黄芪多糖对实验性精索静脉曲张大鼠睾丸HO-1表达的影响及意义

目的 研究黄芪多糖对实验性精索静脉曲张(Varicocele,VC)大鼠睾丸组织中血红素加氧酶-1(HO-l)表达的影响,探讨黄芪有效成分治疗VC的作用及机制.方法 青春期雄性SD大鼠70只,随机分为VC造模组(n=60)和假手术组(n=10,C组).VC造模组大鼠按灌胃药物随机分为黄芪多糖实验组(n=40,A组)和生理盐水对照组(n=20,B组).造模后分别于4周、8周取A、B组和C组大鼠左侧睾丸,用免疫组化方法检测睾丸组织中HO-1的表达.结果 HO-1在A组、B组睾丸组织中的阳性表达率分别为91.6％和94.1％,其表达强度明显高于C组(P＜0.01).A组HO-1表达强度低于B组(P＜0.05).结论 实验性VC大鼠左侧睾丸组织中存在HO-1表达上调.黄芪多糖可下调VC大鼠睾丸组织HO-1表达强度,减少睾丸组织氧化损伤,可能对VC不育有一定治疗作用.     

精索静脉曲张大鼠睾丸低氧与生精细胞凋亡的研究

目的 观察实验精静索静咏曲张(varicocele,VC)大鼠睾丸低氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达与睾丸生精细胞凋亡的关系,探讨VC导致不育的病理生理机制.方法 40只大鼠,随机分为3组.建立模型49d后,取其左侧睾丸组织,检测睾丸组织的HIF-1α的表达和生精细胞的凋亡率.结果 westernblot和免疫组化检测的实验组睾丸HIF-1α的表达(2.529±1847,78.57%)显著高于对照组(0.308±0.165,14.29%)和假手术组(0.309±0.164,0.00%)(P<0.05),差异均具统计学意义;实验组睾丸细胞凋亡指数(20.79±5.70)显著低于对照组(0.6±1.4)和假手术组(0.36±0.71)(P<0.001),差异均具统计学意义;实验组睾丸HIF-1α的表达与其细胞凋亡指数呈正相关(r=0.844,P=0.017).结论 VC可引起睾丸低氧,而低氧可以通过诱导生精细胞凋亡来引起睾丸功能的改变.同时,HIF-1α是一种预测生精细胞凋亡程度的有用指标.     

实验性精索静脉曲张对大鼠睾丸和附睾中血管内皮生长因子及其受体1表达的影响

目的:研究实验性左侧精索静脉曲张(ELV)对青春期大鼠睾丸、附睾中血管内皮生长因子(VEGF)及其受体fms样酪氨酸激酶(Flt-1)蛋白表达的影响。方法:建立青春期雄性SD大鼠ELV模型,采用免疫组化SP法检测VEGF和Flt-1在ELV组及假手术对照组睾丸、附睾组织中的表达变化。结果:VEGF和Flt-1蛋白在ELV组和对照组大鼠睾丸、附睾中均有表达,其定位和表达量具有细胞特异性和区域特异性。经图像分析和统计检测显示,ELV2周和4周组双侧睾丸和附睾中VEGF蛋白的表达与相应对照组比较均显著增加(P<0.01和P<0.05);ELV2周组双侧睾丸和附睾中Flt-1蛋白的表达与相应对照组比较也显著增加(P<0.01和P<0.01),但4周时在双侧睾丸和左侧附睾中Flt-1蛋白的表达显著下降(P<0.01和P<0.05),而右侧附睾未见明显差异(P>0.05)。结论:实验性精索静脉曲张可造成青春期大鼠睾丸、附睾中VEGF和Flt-1的表达量变化,该变化可能会影响精子的发生和成熟,因而可能是VC引起男性生育力下降甚至不育的原因之一。     

高压氧对精索静脉曲张大鼠生精细胞凋亡及其基因缺氧诱导因子-α、bcl-2及bax表达的影响

目的 观察高压氧(HBO)对精索静脉曲张(VC)SD大鼠生精细胞凋亡的影响,探讨精索静脉曲张导致男性不育的机制.方法 50只青春期雄性SD大鼠,随机抽出10只作为假手术对照组(A).A组只游离左肾静脉不予结扎,其余40只部分结扎左肾静脉建立VC模型,8周后,将建立了VC模型的40只随机分为VC模型组(B)和HBO干预的VC模型组(C),C组用HBO对VC模型进行干预.实验结束后各组大鼠切取双侧睾丸,采用原位末端标记法(TUNEL)检测大鼠睾丸生精细胞凋亡,免疫组织化学检测低氧诱导因子(HIF)-α、bcl-2及bax的基因表达.结果 B组较A组生精细胞凋亡数明显增多,HIF-α、bax表达增强(P＜0.01),bcl-2表达减弱(P＜0.01),bcl-2/bax比值降低;C组大鼠较B组生精细胞凋亡数减少(P＜0.01),HIF-α表达减弱(P＜0.01)、bcl-2/bax比值上升,而与A组比较差异无统计学意义.结论 VC大鼠生精细胞凋亡率增加,HIF-α表达增强、bcl-2和bax基因表达失调为其凋亡机制之一;高压氧可能通过HIF-α、bcl-2和bax基因调控途径调节生精细胞凋亡,从而改善VC所致的生精功能障碍.     

实验性精索静脉曲张大鼠生精状态评价

目的 通过对大鼠实验性精索静脉曲张(varicocele,VC)模型睾丸生精小管生精上皮结构、性激素水平的分析,探讨精索静脉曲张致不育的机制.方法 40只雄性青春期Wistar大鼠随机分为VC8周组(n=12)、VC12周组(13=12)和相应对照组(分别n=8);左肾静脉部分结扎建立实验性大鼠VC模型.术后8周或12周,分别测量各组大鼠:(1)左侧精索静脉直径、睾丸温度及体质量、睾丸生精小管生精上皮;(2)外周血中促卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)和睾酮(T)的水平.结果 VC8周和VC12周组大鼠左侧精索静脉明显扩张,与对照相比血管直径差异有统计学意义(P<0.01);VC8和VC12周组大鼠左侧睾丸体质量均低于自体右侧睾丸和对照组睾丸,差异有统计学意义(P<0.05);光镜下,VC组大鼠双侧睾丸生精小管生精上皮精子发生阻滞、细胞脱落和细胞层数减少等,VC12周组损伤程度较VC8周组明显加重,左侧较右侧显著;与对照组相比,VC组大鼠外周血FSH、LH升高,T降低,差异均有统计学意义(P<0.01).结论 本研究提示:VC对大鼠双侧睾丸生精小管生精上皮产生明显的损害作用,并导致大鼠血中T水平降低和FSH、LH水平升高.     

精索静脉曲张与氧化应激的研究

目的 :研究精索静脉曲张 (VC)时氧化应激的损害机制。　方法 :2 8例VC不育男性 ,行精索内静脉结扎术 ,采精索内静脉血和外周静脉血 ;建立大鼠左侧VC模型 (n =12 ) ,以假手术大鼠为对照组 (n =8) ,术后 3个月取睾丸组织。采用分光光度法检测VC男性血浆及大鼠睾丸组织中一氧化氮 (NO)、一氧化氮合酶 (NOS)、黄嘌呤氧化酶(XO)、乳酸 (Lac)和乳酸脱氢酶 (LDH)含量。　结果 :VC患者精索内静脉血浆中NO、NOS、XO、Lac含量明显高于外周静脉血浆 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 ) ,LDH明显降低 (P <0 .0 1)。实验性VC大鼠左侧睾丸组织NO、XO高于对照组 (P <0 .0 1) ,Lac明显降低 (P <0 .0 1)。　结论 :VC时 ,可由于曲张精索静脉血浆中NO、NOS和XO及睾丸组织中NO和XO产生增加 ,以及Lac和LDH含量的变化 ,而导致精子生成障碍或 /和精子活力下降 ,引起男性不育。     

实验性精索静脉曲张大鼠睾丸组织IL-1和NO的变化

目的 :研究精索静脉曲张 (VC)对大鼠睾丸组织中IL 1和NO含量的影响。　方法 :采用部分结扎左肾静脉及左髂总静脉之间的交通支 ,制备Wistar大鼠VC模型。将大鼠随机分为手术结扎组 (VC组 ,n =30 )和假手术组 (n =2 0 ) ,分别测定 2组大鼠睾丸组织中IL 1和NO的含量 ,并加以比较。　结果 :①IL 1、NO含量在左侧睾丸组织中VC组均显著高于假手术组 (P <0 .0 1) ,而在右侧睾丸组织中 2组比较差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;②IL 1与NO呈正相关关系 (r =0 .5 72 ,P <0 .0 1)。　结论 :VC时睾丸组织IL 1和NO的变化 ,可能是造成睾丸损伤、精子发生障碍甚至不育的原因     

茶多酚对精索静脉曲张大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响

目的:研究茶多酚对精索静脉曲张大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响,分析茶多酚对精索静脉曲张大鼠生精功能是否具有保护作用。方法:清洁级青春期Wistar大鼠32只随机分为4组,每组8只:假手术组(仅模拟手术过程,不结扎血管)、模型组(建立左精索静脉曲张模型)、茶多酚低剂量组[建立精索静脉曲张模型并给予10 mg/(kg·d)茶多酚干预]、茶多酚高剂量组[建立精索静脉曲张模型并给予40 mg/(kg·d)茶多酚干预]。建立左侧精索静脉曲张模型4周后,假手术组及模型组均给予生理盐水1 ml/100 g,茶多酚低剂量组及茶多酚高剂量组分别给予茶多酚10 mg/kg(用生理盐水配置成浓度为1 mg/ml)和40 mg/kg(用生理盐水配置成浓度为4 mg/ml),灌胃,1次/日,持续4周。4周后4组大鼠均处死并分别取左侧睾丸组织,检测低氧诱导因子-1(HIF-1)、Bcl-2、Bax、细胞色素C(Cyt C)和caspase-3在睾丸组织中的表达及生精细胞的凋亡并计算凋亡指数(AI)。结果:茶多酚干预组大鼠Bcl-2表达高于模型组(110.03±3.07),低于假手术组(154.18±2.96);茶多酚低剂量组大鼠Bcl-2(127.67±1.28)表达低于茶多酚高剂量组(136.41±1.95),差异有统计学意义(P0.05)。茶多酚干预组大鼠HIF-1、Bax、Cyt C和caspase-3的表达低于模型组,高于假手术组;茶多酚低剂量组大鼠HIF-1、Bax、Cyt C和caspase-3的表达高于茶多酚高剂量组,差异有统计学意义(P0.05)。假手术组AI最低,茶多酚干预组AI低于模型组,茶多酚高剂量组AI低于茶多酚低剂量组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:茶多酚能显著降低精索静脉曲张大鼠睾丸生精细胞的凋亡。     

精索静脉曲张大鼠附睾组织中低氧诱导因子1α和p53的表达

目的:观察精索静脉曲张(VC)大鼠附睾指数,附睾精子活率,附睾组织中低氧诱导因子1α(HIF-1α)、p53的表达及上皮组织的变化,探讨VC大鼠附睾功能降低的机制。方法:90只SD大鼠随机分为手术组、假手术组和正常对照组,每组30只。手术组建立SD大鼠左侧VC模型,采用假手术建立假手术组,正常对照组不作任何处理。各组大鼠均于手术组术后49 d断颈处死。处死前大鼠称重,处死后左侧附睾称重,收集附睾尾部精子,以计算机辅助精子分析系统行精子活率检测;应用Western印迹检测附睾组织中HIF-1α和p53的表达变化;HE染色观察附睾上皮组织的情况。结果:手术组27只大鼠建模成功。3组大鼠附睾指数差异无统计学意义[(40.53±1.76)×10-5、(43.31±1.58)×10-5、(44.10±2.62)×10-5,P0.05];手术组大鼠精子活率[(71.86±5.07)%]和前向运动精子百分率[(42.26±4.45)%]均显著低于假手术组[(78.51±4.50)%、(49.08±4.19)%]和正常对照组[(79.24±2.70)%、(52.23±2.23)%](P均0.05);手术组大鼠附睾组织HIF-1α和p53相对表达量[1.74±0.16、1.71±0.11]均显著高于假手术组[0.32±0.08、0.56±0.13]和正常对照组[0.12±0.03、0.25±0.06](P均0.01);手术组附睾管上皮细胞与另外两组相比明显疏松无序并且数量减少。结论:VC导致附睾组织低氧并可能使附睾功能降低。     

睾丸去神经支配诱发睾丸组织内Bax、Bcl-2基因表达

目的:观察切除精索神经后睾丸组织内Bax、Bcl-2基因表达的变化,探讨睾丸去神经支配诱发生殖细胞凋亡的基因调控机制。方法:健康成年雄性SD大鼠18只,随机分为假手术组(n=6)、精索上神经切除组(n=6)、精索下神经切除组(n=6)。解剖显微镜下建立睾丸去神经支配大鼠模型,于术后1个月采用免疫组化法检测睾丸组织中Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果:术后1个月各手术组大鼠睾丸组织内Bax蛋白表达均较假手术组显著升高(P<0.05),Bcl-2蛋白水平无显著变化。结论:Bax基因可能参与对睾丸去神经支配诱发生殖细胞凋亡过程的调控。     

α-生育酚对精索静脉曲张大鼠生殖细胞凋亡的影响

目的:探讨α-生育酚对精索静脉曲张(VC)大鼠睾丸生殖细胞损害的保护作用。方法:采用成年雄性Wistar大鼠10只复制精索静脉曲张疾病模型,4周后开始每日肌注α-生育酚0.5mg/(100g体重),共4周(生育酚组)。同时设手术组及假手术组进行对照。8周后用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法(TUNEL)检测睾丸生殖细胞凋亡指数(AI)。结果:生育酚组动物左侧睾丸重量显著高于手术组(P<0.05),低于假手术组(P<0.05);生育酚组细胞凋亡率[左侧(5.34±1.28)%,右侧(5.87±1.25)%]高于假手术组[左侧(4.72±1.02)%、右侧(4.88±1.28)%](P<0.05),而显著低于手术组[左侧(9.05±2.51)%,右侧(7.22±1.35)%](P<0.05)。结论:α-生育酚能降低精索静脉曲张大鼠生殖细胞的凋亡指数,延缓睾丸细胞损害的病程,对精索静脉曲张导致的睾丸损害具有一定的保护作用。     

通精灵对实验性精索静脉曲张大鼠生精细胞凋亡及Bcl-2表达的影响

目的：探讨实验性精索静脉曲张大鼠睾丸生精细胞凋亡状况及通精灵对精索静脉曲张大鼠睾丸生精功能的保护作用。方法：成年清洁级雄性Wistar大鼠50只,按Sapyol法制作左精索静脉曲张大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、通精灵低剂量组、通精灵中剂量组、通精灵高剂量组各10只。造模1个月后,各组予以不同药物灌胃1次／d。2个月后处死,用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法检测睾丸生精细胞凋亡,免疫组化法检测睾丸组织Bcl-2表达。结果：模型组大鼠左睾丸凋亡指数明显高于假手术组及通精灵各组（P〈0．01）,通精灵各组左睾丸凋亡指数显著低于模型组（P〈0．05）。与假手术组比较,模型组大鼠睾丸组织Bcl-2蛋白表达下降（P〈0．05）,与模型组比较,通精灵中、高剂量组睾丸组织Bcl-2蛋白表达显著上升（P〈0．05）。结论：通精灵能降低实验性精索静脉曲张大鼠睾丸生精细胞凋亡,减轻实验性精索静脉曲张大鼠睾丸组织的病理损害,上调凋亡抑制基因Bcl-2表达。     

高压氧下调精索静脉曲张大鼠睾丸组织NOS和NO表达的研究

目的:探讨精索静脉曲张(varicocele,VC)大鼠睾丸组织一氧化氮合酶(NOS)和一氧化氮(NO)含量的变化及高压氧(HBO)的干预效果。方法:选取50只7周龄雄性SD大鼠,随机抽取10只为假手术对照组(A组),其余40只部分结扎左肾静脉建立VC模型,8周后再将40只大鼠随机分为VC模型组(B组)和HBO干预的VC模型组(C组),C组用HBO对VC大鼠进行干预。实验结束后分别测定三组大鼠睾丸组织NOS及NO的含量。结果:B组左侧睾丸NOS、NO含量显著高于A组,C组左侧睾丸NOS、NO含量下降明显(P0.01);三组右侧睾丸NOS、NO含量比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:VC时睾丸NOS和NO含量的变化是造成睾丸损伤、生精障碍的原因之一,高压氧可能通过下调NOS、NO的表达来改善VC所致的生精功能障碍。     

精索静脉曲张大鼠睾丸瘦素表达的实验研究

目的研究精索静脉曲张对大鼠睾丸组织瘦素表达的影响，探讨精索静脉曲张引起不育的病理机制。方法选用雄性SD大鼠25只，随机分为模型组15只，假手术对照组10只。采用肾静脉缩窄法建立精索静脉曲张动物模型，半定量RT-PCR法分别检测两组大鼠睾丸瘦素mRNA含量。结果精索静脉曲张模型组和假手术对照组大鼠睾丸均有瘦素表达，模型组较假手术对照组瘦素mRNA含量显著增加（P〈0.05）。结论精索静脉曲张可引起睾丸瘦素mRNA表达显著增加，这可能是精索静脉曲张引起睾丸生精功能障碍导致不育的重要机制之一。     

精索静脉曲张大鼠睾丸细胞自噬的初步研究

目的初步研究自噬在精索静脉曲张大鼠模型中的表达改变和可能的理论意义,及初步探讨自噬和凋亡的可能关系,为精索静脉曲张致不育机制的研究提供新的方向。方法取SD雄性大鼠40只,分为正常对照组、VC组(VC造模组)、VC手术组(VC+手术治疗组)、假手术组,每组10只。正常对照组不做任何处理,VC组和VC手术组行造模,假手术组打开腹腔但不做任何处理,第30天时对VC手术组行左侧精索静脉高位结扎手术治疗。第60天时对所有组大鼠行左侧睾丸切除术。对睾丸组织行HE染色、TUNEL染色,透射电镜观察用于睾丸生精小管上皮细胞自噬体;Western-blot、RT-PCR检测LC3-Ⅱ和Beclin1含量变化。结果透射电镜观察正常对照组和假手术组生精小管上皮细胞中较少见自噬体和自噬溶酶体,VC组和VC手术组中自噬体、自噬溶酶体明显增多。Western-blot及RT-PCR检测示,Beclin-1和LC3-Ⅱ/Ⅰ在VC组和VC手术组中表达明显高于正常对照组和假手术组。结论 VC可致大鼠睾丸生精小管上皮细胞中自噬体表达增多的现象,并且初步探讨自噬与凋亡呈正相关的关系。对VC睾丸细胞自噬的研究,可能进一步为VC的临床治疗提供新的靶点和理论依据。     

巴戟天水提取物对精索静脉曲张SD大鼠睾丸组织中精子结合抗原11T和miR-210的影响

目的:探讨巴戟天(MOH)对精索静脉曲张(VC)SD大鼠睾丸组织精子结合抗原11T(SPAG11T)和微小RNA-210 (miR-210)的影响.方法:将40只SD大鼠随机均分为空白对照组、VC组、治疗1组、治疗2组(n=10).治疗1组给予200 mg/kg MOH水提取物灌胃,治疗2组给予400 mg/kg MO...     

大鼠精索静脉曲张模型的制作及变异分析

目的:观察大鼠睾丸-精索静脉脉管系统解剖及变异情况,探索大鼠精索静脉曲张(varicocele,VC)模型的制作。方法:采用左肾静脉部分结扎法制作80只SD大鼠的VC模型,对模型组及对照组大鼠的睾丸-精索静脉脉管系统进行解剖并绘制图谱。结果:64只成功制成左侧VC模型,平均静脉直径从术前的0.16mm增加到1.3mm。SD大鼠左侧精索静脉走行存在多种类型的变异情况。VC大鼠的睾丸血流由常规的经精索静脉流入下腔静脉变为经3～4个静脉侧枝经膀胱前列腺周围静脉丛流入髂静脉。结论:大鼠VC模型的制作需要考虑多种静脉变异情况,VC使得睾丸静脉血回流通路发生改变。     

脊髓损伤对大鼠睾丸生精细胞iNOS、Bcl-2基因表达的影响

目的 :探讨大鼠脊髓损伤后生精细胞减少的影响因素。　方法 :6 0只SD大鼠随机分为脊髓损伤手术组(n =4 0 )和假手术组 (n =2 0 ) ,应用免疫组化S P法检测脊髓损伤大鼠术后第 2周、第 4周睾丸生精细胞iNOS、Bcl 2表达情况。　结果 :术后第 2周 ,手术组大鼠睾丸生精细胞中iNOS表达与假手术组比较显著增强 (P <0 .0 5 ) ,Bcl 2表达与假手术组比较差异无显著性。术后第 4周 ,手术组大鼠与假手术组比较 ,睾丸生精细胞中iN OS表达显著增强 (P <0 .0 5 ) ,Bcl 2表达显著性减少 (P <0 .0 5 )。　结论 :脊髓损伤后iNOS表达的增强与Bcl 2表达的减少是造成生精细胞显著减少的原因之一     

胸腺素对实验性精索静脉曲张鼠催乳素分泌的影响

本文研究了胸腺素对实验性精索静脉曲张鼠催乳素(PRL)分泌的影响.用放射免疫法测定了血清和睾丸组织中PRL的水平.发现实验性精索静脉曲张未用药组左侧睾丸组织中的PRL水平与假手术组比较明显升高(P<0.01),同组两侧比较有显著性差异(P<0.01).给予胸腺素4周后,两侧睾丸组织中的PRL水平明显降低,尤其以左侧睾丸组织较为显著(P<0. 01).提示PRL水平异常是精索静脉曲张不育的原因之一.胸腺素参与PRL的分泌和功能的调节,对实验性精索静脉曲张鼠生殖内分泌功能的调控具有重要的影响.     

实验性精索静脉曲张大鼠血清及睾内睾酮的变化

目的:研究精索静脉曲张(VC)大鼠模型对血清T和睾丸内T的影响。方法:通过部分结扎左肾静脉建立SD大鼠VC模型20只;假手术组SD大鼠20只为对照组。模型建立后4、8周取静脉血,并取部分睾丸组织匀浆提取上清液,放免法测定血清及睾丸内T浓度。结果:血清T:实验组4、8周与同期对照组相比有下降趋势,但没有统计学意义。双侧睾丸内T水平:实验组4周与对照组4周相比下降,但无统计学意义(P>0.05);实验组8周与对照组8周相比下降,具有统计学意义(P<0.01)。结论:在8周内实验性大鼠VC并没有引起血清T的降低,但可以导致双侧睾丸内T降低。