经典Wnt信号通路与精神分裂症

精神分裂症是一种重性精神病性障碍,病因和机制尚未明确,但目前普遍认为是由多个微效基因协同并与环境因素共同作用导致的疾病。由多基因组成的信号通路及通路间的相互作用在精神分裂症发病中可能起重要作用。与中枢神经系统发育和功能维持密切相关的经典Wnt信号通路近年来受到较多关注。许多针对Wnt信号通路与精神分裂症的关联研究均表明,精神分裂症患者细胞内Wnt信号通路异常。文章就目前针对经典Wnt信号通路在精神分裂症发病中潜在作用的相关研究作一综述。     

经典Wnt信号通路与子宫肌瘤

随着中国女性育龄期的延迟,健康查体和医学超声技术的进步,越来越多育龄期女性被发现患有子宫肌瘤。既往有症状的子宫肌瘤最主要的治疗方法是手术治疗,但子宫切除术和子宫肌瘤剔除术均会对育龄期女性生活质量产生不同程度的影响。因此,探讨子宫肌瘤发病机制,寻求新的治疗方法,对于罹患子宫肌瘤女性的诊治具有重要意义。经典Wnt信号通路是调节子宫肌瘤细胞增殖、凋亡的关键途径,参与子宫肌瘤的发生、发展。因此,探讨经典Wnt信号通路在子宫肌瘤中的作用机制对疾病的诊断、治疗和患者的预后具有重要的临床意义。     

经典Wnt信号通路在骨肉瘤中的作用机制

随着社会医疗水平的进步,骨肉瘤患者5年生存率提高,已被证实与身高、家族遗传病史、辐射、病毒等相关,但其发病机制至今尚不明确,晚期骨肉瘤患者仍存在远处转移的问题,没有得到有效控制.而经典Wnt信号通路在骨肉瘤的凋亡、化疗耐药性及侵袭转移等方面均起着重要的调控作用,通过抑制经典Wnt信号通路的活性,可以减缓骨肉瘤的生长和侵...     

辛伐他汀对大鼠成骨细胞经典Wnt信号通路相关因子表达的影响

目的观察不同浓度、不同时间辛伐他汀对体外培养的大鼠成骨细胞经典Wnt通路Wnt3a、LRP5和β-catenin的m RNA表达的影响,探讨辛伐他汀抗骨质疏松的可能机制。方法用酶消化法培养大鼠颅骨成骨细胞,采用倒置相差显微镜及碱性磷酸酶染色和茜素红染色观察和鉴定成骨细胞。用浓度分别为10^-8mol/L、10-7mol/L、10^-6mol/L和10^-5mol/L的辛伐他汀干预大鼠成骨细胞24 h、48 h和72 h,并设无辛伐他汀为对照组,采用RT-PCR检测经典Wnt信号通路Wnt3a、LRP5和β-catenin的m RNA表达情况。结果镜下观察及染色结果均显示具有成骨细胞典型特征。RT-PCR结果显示：10^-5mol/L辛伐他汀组干预24 h后较对照组Wnt3a[（2.09±0.12）vs（1.82±0.09）]、LRP5[（1.42±0.07）vs（1.29±0.07）]和β-catenin[（1.10±0.06）vs（0.95±0.06）]的m RNA表达显著增加;干预48 h和72 h后各组Wnt3a（F=37.78和96.52,P=0.000）、LRP5（F=10.32,P=0.001和F=22.02,P=0.000）的m RNA表达随着辛伐他汀浓度的增大而显著增加,β-catenin的m RNA表达较对照组显著增加（F=6.67和21.90,P〈0.05）;10^-8-10^-5mol/L辛伐他汀各组中分别干预24 h、48 h和72 h,随着干预时间延长Wnt3a和LRP5的m RNA表达均增加;干预48 h与24 h比较,β-catenin的m RNA表达差异无统计学意义[（1.08±0.09）vs（1.02±0.06）,P〉0.05],而干预72 h较24 h显著增加[（1.23±0.10）vs（1.02±0.06）,P〈0.05],且辛伐他汀浓度为10^-6mol/L和10^-5mol/L干预72 h较48 h显著增加[（1.32±0.07）vs（1.11±0.05）和（1.47±0.08）vs（1.19±0.04）,P〈0.05]。结论辛伐他汀可促进体外培养大鼠成骨细胞经典Wnt信号通路Wnt3a、LRP5和β-catenin的m RNA表达。     

Wnt信号通路与骨关节炎的研究进展

<正>骨关节炎(0A)是一类多见于中老年人的以关节软骨慢性退变为主、继发关节缘骨赘和滑膜慢性炎症为特征的关节疾病。女性发病率较高。其刚开始的、主要的病理表现为退行性变,软骨最先出现局部软化、糜烂,继而外露出软骨下骨,外露的软骨下骨硬化,出现囊性变,随后继发关节周围组织关节滑液、骨膜、滑膜等渐进性病理改变,肌肉组织相应出现挛缩与松弛等变化,从而破坏关节面的应力平衡,使关节形成恶性循环改变,病变逐渐加重。其发生机理与衰老、创伤、过度     

经典Wnt信号通路调控对大鼠心肌梗死后心肌愈合的影响

目的探讨经典Wnt信号通路对大鼠心肌梗死后心肌组织愈合的影响。方法建立大鼠急性心肌梗死模型,采用免疫组化和实时荧光定量PCR技术检测经典Wnt信号通路中的两个关键信号分子Wnt-1、β-catenin蛋白及mRNA在对照组(C组)、梗死组(I组)和非梗死组(N组)各时间点心肌组织中的时空表达;同时观察心肌梗死后心肌组织的病理学变化。结果各时间点心肌组织中Wnt-1、β-catenin的表达水平在C组与N组中无显著性差异。I组4天、7天、10天、14天心肌组织中Wnt-1、β-catenin的蛋白表达水平较C组、N组明显增高(P<0.01);I组1天、4天、7天、10天、14天心肌组织中Wnt-1、β-catenin的mRNA表达水平较C组、N组明显增高(P<0.01);且动态变化与心肌梗死后心肌的愈合过程相平行。通过病理形态学与免疫组化分析发现肌纤维母细胞、内皮细胞在发生梗死的大鼠心脏中增殖和迁移的过程中伴随着Wnt-1、β-catenin的高表达。结论经典Wnt信号通路参与心肌梗死后心肌组织的修复和愈合过程;并对肌纤维母细胞和血管内皮细胞的增殖、迁移起一定的调控作用。     

Wnt信号通路与消化道肿瘤研究进展

Wnt信号通路是调控细胞生长增殖的重要通路之一,其成分不恰当地激活与肿瘤的发生、发展有关,尤其与消化道肿瘤的发生、发展密切相关。本文对Wnt信号通路在食管癌、胃癌、肝细胞癌、结直肠癌等的发生、发展的作用作简要综述,以探究其各组分及相互作用机制,为消化道肿瘤的治疗提供应用前景。     

Wnt信号通路与肿瘤药物治疗研究进展

Wnt信号通路在生物体内控制有关细胞生长、凋亡、自我更新和生存基因的表达,维持生物体中正常的胚胎发育和组织修复再生等生理活动。Wnt信号通路的失调与肿瘤的发生发展有着密切的关系。历史研究表明,运用中和抗体,小分子抑制剂和溶瘤腺病毒等方法可以从多层次水平上抑制Wnt信号通路,从而为开发特异性强,毒副作用小的抗癌药物提供新途径。文章主要对关于Wnt信号通路的科学研究进展及相关抗肿瘤药物的开发做一简要综述。     

经典 Wnt 信号通路在大鼠脑缺血后血管新生中的作用

目的研究缺血性脑卒中大鼠缺血周边脑组织的经典Wnt信号通路活性及干预该通路活性对缺血周边血管新生的影响。方法随机将50只雄性Wistar大鼠分为4组:假手术组(Sham组,n=10),脑缺血对照组(MCAO组,n=20),氯化锂干预组(Li Cl组,n=10),DKK1干预组(DKK1组,n=10)。免疫印迹法检测经典Wnt信号通路成分,FITC-dextran检测血管密度,多普勒血流仪检测血流量。结果脑缺血1 d后,与Sham组相比,MCAO组缺血周边脑组织细胞核蛋白及细胞浆蛋白中β-catenin表达水平显著下降(P<0.05),7 d时明显恢复,14 d时接近正常水平。与MCAO组相比,Li Cl组β-catenin表达水平及p-GSK-3β/GSK-3β比值提高(P<0.05),并且缺血周边血管密度及血流量增加(P<0.05);DKK1组变化相反,β-catenin表达水平及p-GSK-3β/GSK-3β比值降低(P<0.05),血管密度及血流量下降(P<0.05)。结论经典Wnt信号通路参与调节缺血性脑卒中后缺血周边的血管新生。     

Wnt信号通路与血管发生研究进展

Wnt信号通路与血管发生有着密切联系,它能够通过使血管内皮细胞增殖、血管芽生、血管丛重塑、促进脉管系统成熟等多个阶段来诱导血管发生.通过动态变化的Wnt信号来改善如缺血性脑损伤等与内皮细胞密切相关的神经病理状况成为了近来研究的热点.本文就Wnt信号通路与血管发生之间的关系做一综述.     

非霍奇金淋巴瘤细胞株中Wnt信号通路功能检测及siRNA敲低Wnt信号通路对细胞活力的影响

目的:研究非霍奇金淋巴瘤细胞株中Wnt信号通路功能及siRNA敲低Wnt信号通路对细胞活力的影响.方法:培养SUDHL-4细胞株(弥漫大B细胞淋巴瘤细胞株)、Namalwa细胞株(Burkitt淋巴瘤细胞株)和正常淋巴细胞,检测Wnt信号通路功能;采用siRNA干扰的方式敲低淋巴瘤细胞株中Wnt蛋白的表达,检测细胞活力以及MYC、CylinD1、Bcl-6的mRNA含量.结果:SUDHL-4细胞株和Namalwa细胞株中Wnt、β-catenin、LRP5、Tcf、Lef的mRNA含量高于正常淋巴细胞,GSK-3β含量低于正常淋巴细胞,差异具有统计学意义(P＜0.05);抑制Wnt蛋白表达后,SUDHL-4细胞株和Namal-wa细胞株的细胞活力明显减低,细胞中MYC、CylinD1、Bcl-6的mRNA含量明显降低,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:非霍奇金淋巴瘤细胞株中Wnt信号通路功能增强;抑制Wnt信号通路能够降低细胞活力和相关靶基因的表达.     

Wnt信号转导通路与肝纤维化关系的研究进展

肝纤维化是十分复杂的病理过程,其本质是肝星状细胞（ hepatic stellate cells,HSCs）的活化和细胞外基质（ extracellular matrix,ECM）的过度沉积。目前认为HSCs的活化与多种信号通路的激活相关。相关研究证实Wnt信号转导通路在调控肝脏病理生理的过程中起到重要作用,阻断该通路可以抑制HSCs的增殖及诱导其凋亡。本文就Wnt信号转导通路与肝纤维化关系的研究进展进行综述。     

干扰CXCR4基因抑制胰腺癌经典Wnt通路活化的体外实验研究

目的观察CXCR4 shRNA转染胰腺癌细胞后经典Wnt通路的活性变化.方法构建CXCR4 shRNA表达载体转染胰腺癌CXCR4高表达细胞Miapaca-2并应用G418筛选出稳定表达株,通过Realtime-PCR、WesternBlot实验观察RNAi对CXCR4基因的抑制效率;通过PGL3-OT/OF荧光素酶检测方法观察CXCR4基因沉默后对胰腺癌Wnt/β-catenin经典通路活性的影响,并通过Realtime-PCR、Western Blot实验观察CXCR4 shRNA对Wnt/β-catenin通路下游靶基因的影响.结果特异性CXCR4基因沉默能够在基因和蛋白水平稳定、高效、特异地抑制CXCR4的表达,抑制效率达70%以上,同时,特异性CXCR4干扰后能够显著抑制PGL3-OT转染后的荧光素活性（P〈0.05）以及Wnt/β-catenin下游靶基因的mRNA及蛋白的表达.结论CXCR4基因沉默能抑制Wnt/β-catenin经典通路在胰腺癌中的活性,阻遏Wnt/β-catenin通路下游靶基因表达,为CXCR4作为胰腺癌治疗的分子靶点提供依据.     

Wnt信号通路参与实验性小鼠肝纤维化的研究

目的探讨Wnt信号通路对实验性小鼠肝纤维化（hepatic fibrosis,HF）的促进作用。方法建立小鼠CCl4诱导HF模型,随机分为正常对照组、HF模型组与Wnt处理组。体内实验对小鼠腹腔注射Wnt3A与Wnt11各5 ng/ml,每周2次,4周后获得肝组织;体外实验Wnt处理组为正常小鼠肝细胞在含有Wnt 5 ng/ml无血清培养基培养2周后,RT-PCR法检测肝细胞α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）、E-钙黏附素（E-cadherin,E-cad）、Wnt3A,Wnt5A与Wnt11。免疫荧光显微镜及激光共聚焦定位法分析肝细胞形态学变化。对培养细胞进行诱导分化,Massion染色法观察。结果体内试验HF小鼠肝细胞Wnt3A与Wnt11的免疫荧光分析及Massion染色显示,经Wnt3A与Wnt11处理后的小鼠肝上皮细胞标志（E-cad）减低,肝间质细胞标志（α-SMA）升高（P〈0.05）,发生了上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transitions,EMT）。体外试验HF小鼠肝细胞RT-PCR分析表明：HF组与Wnt处理组与正常对照组比较α-SMA、Wnt3A、Wnt5A、Wnt11表达明显增加,E-cad表达明显减少（P〈0.05）。病理学支持Wnt处理组显示了类似HF的小鼠肝细胞发生EMT的形态学改变。结论研究表明Wnt信号通路参与了小鼠HF的过程,其机制可能是在实验性小鼠肝上皮细胞中通过下调内源的某些自分泌信号抑制因子,而诱导细胞启动EMT程序,从而导致HF。     

调节DKK-1影响胰腺癌Wnt活性

目的：研究胰腺癌细胞中Wnt通路的活性变化,观察Wnt通路拮抗剂DKK-1的表达及其在胰腺癌中可能的发生机制,探讨DKK-1对Wnt通路活性的调节作用.方法：通过luciferase活性检测观察Wnt活性在胰腺癌细胞的变化,通过Real-timePCR技术检测Wnt拮抗剂DKK-1的mRNA的表达.通过MSP分析以及5-氮杂-脱氧胞苷酸处理分析DKK-1在胰腺癌细胞中的甲基化情况.应用基因重组技术调节DKK-1在不同胰腺癌细胞中的表达,观察Wnt活性的变化,分析DKK-1的表达变化能否在胰腺癌中调节Wnt通路.结果：Wnt通路在不同的胰腺癌细胞中表达程度不同,多数胰腺癌表现为Wnt通路的异常激活.DKK-1在胰腺癌细胞中表达较低,MSP分析发现DKK-1在部分胰腺癌细胞中表达为甲基化,5-氮杂-脱氧胞苷酸处理后能够显著提高DKK-1表达.调节DKK-1在不同细胞中的表达影响Wnt通路活性的变化.结论：胰腺癌细胞中存在Wnt通路的异常激活,胰腺癌中Wnt拮抗剂DKK-1的甲基化是引起胰腺癌Wnt活性变化的原因之一.     

Wnt信号转导通路与细胞凋亡

细胞信号转导是各类信号通过细胞膜或细胞内信使分子引起基因表达或物质代谢改变的过程。因此,细胞信号转导过程发生障碍或异常,必然会导致细胞生长、分化、代谢及生物学行为异常,从而引起各种疾病甚至肿瘤。Wnt信号转导通路是一个由多种分子参与、相互影响、相互制约和协同作用的复杂体系;是胚胎发育、调控细胞生长增殖的关键途径。由于基因突变或稳定性增加引起该途径异常激活可以启动c-myc、cyclin、MMP-7、Survivin等下游靶基因表达异常,导致细胞增殖,抑制细胞凋亡,肿瘤形成等。Wnt信号通路作为细胞信号转导系统之一,参与肿瘤发生的机制涉及信号转导、细胞周期、细胞增殖、迁移和分化、细胞凋亡,介导细胞的黏附等多方面。     

Wnt信号通路调控肠癌细胞GRP78表达与细胞膜转位

 目的 本研究旨在探讨Wnt/β catenin信号通路和葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78,GRP78)两者在肠癌细胞中的调控关系。方法 本研究采用氯化锂(LiCl)处理肠癌HT 29和DLD1细胞,激活其Wnt/β catenin信号通路。通过Western blot和荧光定量PCR,检测Wnt信号活化对GRP78表达的影响;通过对细胞组分的分离和免疫荧光染色技术分析Wnt信号活化对GRP78细胞膜转运的影响。结果 LiCl处理能够显著激活HT 29和DLD1细胞中的Wnt/β catenin信号通路,GRP78蛋白在HT 29细胞膜表面呈独特的“簇状”分布,LiCl处理明显提高了细胞中GRP78的转录和翻译水平,且GRP78在细胞表面的分布水平也有明显增加。结论 肠癌细胞中GRP78的表达和细胞膜转位受Wnt/β catenin信号通路活性的调控。     

卵巢癌组织中Wnt信号通路活性检测及肿瘤恶性生物学行为的评估

目的:研究卵巢癌组织中Wnt信号通路活性及其与及肿瘤恶性生物学行为的关系.方法:将2012年3月～2014年5月我院收治的卵巢癌和卵巢良性病变患者纳入研究,收集卵巢癌组织和卵巢良性病变组织,分别采用荧光定量PCR和免疫印迹法检测Wnt、β-catenin、巨噬细胞移动抑制因子(MIF)、缺氧诱导因子-1(HIF-1)、血管内皮生长因子(VEGF)、β-N-乙酰葡萄糖胺基转移酶(OGT)、CD44v、整合素β1(IGTβ1)的mRNA含量和蛋白含量.结果:(1)Wnt信号通路:卵巢癌组织中Wnt、β-catenin的mRNA和蛋白含量均高于卵巢良性病变组织;(2)血管新生相关细胞因子:卵巢癌组织中MIF、HIF-1、VEGF的mRNA和蛋白含量均高于卵巢良性病变组织;(3)细胞黏附和侵袭相关分子:卵巢癌组织中OGT、CD44v、IGTβ1的mRNA和蛋白含量均高于卵巢良性病变组织;(4)MIF、HIF-1、VEGF、OGT、CD44v、IGTβ1的蛋白含量与Wnt、β-catenin呈正相关.结论:卵巢癌组织中Wnt信号通路的活性增强、血管新生相关细胞因子和细胞黏附和侵袭相关分子含量增多;Wnt信号通路可能参与肿瘤恶性生物学行为的调节.