参附对大鼠肾缺血再灌注损伤NF-κB、细胞黏附分子-1、TNF-α表达的影响

目的:观察参附注射液(shenfu injection,SF)对大鼠肾缺血再灌注损伤细胞黏附分子-1(ICAM-1)、NF-κB、TNF-α表达的影响。方法:采用切除右肾,无创动脉夹夹闭左肾动脉45 min,再灌注2 h制作在体肾缺血再灌注损伤模型。36只SD大鼠随机分为缺血再灌注组、假手术对照组、参附预处理组(10 mL/kg),每组12只。免疫组化法检测肾组织中NF-κB、ICAM-1蛋白含量,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清、肾组织中TNF-α的表达。结果:缺血再灌注组NF-κB、ICAM-1表达和TNF-α含量明显高于假手术对照组(P<0.01)。与缺血再灌注组相比,参附预处理组NF-κB、ICAM-1表达和TNF-α含量明显降低(P<0.01)。结论:参附通过抑制NF-κB的表达,从而下调其下游的TNF-α、ICAM-1的表达,发挥其肾脏保护作用。     

地塞米松与参附对大鼠皮瓣缺血再灌注损伤后肿瘤坏死因子α的调节作用

目的探讨地塞米松与参附单独和联合用药对皮瓣缺血再灌注损伤的保护作用和机制。方法40只月龄相当的健康大鼠随机分为A、B、C、D四组,制作腹部岛状皮瓣,分别于阻断血流前30min皮瓣蒂部动脉注射0．9％NaCl注射液、地塞米松1ml／kg、参附注射液10ml／kg、联合注射地塞米松1ml／kg加参附注射液10ml／kg。四组动物均在蒂部血管阻断前1h及再灌注后1h,6h、12h、24h分别从蒂部静脉采集血样,测定血浆肿瘤坏死因子α（TNF—α）含量。结果各治疗组术后各时段TNFα浓度明显低于空白组（P〈0．01）,D组与B、C组也有明显差异（P〈0．01）。结论早期使用地塞米松、参附注射液能降低皮瓣再灌注损伤后血TNF-α浓度,对皮瓣具有保护作用。联合使用效果更佳。     

参附注射液对大鼠移植肝脏缺血-再灌注损伤的保护作用

目的 研究参附注射液对大鼠移植肝脏缺血-再灌注损伤的保护作用及其机制.方法 将雄性SD大鼠分为参附组、对照组和肝脏缺血-再灌注损伤模型组.参附组在获取供肝前经腰静脉灌注参附注射液(2mL/100 g),对照组注入等量0.9%氯化钠注射液,模型组不予处理.光镜观察术后180 min肝脏病理学变化.分别于肝移植完成后0,60,180 min测定大鼠血清丙氨酸氨基转移酶、天门冬酸氨基转移酶和肿瘤坏死因子-α水平.结果 再灌注180 min后,参附组病理损害程度较对照组和模型组轻;再灌注60 min和180 min后,参附组丙氨酸氨基转移酶、天门冬酸氨基转移酶和肿瘤坏死因子-α因子水平明显低于对照组和模型组(P<0.05).结论 参附注射液通过降低炎性因子肿瘤坏死因子-α表达水平,对大鼠移植肝脏缺血-再灌注损伤有明显保护作用.     

参附注射液对大鼠肾缺血再灌注损伤的防治作用

目的:观察参附注射液(shenfuinjection,SF)对肾缺血再灌注损伤大鼠P38丝裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达的影响,并探讨其肾脏保护作用的可能机理。方法:动物随机分为假手术对照组、缺血再灌注组、参附预处理组3组。免疫组化法检测肾组织P38MAPK、ICAM-1蛋白含量,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测肾组织和血浆TNF-α的表达。结果:缺血再灌注组P38MAPK、ICAM-1表达和TNF-α含量明显高于假手术对照组(P<0.01)。与缺血再灌注组相比,参附组P38MAPK、ICAM-1表达和TNF-α含量明显降低(P<0.01)。结论:SF可能通过抑制P38MAPK的表达,从而下调TNF-α、ICAM-1的表达,发挥其肾脏保护作用。     

壳寡糖预处理对大鼠肠缺血再灌注损伤回肠NF-κB表达的影响

目的:研究壳寡糖预处理对大鼠肠缺血再灌注损伤(I/R)回肠核转录因子κB(NF-κB)表达的影响。方法:某院于2015年2月~2015年7月间将实验室饲养的40只健康雄性SD大鼠随机分为I/R组、壳寡糖预处理组两组,每组各20只。I/R组术前60min生理盐水灌胃,并通过手术建立肠I/R模型;壳寡糖预处理组在肠I/R模型建立前5d按1500mg/kg给予壳寡糖灌胃预处理,连续5d,并于建模前30min再灌胃1次,建立I/R模型。灌注处死大鼠后通过病理组织切片观察和免疫组化分析,观察两组肠黏膜损伤程度和NF-κB检测表达。结果:壳寡糖预处理肠黏膜损伤Chiu(2.64±0.11)分、NF-κB蛋白表达(0.17±0.01)、NF-κB mRNA(0.57±0.05)较I/R组(4.18±0.14)分、(0.23±0.03)、(0.70±0.05)均较低,相较差异显著(P0.05)。结论:壳寡糖能较好的抑制NF-κB表达,对减轻回肠缺血再灌注黏膜损伤效果显著。     

参附注射液对大鼠肝缺血再灌注损伤时ATP酶的影响

目的:研究参附注射液对肝缺血再灌注损伤大鼠的保护作用及可能机制。方法:将36只大鼠随机分为参附注射液(SF)组与生理盐水对照(NS)组。肝脏缺血15min,分别于再灌注后1、3、24h取肝组织测定Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶水平,并行酶组织化学染色,观察Ca2+-ATP酶的活性变化。结果:再灌注1、3h后,SF组肝组织中Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶水平显著高于NS组;但在24h时,2组数据无显著性差异(P>0.05)。结论:参附注射液可以通过保护ATP酶发挥对大鼠肝缺血再灌注损伤早期保护作用。     

氯胺酮对大鼠缺血/再灌注心肌NF-κB和肿瘤坏死因子的影响

为观察氯胺酮对缺血 /再灌注心肌 NF-κB和血清肿瘤坏死因子 (TNF-α)的影响 ,将健康 SD大鼠 2 4只随机分为心包打开假手术组 (A组 )、缺血 /再灌注对照 (I/ R)组 (B组 )、5 mg· kg- 1氯胺酮 (KTM) + I/ R组 (C组 )和 10 mg·kg- 1 KTM+ I/ R组 (D组 )。在缺血 3 0 min,再灌 12 0 min后 ,取心肌组织用 Western-blot法分别检测其中胞核 NF-κB含量。在再灌 3 0 min和 12 0 min两个时间点分别取颈静脉血清做 TNF-α的 ELISA检测。结果显示 ,B、C、D组胞核 NF-κB含量均高于 A组 ,升高程度呈下降趋势 (P<0 .0 1) ,且两个时间点血清 TNF-α浓度也高于 A组 ,升高程度也呈下降趋势 (P<0 .0 1或 P<0 .0 5 )     

核转录因子κB与脑缺血再灌注损伤

脑缺血再灌注损伤(CIRI)是由兴奋性(氨基酸)中毒、氧化应激、细胞内钙超载、炎症反应和细胞凋亡(AP)等多种因素参与的病理过程[1].以往对CIRI机制的研究主要集中在氧化应激、兴奋性(氨基酸)中毒、细胞内钙超载等方面,近年来随着分子生物学的发展,发现CIRI与炎症反应和细胞凋亡也有着密切的关系.     

参附注射液对大鼠小肠缺血-再灌注后肾损伤的影响

目的 观察参附注射液(SF)对大鼠小肠缺血-再灌注后肾结构、功能和肾组织中bcl-2、bax表达水平的影响. 方法将36只SD大鼠随机平分为假手术组 (C组),缺血-再灌注＋0.9%氯化钠溶液组(IR＋NS组),缺血-再灌注＋参附注射液预处理组(IR＋SF组),各12只. IR＋NS组和IR＋SF组夹闭大鼠肠系膜上动脉60 min后松开建立小肠缺血-再灌注模型,C组穿线但不结扎. C组和IR＋NS组分别于阻断前30 min用微量泵经股静脉恒速泵入0.9%氯化钠溶液10 mL&#8226;kg^-1,IR＋SF组同法泵入参附注射液10 mL&#8226;kg^-1. 光镜下观察肾组织结构,i-STAT自动分析仪检测血清尿素(Urea)及电解质含量,免疫组化方法检测肾组织中bcl-2、bax蛋白的表达,TUNEL法检测肾脏细胞的凋亡水平. 结果 光镜下可见IR＋NS组肾组织结构损伤较IR＋SF组严重. IR＋NS组血清Urea和 钾离子(K＋)水平分别为(15.88±1.38 )和(6.88±0.43)mmol&#8226;L^-1, C组分别为(5.82±0.39)和(4.28±0.24 ) mmol&#8226;L^-1,IR＋SF组分别为(8.03±0.77)和(5.03±0.31 )mmol&#8226;L^-1,IR＋NS组和IR＋SF组与C组比较,差异有统计学意义(P＜0.01),IR＋SF组较IR＋NS组显著降低(P＜0.01). IR＋NS组bcl-2和bax阳性细胞率分别为(0.242 5±0.036 5)%和(0.281 7±0.029 2)%,显著高于C组[分别为(0.013 7±0.008 6)%和(0.011 7± 0.009 4)%](P＜0.01), IR＋SF组分别为(0.176 3±0.030 2)%和(0.196 7±0.024 6)%,较IR＋NS组显著降低(P＜0.01). C组凋亡指数(apoptotic index,AI)为(0.014 2±0.009 0)%,IR＋NS组为(0.179 2±0.028 4)%,IR＋SF组为(0.124 2±0.026 4)%,IR＋NS组和IR＋SF组与C组比较,差异有统计学意义(P＜0.01),IR＋SF组较IR＋NS组显著降低(P＜0.01). 结论 参附注射液对小肠缺血-再灌注造成的肾损伤组织具有保护作用.     

核转录因子-κB对鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的影响及机制

目的测定沙土鼠前脑缺血再灌注后核转录因子-κB(NF-κB)的活化水平、凋亡相关基因Bcl-2、p53的表达、以及神经细胞凋亡水平,探讨N F-κB对神经细胞凋亡的影响及可能机制。方法采用夹闭双侧颈总动脉60m in、再开放24h的方法,建立沙土鼠前脑缺血再灌注模型。以平行视交叉冠状平面为模板、取前脑切片。应用免疫组织化学方法,测定缺血再灌注组、缺血组及正常对照组NF-κB、Bcl-2、p53表达阳性细胞染色灰度值;应用原位缺口末端标记法(TUN EL),观察各组切片中神经细胞凋亡数。结果缺血再灌注后,N F-κB的活化水平明显增强,与缺血组及对照组比较差异显著;N F-κB活化水平与Bcl-2表达呈显著负相关,与p53表达及神经细胞凋亡数目呈显著正相关。结论缺血再灌注后24h,N F-κB的活化促进了神经细胞凋亡的发生;其可能的机制在于NF-κB通过调控凋亡相关基因,进而促进缺血再灌注后神经细胞的凋亡。     

SN50对缺血再灌注损伤中TNF-α影响的实验研究

目的研究核转录因子-κB（nuclear factor-kappaB,NF-κB）抑制剂SN50对氧糖剥夺条件下培养的SD大鼠巨噬细胞炎性因子肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）表达的影响。方法用MTT法检测SN50对细胞增殖活性的影响,以ELISA法检测氧糖剥夺条件下SN50对TNF-α表达影响。结果经SN50处理的氧糖剥夺条件下的巨噬细胞成活率较未经处理的明显上升（P〈0.05或P〈0.01）,TNF-α表达的上调幅度亦明显变小（P〈0.05或P〈0.01）。结论 SN50主要是通过抑制NF-κB核的移位干扰了TNF-α的基因转录而导致其合成的蛋白量降低。     

参附注射液后处理对肺缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨参附注射液(SF)后处理对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法采用大鼠肺原位缺血再灌注损伤模型进行研究。40只清洁级SD大鼠随机分为4组:手术对照组(S组),缺血再灌注组(I/R组),参附注射液后处理组(SF/IPO组),缺血后处理组(IPO组)。观察肺组织病理形态变化,测定肺组织湿/干重比(W/D);检测肺组织匀浆中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果与S组比较,I/R组光镜下见肺组织病变明显加重,肺组织W/D明显增加,肺组织中SOD活力明显降低,MDA的浓度明显增高(P<0.01);与I/R组比较,SF/IPO组及IPO组肺组织病变减轻,肺组织W/D明显降低,肺组织中SOD活力明显升高,MDA的浓度明显降低(P<0.01);与IPO组比较,以SF/IPO组效果更为明显(P<0.01)。结论参附注射液后处理对大鼠肺原位缺血再灌注损伤有保护作用;与经典的缺血后处理比较,是一种更有效的更适合临床应用的减轻再灌注损伤方法。     

肠缺血再灌注损伤与NF-кB研究进展

核因子kappa B(NF-κB)是一种重要的转录因子,NF-κB能够调节诸多基因的表达,参与炎症、免疫应答、细胞增殖、细胞凋亡等生物过程。肠道的缺血再灌注损伤是一种常见的病理生理过程,研究表明许多细胞因子参与了这一过程,如TNF-α、IL-1、IL-6、ICAM-1等,而NF-кB可以调控这些因子的表达。现就NF-κB和肠缺血再灌注损伤之间的联系和作用作一综述。     

异丙酚对兔缺血-再灌注心肌白介素-8和心肌核转录因子-κB及细胞凋亡的影响

目的观察异丙酚对缺血-再灌注心肌白介素-8（IL-8）和核转录因子-κB（NF-κB）的影响,探讨异丙酚减轻心肌缺血-再灌注损伤的机制。方法雄性新西兰大耳白兔24只,随机分为假手术组（Sham组）、缺血-再灌注组（I-R组）和异丙酚组（P组）,每组8只。实验结束取缺血区心肌组织,免疫组织化学方法检测NF-κB、IL-8的表达;流式细胞术检测心肌细胞凋亡。结果I-R组、P组NF-κB、IL-8表达及凋亡细胞数均高于Sham组（P〈0.05）,P组各指标较I-R组降低（P〈0.05）。结论抑制缺血-再灌注心肌NF-κB激活,进而降低IL-8表达,是异丙酚减少缺血-再灌注心肌细胞凋亡的机制之一。     

异丙酚对大鼠心肌缺血/再灌注损伤时核因子-κB信号途径的影响

目的观察异丙酚对大鼠在体心肌缺血/再灌注时核因子-κB(NF-κB)信号途径的影响,以探讨异丙酚的心肌保护作用机制。方法阻断大鼠左冠状动脉前降支30min,再灌注2h引起心肌缺血/再灌注损伤。60只SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、缺血/再灌注组(I/R)和异丙酚3、6、12mg·kg-1·h-1组。分别于缺血前、缺血30min末、再灌注2h末记录心率、平均动脉压,并计算心率-血压指数。ELISA及放射免疫法分别测定血清、心肌中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)的含量。分别用原位杂交法(ISH)和半定量RT-PCR法检测心肌组织中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、粘附分子1(ICAM-1)的mRNA的表达。免疫组化染色分析心肌组织中NF-κB的核移位,Western blot检测心肌组织NF-κB的表达量。结果缺血/再灌注后各组大鼠的平均动脉压、血压-心率指数均呈进行性下降(与Sham组相比P<0.05)。异丙酚12mg·kg-1·h-1组在缺血/再灌注后的平均动脉压和血压-心率指数明显高于I/R组(P<0.05)。与Sham组相比,I/R组NF-κB活化,明显从细胞质移位于细胞核,表达量也增加(P<0.05);血清、心肌中TNF-α、IL-1β含量明显升高(P<0.01),心肌中iNOSmR-NA、ICAM-1 mRNA表达增强(P<0.01)。而异丙酚6、12mg·kg-1·h-1组,NF-κB从细胞质向细胞核的移位被明显限制,NF-κB的表达量也明显低于I/R组(均P<0.05);血清、心肌中TNF-α、IL-1β含量明显较I/R组降低(P<0.05),心肌中iNOS mRNA、ICAM-1 mRNA表达减弱(与I/R组相比,P<0.05,P<0.01)。结论异丙酚能减轻缺血/再灌注损伤,同时明显抑制心肌缺血/再灌注时NF-κB的活化,阻断NF-κB相关信号通路的传导,下调TNF-α、IL-1β、ICAM-1和iNOS等炎症相关因子的表达。     

参脉注射液对下肢缺血-再灌注损伤的保护作用

目的 探讨参脉注射液(SM)对下肢缺血—再灌注(I-R)损伤的保护作用.方法 60例成人骨科下肢手术患者随机分为参脉组(SM组)和对照组(C组).SM组在止血带充气前静脉给予SM 60 ml;C组用等量生理盐水.测定下肢缺血前(To)、止血带充气30 min(T1)、放气后3min(T2)、30 min(T3)及术后24 h(T4)血K+、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD);记录心电图.结果 与T0比较,两组止血带放气之后平均动脉压(MAP)均降低,SM组T2时高于C组(P＜0.05).SM组T2、T3时MDA均低于C组、而SOD均高于C组(P＜0.05).SM组止血带放气后心律失常发生率3.3％(1/30),明显低于C组的10％(3/30)(P＜0.01).结论 下肢止血带充气前静脉给予SM 60 ml可减轻下肢I-R损伤.     

参附注射液对心血管及缺血再灌注心肌保护作用的研究进展

参附注射液是根据我国医学经典方剂参附汤制成,主要含人参皂苷、乌头碱,每毫升注射液相当于生药红参0.1 g,附片0.2 g,是红参与黑附片提取物,此药已在医院临床开展了应用及研究。本文概述该药对心血管及体外循环心脏手术中对心肌保护的作用。1参附注射液药物作用机制的研究现代有关药理学研究发现参附注射对大鼠心肌细胞膜ATP酶活性有抑制作用,提示参附注射液可能具有正性肌力作用,参附注射液中含有的人参皂苷作为一种特殊的强心苷类药物,具有明显增强心肌收缩力,增加输出量,扩张冠状动脉,降低心肌耗氧量,扩张肺动脉,促进血氧的输送及组织…     

参附注射液对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠中枢神经系统病理学的影响

目的:研究参附注射液(SFI)对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠中枢神经系统病理学的影响。方法:80只雄性大鼠均分为4组,即空白对照、假手术、模型和SFI组。大鼠麻醉5min后经尾iv参附注射液10mg·kg-1,复制右侧大脑中动脉缺血2h再灌注24h模型。比较各组血脑屏障和大脑皮质神经元的病理改变以及相应功能的变化。结果:电镜下模型组大脑皮质毛细血管周围水肿及管腔受压严重,神经元肿大,细胞膜连续性中断,胞浆肿胀、空泡化,细胞核肿胀、破裂,核基质密度增加,异染色质增加。SFI组大脑皮质毛细血管周围水肿和毛细血管管腔受压程度明显轻于模型组,神经元肿胀,细胞膜边界欠清楚,胞浆肿胀,细胞核肿胀,核膜尚完整,核基质密度轻度增加,异染色质轻度增加。与模型组比较,SFI组缺血2h神经功能缺损评分无显著性改变;SFI组再灌注24h后神经功能缺损评分显著降低(P<0.01)。结论:SFI可减轻局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠中枢神经系统病理学改变程度,进而减轻神经功能受损伤的程度。     

褪黑素对缺血再灌注后大鼠肝脏NF-κB表达及肝细胞凋亡的影响

目的探讨裉黑素对缺血再灌注后大鼠肝脏核因子κB（NF-κB）表达及肝细胞凋亡的影响。方法采用大鼠部分肝缺血模型,将健康雄性SD大鼠78只随机分为3组：（1）假手术组（S,n=6）,动物只接受麻醉、肝门解剖和溶媒腹腔注射;（2）缺血再灌注组（I／R,n=36）,肝脏缺血模型建立70min后对缺血肝叶进行再灌注,分别于再灌注后0、1、3、6、9、12h收集缺血肝叶组织标本（每个时点n=6）;（3）褪黑素组（Mel,n=36）,分别于建模前15min和即将再灌注时腹腔注射褪黑素溶液10mg／kg,收集标本时点及各时点动物数同I／R组。分别检测标本中NF-κB表达和肝细胞凋亡。结果S组仅有极少量的肝细胞凋亡,无NF-κB阳性表达;I／R组和mel组经历单纯肝脏缺血后NF-κB的表达及肝细胞凋亡率（HAI）与S组无差异（P〉0．05）;而再灌注后两组均有不同程度的NF-κB表达和HAI的增加,Mel组于再灌注后各相应时点NF-κB的阳性表达率和HAI均显著低于I／R组（P〈0．01）。结论褪黑素可以有效下调肝脏I／R过程中NF-κB的表达,抑制肝细胞的凋亡,发挥其对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。     

糖尿病大鼠缺血再灌注脑组织核转录因子-κB的表达及意义

目的观察糖尿病大鼠缺血再灌注脑组织NF-κBp65的表达及意义。方法89只Wistar大鼠随机分为正常对照组、假手术组、正常血糖缺血再灌注组(nIR)和糖尿病缺血再灌注组(dIR),观察时间点为再灌注0小时、6小时、12小时、24小时,每个时间点各5只。用小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射诱发形成糖尿病大鼠模型,采用线拴法复制大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,应用免疫组化的方法测定NF-κBp65的表达。结果dIR组和nIR组NF-κBp65主要表达于缺血周边区,dIR组再灌注0小时、6小时、12小时、24小时NF-κBp65阳性细胞百分率分别为24.7±4.2、53.4±8.0、72.4±7.2、60.7±5.0,与nIR组同一时间点比较,差异有显著性(P<0.05)。结论糖尿病大鼠缺血再灌注脑组织NF-κBp65表达增加和表达时间提前可能是糖尿病加重脑缺血再灌注损伤的机制之一。