MAPK介导血管球囊损伤后血管平滑肌细胞的增殖

目的探讨血管球囊损伤后诱导的血管平滑肌细胞增殖的信号传递途径。方法采用同位素技术测定3H-TdR掺入和丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)活性。结果 血管球囊损伤后诱导了血管平滑肌细胞增殖,同时有MAPK活性明显增加。结论血管球囊损伤后诱导的血管平滑肌细胞增殖可能是通过增加MAPK活性途径实现的。     

外源性一氧化氮对高血压患者离体动脉平滑肌细胞的增殖作用研究

为探讨原发性高血压（EH）患者血管平滑肌细胞（VSMC）与一氧化氮（NO）的关系以及外源性NO对离体VSMC的增殖作用，采用EH患者肠系膜动脉分离、消化后进行离体VSMC培养。应用一氧化氮合成酶（NOS）诱导剂白细胞介素－1（IL－1）干预，检测NO水平，并用外源性NO药物硝普钠进行干预，研究其对VSMC摄入3H－胸腺嘧啶核苷（3H－TdR）的影响。结果：EH组VSMC释放的NO较正常血压（NT）组低（P＜0．01），IL－1诱导后NO明显增加（P＜0．01），但仍较NT组低（P＜0．05）。外源性NO药物硝普钠干预后3H－TdR掺入量随浓度的增高而减低，与对照组相比P＜0．01。提示：EH患者存在着NO产生通路的异常，外源性NO可抑制平滑肌细胞的增殖。     

高血压病患者动脉血管平滑肌细胞NO含量及作用

目的：探讨在基础状态下高血压病患者（ＥＨ）动脉血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）的一氧化氮合酶（ＮＯＳ）和一氧化氮（ＮＯ）的变化特点及其ＶＳＭＣ增殖的影响。方法：采用血压正常者（ＮＴ）及ＥＨ患者的肠纱膜动脉进行分离培养,对比观察ＮＴ和ＥＨ组的动脉ＶＳＭＣ的ＮＯＳ活性、ＮＯ含量、细胞计数和细胞周期的变化,研究ＥＨ患者动脉ＶＳＭＣ的ＮＯＳ－ＮＯ系统的变化与细胞增殖的关系。结果：（１）在基础状态下,Ｅ组动脉ＶＳ     

大鼠血管球囊损伤后平滑肌细胞的增殖与雷帕霉素的干预

目的:研究经皮穿刺血管内成形术后大鼠腹主动脉血管平滑肌细胞增殖程度与p27蛋白水平的关系,及国产雷帕霉素（Rapamyc in）对血管平滑肌细胞增殖的抑制,探讨防治经皮冠状动脉内成形术（PTCA）后再狭窄的有效途径和指标。方法:流式细胞计数法测定p27蛋白、CDK2、cyc lin E在大鼠再狭窄血管平滑肌细胞及对照组的表达水平。结果:雷帕霉素干预后p27蛋白表达水平在PTCA术后各组与对照组相比均有上移,减轻血管狭窄程度（P<0.01）。结论:p27蛋白在增殖的血管平滑肌细胞中表达水平与狭窄程度负相关,国产雷帕霉素可上调p27蛋白水平从而抑制血管狭窄形成。     

同型半胱氨酸诱导血管平滑肌细胞的增殖作用

目的 :探讨同型半胱氨酸 (Hcy)对血管平滑肌细胞 (VSMC)生长的影响。方法 :采用MTT法检测细胞数量及流式细胞术测定细胞周期。结果 :5× 10 -4mol/LHcy干预处于生长静止期的细胞 4 8、72h细胞数量较对照组明显增加 (P <0 .0 1) ,分别增加了 5 0 .75 %和 84 .83%。当采用 1× 10 -4,2 .5× 10 -4,5× 10 -4,1× 10 -3mol/L的Hcy干预细胞 72h后 ,其细胞数量分别较对照组增加了4 1.5 6 % ,5 8.4 4 % ,6 6 .2 3% ,74 .0 2 %。并且当 5× 10 -4mol/LHcy干预细胞 2 4、36、4 8h后 ,其S期、G2 /M期在细胞周期的比例也明显增加 (P <0 .0 1)。结论 :Hcy能明显诱导VSMC增殖 ,并呈现时间和剂量依赖关系 ,提示Hcy通过诱导VSMC的增殖可导致动脉粥样硬化的发生。     

准分子激光斑块消蚀术治疗下肢动脉慢性闭塞△

目的分析准分子激光斑块消蚀术(excimer laser atherectomy,ELA)治疗下肢股浅动脉以及膝下动脉慢性闭塞病变的安全性和可行性。方法我们率先在华南地区采用ELA治疗下肢动脉慢性闭塞所致严重肢体缺血(critical limb ischemia,CLI)2例,1例为股浅动脉原发闭塞性病变,采用ELA联合紫杉醇涂层球囊处理;1例为胫后动脉原发闭塞病变,采用ELA联合普通球囊扩张处理。结果 2例患者手术顺利,术后前向血流通畅,下肢缺血明显改善,无需补救性植入支架,无手术并发症。术后1个月跛行距离延长,足部溃疡愈合,复查超声显示股浅动脉及胫后动脉血流通畅。结论 ELA治疗下肢股浅及膝下动脉慢性闭塞病变安全可行。     

弹性蛋白酶抑制剂对动脉损伤后血管平滑肌细胞增生作用的研究

目的　探讨弹性蛋白酶抑制对平滑肌细胞向内膜迁徙及增生的作用。方法　 2 0 0 2 - 0 8～ 2 0 0 3- 0 5 ,用 2F球囊导管损伤Wistar大鼠颈总动脉内皮 ,给弹力蛋白酶抑制剂 ,做损伤动脉组织染色及免疫染色 ,测定内膜及中膜的BrdU阳性细胞率、细胞数及面积。结果　球囊损伤后 ,弹力蛋白酶抑制剂给药 10d明显抑制内膜BrdU阳性细胞率、细胞数及面积 ,尽管给药 5d对上述指标无明显抑制作用。结论　弹性蛋白酶抑制剂通过降低内膜平滑肌增生抑制内膜肥厚 ,有可能成为用于治疗内膜增生的新药物。     

热刺激致动脉平滑肌增殖及血府逐瘀汤的干预作用

目的探讨热刺激对动脉管壁的影响及血府逐瘀汤的干预效果。方法局部热刺激兔耳,温度为43.0℃±0.5℃,每次3h,每日1次,共做3次。血府逐瘀汤组实验前3d及实验后一直用血府逐瘀汤6.0g/(kg·d)灌胃。各组均于造模后3d,7d,14d及28d时分别取材。采用光学显微镜及图像分析仪进行形态学观察。结果模型组热刺激后动脉平滑肌细胞层数及中膜厚度增加,造成管腔变狭。血府逐瘀汤组与模型组相比,增殖程度减小,各项观测指标均有不同程度的变化,但统计学分析仅28d时差异有统计学意义。结论热刺激可导致动脉管壁增厚,6.0g/(kg·d)剂量的血府逐瘀汤对此有较好的干预作用。     

动脉平滑肌细胞一氧化氮合酶与高血压发病的关系

目的 探讨高血压病患者血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）一氧化氮合酶（ＮＯＳ）活性和ＮＯＳ基因表达的特点及其与高血压发病的关系。方法 采用复合胶原酶法分离培养高血压病患者和血压正常者动脉ＶＳＭＣ,并以血红蛋白分光光度法、原位反转录聚合酶链反应检测ＶＳＭＣ的ＮＯＳ活性和诱生型ＮＯＳ（ｉＮＯＳ）ｍＲＮＡ表达量。结果 （１）高血压组ＶＳＭＣ的ＮＯＳ活性和ｉＮＯＳ ｍＲＮＡ表达量均显著低于正常组（Ｐ〈０．０１）;     

降钙素基因相关肽抑制原发性高血压患者动脉血管平滑肌细胞的增殖作用

目的 :探讨降钙素基因相关肽 (CGRP)对原发性高血压 (EH)患者动脉血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖的抑制作用。方法 :对EH患者和血压正常者的动脉进行培养 ,分别测定两组VSMC的周期和数量 ,并观察CGRP对其影响。结果 :①基础状态下 ,EH组VSMC周期的S期百分率和增殖指数 (PI)分别为 (35 .78± 1.0 0 ) %和 (5 4 .84± 1.98) % ,均显著高于正常对照组的 (2 8.88± 1.0 7) %和 (4 4 .12± 1.4 3) % ,P <0 .0 1;EH组VSME数量为 (10 .39± 1.30 )× 10 9个 /L ,显著高于正常对照组的 (7.6 7± 0 .98)× 10 9个 /L ,P <0 .0 1。②在CGRP作用下 ,EH组VSMC细胞周期中的S期百分率和PI分别为 (32 .4± 1.4 7) %和 (4 8.86± 2 .2 1) % ,均显著高于正常对照组的 (2 0 .81± 0 .94 ) %和 (33.18± 1.2 6 ) % ,P <0 .0 1;EH组细胞数量为 (7.4 8± 0 .2 2 )× 10 9个 /L ,显著高于正常对照组的 (5 .37± 0 .6 6 )× 10 9个 /L ,P <0 .0 1。③在CGRP作用下 ,两组VSMC的细胞周期中S期百分率、PI和细胞数量分别较基础状态下减低非常显著 ,P <0 .0 1。结论 :EH患者VSMC的细胞数量和细胞周期中的S期百分率、PI增加 ;CGRP使VSMC的数量和PI减低 ,抑制VSMC增殖。提示CGRP含量不足可能是EH发病的机制之一     

脐动脉平滑肌细胞体外培养方法的改进

目的:建立并优化的人脐动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)的体外培养方法。方法:人脐动脉VSMCs的体外原代培养应用优化的组织块贴壁法进行。在分别应用传统细胞培养法和优化后细胞培养法贴壁培养提取的原代细胞10 d后,计数6孔板每孔细胞数目,并做统计比较分析相同时间内原代细胞的数量。以抗α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)抗体和抗CD31抗体进行免疫荧光染色和倒置相差显微镜观察鉴定培养的细胞。结果:与传统细胞培养法相比,在相同的时间周期内优化实验方法后培养的原代细胞数量较传统多,我们可以在较短时间内得到实验所需的细胞量,因此优化后可缩短细胞的培养周期。原代和传代培养的脐动脉VSMCs生长良好,细胞经冻存、复苏后状态依然良好。光镜下细胞呈典型的"峰-谷"样生长,细胞多为长梭形,具有VSMCs的特征,且传代培养至第7代,细胞生长特性不变。经抗α-SMA、CD31抗体进行免疫荧光染色鉴定证实为VSMCs。结论:优化的组织块贴壁法可缩短原代人脐动脉VSMCs的培养周期,且细胞的生物学特性较稳定,为与平滑肌相关的疾病进展及心血管生长发育的研究奠定了实验基础。     

高血压病患者动脉血管平滑肌细胞NO含量及作用

目的: 探讨在基础状态下高血压病患者（ＥＨ）动脉血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）的一氧化氮合酶（ＮＯＳ）和一氧化氮（ＮＯ）的变化特点及其对ＶＳＭＣ增殖的影响。方法: 采用血压正常者（ＮＴ）及ＥＨ 患者的肠系膜动脉进行分离培养,对比观察ＮＴ组和ＥＨ 组的动脉ＶＳＭＣ的ＮＯＳ活性、ＮＯ含量、细胞计数和细胞周期的变化,研究ＥＨ 患者动脉ＶＳＭＣ的ＮＯＳ－ＮＯ系统的变化与细胞增殖的关系。结果:①在基础状态下,ＥＨ组动脉ＶＳＭＣ的ＮＯＳ活性和ＮＯ含量较ＮＴ组明显降低（Ｐ＜ ０．０５）。②ＥＨ组动脉ＶＳＭＣ的细胞数量明显高于ＮＴ组（Ｐ＜ ０．０５）。③ＥＨ组Ｓ期百分率和细胞增殖指数（ＰＩ）明显高于ＮＴ组（Ｐ＜ ０．０５）,ＥＨ组Ｇ０／Ｇ１ 期百分率较ＮＴ组明显降低（Ｐ＜ ０．０５）。④ＮＴ组和ＥＨ组的ＮＯＳ活性和ＮＯ含量与ＰＩ均呈负相关。结论:ＥＨ患者动脉ＶＳＭＣ存在着ＮＯＳ－ＮＯ系统功能低下;ＮＯ具有抑制ＶＳＭＣ增殖的作用     

高血压病患者动脉平滑肌细胞NO的变化及其与发病的关系

为探讨高血压病（ＥＨ）患者一氧化氮（ＮＯ）浓度变化特点与高血压病发病的关系，本研究以复合胶元酶法分离培养ＥＨ患者和血压正常者（ＮＴ）离体动脉平滑肌细胞（ＶＳＭＣ），检测细胞培养液的ＮＯ含量和ＶＳＭＣ的一氧化氮合酶（ＮＯＳ）活性，观察ＥＨ患者动脉ＶＳＭＣ分泌ＮＯ的特点。结果显示:①ＥＨ组ＶＳＭＣ的ＮＯ含量和ＮＯＳ活性均显著低于ＮＴ组（Ｐ＜０．０１）；②ＥＨ患者和ＮＴＶＳＭＣ的ＮＯ含量和ＮＯＳ活性随培养时间延长均显著地增加（Ｐ＜０．０１）；③ＥＨ患者和ＮＴ的ＮＯ含量随ＮＯＳ活性增强而增加，并呈显著的正相关（Ｐ＜０．０１）。表明ＥＨ患者ＶＳＭＣ的ＮＯＳ－ＮＯ系统可能存在功能或结构的异常，并参与高血压病的发生和发展     

动脉平滑肌细胞增生受白细胞介素影响的研究状况

动脉平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）的增生受白细胞介素（ＩＬｓ）的影响。ＩＬ－２低浓度时可促进ＡＳＭＣ的增生，高浓度时可抑制ＡＳＭＣ的增生，呈双相效应。ＩＬ－１、ＩＬ－６可以促进ＡＳＭＣ的增殖，ＩＬ－８可以促进ＡＳＭＣ的迁移，ＩＬ－４可抑制ＡＳＭＣ增生。当然，ＩＬｓ之间，ＩＬｓ与生长因了及其他相关因素之间形成一个复杂的网络从而发挥作用。     

过氧化氢酶过度表达对血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的 探讨腺病毒戢体介导的过氧化氢酶基因转染对体外培养的人血管平滑肌细胞凋亡的影响。方法 用含过氧化氢酶基因的重组腺病毒转染人血管平滑肌细胞，采用Western blot方法检测血管平滑肌细胞过氧化氢酶的表达。应用流式细胞术、TUNEL法等方法检测血管平滑肌细胞的凋亡。结果 含过氧化氢酶基因的重组腺病毒转染后血管平滑肌细胞过氧化氢酶表达明显增多；流式细胞术显示含过氧化氢酶基因的重组腺病毒组与对照组比较凋亡率明显增加（P〈0．01）。经TUNEL分析显示，含过氧化氢酶基因的重组腺病毒组凋亡细胞明显多于对照组。两者之间有显著性差异（P〈0．001）。结论 腺病毒载体介导的过氧化氢酶基因转染导致过氧化氢酶过度表达。促进人血管平滑肌细胞的凋亡，这可能是防治经皮腔内冠状动脉血管成形术后再狭窄的一种新方法。     

高血压病患者动脉平滑肌细胞NO的变化及其与发病的关系

为探讨高血压病（ＥＨ）患者一氧化氮（ＮＯ）浓度变化特点与高血压病发病的特点，本研究以复合胶元酶法分离培养ＥＨ患者和血压正常者（ＮＴ）离体动脉平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）检测细胞培养液的ＮＯ含量和ＶＳＭＣ的一氧化氮含量（ＮＯＳ）的活性，观察ＥＨ患者动脉ＶＳＭＣ分泌ＮＯ的特点，结果显示：（１）ＥＨ组ＶＳＭＣ的ＮＯ含量和ＮＯＳ活性均显著于低于ＮＴ组（Ｐ〈０．０１）；（２）ＥＨ患者和ＮＴＶＳＭＣ的ＮＯ含量和ＮＳ     

细胞外基质影响血管平滑肌细胞迁移和增殖的研究进展

细胞外基质主要包括胶原,氨基多糖,弹性蛋白和糖蛋白等成分.细胞外基质通过与血管平滑肌细胞表面上的整合素受体结合,形成粘着斑,激活粘着斑激酶,触发细胞内一系列信号传导,从而对血管平滑肌细胞的迁移和增殖产生影响.     

磁场抑制动脉平滑肌细胞增殖作用的研究

目的 :探讨不同场强、不同作用时间的低频电磁场对兔主动脉平滑肌细胞增殖的调控作用。　　方法 :体外培养的新西兰白兔主动脉平滑肌细胞 3～ 7代与含 5 %小牛血清的 RPMI- 16 40培养液的混悬液 10 0 μl加入 96孔板中培养 ,按照实验分组 ,每日磁场作用 1次 ,共 2日。 72 h后用四唑盐比色法和氚标记的胸腺嘧啶脱氧核苷(3H- Td R)掺入法检测动脉平滑肌细胞的增殖数量。　　结果 :2 0 m T、40 m T和 6 0 m T各磁场组动脉平滑肌细胞的增殖数量显著低于对照组 (P<0 .0 5 ) ,其中 30 min、40m T磁场组动脉平滑肌细胞增殖数量的降低最显著 (P<0 .0 0 1)。　　结论 :磁场对动脉平滑肌细胞增殖有显著的抑制作用 ,这种抑制效应具有强度敏感性和时间依赖性。