转化生长因子β1与骨形态发生蛋白2对关节软骨损伤修复的价值

关节软骨损伤的修复,一直是医学界及运动损伤领域所关注的问题.随着分子生物技术的应用和发展,生长因子在关节软骨损伤中的作用显得尤为重要.文章通过分析关节软骨损伤修复难的原因,阐述众多生长因子中转化生长因子β1与骨形态发生蛋白2对关节软骨损伤修复的作用及机制,并对存在的问题进行了归纳,为今后的实验研究提供重要的参考依据.     

转化生长因子β1与骨生化指标和骨密度的关系

背景：转化生长因子β1是一种重要的调节骨构塑的细胞因子,其是否能作为反应骨转换的敏感因子尚不清楚。目的：探讨转化生长因子β1与骨形成、骨吸收指标,以及腰椎正位骨密度间的关系。方法：实验共纳入来自长沙的健康妇女663名,年龄20～80岁。采用ELISA法测定空腹血清转化生长因子β1、骨特异性碱性磷酸酶和Ⅰ型胶原羧基末端肽的水平,同时应用双能X射线骨密度仪测定腰椎正位的骨密度。并分析转化生长因子β1与其他各指标的相关性。结果与结论：检测结果显示30～39岁,40～49岁年龄段妇女的血清转化生长因子β1水平最高,转化生长因子β1水平与年龄呈负相关,与体质量指数无相关。校正体质量指数后发现,转化生长因子β1与骨特异性碱性磷酸酶和Ⅰ型胶原羧基末端肽负相关,校正体质量指数和年龄后血清转化生长因子β1水平与腰椎正位骨密度正相关。说明转化生长因子β1能动态地反映骨转换情况。     

转化生长因子β1与骨生化指标和骨密度的关系

背景:转化生长因子β1 是一种重要的调节骨构塑的细胞因子,其是否能作为反应骨转换的敏感因子尚不清楚.目的:探讨转化生长因子β1 与骨形成、骨吸收指标,以及腰椎正位骨密度间的关系.方法:实验共纳入来自长沙的健康妇女663 名,年龄20～80 岁.采用ELISA 法测定空腹血清转化生长因子β1、骨特异性碱性磷酸酶和Ⅰ型胶原羧基末端肽的水平,同时应用双能X 射线骨密度仪测定腰椎正位的骨密度.并分析转化生长因子β1 与其他各指标的相关性.结果与结论:检测结果显示30～39 岁,40～49 岁年龄段妇女的血清转化生长因子β1 水平最高,转化生长因子β1 水平与年龄呈负相关,与体质量指数无相关.校正体质量指数后发现,转化生长因子β1 与骨特异性碱性磷酸酶和Ⅰ型胶原羧基末端肽负相关,校正体质量指数和年龄后血清转化生长因子β1 水平与腰椎正位骨密度正相关.说明转化生长因子β1 能动态地反映骨转换情况.     

人角质形成细胞Notch信号通路与转化生长因子β调控受体蛋白的作用

背景:在皮肤中受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa的调控至关重要,而转化生长因子β似乎是其调控的上游因子,既然Notch信号和转化生长因子β信号通道如此相关,那么Notch是不是也参加了转化生长因子β信号对受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa的调控呢?目的:探讨Notch信号通道在人角质形成细胞中对转化生长因子β调控受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa的作用的影响。方法:在分别用Jagged-1激活和用Γ-分泌酶抑制剂抑制Notch信号通道后,加入转化生长因子β,同时设立对照组,用Real-timePCR测试人角质形成细胞中受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappamRNA表达量。结果与结论:覆盖率为40%的角质形成细胞在加入了转化生长因子β后,受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappamRNA量在各时间点均高于对照组。在用Jagged-1激活Notch通道的角质形成细胞中,单独加入Jagged-1、转化生长因子β及两者都加入时均高于对照组(P<0.05,P<0.01)。在用γ-分泌酶抑制剂抑制Notch通道的角质形成细胞中,只加入转化生长因子β显著高于对照组(P<0.01),只加入γ-分泌酶抑制剂和两者均加入时与对照组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。说明加入转化生长因子β导致角质形成细胞中受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa表达增加,而分别对Notch信号进行激活和抑制后发现,受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa信号分别显著增加和显著被抑制。所以在转化生长因子β升高受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa表达过程中Notch信号通道是非常重要且不可或缺的。     

人角质形成细胞Notch信号通路与转化生长因子β调控受体蛋白的作用

背景：在皮肤中受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa的调控至关重要,而转化生长因子β似乎是其调控的上游因子,既然Notch信号和转化生长因子β信号通道如此相关,那么Notch是不是也参加了转化生长因子β信号对受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa的调控呢？目的：探讨Notch信号通道在人角质形成细胞中对转化生长因子β调控受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa的作用的影响。方法：在分别用Jagged-1激活和用Γ-分泌酶抑制剂抑制Notch信号通道后,加入转化生长因子β,同时设立对照组,用Real-timePCR测试人角质形成细胞中受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappamRNA表达量。结果与结论：覆盖率为40%的角质形成细胞在加入了转化生长因子β后,受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappamRNA量在各时间点均高于对照组。在用Jagged-1激活Notch通道的角质形成细胞中,单独加入Jagged-1、转化生长因子β及两者都加入时均高于对照组（P〈0.05,P〈0.01）。在用γ-分泌酶抑制剂抑制Notch通道的角质形成细胞中,只加入转化生长因子β显著高于对照组（P〈0.01）,只加入γ-分泌酶抑制剂和两者均加入时与对照组比较,差异无显著性意义（P〉0.05）。说明加入转化生长因子β导致角质形成细胞中受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa表达增加,而分别对Notch信号进行激活和抑制后发现,受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa信号分别显著增加和显著被抑制。所以在转化生长因子β升高受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa表达过程中Notch信号通道是非常重要且不可或缺的。     

Cyclosporin exerts a direct fibrogenic effect on human tubulointerstitial cells: roles of insulin-like growth factor I, transforming growth factor beta1, and platelet-derived growth factor

To assess the direct fibrogenic effects of cyclosporin A (CyA) on the human tubulointerstitium, primary cultures of human renal proximal tubule cells (PTC) and renal cortical fibroblasts (CF) were incubated for 24 h with various concentrations of CyA. Cytotoxicity was confirmed in both cell populations by dose-dependent inhibition of thymidine incorporation, viability, and PTC apical sodium-hydrogen exchange activity (ethylisopropylamiloride-sensitive apical 22Na+ uptake). Compared with controls, both 500 and 1000 ng/ml CyA significantly stimulated CF collagen synthesis (proline incorporation 4.6 +/- 0.4, 6.5 +/- 0.8, and 7.1 +/- 1.0%, respectively; p <.05) and inhibited matrix metalloproteinase-2 (100%, 85.7 +/- 10.0%, and 38.8 +/- 9.2%) and matrix metalloproteinase-9 activity (100%, 110.6 +/- 19.0%, and 49.9 +/- 12.8%). CyA did not affect CF secretion of transforming growth factor beta1, but markedly stimulated insulin-like growth factor-I (IGF-I) secretion and inhibited secretion of both IGF-I binding protein-(IGFBP)-3 and IGFBP-2. CyA-induced CF collagen synthesis was abrogated by 5 microgram/ml anti-IGF-I receptor antibody, but not by 5 microgram/ml murine nonimmune globulin. Increasing concentrations of CyA progressively augmented PTC secretion of the fibrogenic cytokines transforming growth factor-beta1 and platelet-derived growth factor. These results indicate that clinically relevant concentrations of CyA are directly toxic to PTC and CF, irrespective of hemodynamic effects, and promote interstitial fibrosis by inhibiting matrix degradation and stimulating cortical fibroblast collagen synthesis via induction of autocrine IGF-I action. The latter effect may be further accentuated by the ability of CyA to augment secretion of transforming growth factor beta1 and platelet-derived growth factor by PTCs.     

转化生长因子β1质粒对静脉移植的影响

背景:大量实验表明,转化生长因子β1质粒在神经移植过程中可抑制或减弱移植排斥反应,而对静脉移植的影响却很少有行报道.目的:探讨大鼠局部注射转化生长因子β1质粒诱导同种异体异基因股静脉移植免疫耐受的作用途径.设计、时间及地点:随机分组,动物实验观察,于2007-03/2008-04在哈尔滨医科大学动物实验中心完成.材料:供体Wistar大鼠18只,受体SD大鼠48只随机分为自体移植组,异体移植组,免瘦抑制剂组,转化生长因子β1质粒组,每组12只.方法:免疫抑制剂组在移植前3 d开始腹腔内注射环孢霉素A(10 mg/kg),1次,d,直到处死.转化生长因子β1质粒组大鼠于局部股静脉两断端内注射40 μg/只的转化生长因子β1质粒.自体移植和异体移植组仅进行静脉移植.主要观察指标:于2周后进行影像学、组织学、免疫学检测.结果:自体移植组:内皮细胞扁平,核膜增厚.异体移植组;脱落内皮细胞及碎片,可见内膜下层.免疫抑制剂组:血管内皮细胞核膜增厚,广泛粗面内质网扩张.转化生长因子β1质粒组:血管内皮细胞可见粗面内质网扩张,线粒体空泡变.相邻细胞间可见紧密连接.转化生长因子β1质粒组优于免疫抑制剂组和异体移植组.4组混合淋巴细胞培养A值分别为1.07±0.14、4.15±0.67、1.77±0.23和1.38±0.23.转化生长因子β1质粒组与异体血管移植组和免疫抑制剂组比较,有显著差异(P<0.05).异体血管移植组对供体大鼠淋巴细胞的刺激呈正常反应,转化生长因子β1质粒组对供体鼠淋巴细胞的刺激反应性减弱,与免疫抑制剂组比较,差异有显著性意义(P<0.05).结论:局部注射转化生长因子β1质粒可以协同减轻移植后产生的免疫排斥反应.     

转化生长因子β1对咬肌再附着界面生物力学的影响

目的：观察转化生长因子β1对兔咬肌再附着界面的生物力学影响，探讨促进咬肌再附着的方法。方法：实验于2004—11／2005-04在南方医科大学附属南方医院动物实验中心完成。健康新西兰大白兔18只，随机分为3组（术后1，2，3个月组）。每组6只。将实验用兔的双侧咬肌从下颌骨附着处剥离，下颌骨截骨后将咬肌复位，一侧定期注射转化生长因子β1，另一侧作为对照。分别在术后1，2，3个月处死动物各6只，取实验侧和对照侧下颌骨骨块，大小1cm&;#215;0．5cm，连同其上附着咬肌-起取下进行拉伸试验，检测肌-骨再附着界面突然断裂时数据，即为咬肌再附着界面的最大断裂负荷。记录并分析术后1，2，3个月咬肌再附着界面的生物力学变化。结果：实验兔18只均进入结果分析。①术后1，2,3个月实验侧肌-骨界面最大断裂负荷明显高于对照侧[实验侧：（0．58&;#177;0．13），（0.74&;#177;0．07），（1．28&;#177;0．21）kg；对照侧：（0．46&;#177;0．07），（0．62&;#177;0．11），（0．93&;#177;0．16）kg，P〈0．05]。②双侧咬肌-下颌骨再附着界面的附着强度随时问延长逐渐增强，实验侧与对照侧比较有显著差异。结论：外源性转化生长因子β1可以促进咬肌剥离后的再附着。     

Stimulation of the chemotactic migration of human fibroblasts by transforming growth factor beta

Transforming growth factor beta (TGF-beta) is a potent chemoattractant in vitro for human dermal fibroblasts. Intact disulfide and perhaps the dimeric structure of TGF-beta is essential for its ability to stimulate chemotactic migration of fibroblasts, since reduction with 2-ME results in a marked loss of its potency as a chemoattractant. Although epidermal growth factor (EGF) appears to be capable of modulating some effects of TGF-beta, it does not alter the chemotactic response of fibroblasts to TGF-beta. Specific polyvalent rabbit antibodies to homogeneously pure TGF-beta block its chemotactic activity but has no effect on the other chemoattractants tested (platelet-derived growth factor, fibronectin, and denatured type I collagen). Since TGF-beta is secreted by a variety of neoplastic and normal cells including platelets, monocytes/macrophages, and lymphocytes, it may play a critical role in vivo in embryogenesis, host response to tumors, and the repair response that follows damage to tissues by immune and nonimmune reactions.     

转化生长因子β1对咬肌再附着界面生物力学的影响

目的:观察转化生长因子β1对兔咬肌再附着界面的生物力学影响,探讨促进咬肌再附着的方法。方法:实验于2004-11/2005-04在南方医科大学附属南方医院动物实验中心完成。健康新西兰大白兔18只,随机分为3组(术后1,2,3个月组),每组6只。将实验用兔的双侧咬肌从下颌骨附着处剥离,下颌骨截骨后将咬肌复位,一侧定期注射转化生长因子β1,另一侧作为对照。分别在术后1,2,3个月处死动物各6只,取实验侧和对照侧下颌骨骨块,大小1cm×0.5cm,连同其上附着咬肌一起取下进行拉伸试验,检测肌-骨再附着界面突然断裂时数据,即为咬肌再附着界面的最大断裂负荷。记录并分析术后1,2,3个月咬肌再附着界面的生物力学变化。结果:实验兔18只均进入结果分析。①术后1,2,3个月实验侧肌-骨界面最大断裂负荷明显高于对照侧犤实验侧:(0.58±0.13),(0.74±0.07),(1.28±0.21)kg;对照侧:(0.46±0.07),(0.62±0.11),(0.93±0.16)kg,P<0.05犦。②双侧咬肌-下颌骨再附着界面的附着强度随时间延长逐渐增强,实验侧与对照侧比较有显著差异。结论:外源性转化生长因子β1可以促进咬肌剥离后的再附着。     

Role of transforming growth factor beta in conjunctival scarring

Glaucoma is the major cause of irreversible blindness throughout the world. Of all of the treatments that are available at present, the most effective appears to be surgery; however, excessive conjunctival scarring can lead to surgical failure. In the last decade, the introduction of the anti-metabolites mitomycin-C and 5-fluorouracil as anti-scarring treatments have greatly improved the results of glaucoma surgery, but these agents are associated with complications that can potentially result in blindness. A possible target for a more physiological approach to anti-scarring is transforming growth factor beta. This review examines the role of transforming growth factor beta in conjunctival scarring and discusses promising new ways of modifying its activity.     

转化生长因子β在骨缺损修复过程中对骨痂内ALP和钙的影响

目的：观察转化生长因子β与兔骨松质的复合材料对兔颅骨缺损的修复过程中骨痂内ALP、钙的影响。方法：取12只日本大耳白兔在颅顶双侧制成2个直径15mm的全层圆形骨缺损，作为颅骨大面积缺损的动物模型；将转化生长因子β与经化学处理过的兔骨松质结合，制成复合材料，分别植入骨缺损中。于术后2，4，8，12周进行生物化学检测。结果：不同时相实验组与对照组相比，在ALP含量、钙离子测定值这两个水平上差异均具有统计学意义。结论：转化生长因子与兔骨松质复合材料成骨能力强于对照组，可以作为颅骨缺损修复材料的一种选择。     

成纤维细胞生长因子对兔纤维环细胞转化生长因子β2的调节

目的:观察成纤维细胞生长因子对培养兔纤维环细胞转化生长因子β2表达的调节作用。方法:实验于2005-03/2006-04在华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科实验室完成。培养4月龄雌性日本大白兔的纤维环细胞,在每次换液时加入成纤维细胞生长因子100μg/L,铺满后收集细胞,作纤维环细胞转化生长因子β2常规免疫组织化学研究,细胞呈棕黄色染色为阳性表达信号,同时为进一步明确纤维环细胞转化生长因子β2的定位进行免疫胶体金标记电镜观察。结果:光镜下细胞明显呈棕色,电镜下细胞膜表面有明显的胶金颗粒粘附。结论:成纤维细胞生长因子能促进纤维环细胞转化生长因子β2的表达。     

转化生长因子β1诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化

背景:转化生长因子β1是关节软骨组织工程研究的首选生长因子,适当浓度能刺激关节软骨细胞增殖、分裂和分化.目的:建立含有转化生长因子β1的特殊诱导体系培养条件下骨髓间充质干细胞分化为软骨细胞的能力,观察诱导后的细胞形态及表型变化.方法:于兔胫骨结节内侧抽取骨髓,采用贴壁培养法分离纯化兔骨髓间充质干细胞,取第3代骨髓间充质干细胞行流式细胞仪检测鉴定其表面抗原,以含有转化生长因子β1的特殊软骨诱导体系的培养条件下对第3代骨髓间充质干细胞诱导培养21 d,诱导后与人鼻中隔软骨细胞进行比较.采用免疫组织化学法对Ⅱ型胶原进行定性检测.结果与结论:贴壁培养法可分离并纯化兔骨髓间充质干细胞,所得第3代骨髓间充质干细胞表面抗原CD44 阳性,CD34、CD45 阴性.经诱导培养21 d后细胞形态变为不规则,Ⅱ型胶原免疫组织化学染色显示可见阳性细胞.提示含有转化生长因子β1的特殊软骨诱导体系的培养条件下,骨髓间充质干细胞可以转化为软骨细胞,且与正常软骨细胞无明显差异.     

软骨形成过程中的转化生长因子

背景:转化生长因子β2 是一族多肽类生长因子,具有多重生物学效应,对骨髓间充质干细胞增殖分化功能有一定促进作用,是调节骨髓间充质干细胞增殖和向软骨细胞方向分化的最主要因子之一.目的:探讨转化生长因子β2 的分子结构特点及其在软骨形成方面的作用.方法:应用计算机检索中国期刊全文数据CNKI、中国期刊全文数据维普中文科技期刊数据库(VIP)和PubMed 数据库(1995-01/2011-08)与骨组织工程中转化生长因子β2 诱导软骨形成有关的文章,检索词分别为"转化生长因子β2;软骨细胞分化;骨组织工程"和"TGF-β2;cartilage formation;tissue engineering".纳入所述内容与转化生长因子β2 分子结构特点,转化生长因子β2 信号转导通路,软骨细胞的诱导性分化,软骨性疾病的生物性治疗进展有关.排除综述文献、重复研究、观点陈旧的文章.结果与结论:初检得到302 篇文献,排除262 篇不符合标准的文献,共纳入40 篇符合标准的文献.经分析得出转化生长因子β2 通过促进骨髓间充质干细胞分化为软骨细胞促进软骨特异性基质如Ⅱ型胶原及蛋白多糖的合成,从而发挥软骨诱导作用.转化生长因子β2 与其他因子共同作用调节软骨细胞生长分化,使临床上永久性修复软骨组织缺损的治疗变为可能.     

Release of early human hematopoietic progenitors from quiescence by antisense transforming growth factor beta 1 or Rb oligonucleotides

We have used antisense oligonucleotides to study the roles of transforming growth factor beta (TGF-beta) and the two antioncogenes, retinoblastoma susceptibility (Rb) and p53, in the negative regulation of proliferation of early hematopoietic cells in culture. The antisense TGF-beta sequence significantly enhanced the frequency of colony formation by multi-lineage, early erythroid, and granulomonocytic progenitors, but did not affect colony formation by late progenitors. Single cell culture and limiting dilution analysis indicated that autocrine TGF-beta is produced by a subpopulation of early progenitors. Antisense Rb but not antisense p53 yielded similar results in releasing multipotential progenitors (colony-forming unit-granulocyte/erythroid/macrophage/megakaryocyte) from quiescence. Rb antisense could partially reverse the inhibitory effect of exogenous TGF-beta. Anti-TGF-beta blocking antibodies, antisense TGF-beta, or Rb oligonucleotides all had similar effects. No additive effects were observed when these reagents were combined, suggesting a common pathway of action. Our results are consistent with the model that autocrine production of TGF-beta negatively regulates the cycling status of early hematopoietic progenitors through interaction with the Rb gene product.     

软骨形成过程中的转化生长因子β2

背景：转化生长因子β2是一族多肽类生长因子,具有多重生物学效应,对骨髓间充质干细胞增殖分化功能有一定促进作用,是调节骨髓间充质干细胞增殖和向软骨细胞方向分化的最主要因子之一。目的：探讨转化生长因子β2的分子结构特点及其在软骨形成方面的作用。方法：应用计算机检索中国期刊全文数据CNKI、中国期刊全文数据维普中文科技期刊数据库（VIP）和PubMed数据库（1995-01/2011-08）与骨组织工程中转化生长因子β2诱导软骨形成有关的文章,检索词分别为＂转化生长因子β2;软骨细胞分化;骨组织工程＂和＂TGF-β2;cartilage formation;tissue engineering＂。纳入所述内容与转化生长因子β2分子结构特点,转化生长因子β2信号转导通路,软骨细胞的诱导性分化,软骨性疾病的生物性治疗进展有关。排除综述文献、重复研究、观点陈旧的文章。结果与结论：初检得到302篇文献,排除262篇不符合标准的文献,共纳入40篇符合标准的文献。经分析得出转化生长因子β2通过促进骨髓间充质干细胞分化为软骨细胞促进软骨特异性基质如Ⅱ型胶原及蛋白多糖的合成,从而发挥软骨诱导作用。转化生长因子β2与其他因子共同作用调节软骨细胞生长分化,使临床上永久性修复软骨组织缺损的治疗变为可能。     

转化生长因子β3和骨形态发生蛋白2基因共转染骨髓干细胞*

背景：骨形态发生蛋白2及转化生长因子β是骨再生中重要的因子,提高其表达可促进骨髓间充质干细胞的成骨分化。目的：构建携带转化生长因子β3和骨形态发生蛋白2基因的慢病毒载体,观察其在骨髓间充质干细胞中的表达情况。方法：应用重组慢病毒技术构建同时携带转化生长因子β3、骨形态发生蛋白2和绿色荧光蛋白基因的重组慢病毒表达载体,并用其转染体外培养的第3代兔骨髓间充质干细胞,以转染携带转化生长因子β3或骨形态发生蛋白2单一基因的慢病毒或单独慢病毒的骨髓间充质干细胞作为对照。转染后1周分别提取各组细胞的总RNA 和蛋白进行检测。结果与结论：荧光显微镜下见转染转化生长因子β3和(或)骨形态发生蛋白2基因3 d 的骨髓间充质干细胞发绿色荧光,转染效率达90%以上。RT-PCR 和 Western blot 结果显示,转染转化生长因子β3和骨形态发生蛋白2基因的骨髓间充质干细胞转化生长因子β3和骨形态发生蛋白2 mRNA 和蛋白的表达均高于单一基因转染组及空白对照组。可见应用慢病毒可成功将转化生长因子β3和骨形态发生蛋白2基因转染至骨髓间充质干细胞并实现其高效表达,且两种基因具有协同促表达作用。     

人转化生长因子β1基因转染骨髓基质干细胞复合藻酸钙修复骨软骨缺损

目的:拟利用人转化生长因子β 1基因转染骨髓基质干细胞,再与可降解藻酸钙材料复合构建具有较好生物学活性的组织工程化人工骨软骨,以期获得良好的软骨间整合.方法:雄性12个月龄的崇明山羊18只.由上海交通大学附属第九人民医院动物实验中心提供.携带人转化生长因子β 1基因的重组腺病毒由上海交通大学附属第九人民医院骨科研究室提供.制备藻酸钙凝胶的氯化钙、藻酸钠为Gibco公司产品.从羊髂嵴抽取8 mL骨髓,贴壁法分离培养骨髓基质干细胞,传至第3代以携带人转化生长因子β 1基因的重组腺病毒转染过夜.18只山羊均于双膝股骨内髁负重区建立骨软骨缺损模型,造模后分为3组,6只,组:转染细胞-藻酸钙组将转染人转化生长因子β 1基因的骨髓基质干细胞悬于1.2%藻酸钠中,调整细胞密度为5×1010L-1,吸取5 mL注入骨软骨缺损处,随后缓慢滴入过量的2.5%氯化钙,使氯化钙与藻酸钠发生交联反应形成藻酸钙凝胶.复合对照组同法注入未转染人转化生长因子β 1基凼的骨髓基质干细胞-藻酸钙凝胶,模型组不给予任何干预.转染后Western blot法检测细胞外源基因的表达.移植后组织形态学检查及缺损评分.结果:人转化生长因子β 1基因转染后,骨髓基质干细胞表达人转化生长因子β 1,并分泌细胞外基质Ⅱ型胶原及Aggrecan.移植后24周,转染细胞-藻酸钙组缺损获得类透明样软骨修复,复合对照组及模型组均为纤维组织或纤维样软骨修复.与模型组比较,移植后第12,24周复合对照组、转染细胞.藻酸钙组骨软骨缺损组织形态学评分均明显升高(P<0.05),且转染细胞-藻酸钙组升高幅度显著大于复合对照组(P<0.05);转染细胞.藻酸钙组缺损评分随着修复时间的延长而明显升高(P<0.05).结论:实验成功将组织工程学与分子生物学有机结合,经基因修饰的骨髓基质干细胞可使人转化生长因子β1持续高效发挥作用,并逐步转化为成熟的软骨细胞且分泌软骨基质,与藻酸钙复合修复骨软骨缺损效果满意.