黄绿青霉素对低硒低蛋白大鼠心肌损伤的生化检测

目的 观察黄绿青霉素(CIT)对低硒低蛋白大鼠心肌损伤在生化水平上的特点.方法 48只4周龄Wistar雄性大鼠,2×2析因设计,按体质量随机分为4组:低硒低蛋白加CIT组、低硒低蛋白组、常硒常蛋白加CIT组、常硒常蛋白组,每组12只.分别采用低硒低蛋白和常硒常蛋白饲料喂养大鼠至第12周后,加毒素组大鼠饲料中加入8mg·kg-1·d-1 CIT喂养至第20周,再加量至10 mg·kg-1·d-1 CIT继续喂养至22周,股动脉采血及取心脏,检测血清肌钙蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)、白蛋白水平,肌酸激酶(CK)、谷胱甘肽过氧化物酶( GSH-Px)以及心肌超氧化物歧化酶(SOD)活性,总抗氧化能力(T-AOC).结果 “硒+蛋白”与CIT对大鼠终来体质量、白蛋白和Tn-Ⅰ存在交互作用(F值分别为8.186、6.160、19.183,P均＜0.05),对12周大鼠体质量,22周血清GSH-Px、CK水平以及心肌SOD、T-AOC活性的影响不存在交互作用(F值分别为1.633、1.987、0.075、0.474、1.145,P均＞ 0.05).在低硒低蛋白背景下,加CIT组血清白蛋白和Tn-Ⅰ水平[(42.88±1.19)g/L,(668.6±55.8) ng/L]均低于无CIT组[(47.59±1.05)g/L,(989.3±49.2)ng/L,P均＜0.05].“硒+蛋白”对12周大鼠体质量、22周血清GSH-Px活性以及心肌SOD、T-AOC有影响(F值分别为96.860、58.086、4.475、25.485,P均＜0.05).低硒低蛋白两组12周大鼠体质量[(186.33±7.89)、(197.83±7.89)g]均低于常硒常蛋白两组[(274.08±7.89)、(265.42±7.89)g,P均＜0.05];低硒低蛋白两组[(317.5±102.6)、(296.9±90.5)U/L]血清GSH-Px活性均低于常硒常蛋白两组[(926.1±110.9)、(1181.7±85.9) U/L,P均＜0.05];低硒低蛋白两组心肌SOD活性[ (65.22±5.91)×106、(62.68±5.61)× 106 U/kg]均低于常硒常蛋白两组[(74.07±7.24)×106、(80.07±5.91)×106 U/kg,P均＜0.05];低硒低蛋白两组心肌T-AOC活性[(1.138±0.086)×106、(0.806±0.081)× 106U/kg]均低于常硒常蛋白两组[(1.688±0.105)×106、(1.163±0.086)×106 U/kg,P均＜0.05].结论 低硒低蛋白模型复制成功,CIT对低硒低蛋白大鼠心肌损伤在生化水平未发现有规律性效应,有待进一步研究确定.     

黄绿青霉素对低硒低蛋白大鼠心肌组织形态结构的影响

目的 观察黄绿青霉素(CIT)对低硒低蛋白大鼠心肌组织形态结构的影响.方法 将48只Wistar 雄性大鼠按2×2析因设计分为4组:低硒低蛋白加毒素组、低硒低蛋白无毒素组、常硒常蛋白加毒素组和常硒常蛋白无毒素组,每组12只.首先用常硒常蛋白或低硒低蛋白饲料喂养大鼠2个月,然后加毒素各组饲料中另加入8 mg·kg-1·d-1 CIT喂养2个月,再以加入10 mg·kg-1·d-1 CIT的饲料喂养2周,而无毒素各组继续喂饲原饲料.在实验终期将大鼠麻醉后进行股动脉放血处死,称量心脏质量,计算心脏质量指数,光镜下观察心肌组织病理学变化.结果 低硒低蛋白加毒素组、低硒低蛋白无毒素组、常硒常蛋白加毒素组和常硒常蛋白无毒素组心脏质量指数分别为( 3.65±0.45)×10-3、(3.05±0.19)×10-3、(3.83±1.06)×10-3、(3.31±0.52)× 10-3.析因分析结果显示,CIT因素对大鼠心脏质量指数有明显影响作用(F=8.524,P＜0.05),而“硒+蛋白”因素未见明显影响作用(F=1.347,P＞0.05),且二者间不存在交互作用(F=0.048,P＞0.05).光镜下低硒低蛋白加毒素组大鼠心肌细胞血管周围出现纤维组织增生,细胞中出现明显的收缩带;低硒低蛋白无毒素组大鼠出现少量心肌细胞固缩;常硒常蛋白加毒素组大鼠心肌细胞出现坏死灶,并伴有炎性细胞浸润,出现较多固缩细胞;常硒常蛋白无毒素组大鼠心肌细胞群排列整齐,层次清晰,结构完好.结论 CIT可引起大鼠心肌组织变性坏死,低硒低蛋白也可造成大鼠心肌组织轻微损伤,而两因素叠加在一起时心肌损伤较严重.     

黄绿青霉素致大鼠心肌损伤的实验观察

目的 观察黄绿青霉素（ｃｉｔｒｅｏｃｖｉｒｉｄｉｎ,ＣＩＴ）对大鼠心肌的损伤。方法 用含ＣＩＴ（每日每ｋｇ体重１５ｍｇ）的染毒饲料喂养大鼠１个月,取心肌和肝脏组织,石蜡切片,光镜观察。结果 实验组大鼠心肌在左室壁内膜下、心尖、室中隔部位出现明显坏死等改变,病变呈灶状或条索状分布,涉及范围较大,有淋巴细胞和单核细胞浸润,心肌细胞呈颗粒变性,肌原纤维凝聚、崩解,部分肌纤维溶解。结论 ＣＩＴ可致大鼠尽肌     

T-2毒素致低硒低蛋白大鼠心肌损伤实验观察

目的 探讨低硒低蛋白条件下T-2毒素对大鼠心肌的损伤作用以及补硒对该损伤的保护作用。方法 应用人工合成的低硒低蛋白饲料喂养Wistar大鼠，达到低硒状态后(6周)给予T-2毒素，按0．2mg／kg体重隔日灌胃24周，取大鼠心肌组织进行常规HE染色和电镜观察．并利用免疫组化技术检测心肌中的T-2毒素的含量。利用末端标记法检测心肌细胞凋亡发生情况。结果 T-2毒素灌胃组大鼠心肌T-2毒素表达明显，但灌胃各组之间差异不明显；低硒低蛋白组心肌损伤明显重于常硒常蛋白组．补硒保护作用明显。结论 T-2毒素能够在心肌组织中残留。低硒低蛋白能够加重T-2毒素对心肌的损伤作用．补硒能够起到一定的保护作用。     

黄绿青霉素致人胃癌细胞损伤的电镜观察

目的 电镜观察黄绿青霉素（CIT）对离体细胞损伤的超微形态变化。方法 细胞株为人胃癌细胞（SGC－7901）,常规培养。实验组分高低剂量两组,CIT在细胞培养液的终浓度分别为20,60μmol/L,37℃5%CO2孵箱中孵育24h。结果 实验两组CIT均导致细胞线粒体损伤。表现为线粒体嵴膜破坏,嵴变短、消失,线粒体肿胀、空泡变;高剂量组还伴有核浓缩、染色质边集。结论 CIT损害细胞线粒体结构。     

低剂量黄绿青霉素对大鼠心肌细胞色素C氧化酶与琥珀酸脱氢酶活性的影响

目的观察低剂量黄绿青霉素（CIT）对大鼠心肌细胞色素c氧化酶（COX）、琥珀酸脱氢酶（SDH）活性的影响。方法将刚断乳的Wistar雌性大鼠随机分为4组，3个实验组饲料加入乙醇提取的CIT粗毒素．按动物体质量给予CIT剂量分别为0．5、1．5、3．0mg／kg，对照组正常饲料加乙醇。饲养30d后用乙醚麻醉处死大鼠，取心室肌，酶组织化学染色法观察COX和SDH酶活性变化。结果1．5mg／kgCIT剂量组可见酶染颗粒减少，与对照组相比呈浅染；3．0mg／kgCIT剂量组酶染颗粒大量减少，且分布不均，局部可见点灶样缺失。图像定量分析表明，与对照组相比，1．5、3．0mg／kg剂量组的COX、SDH酶活性均明显降低，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论CIT剂量达1．5mg／kg时可致大鼠心肌组织COX、SDH酶活性显著减弱，且呈剂量效应关系。     

低硒与低营养复合因素致大鼠心肌损伤的实验研究

目的 探讨长期低硒与低营养复合因素膳食对大鼠心肌损伤的作用。方法 将Wistar大鼠40只随机分成2组，实验组用低硒、低蛋白、低维生素E饲料喂养，对照组用常硒、常蛋白、常维生素E饲料喂养，至第26周处死大鼠。测定全血谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性，血清肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH）水平和心脏质量与体质量比值。光镜、电镜下观察心肌结构改变。结果 实验组大鼠全血GSH墩活性水平显著低于对照组（t=58．79，P〈0．01）；实验组与对照组大鼠血清CK分别为（1．456±0．291）、（1．057±0．251）kU／L，CK—MB分别为（1．138±0．215）、（0．722±0．130）kU／L，LDH分别为（864．96±137．57）、（404．65±72．49）U／L，组间比较差异有统计学意义（t=4．71、7．46、13.42，P〈0．01）。大鼠心脏质量与体质量比值，实验组[（3．608±0．166）g／kg]显著高于对照组[（3．140±0．114）g／kg]，组间比较差异有统计学意义（t=10．62，P〈0．01）。光镜下实验组大鼠心肌出现散在小灶状坏死，检出率为66．67％，两组心肌病变检出率差异有统计学意义（χ^2=7．25，P〈0．01）。电镜下实验组大鼠部分心肌细胞线粒体嵴断裂，基质密度下降，细胞核固缩，早期凋亡形成，肌丝走行紊乱甚至溶解；对照组大鼠心肌细胞膜结构完好，线粒体嵴清晰，基质密度适中。结论 长期低硒、低营养复合因素膳食可引起大鼠心肌组织出现损伤。     

蛋白质缺乏在低硒高锰条件下对心肌的损伤作用

用低硒，低硒低蛋白质，低硒低蛋白质高锰半合成饲料喂大鼠。８周后和死。实验结果表明，低硒低蛋白质饲料使动物体重下降，心肌电镜所见，心肌细胞内水肿及少数线粒体空泡变，全血、心脏和肝脏ＧＳＨ－Ｐｘ活性下降，心肌ＣＣＯ和ＳＤＨ活性也有下降趋势，而低硒主锰和蛋白质缺乏的复合作用导致体重下降，电镜下显示心肌细胞内水肿，线粒体肿胀、弥人光变，肌原纤维断裂、肌丝分解、全血、 脏ＧＳＨ－Ｐdisplay status     

粮食中黄绿青霉素的高效液相色谱法检测

目的用高效液相色谱（ＨＰＬＣ）检测粮食中黄绿青霉素（ｃｉｔｒｅｏｖｉｒｉｄｉｎ，简称ＣＩＴ）的含量，用于评价粮食受青霉菌污染程度。方法用ＣＩＴ纯品污染粮样，再用二氯甲烷提取、过滤，过４ｃｍ硅胶柱，用乙酸乙酯∶正己烷（７∶３，Ｖ／Ｖ）洗脱，６０℃氮气吹干，ＨＰＬＣ检测。结果最低检出量为８ｎｇ，线性、重复性良好，回收率较高。结论文中报告的方法可用于地方病区粮食黄绿青霉素污染水平的检测、评价。     

粮食中黄绿青霉素的薄层色谱法检测

目的探索薄层色谱法（thin-layerchromatography，TLC）检测粮食中黄绿青霉素（citreoviridin，CIT）的实用方法。方法以CIT标准品人工污染粮样，然后用乙腈和水（80：20）提取，石油醚脱脂，蒸干，甲苯：乙酸乙酯：甲酸（6：3：1）定溶。溶液点样于60目高效薄层硅胶板上，在甲苯：乙酸乙酯：甲酸（6：3：1）溶液中展开，在紫外长波（366nm）下观察黄色条带来进行半定量分析，利用双波长薄层色谱扫描仪对CIT进行定量检测。结果最低检出限25ng，回收率在80.0％-103。1％。结论检测方法经济、快速、有效。     

硒、蛋白质和维生素E联合缺乏致大鼠甲状腺损伤的实验研究

目的 探讨长期低硒、低蛋白质和低维生素E(VE)膳食对大鼠甲状腺组织及其激素代谢的影响.方法 Wistar大鼠40只,按体质量随机分为4组:低硒低蛋白低VE组、低硒低蛋白常VE组、常硒常蛋白低VE组、常硒常蛋白常VE组.饲养至第26周处死,测定大鼠全血谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和肝脏Ⅰ型5'-脱碘酶(ID Ⅰ)活性,血清活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、三碘甲状腺原氨酸(T3)、四碘甲状腺原氨酸(T4)和促甲状腺激素(TSH)水平;光镜下观察甲状腺组织病理学改变.结果 ①硒+蛋白质和vE对大鼠全血GSH-Px和肝脏ID Ⅰ活性的影响均无交互作用(F值分别为0.003、0.871,P＞0.05),但对血清MDA和ROS水平的影响均存在交互作用(F值分别为13.057、6.706,P＜0.05或＜0.01).②硒+蛋白质和VE对血清T3、T4水平均有影响(F值分别为431.977、28.271、6.570、41.419,P＜0.05).但均无交互作用(F值分别为0.871、0.136,P＞0.05).无论在低硒低蛋白还是常硒常蛋白条件下,常VE组T4水平[(79.095±12.199)、(64.392±6.261)μg/L]均高于低VE组[(61.068±6.648)、(44.176±7.090)μg/L],差异有统计学意义(t值分别为3.670、6.045,P＜0.01);在低VE条件下,常硒常蛋白组T3、T4水平[(0.718±0.079)、(44.176±7.090)μg/L]均低于低硒低蛋白组[(0.966±0.156)、(61.068±6.648)μg/L],差异有统计学意义(t值分别为4.568、4.916,P＜0.01);在常VE条件下,常硒常蛋白组Td水平[(64.392±6.261)μg/L]低于低硒低蛋白组[(79.095±12.199)μg/L],差异有统计学意义(t=3.033,P＜0.01).③低硒低蛋白低VE膳食大鼠甲状腺滤泡上皮细胞出现变性坏死,而补充VE可减轻这种损伤:常硒常蛋白低VE膳食大鼠偶见滤泡腔内胶质稀疏.结论 长期低硒、低蛋白、低VE膳食可导致大鼠体内含硒酶活性降低,从而引起机体氧化代谢产物堆积,甲状腺组织出现病理性损伤,其激素代谢紊乱,而在低硒、低蛋白膳食中补充适量VE可部分降低这种损伤现象.     

碘硒缺乏对大鼠脑脂类含量的影响

按２×２析因实验设计将Ｗｉｓｔａｒ大鼠分成４组：Ｉ＋Ｓｅ＋、Ｉ＋Ｓｅ－、Ｉ－Ｓｅ＋和Ｉ－Ｓｅ－组。观察了碘硒两种因素及其联合作用对生后１５日、３０日龄仔鼠大脑总脂质，总磷脂及总胆固醇含量的影响。结果表明缺碘组（Ｉ－Ｓｅ＋和Ｉ－Ｓｅ－）三项指标的含量均明显低于补碘组（Ｉ＋Ｓｅ＋，Ｉ＋Ｓｅ－），而缺硒与补硒组之间无差别，提示缺碘组仔鼠存在脑髓化障碍。经析因方差分析表明，碘因素对上述指标的影响极为显著，而硒因素以及碘硒交互作用均未见明显影响。提示缺碘是影响脑脂类代谢即脑髓化障碍的主要原因。     

硒和蛋白质对大鼠心肌形态结构及谷胱甘肽过氧化物酶和线粒体型硫氧还蛋白还原酶表达的影响

目的 观察硒和蛋白质对大鼠心肌形态结构及谷胱甘肽过氧化物酶(GPX1)、线粒体型硫氧还蛋白还原酶(TR2)表达的影响.方法 选取健康纯系断乳雄性Wistar大鼠60只,按2×2析因设计分为4组,每组15只.饮水分为低硒(0 mg/L)、常硒(0.25 mg/L)2个水平;饲料分别为低蛋白(10％蛋白+0.008 mg/kg硒)、常蛋白(20％蛋白+ 0.015～0.026 mg/kg硒)2个水平.饲养1年后处死,光镜下观察心肌组织病理改变,免疫组化法和Westem blot法检测GPX1和TR2在大鼠心肌组织的表达水平.结果 各组大鼠心肌坏死率比较,差异有统计学意义(x2=11.04,P＜ 0.05),其中低硒低蛋白组[66.7％(8/12)]明显高于常硒常蛋白组[7.1％(1/14),x2=11.06,P＜ 0.05].免疫组化法检测,低硒低蛋白组、常硒低蛋白组、低硒常蛋白组、常硒常蛋白组大鼠心肌组织GPX1表达阳性率分别为0(0/12)、81.8％(9/11)、10.0％(1/10)、100.0％(14/14),其中常硒低蛋白组和常硒常蛋白组阳性率明显高于低硒低蛋白组和低硒常蛋白组(x2值分别为12.88、8.14和35.89、32.60,P均＜ 0.05);TR2阳性率分别为0(0/12)、81.8％(9/11)、0(0/10)、100.0％(14/14),其中常硒低蛋白组和常硒常蛋白组阳性率明显高于低硒低蛋白组和低硒常蛋白组(x2值分别为28.67、18.25和35.89、32.60,P均＜0.05).Western blot法检测,上述4组大鼠心肌组织GPX1蛋白表达分别为0.87±0.13、1.18±0.13、0.95±0.13、1.74±0.23,经析因分析,硒和蛋白质水平对心肌细胞GPX1表达具有影响作用(F值分别为124.93、43.16,P均＜0.05),且硒和蛋白质间有交互作用(F=24.10,P＜0.05);TR2蛋白表达分别为0.63±0.19、0.97±0.24、0.55±0.08、1.03±0.31,经析因分析,硒因素对心肌细胞TR2表达具有影响作用(F=36.97,P＜0.05).结论 常硒和常蛋白相对于低硒和低蛋白都可以提高心脏GPX1和TR2表达水平,增强心肌组织抗氧化能力,保护心肌内皮细胞,降低心肌的损伤程度,且二者联合作用较好.     

碘硒缺乏对大鼠脑组织抗氧化能力的影响

按２×２析因实验设计将Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为４组：Ｉ￣＋Ｓｅ￣＋，Ｉ￣＋Ｓｅ￣－，Ｉ￣－Ｓｅ￣＋，Ｉ￣－－Ｓｅ￣－组，观察了碘硒两种因素对１２周、３２周成鼠及１５日、３０日仔鼠大脑４种抗氧化酶（ＧＰｘ，ＳＯＤ，ＧＳＴ，ＣＡＴ）活力及ＬＰＯ含量的影响。结果表明，缺碘可使成鼠脑ＳＯＤ、ＣＡＴ活力增高，但随着缺碘延长，ＳＯＤ、ＧＰｘ呈下降趋势；除ＧＰｘ外Ｓｅ因素对其它酶无影响，ＧＳＴ各组无变化；缺碘仅使仔鼠（哺乳期）脑ＣＡＴ活力增高，而对其它酶无影响：ＧＰｘ活力在３０日开始受Ｓｅ水平影响；无论成鼠还是仔鼠，缺碘均使脑ＬＰＯ含量明显增高，缺Ｓｅ有增高ＬＰＯ趋势。结果提示，长期缺碘，成鼠腋组织可以发生自由基损伤，而仔鼠脑损伤可能更为严重。     

维生素C对低硒高镉饲料饲养大鼠心肌细胞DNA的影响

目的阐明维生素C(VC)对低硒(Se)高镉(Cd)饲料饲养大鼠心肌细胞DNA的影响。方法按喂养大鼠的饲料不同分组,用单细胞凝胶电泳技术分别观察普通饲料(对照1),实验构成饲料(对照2),单纯高Cd、高Cd高VC、低Se高Cd、低Se高Cd伴高VC、高Se高Cd、高Se高Cd伴高VC饲料饲养14周后大鼠心肌细胞DNA的改变。结果高Se高Cd伴高VC组大鼠心肌细胞DNA损伤率与对照组比较差异无统计学意义(P>0．05);高Cd高VC组、高Se高Cd组心肌细胞DNA轻度损伤;低Se高Cd高VC组、单纯高Cd组心肌细胞DNA损伤较重;低Se并高Cd组心肌细胞DNA损伤最为严重,损伤率达26．18％(P<0．01)。结论低Se并高Cd可在一定程度上改变心肌细胞的DNA生物学特性,VC可以对抗低Se并高Cd对心肌细胞所致的这种变化。