SIV感染CEM×174细胞后CD28家族免疫调控分子mRNA的动态变化

目的观察猴免疫缺陷病毒（SIV）感染CEM×174细胞后CD28家族免疫调控分子CD28、BTLA、ICOS、PD-1 mRNA表达水平的动态变化。方法以SIVmac251感染接种CEM×174细胞,收集感染后12,24,48,72,96,120,144,168,216h共8个时间点及正常未感染细胞,提取细胞RNA,以染料法逆转录荧光定量PCR法检测SIV、CD28、ICOS、PD-1、BTLA mRNA的表达。结果SIV mRNA在48h时表达即显著升高（P〈0．05）,随着SIV mRNA量的逐渐上升,ICOS在48h时开始显著升高（P〈0．05）,而CD28、PD-1 mRNA在120h时才出现表达显著增加（P〈0．05）;BTLA mRNA则呈现下降趋势,并在168h开始出现显著下调（P〈0．05）。结论除BTLA以外,所检测SIV感染后细胞中促进免疫激活和抑制免疫的免疫调节因子（ICOS、PD-1、CD28）表达均显著升高,提示AIDS中存在免疫紊乱。     

B7/CD28家族共刺激分子在川崎病发病机制中的作用

目的观察在川崎病(KD)患儿外周血单个核细胞(PBMC)B7/CD28家族分子:CTLA-4、BTLA、ICOS、CD80、CD86表达变化,旨在探讨B7/CD28家族分子在KD发病机制中的作用。方法应用荧光定量PCR检测48例KD患儿和其中30例用丙种球蛋白(IVIG)治疗后患儿的CTLA-4、BTLA、ICOS mRNA表达的变化,部分患儿应用流式细胞术测定CD80、CD86表达状况。本研究以25例同龄健康儿童作为对照组。结果(1)KD组与对照组相比:正性调节因子ICOS mRNA的表达显著升高(P<0.01);CD80、CD86表达升高(P<0.01);负性调节因子CT-LA-4、BTLA mRNA的表达则显著降低(P<0.05,P<0.01)。其中冠状动脉损害组较无冠状动脉损害组ICOS表达程度更高(P<0.01)。(2)KD组中IVIG治疗前后进行配对比较:IVIG治疗后CTLA-4、BTLA mRNA表达显著回升(P<0.05),ICOS mRNA的表达则显著下降(P<0.05)。IVIG治疗不敏感组与敏感组比较:ICOS表达前者显著升高(P<0.05),CTLA-4、BTLA表达显著降低(P<0...     

SIV感染CEM×174细胞后CTLA-4、FOXP3、ID OmRNA的变化

目的观察SIV感染CEM×174细胞后CTLA-4、FOXP3、IDOmRNA表达水平的动态变化。方法以SIVmac251感染接种CEM×174细胞,收集感染后12h-216h共8个时间点及正常未感染细胞,提取细胞RNA,进行RNA逆转录荧光定量PCR检测。结果随着SIVmRNA的升高,CTLA-4、FOXP3、IDO三者mRNA均显著升高;SIVmRNA、CTLA-4mRNA到观察结束时（216h）达到最高值,而FOXP3、IDO则是在168h时mRNA达到最高值,在216h时有所回落。结论被SIV感染的细胞中部分促进免疫激活和抑制免疫的免疫调节因子表达均显著升高,提示免疫紊乱是AIDS的一个重要发病机制。     

猴艾滋病模型CD28家族mRNA动态变化及中药干预作用

目的观察猴艾滋病毒(SIV)感染猴模型外周血CD28家族免疫共刺激分子mRNA动态变化及中药复方艾可清的干预作用。方法 SIVmac251感染12只恒河猴,分别于感染前、感染后8周每周、给药前(SIV感染第10周)、给药后每4周时间点采集外周静脉血,分离PBMC,以定量PCR检测CD28、ICOS、PD-1、CTLA-4及HLA-DRmRNA。结果所观察的4种免疫共刺激分子及免疫活化标志物HLA-DR mRNA量出现了不同程的升高,其中HLA-DRmRNA高峰出现在SIV感染后第2周,而4种免疫共刺激分子mRNA峰值均出现在SIV感染第5周之后。艾可清使ICOS、CD28、PD-1及HLA-DRmRNA量出现不同程度的降低,而对CTLA-4mRNA量无显著影响。结论 SIV感染猴外周血PBMC负性和正性CD28家族免疫共刺激分子mRNA均出现不同程度的升高;艾可清可能通过同时降低正性及负性免疫共刺激分子mRNA表达而减轻艾滋病免疫活化。     

非小细胞肺癌患者共刺激分子 mRNA 的表达及意义

目的：探讨非小细胞肺癌（NSCLC）患者共刺激分子CD28、细胞毒T淋巴细胞相关抗原4（CTLA-4）、程序性死亡分子-1（PD-1）、程序性死亡配体-1（PD-L1） mRNA的表达及意义。方法采用Taqman 探针实时荧光定量PCR方法检测50例NSCLC患者、30例肺良性疾病患者及50例健康人外周血共刺激分子CD28、CTLA-4、PD-1、PD-L1 mRNA的表达水平。结果与健康人相比,NSCLC及肺良性疾病患者CD28 mRNA表达显著降低（P＜0.01）,PD-1 mRNA表达显著增加（P＜0.01）,CTLA-4 mRNA及PD-L1 mRNA表达差异无统计学意义（P＞0.05）,与肺良性疾病患者相比,NSCLC患者4项指标差异无统计学意义（P＞0.05）;Ⅲ＋Ⅳ期NSCLC患者CD28 mRNA表达低于Ⅰ＋Ⅱ期患者（ P＜0.05）,有淋巴结转移的NSCLC患者CD28 mRNA表达低于无淋巴结转移的患者,PD-1 mRNA表达高于无淋巴结转移的患者（ P＜0.05）。结论 NSCLC患者B7-CD28家族分子表达异常是其免疫功能紊乱和疾病恶化进展的重要原因。     

登革病毒感染对人血管内皮细胞血管细胞黏附分子-1表达的影响

目的:研究登革病毒2型(DV2)体外感染对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表达血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)的影响.方法:原代分离、纯化、培养人HUVEC细胞,用生长良好的2～3代细胞进行实验.分别用病毒感染复数(MOI)为1、2、4、8、16的DV2病毒液感染HUVEC,阴性对照组直接以RPMI 1640培养,应用细胞计数试剂-8(CCK-8)法测定DV2感染前和感染后6、12、24、48、72和96 h的细胞活性.另以MOI=2的DV2病毒液感染细胞,阴性对照组直接以RPMI 1640培养,于感染后6、12、24、48、72、96 h分别收集病毒感染的HUVEC,采用流式细胞术测定细胞表面VCAM-1表达水平;采用RT-PCR法检测细胞中VCAM-1 mRNA转录水平.结果:当病毒MOI=2时对细胞活力的影响与对照组相比差异无统计学意义.DV2感染可以促进HUVECs中VCAM-1 mRNA的转录,96 h内均有增加,与对照组相比有显著性差异(P<0.05).其中,正常状态下HUVEC基本无VCAM-1 mRNA转录,感染12 h达到最高峰,12～48 h表达量显著高于其他时间(P<0.05).DV2 感染HUVEC后, VCAM-1蛋白表达在12～72 h显著升高(P<0.05),与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05).结论:DV2感染上调HUVEC的VCAM-1 mRNA转录和蛋白表达.这可能是DV2感染诱发患者血管通透性升高和血浆渗漏的重要分子机制之一.     

PD-1在骨髓增生异常综合征中的表达及意义

目的检测负性共刺激分子PD-1在骨髓增生异常综合征(MDS)患者中的表达,分析其表达水平与相关临床指标之间的关系,探讨其在MDS发病过程中所起的作用。方法收集44例MDS患者外周血标本(MDS组)和25例健康者外周血作阴性对照(NC组),采用流式细胞术检测PD-1在T细胞上的表达,RT-PCR检测T细胞亚群中PD-1mRNA的表达,同时ELISA法检测MDS患者血清中可溶性PD-1的水平。收集MDS患者相关临床指标,线性相关分析法分析PD-1mRNA水平与各项临床指标之间的关系。结果MDS组患者中PD-1mRNA表达阳性率为(11.31±0.18)%,而NC组阳性率为(6.46±0.25)%,与NC组相比,MDS患者中CD3+、CD4+及CD8+T细胞上PD-1表达水平及PD-1mRNA水平显著升高。MDS组患者血清sPD-1水平较NC组明显升高。在MDS组患者中,CD3+、CD8+T细胞上PD-1的表达水平与LDH水平呈显著正相关,CD4+T细胞上的表达水平与CRP呈显著正相关。结论T细胞表面PD-1分子的高表达可能在MDS发病过程中起到一定作用。 更多还原     

JQ1对系统性红斑狼疮患者CD4+T细胞中自身免疫相关基因表达的作用

目的：探讨溴结构域(bromodomain and extra-terminal,BET)蛋白抑制剂JQ1对系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)外周血CD4+T细胞中自身免疫相关基因表达的作用。方法：利用磁珠分选获得SLE患者CD4+T细 胞,采用流式细胞检测CD4+T细胞纯度。用JQ1(100 nm/L)处理CD4+T细胞6,24,48 h后收集细胞。采用实时荧光定 量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测不同辅助性T细胞亚类特异性基因的mRNA表达。采用ELISA法检测细胞培 养上清中细胞因子的蛋白水平。结果：磁珠分选所得CD4+T细胞百分比为97.2%。与对照组相比,JQ1处理组IFNG, IL-17F,IL-21,CXCR5和FOXP3 mRNA表达水平在6,24,48 h均显著降低(P<0.05),IL-17A mRNA表达在6,24 h显著 下降(P<0.01),IL-4 mRNA表达在24,48 h显著升高(P<0.01),TGF-β1 mRNA表达在6,48 h显著升高(P<0.05)。JQ1处理 48 h细胞培养上清中IFN-γ,IL-21和IL-17蛋白水平明显下降(P<0.05),IL-4和TGF-β蛋白水平明显升高(P<0.05)。结论： BET蛋白抑制剂JQ1可纠正SLE患者CD4+T细胞中的免疫调节失衡,促进免疫稳态恢复。     

转化生长因子β1诱导A549细胞上皮-间充质转化的时间相关性

目的:探讨转化生长因子β1(TGF-β1)诱导A549细胞发生上皮-间充质转化(EMT)的时间相关性。方法:将体外培养的A549细胞分为空白组(加入F-12培养基)、模型组(加入10ng/ml TGF-β1)后继续培养。采用MTT实验检测细胞的增殖能力,光学显微镜下观察细胞形态学改变,实时荧光定量PCR和Western blot法检测E-Cad、Vim、FN mRNA的蛋白表达水平。结果:模型组在48h、72h时与空白组比较,A549细胞显著增殖(均P<0.01)、细胞形态明显改变,72h时几乎所有细胞呈纺锤形;48h、72h时与空白组比较,模型组FN mRNA表达显著上调(P<0.05,P<0.01),E-Cad mRNA表达显著下调(P<0.01)。48h时与空白组比较,模型组FN蛋白表达上调(P<0.05),E-Cad蛋白表达显著下调(P<0.01)。在72h时与空白组比较,模型组FN、Vim蛋白表达明显上调(P<0.01),E-Cad mRNA表达显著下调(P<0.01)。结论:A549细胞发生EMT与TGF-β1刺激的时间长短有关。72h和48h为体外实验EMT发生的时间,72h为EMT的最佳时间点。     

NLRX1对低氧诱导的小胶质细胞极化的影响

背景 研究表明急进海拔4000 m以上高原低氧地区脑水肿发生率明显增加,小胶质细胞极化介导许多中枢神经系统炎性反应过程,NOD样受体家族X1(NOD-like receptor family X1,NLRX1)蛋白是一种炎症反应的负性调控因子;目前,低氧及NLRX1对小胶质细胞极化的调节作用尚不清楚.目的 分析低氧对小胶质细胞极化和NLRX1蛋白表达的影响,探讨NLRX1是否参与了小胶质细胞极化.方法 将小鼠小胶质细胞BV-2按处理条件分为3组:对照组(21％O2,5％CO2,37℃),实验组(1％O2,5％CO2,37℃处理6 h、12 h、24 h、48 h),M1型极化阳性对照组(LPS 1μg/mL处理24 h).干扰NLRX1基因的BV-2细胞分为3组:BV-2 sh-Control常氧组(21％O2,5％CO2,37℃),BV-2 sh-Control低氧组(1％O2,5％CO237℃处理6 h、24 h、48 h),BV-2 sh-NLRX1组(1％O2,5％CO237℃处理6 h、24 h、48 h).相差显微镜观察细胞形态变化;CCK-8测定细胞活力;流式细胞术检测小胶质细胞极化分型;RT-PCR分析TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10及TGF-β的mRNA水平;蛋白免疫印迹测定NLRX1蛋白水平.结果 低氧培养及LPS处理可见细胞突起变多变短,阿米巴样形态细胞增多;细胞活力在低氧2 h和6 h组增加,而在低氧12 h、24 h、48 h及LPS组降低(F=459.1,P<0.05);与对照组相比,低氧培养48 h后,CD11b++CD86+M1型小胶质细胞百分比下降,CD11b++CD86++CD206+M1和M2混合型细胞百分比升高,CD11b++CD206+M2型小胶质细胞比例均无明显变化;随低氧时间延长,促炎因子TNF-α、IL-6、IL-1β基因的mRNA水平逐渐降低(P<0.05)并在24 h达到最低,而抗炎因子IL-10基因的mRNA水平升高(F=11.38,P<0.05);NLRX1蛋白水平随低氧时间延长而升高;与sh-Control常氧组相比,sh-Control低氧组IL-1βmRNA水平下降(P<0.05),IL-10 mRNA水平低氧处理6 h和48 h均上升;与sh-Control低氧组相比,sh-NLRX1组低氧处理后IL-1βmRNA水平在24 h和48 h下降(P<0.05),IL-10 mRNA水平低氧处理后均下降(P<0.05).结论 低氧可上调NLRX1蛋白水平并减少小胶质细胞M1型极化,该过程可能通过NLRX1下调抗炎因子介导.     

基于NF-κB/Twist 1通路二甲双胍对GDM大鼠子代胎鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞EMT的作用机制

目的 探讨共表达PD-1/ICOS信号转换受体通过增强靶向CD19的嵌合抗原受体T细胞（CD19-CAR-T细胞）增殖能力提高其对弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）产生的抗肿瘤活性。方法 慢病毒感染法构建CD19-CAR-T细胞（bbz）以及共表达PD-1/ICOS信号转换受体的CD19-CAR-T细胞（PD-1/ICOS-bbz）;流式细胞术检测长期共孵育后T细胞CD69的表达;通过细胞计数检测CAR-T细胞的增殖情况;LDH法检测CAR-T细胞对靶细胞的细胞毒性;活体成像检测小鼠体内肿瘤细胞的生长情况;流式细胞术检测外周血中T细胞的比例。结果 成功构建bbz及PD-1/ICOS-bbz;长期共孵育后,PD-1/ICOS-bbz较bbz CD69表达水平更高,增殖能力及对靶细胞的细胞毒性均显著提高（P＜0.01）;PD-1/ICOS-bbz可以完全清除小鼠体内的淋巴瘤细胞,且PD-1/ICOS-bbz较bbz而言可以显著延长小鼠生存期（P＜0.01）,同时PD-1/ICOS-bbz较bbz具有更强的体内增殖能力(P＜0.05)。结论 PD-1/ICOS-bbz较传统的二代CAR-T细胞具有更强的抗肿瘤活性,有望成为一种潜在的弥漫大B细胞淋巴瘤的治疗方案。     

PD-1/ICOS信号转换受体通过增强CD19-CAR-T细胞增殖能力提高其对DLBCL的杀伤活性

目的 探讨共表达PD-1/ICOS信号转换受体通过增强靶向CD19的嵌合抗原受体T细胞（CD19-CAR-T细胞）增殖能力提高其对弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）产生的抗肿瘤活性。方法 慢病毒感染法构建CD19-CAR-T细胞（bbz）以及共表达PD-1/ICOS信号转换受体的CD19-CAR-T细胞（PD-1/ICOS-bbz）；流式细胞术检测长期共孵育后T细胞CD69的表达；通过细胞计数检测CAR-T细胞的增殖情况;LDH法检测CAR-T细胞对靶细胞的细胞毒性；活体成像检测小鼠体内肿瘤细胞的生长情况；流式细胞术检测外周血中T细胞的比例。结果 成功构建bbz及PD-1/ICOS-bbz；长期共孵育后，PD-1/ICOS-bbz较bbz CD69表达水平更高，增殖能力及对靶细胞的细胞毒性均显著提高（P＜0.01）；PD-1/ICOS-bbz可以完全清除小鼠体内的淋巴瘤细胞，且PD-1/ICOS-bbz较bbz而言可以显著延长小鼠生存期（P＜0.01），同时PD-1/ICOS-bbz较bbz具有更强的体内增殖能力(P＜0.05)。结论 PD-1/ICOS-bbz较传统的二代CAR-T细胞具有更强的抗肿瘤活性，有望成为一种潜在的弥漫大B细胞淋巴瘤的治疗方案。     

PD-1、PD-L1、TIM-3在口腔鳞癌中的表达及临床意义

目的探讨程序性死亡分子-1(PD-1)及其配体(PD-L1)、T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3(TIM-3)在口腔鳞癌(OSCC)中的表达及临床意义。方法收集2016年1月至2017年10月郑州大学第一附属医院病理科存档的42例OSCC石蜡包埋组织作为观察组,另选取22例正常口腔黏膜组织作为对照组。采用免疫组织化学技术和实时荧光定量PCR技术检测两组中PD-1、PD-L1、TIM-3蛋白及mRNA的表达情况,分析各蛋白与其mRNA的相关性、各蛋白与OSCC患者临床病理特征的关系。结果观察组PD-1、PD-L1、TIM-3蛋白的阳性表达率分别为61.90%(26/42)、66.67%(28/42)、64.28%(27/42),均高于对照组的22.73%(5/22)、4.55%(1/22)、18.18%(4/22),差异有统计学意义(均P<0.05)。观察组PD-1、PD-L1、TIM-3 mRNA表达水平均高于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。PD-1 mRNA与TIM-3 mRNA呈正相关(r=0.455,P<0.05)。PD-1蛋白表达水平与性别、TNM分期有关(均P<0.05);PD-L1蛋白表达水平与肿瘤大小有关(P<0.05)。结论 PD-1、PD-L1、TIM-3可能共同参与了OSCC的免疫逃逸,为OSCC的免疫治疗提供新依据。     

护肝合剂对慢性乙型肝炎患者PBMC功能的影响

目的观察护肝合剂对慢性乙型肝炎患者肝功能、外周血单个核细胞(PBMC)功能的影响。方法治疗组50例,在一般治疗的基础上加用护肝合剂,对照组15例用甘草酸二胺氯化钠溶液、门冬氨酸鸟氨酸、灯盏花素等进行一般治疗。分离培养治疗前后外周血单核细胞,加入植物血凝素(PHA),培养48h后,1500r/min离心10min,收集上清液-20℃保存,统一检测IFN-γ,IL-10含量。采用流式细胞仪检测治疗前后外周血CD8 CD28 T细胞亚群。结果治疗组谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST),黄疸指数(TBIL)复常率均明显优于对照组(P<0.05,P<0.01,P<0.01)。治疗组治疗后IFN-γ显著升高(P<0.05),IL-10显著下降(P<0.05),对照组升高不显著(P>0.05)。CD8 CD28 T细胞亚群治疗组较对照组显著升高(P<0.05),且治疗组治疗前后亦显著升高(P<0.05)。结论护肝合剂能够改善肝功能,提高慢性乙型肝炎患者Th1细胞免疫。     

穿龙薯蓣皂苷元对DBA1/J小鼠CD4+CD25-T细胞的影响

目的 初步探讨穿龙薯蓣皂苷元对DBA1/J小鼠CD4+CD25-T细胞的影响.方法 采用MACS磁珠分选法分离DBA1/J小鼠脾CD4+CD25-T细胞,并鉴定纯度.穿龙薯蓣皂苷元作用CD4+CD25-T细胞后,采用ELISA方法检测各组培养上清中IL-10的浓度,Real-Time PCR方法检测Foxp3的水平,FCM检测Treg细胞的比率.结果 免疫磁珠术分选D B A1/J小鼠脾C D4+C D25-T细胞纯度达93.89％.给药作用48h后,与对照组相比,穿龙薯蓣皂苷元组上清中IL-10的浓度显著升高(P<0.05),Foxp3 mRNA水平明显上升(P<0.05),Treg细胞比率明显升高(P<0.05).结论 穿龙薯蓣皂苷元能明显提升DBA1/J小鼠脾脏CD4+CD25-T细胞上清中细胞因子IL-10浓度,Treg细胞Foxp3 mRNA水平及Treg细胞比率.     

Basigin/CD147参与马兜铃酸损伤人肾小管上皮细胞的体外实验

目的:探讨马兜铃酸(AA)对人肾小管上皮细胞损伤机制及细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(Basigin/CD147)在损伤过程中发挥的作用。方法:不同浓度AA(10、20、40μg/ml)作用于人近端肾小管上皮细胞(HK-2)不同时间(24、48 h)后,MTT比色法检测细胞增殖变化;Basigin/CD147干扰质粒转染HK-2,选取AA最适浓度(20μg/ml),ELISA法检测不同时间段(24、48 h)细胞上清液中转化生长因子-β1(TGF-β1)含量;实时定量(Real-time)PCR法检测Basigin/CD147 mRNA表达;Western印迹检测Basigin/CD147、TGF-β1和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白表达。结果:AA 48 h组TGF-β1含量显著高于空白组(P0.05),siRNA+AA 48 h组TGF-β1低于48 h AA组(P0.05);AA48 h组Basigin/CD147 mRNA含量显著高于空白组(P0.05),siRNA+AA 48 h组Basigin/CD147 mRNA显著低于48 h AA组(P0.05);AA 48 h组Basigin/CD147、α-SMA、TGF-β1蛋白表达明显高于空白组(P0.05),siRNA+AA 48 h组Basigin/CD147、α-SMA、TGF-β1蛋白表达均显著低于48 h AA组(P0.01)。结论:Basigin/CD147参与介导AA所致HK-2细胞损伤过程,干扰Basigin/CD147表达可能抑制AA引起的细胞纤维化;Basigin/CD147蛋白表达调控异常可能是引起马兜铃酸肾病的重要发病机制之一。     

酪酸梭菌双岐杆菌二联活菌对早产小鼠CD4~+ T细胞CD28和PD1表达的影响及意义

目的:探讨酪酸梭菌双歧杆菌二联活菌对CD28和程序性死亡分子1(PD1;CD279)在早产小鼠CD4~+ T细胞表达的影响及意义。方法:用米非司酮(RU486)腹腔注射无菌孕鼠建立早产模型。随机选择出生后第1天(postnatal day 1,P1)的小鼠分为早产实验组(Ⅰ组)、早产对照组(Ⅱ组)和足月对照组(Ⅲ组),每组各16只。Ⅰ组与Ⅱ组为早产模型所生幼鼠,Ⅲ组为未进行干预的孕鼠自然分娩的幼鼠。Ⅰ组给予酪酸梭菌双岐杆菌二联活菌灌胃,同一时间给予Ⅱ组与Ⅲ组等量生理盐水灌胃。3组新生鼠分别在P14、P21,用流式细胞术检测CD4~+ T细胞表面CD28及PD1表达量。结果:相对于Ⅲ组,Ⅱ组在P14时,CD4~+ T细胞表面CD28及PD1的表达没有显著变化(P>0.05),但在P21时,两分子的表达均增高(P<0.05);相对于Ⅱ组或Ⅲ组,在P14和P21时,Ⅰ组CD28及PD1的表达均升高(P<0.05);相对于P14,在P21时,Ⅱ组CD28的表达更高(P<0.05),但Ⅰ组和Ⅲ组均无显著变化(P>0.05);相对于P14,在P21时,Ⅱ组PD1的表达增强(P<0.05),而Ⅰ组PD1的表达降低(P<0.05),Ⅲ组PD1的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:早产小鼠CD4~+ T细胞表面CD28和PD1表达异常;酪酸梭菌双岐杆菌二联活菌可能通过调节早产小鼠CD28和PD1的表达,促进CD4~+ T细胞的成熟与活化,进而增强早产小鼠的免疫功能。     

PD-L1-PD-1信号通路在肾小管上皮细胞与Jurkat细胞共培养中的作用

目的 了解12-O-十四酰基咐派醇-13-乙酸酯(TPA)对培养的Jurkat细胞表达PD-1的影响以及阻断PD-L1-PD-1信号通路在人近端肾小管上皮细胞株HK2细胞与Jurkat细胞共培养中的作用.方法 RT-PCR、流式细胞计数法检测Jurkat细胞上PD-1的表达,夹心ELISA法检测Jurkat细胞分泌的IL-2. 结果正常培养的Jurkat细胞不表达PD-1 mRNA和蛋白,20 nM的TPA刺激Jurkat细胞24 h后,可见PD-1 mRNA和蛋白表达升高,与对照组比较差异有显著性(P<0.01).HK2细胞与Jurkat细胞共培养上清中IL-2的含量平均为(540±96)pg/mL,当加入抗人PD-L1抗体后,IL-2的平均含量升高为(760±84)pg/mL(P<0.001).结论 TPA刺激Jurkat细胞表达PD-1升高,HK2细胞上的PD-L1可能通过与Jurkat细胞上的PD-1的结合,负调节Jurkat细胞的活性.     

吗啡对PC12细胞嘌呤核苷酸代谢相关酶基因表达的影响

目的：研究吗啡对神经细胞模型PC12嘌呤核苷酸补救合成酶与分解代谢关键酶基因表达的影响。方法：采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测暴露于吗啡不同时间的PC12细胞次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT）、腺苷激酶（AK）和腺苷脱氨酶（AD A）mRNA的表达水平。结果：与相应时段对照组相比，PC12细胞暴露于吗啡12及24 h时，HGPRT mRNA水平均明显增高(P<0.05)，作用48 h时HGPRT mRNA水平显著降低(P<0.05)，72 h后HGPRT mRNA水平再次升高(P<0.05)；吗啡处理的PC12细胞于12和24 h时，AK mRNA水平均明显降低(P<0.05)，作用48 h时AK mRNA水平升高(P<0.05)，72 h后AK mRNA水平恢复正常；ADA mRNA水平均表现为轻度降低，12 h差异有显著性(P<0.05)。结论：吗啡影响神经细胞嘌呤核 苷酸代谢，使细胞内腺苷酸及腺苷水平增高，这可能是吗啡依赖和耐受形成的机理之一 。     

大鼠热应激对细胞免疫学的影响

目的 探讨热应激对大鼠脾脏细胞Toll样受体4(TLR4)及外周血T调节(Treg)细胞表达的影响.方法 将72只SD大鼠分为20℃常温组和37℃高温湿热组,每组分非刺激、细菌脂多糖(LPS)刺激、刀豆素-A(Con-A)刺激亚组,每个亚组设1、12、48、168 h观察点;流式细胞术测定TLR4+细胞及Treg细胞.结果 37℃高温湿热组脾脏TLR4+细胞比率在各亚组的1～168 h均低于20℃常温组(P＜0.05).37℃高温湿热组各亚组1～48 h的外周血CD4+ CD25+ Treg较20℃常温组显著下降(P＜0.05),只有LPS刺激的168 h稍有升高,37℃高温湿热组中非刺激及Con-A刺激亚组CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg在12h时间点较20℃常温组显著升高,而在168 h时间点各亚组显著降低(P＜0.05).37℃高温湿热组中各亚组1h和168 h的外周血CD8+ CD25+ Treg较20℃常温组显著升高;而CD8+ CD25+ Foxp3+ Treg各亚组在1h和48 h较20℃常温组显著降低,在非刺激和LPS刺激亚组的12 h和168 h较20℃常温组显著升高(P＜0.05).结论 高温湿热可破坏大鼠固有免疫并改变适应性免疫的功能状态.