心肌M2胆碱受体抗体对大鼠心房及心室肌cAMP含量的影响

目的了解心肌M     

用抗肽抗体对豚鼠心肌行M2胆碱受体分布的研究

目的：对比观察豚鼠左右心房和心室Ｍ２胆碱受体的分布位置及其特性。方法：采用Ｍ２胆碱受体自身抗体与用人Ｍ２胆碱受体肽段经免疫制备的抗受体在豚鼠心肌进行免疫组织化学研究。结果：Ｍ２胆碱受体的免疫反应阳性颗粒主要位于胞膜及周缘胞浆内;心房和心室匀存在明显的免疫阳性反应物,胆其分布密度存在有明显差异,心房免疫阳性颗粒明显多于心室;用阿托品后,心房心室细胞的免疫阳性反应产物明显降低,Ｍ２胆碱受体抗抗体和受体     

用抗肽抗体对豚鼠心肌行M2胆碱受体分布的研究

目的:对比观察豚鼠左右心房和心室M2胆碱受体的分布位置及其特性.方法:采用M2胆碱受体自身抗体与用人M2胆碱受体肽段经免疫制备的抗受体抗体在豚鼠心肌进行免疫组织化学研究.结果:M2胆碱受体的免疫反应阳性颗粒主要位于胞膜及周缘胞浆内;心房和心室肌细胞均存在明显的免疫阳性反应物,但其分布密度存在有明显差异,心房免疫阳性颗粒明显多于心室;用阿托品后,心房心室细胞的免疫阳性反应产物明显降低,M2胆碱受体抗体和受体结合的位点可部分被M2胆碱受体拮抗剂阻断.结论:豚鼠心脏M2胆碱受体主要分布于心房和心室肌细胞的表面,心房M2胆碱受体密度明显大于心室.M胆碱受体拮抗剂具有阻滞M2胆碱受体抗体和其受体结合的效应.     

兔心房和心室M_2胆碱受体分布特性的比较研究

目的 :对比观察了兔左右心房和心室M2 胆碱受体的分布位置及其特性。方法 :采用在扩张型心肌病患者新发现的心脏M2 胆碱受体自身抗体与用人M2 胆碱受体肽段经免疫制备的抗受体抗体在兔心肌进行免疫组织化学研究。结果 :①M2 胆碱受体的免疫反应阳性颗粒主要位于远离胞核的胞浆内 ;②心房和心室肌细胞均存在明显的免疫阳性反应物 ,但其分布密度存在有明显差异 ,心房免疫阳性颗粒明显多于心室 ;③用阿托品后 ,心房心室细胞的免疫阳性反应产物明显降低 ,M2 胆碱受体抗体和受体结合的位点可部分被M2 胆碱受体拮抗剂阻断。结论 :兔心脏M2 胆碱受体主要分布于心房和心室肌细胞的表面 ,心房M2 胆碱受体密度明显大于心室。M胆碱受体拮抗剂具有阻滞M2 胆碱受体抗体和其受体结合的效应     

快速起搏心房对犬心房乙酰胆碱M2受体表达和cAMP含量的影响

目的 探讨快速起搏心房对犬心脏乙酰胆碱M2受体表达和cAMP含量的影响.方法 13只犬随机分为两组.在实验组犬左心房缝合电极连接刺激仪持续快速起搏,诱发出持续性房颤,制备犬慢性房颤模型,Western blotting检测实验组和假手术组乙酰胆碱M2受体表达,放射免疫法测定心房cAMP含量.结果 实验犬在(25.2±5.2)d内均能诱发出持续超过24 h的房颤,实验组M2受体蛋白的表达明显高于假手术组(0.52±0.05vs 0.28±0.04,P相似文献   

心房肽对高血压模型鼠免疫细胞内cAMP cGMP含量的影响

本文探讨了心房肽对自发性高血压大鼠免疫细胞内cAMP、cGMP含量的影响,结果表明,尽管心房肽并不显著影响静止状态下免疫细胞内cAMP含量,但却可以降低经前列腺素E_1所增加的免疫细胞内cAMP含量;心房肽可以直接增加免疫细胞内cGMP含量。从而提示,心房肽可通过影响免疫细胞内信使分子调节免疫细胞的活性,尤其对于某些抑制因子作用下的免疫细胞的功能调节有重要意义。     

盐酸小檗碱对血管内皮M胆碱受体作用的研究

盐酸小檗碱在≤０．１μｍｏｌ／Ｌ浓度时，对乙酰胆松驰带内皮血坏的作用有剂量依赖性的增强；当浓度≥２０μｍｏｌ／Ｌ时， 带内皮备血管环具浓度依赖性的直接舒张作用，而人皮或阻断Ｍ受体后均完全被抑制。     

M胆碱受体拮抗药对慢性阻塞性肺疾病患者呼吸肌功能的影响

目的 探索COPD患者的呼吸肌和外周肌肉的功能状态,评价M胆碱受体拮抗药对呼吸肌肉功能的影响.方法 对22例COPD 患者和22例健康对照者测定静态肺功能和最大吸气压力和最大呼气压力,行运动负荷试验,以无创气体交换方法求取无氧阈.COPD患者予以异丙托溴铵气雾剂每日120μg,分3次吸入,4周后再次测定肺功能和呼吸肌力指标.结果 COPD组的PI max为4.8±2.1kPa,低于健康人组的PI max7.1±2.4kPa;PEmax 为7.2±3.9kPa,与健康人组的 PEmax7.6±3.5kPa没有差别;AT 为15.8±3.5 ml/(min·kg),低于健康人组19.6±3.1 ml/(min·kg).COPD患者吸入异丙托溴铵气雾剂4周前后FEV1分别为1.48 ±0.39L,1.61 ±0.43L;V50分别为0.88 ±0.22L/min,1.21 ±0.31L/min;PImax分别为4.8±2.1kPa,5.9 ±2.0kPa,均明显改善.结论 COPD患者不仅存在着肺部阻塞性通气功能降低,也存在呼吸肌肉和外周肌肉的功能降低,最大吸气压力PI max 和无氧阈AT可以作为康复运动设计的呼吸生理学指标.M胆碱受体拮抗药能有效改善COPD患者的肺功能和呼吸肌功能.     

Stimulatory activity of anti-peptide antibodies against the second extracellular loop of human M2 muscarinic receptors

Objective To study the activity of anti-peptide antibodies against the second extracellular loop of human M(2) muscarinic receptors on cAMP production and inward calcium currents (I(Ca)) in guinea pig ventricular myocytes.A comparison was also made with those of a muscarinic receptor agonist.Methods cAMP content was determined by radioimmunoassay and the I(Ca) in guinea pig single ventricular cells were recorded by the whole-cell patch clamp technique.Results Both the muscarinic receptor agonist, carbachol (Carb 10 μmol/L), and anti-peptide antibodies (Abs 100 nmol/L) could decrease basal cAMP levels (by 46.9%±4.2% and 60.2%±4.6%, respectively) and basal I(Ca).Both Carb (10 μmol/L) and Abs (100 nmol/L) could also inhibit the isoprenaline-induced (Iso 0.8 μmol/L) increases in cAMP production (from 108.2±7.0 to 88.4±7.2 pmol/mg·protein/min for Carb and 88.6±5.1 pmol/mg·protein/min for Abs, respectively) and the increases in I(Ca).The muscarinic receptor antagonist atropine (Atr) was able to prevent these effects of Carb and Abs.Conclusions Anti-peptide antibodies against an epitope located in the second extracellular loop of human M(2) muscarinic receptors, similar to muscarinic receptor agonist, could decrease the basal I(Ca) and β-receptor agonist stimulated increase of I(Ca) by decreasing the basal and β-receptor agonist stimulated increase of cAMP production, and therefore could have an effect on their target receptor.These results further suggest that autoimmunity may participate in the pathogenesis of human cardiomyopathy and the second extracellular loop of human M(2)muscarinic receptor could be the main immunodominant region.     

抗M2受体的抗肽段抗体对cAMP产生量和钙电流的影响

应用放射免疫分析方法及全细胞膜片钳技术研究了抗M     

M_2型毒蕈碱受体对离体跳动灌流家兔心房钠尿肽分泌的影响

[目的]建立离体跳动灌流心房模型,并探讨激活M2型毒蕈碱受体对离体跳动灌流心房钠尿肽(ANP)分泌的影响.[方法]利用急性剥离的家兔左心房和放射免疫分析方法观察M2型毒蕈碱受体对离体跳动灌流心房动力学及灌流液中ANP分泌的影响.[结果]记录到的离体跳动灌流心房模型心房内压及每搏搏出量与文献报道基本一致;卡巴胆碱明显抑制心房内压和搏出量,显著增加灌流心房ANP的分泌,此效应被M2型毒蕈碱受体抑制剂Methoctramine阻断.[结论]成功建立离体跳动灌流心房模型;M2型毒蕈碱受体的激活增加心房ANP的分泌.     

有机磷类杀虫剂对毒蕈碱乙酰胆碱M2受体磷酸化的影响

目的：研究有机磷类杀虫剂（OPs）对G蛋白结合受体激酶-2（GRK2）介导的毒蕈碱乙酰胆碱M2受体磷酸化的影响,进一步揭示有机磷类杀虫剂可能存在的其他作用途径.方法：利用亲和层析方法从猪脑中纯化毒蕈碱乙酰胆碱M2受体;将纯化的毒蕈碱乙酰胆碱M2受体,G蛋白结合受体激酶-2,[γ-p^32]标记的ATP与不同浓度的对氧磷（PO）、氧毒死蜱（CPO）共同保温,聚丙烯酰胺凝胶电泳,凝胶片干燥后放射性自显影检测M2受体磷酸化结果.之后将干燥凝胶片中放射性标记的磷酸化M2受体蛋白带剪下,同位素液体闪烁计数器计数.结果：氧毒死蜱（CPO）完全抑制毒蕈碱乙酰胆碱M2受体的磷酸化,其IC50为70 μM;毒死蜱（CPF）也抑制M2受体的磷酸化,而对氧磷（PO）与对硫磷（parathion）不抑制M2受体的磷酸化.结论：不同的OPs对GRK2介导的毒蕈碱乙酰胆碱M2受体的磷酸化有完全不同的作用;毒死蜱阻断M2受体的磷酸化,提示OPs的毒性作用存在其他的可能作用途径.     

大鼠心房与心室胆碱能神经和M2受体的分布比较

目的 探讨大鼠心房,心室以及左室游离壁3层组织胆碱能神经分布及其主要靶受体-M2受体的整体表达模式和特点。方法 实验应用Kamovsky-Roots组化染色结合点计数法,免疫组化SABC法结合图像分析技术,检测胆碱能神经和M2受体的分布,并比较各部位之间神经和受体的密度差异。结果 （1）大鼠心房和心室均有胆碱能神经和M2受体的阳性染色产物,心房的胆碱能神经点计数为心室的4．6倍,M2受体免疫阳性产物面积为心室的3倍;（2）左室游离壁3层组织分析发现：中层心肌组织胆碱能神经纤维点计数明显少于心内膜层和心外膜层：左室游离壁3层心肌组织M2受体密度无显著统计学差异。结论 大鼠心房、心室肌均有胆碱能神经和M2受体,并存在明显的密度差异：左心室游离壁3层之间胆碱能神经分布有跨室壁不均一性,而M2受体密度没有明显差异。     

放射自显影技术研究老年大鼠不同脑区M胆碱受体的变化

目的： 观察自然衰老大鼠不同脑区Ｍ 胆碱受体包括Ｍ１ 亚型受体的变化。方法： 采用放射自显影技术显示大鼠脑Ｍ 受体,并用图像分析仪进行灰度分析,以反映Ｍ 受体在不同脑区的相对定量分布。结果： 所得脑切片自显影灰度层次清晰,主要分布在大脑皮质,海马,纹状体等部位,非特异结合灰度很低,图像分析仪分别给出不同脑区的平均灰度值,老年鼠皮质,海马,纹状体部位的灰度显著低于青年鼠,Ｍ 受体分别降低２４８７ ％ ,１４１２ ％ ,１２７６ ％ （ Ｐ＜ ００５） ,Ｍ１ 亚型受体分别降低１５７８ ％ ,８６９ ％ ,１２３６ ％ （ Ｐ＜ ００１） 。结论： 以上３ 个重要脑区Ｍ 胆碱受体密度的改变可能是脑衰老的一个重要机制