钛合金表面聚乙烯亚胺/肝素聚电解质多层膜的体外和体内血液相容性研究

目的利用静电自组装技术在钛合金表面涂层聚电解质多层膜,评价其体外和体内血液相容性,探讨该技术在医用金属表面改性领域内的应用前景。方法利用静电自组装技术制备以肝素为最外层的聚乙烯亚胺/肝素聚电解质多层膜。并对该聚电解质多层膜进行物理表征分析,再进行体外溶血实验、凝血时间测定、蛋白吸附实验、血小板粘附实验和兔颈动脉腔内植入实验,对其进行血液相容性评价,与裸钛合金和(或)膨体聚四氟乙烯作平行对照。结果钛合金表面聚乙烯亚胺/肝素聚电解质多层膜的体外溶血率为0.690%,该涂层可以延长活化部分凝血酶原时间到(51.33±2.87)s,减少白蛋白的吸附量,尤其减少纤维蛋白原的吸附量,并且减少血小板的粘附与激活;体内动物实验中进一步证实聚乙烯亚胺/肝素聚电解质多层膜可以有效地减少材料表面血栓的形成。结论聚乙烯亚胺/肝素聚电解质多层膜为一种新型的生物化膜,可以使钛合金的血液相容性得到显著改善,显示了静电自组装技术在医用金属表面改性领域的广泛应用前景。     

钛表面载银的硫酸乙酰肝素/壳聚糖抗菌涂层的构建

目的 研究多孔钛表面通过层层自组装技术(LBL)制备硫酸乙酰肝素(HEP)/壳聚糖(CHI)聚电解质多层膜并沉积纳米银后的抗菌性能。方法 应用LBL将带负电的HEP和带正电荷的CHI交替吸附在多孔钛表面形成聚电解质多层膜,在碱性条件下装载银离子。使用扫描电子显微镜、X射线光电子能谱仪、接触角测量仪、电感耦合等离子体发射光谱仪评价各制备表面性质,利用抑菌圈法、浊度法、活/死细菌染色法和涂布平板法评估载银聚电解质多层膜的抗菌性能。结果 材料表征手段证实聚电解质多层膜成功沉积在钛表面,且纳米银颗粒沉积在膜表面。抗菌实验显示载银修饰显著改善涂层抗菌能力。结论 通过层层自组装技术在改性钛表面制备的载银HEP-CHI聚电解质多层膜具有良好的抗菌性能。     

层层自组装壳聚糖/肝素复合涂层膜对支架血栓形成的影响

目的:观察层层自组装壳聚糖/肝素复合涂层膜对支架血栓形成的影响.方法:通过逐层自组装的方式将壳聚糖和肝素逐层结合在316L不锈钢槽内,制成不同层数的涂层膜,以凝固法测定健康人血液在聚合物膜和不锈钢上作用2 h后的部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)和凝血酶时间(TT),并检测其抗凝血功能的稳定性.制备壳聚糖/肝素复合涂层膜支架,研究复合涂层膜支架在猪动静脉分流血栓模型中对支架血栓形成的影响.结果:备组复合涂层膜APTT和TT均较316L不锈钢组极显著延长(P<0.01),并且APTT和TT延长和复合涂层膜层数增加相关.复合涂层膜在2周内上述凝血功能无显著差异(P>0.05).在猪动静脉分流血栓模型中,复合膜涂布的金属支架形成的血栓重量极显著低于316L裸支架(P<0.001).结论:层层自组装壳聚糖/肝素复合涂层膜具有极显著的抗支架血栓作用,而且具有良好的稳定性.     

壳聚糖/肝素西罗莫司药物洗脱支架对猪冠状动脉血栓形成及早期快速内皮化的作用

目的 将壳聚糖/肝素涂层膜应用于西罗莫司药物洗脱支架(DES),明确壳聚糖/肝素西罗莫司DES对猪冠状动脉血栓形成及早期快速内皮化的作用。 方法 将壳聚糖/肝素层层自组装涂层膜应用于西罗莫司DES,并采用非对称涂抹方式使支架血液面为壳聚糖/肝素涂层,而支架血管壁面为聚乳酸(PLA)-西罗莫司。实验分为裸金属支架(BMS)组、壳聚糖/肝素支架组、西罗莫司DES组和壳聚糖/肝素西罗莫司DES组,采用动静脉分流模型和高负荷血栓模型验证壳聚糖/肝素西罗莫司DES的抗血栓作用;采用为期1周的猪冠状动脉球囊损伤动物实验观察壳聚糖/肝素西罗莫司DES对早期内皮化的作用。 结果 在动静脉分流模型中,壳聚糖/肝素西罗莫司DES和壳聚糖/肝素支架表面未形成血栓,而BMS和西罗莫司DES表面覆满血栓;在高负荷血栓模型中,壳聚糖/肝素西罗莫司DES和壳聚糖/肝素支架在6 h内未出现支架内血栓,而BMS和西罗莫司DES分别在(59.0±8.5) min和(67.0±7.8) min时出现支架血栓,差异有统计学意义(P<0.01)。在猪冠状动脉球囊损伤动物模型中,壳聚糖/肝素西罗莫司DES和壳聚糖/肝素支架置入7 d后内皮覆盖率分别为(82.7±16.4)%和(80.7±14.1)%,高于 BMS和西罗莫司DES\[分别为(64.3±11.0)%和(59.8±8.4)%,P<0.01\]。 结论 壳聚糖/肝素涂层西罗莫司DES具有较好的抗血栓作用,且能够在早期促进支架内皮化。     

高效液相色谱法测定静电层层自组装载药多层膜中葛根素的载药量

[目的]建立测定静电层层自组装载药多层膜内葛根素载药量的高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)方法。[方法]多层膜浸没于十二烷基硫酸钠饱和溶液,超声崩解,崩解液冻干后甲醇定容,由HPLC法定量测定。葛根素的定量分析采用Hypersil BDS C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为甲醇-0.2%甲酸(18/82),流速1.0mL·min-1,检测波长250nm,柱温30℃,进样量为10μL。[结果]在本研究确定的色谱条件下,葛根素浓度2.0~12.0μg·mL-1范围内,葛根素浓度与出峰面积线性关系良好(r=0.9994)。以HPLC法测定静电层层自组装多层膜内葛根素载药量精密度、重复性和稳定性良好;在低、中、高三个剂量水平下的空白回收率为96.98%~102.34%。利用该方法定量测定10、15和20双层载药多层膜中葛根素的载药量,随着多层膜组装层数增加,载药量显著增大,葛根素含量分别为(1.92±0.54)μg·cm-2、(2.58±0.52)μg·cm-2和(4.23±0.77)μg·cm-2,差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]以HPLC法测定静电层层自组装多层膜内葛根素载药量,方法简便、条件温和、结果可靠,为静电组装多层膜的载药量测定提供了参考。     

多层聚电解质膜包覆的微泡超声造影剂的制备

目的制备多层聚电解质膜包覆的微泡超声造影剂,观察其对正常兔肝脏超声显影效果。方法采用声空化方法制备表面活性剂(Span60和Tween80)包裹全氟丙烷气体的超声造影剂微泡(ST68-PFC)。然后以微泡为模板粒子,用带相反电荷的聚赖氨酸(PLL)和海藻酸钠(Alg)为包膜材料,通过静电吸引层层自组装技术对微泡进行包覆和表面修饰,观察其对正常兔肝实质的造影效果。结果声空化法能够制备出粒径分布均匀的超声造影剂微泡,聚电解质有效地组装到ST68-PFC微泡表面。动物肝脏造影实验证明经过多层聚电解质膜包覆的微泡造影剂能够有效增强兔肝实质显像效果。结论经过层层自组装修饰的微泡造影剂在赋予更多功能的同时,并没有减弱其造影效果。通过选择含有氨基、羧基等基团的高分子材料作为微泡的最外层,可以方便地将特异性配体连接到微泡表面上,实现靶向目的。