative of regenerative growth. No such growth was detectable in the controls. Viable axons were found 0.5 mm distal to the site of injury in 6 of 8 dexanabinol treated rats, but in only 1 of 10 rats in the control groups.These results have clinical implications for the prevention of secondary degeneration and promotion of regeneration after injuries to the central nervous system.     

Nogo在视神经损伤后再生中的研究进展

哺乳动物外周神经损伤后轴突能再生很长距离。在一定条件下,中枢神经系统受损后也能部分再生。Nogo是一种已经被证实的髓鞘相关抑制因子,中枢神经损伤后Nogo释放增加、表达增强,启动神经元凋亡过程,导致神经元死亡。我们从Nogo-A,Nogo-66,可溶性NgR片段、RhoA酶与Rho-A/Rho激酶信号通道、钙离子几个方面综述Nogo的作用机制,并探讨其在视神经损伤后神经再生中的应用前景。     

Recovery of vision after presumed direct optic nerve injury

Immediate loss of light perception after direct optic nerve injury is usually irreversible. Our patient sustained presumed direct optic nerve injury because of a shotgun injury with loss of light perception, absent pupillary response, and absent visual-evoked potential. A small pupillary response was noted 12 days after injury, light perception returned by 15 days, and visual acuity was 20/100 at 4 months. A variety of pathophysiologic mechanisms may lead to visual loss after direct optic nerve injury. It is important to recognize that blindness is not always permanent in these cases despite the results of initial clinical and electrophysiologic testing.     

钙通道抑制介导轴突稳定对视神经损伤修复作用的研究进展

视神经损伤是常见的神经性疾病,其基本的病理特征为轴突变性和视网膜神经节细胞(RGCs)凋亡,从而导致视觉功能障碍等症状的出现。轴突变性是神经发育、轴突重塑和损伤反应的重要过程,包括轴突选择性退化、轴突横断诱导的Wallerian变性和凋亡诱导的轴突变性(轴突凋亡)。轴突变性是许多创伤性神经系统疾病的初始步骤之一,损伤的轴突一般无法再生,从而进一步导致神经元胞体凋亡。神经元凋亡导致胞体和轴突两者的退化,在发育过程中广泛发生并且应对神经元的各种损伤。近年来有研究证实,钙是轴突变性的主要调控因子。在视神经挤压伤(ONC)发生后,通过钙通道抑制剂阻止钙离子涌入轴突,可以减弱急性轴突变性(AAD)的程度,提高RGCs的存活率以及促进轴突的再生。     

视神经损伤再生修复的视觉诱发电位研究

目的探讨视神经损伤后不同时期视觉诱发电位检查的刺激模式空间频率、P100波幅变化与视神经损伤再生修复之间的联系,探讨将视觉诱发电位技术应用于视神经损伤再生修复评估的可行性。方法分析因眼外伤致视神经受损23例（29眼）的视觉诱发电位资料,实验确定刺激模式空间频率及P100波幅作为检测指标,以受检者的视力表视力为参照,记录全部受检眼的检测结果,在此基础上,分析视神经损伤后不同时期视觉诱发电位变化与视神经再生修复之间的关系。结果一定的视觉刺激模式空间频率大小与视神经损伤再生修复表现出一致性,P100波幅与视力水平呈正相关。视神经损伤后前3个月,再生修复眼视觉诱发电位检测结果呈现动态变化,如视力恢复、刺激模式空间频率减小及P100波幅增大预示视神经损伤再生修复;若视力减退、刺激模式空间频率增大（或无变化）及P100波幅减小（或无变化）则提示视神经损伤严重,无明显再生修复。结论视觉诱发电位技术可用于视神经损伤再生修复的客观评估。