青蒿素对 AECOPD 患者外周血中炎症因子及 Th17/Treg 失衡的调控

目的：通过检测青蒿素干预前后慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者外周血中 Th17细胞,Treg 细胞占 CD4+ T 细胞的比例,炎症因子 IL-6、IL-21、转化生长因子β(TGF-β)的含量,初步探讨青蒿素对 COPD 患者外周血中炎症因子和 Th17/Treg 失衡的调控机制。方法随机收集 AECOPD 20例,将其分为1640干预组和青蒿素干预组,收集同一时期肺功能正常健康体检者20例作为对照组,抽取清晨空腹静脉血,采用流式细胞术检测所有实验对象 CD4+ Th17细胞和 Treg 细胞占 CD4+ T 细胞的比例;采用 ELISA 方法检测所有实验对象血清中炎症因子 IL-6、IL-21、TGF-β的水平。结果①CD4+ Th17细胞/CD4+ T 细胞和 Th17/CD4+ Treg 细胞的比例1640干预组高于青蒿素干预组和对照组,青蒿素干预组高于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。Treg 细胞/CD4+ T 细胞的比例1640干预组则低于青蒿素干预组和对照组,青蒿素干预组低于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。炎症因子 IL-6和 IL-21的水平1640干预组高于青蒿素干预组和对照组;青蒿素干预组高于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。④炎症因子 TGF-β的水平1640干预组则低于青蒿素干预组和对照组,青蒿素干预组低于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。⑤Th17/Treg 细胞的比值与炎症因子 IL-6(r =0.095,P <0.05),IL-21(r =0.051,P <0.05)的水平呈正相关,与 TGF-β(r =-0.002,P <0.05)的水平呈负相关;炎症因子 TGF-β的水平与炎症因子 IL-6(r =-2.075,P <0.05),IL-21(r =-2.869,P <0.05)的水平呈负相关。结论 AECOPD 患者外周血中存在 Th17/Treg 的失衡,炎症因子 IL-6、IL-21、TGF-β与 Th17/Treg 的失衡密切相关,青蒿素可能能够通过下调 IL-6和 IL-21的表达,上调 TGF-β的表达来调节其失衡。     

Treg/Th17细胞在不同时期慢性阻塞性肺疾病患者中的改变及意义探讨

目的 探讨CD4+ CD25+ CD127low调节性T细胞(Treg细胞)、Th17细胞特异性分泌因子IL-17在COPD急性加重期(AECOPD)及COPD稳定期中的改变及临床意义.方法 选取住院AECOPD患者26例,随访COPD稳定期患者20例,健康对照患者15例.流式细胞仪检测患者外周血CD4+ CD25+ CD1271.wTreg细胞比例、ELISA检测外周血IL-17浓度.结果 ①AECOPD组患者外周血Treg细胞比例较COPD稳定期组、对照组均明显升高[分别为(10.319±2.154)％,(6.406±1.498)％,(6.307±1.626)％;P＜0.05],COPD稳定期组患者Treg细胞比例高于对照组但差异无统计学意义;②A ECO PD组及COPD稳定期组外周血IL-17水平较对照组明显升高[分别为(0.813±0.233) ng/L,(o.547±0.157) ng/L,(0.408±0.169) ng/L;P＜0.001],AECOPD组IL-17水平高于COPD稳定期组(P＜0.01),COPD稳定期组IL-17水平高于对照组(P=0.046);③各组Treg细胞、IL-17水平与各指标之间未见相关性.结论 Treg细胞、IL-17在AECOPD及COPD稳定期中的水平异常说明在COPD的不同时期存在着不同的炎症,Treg/Th17细胞失衡可能导致COPD的免疫紊乱和慢性炎症持续.     

慢性阻塞性肺疾病患者辅助性T细胞17/调节性T细胞变化及其与肺功能的相关性研究

目的观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者辅助性T细胞17(Th17细胞)/调节性T细胞(Treg细胞)变化,探讨其与肺功能的相关性。方法选取2013年9月—2015年9月四川省成都市西区医院收治的老年COPD稳定期患者36例作为稳定期组,COPD急性加重期患者29例作为急性加重期组;另选取同期在本院体检健康者50例作为对照组,其中吸烟者22例作为吸烟对照组,不吸烟者28例作为正常对照组。比较4组受试者外周血Th17细胞分数、Treg细胞分数、Th17细胞/Treg细胞比值,血清IL-17、IL-10水平及肺功能指标〔第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1%)、用力肺活量占预计值百分比(FVC%)及第1秒用力呼气容积与用力肺活量比值(FEV1/FVC)〕,并分析外周血Th17细胞分数、Treg细胞分数及Th17细胞/Treg细胞比值与肺功能指标的相关性。结果急性加重期组和稳定期组患者外周血Th17细胞分数、Th17细胞/Treg细胞比值及血清IL-17水平高于吸烟对照组和正常对照组,外周血Treg细胞分数及血清IL-10水平低于吸烟对照组和正常对照组(P0.05);急性加重期组患者外周血Th17细胞分数、Th17细胞/Treg细胞比值及血清IL-17水平高于稳定期组,外周血Treg细胞分数及血清IL-10水平低于稳定期组(P0.05);吸烟对照组受试者外周血Th17细胞分数、Th17细胞/Treg细胞比值高于正常对照组(P0.05)。4组受试者FVC%比较,差异无统计学意义(P0.05);急性加重期组和稳定期组患者FEV1%、FEV1/FVC低于吸烟对照组和正常对照组,急性加重期组患者FEV1%、FEV1/FVC低于稳定期组(P0.05)。Pearson相关性分析结果显示,外周血Th17细胞分数与FEV1、FEV1%/FVC呈负相关(r值分别为-0.736、-0.694,P0.05),Th17/Treg细胞比值与FEV1、FVC%、FEV1%/FVC呈负相关(r值分别为-0.892、-0.222、-0.748,P0.01),而外周血Treg细胞分数与FEV1、FVC%、FEV1%/FVC呈正相关(r值分别为0.837、0.368、0.822,P0.01)。结论 COPD患者存在Th17/Treg细胞失衡,而Th17/Treg细胞失衡与吸烟、COPD病情变化及肺功能损伤等密切相关。     

老年慢性阻塞性肺疾病患者外周血HIF-1α、IL-18、Th17和Treg的表达及与肺功能的关系

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)老年患者外周血中低氧诱导因子(HIF)-1α、白细胞介素(IL)-18、辅助性T细胞(Th)17和调节性T淋巴细胞(Treg)的表达情况及与肺功能的关系。方法随机选取COPD稳定期,且吸烟≥20年的老年(≥60岁)患者24例作为观察组,另选取门诊体检肺功能健康且吸烟≥20年的老年人20例作为对照组,肺功能正常且不吸烟的老年人30例作为健康组。采用酶联免疫法(ELISA法)检测所有老人外周血血清中HIF-1α和IL-18的水平进行,采用流式细胞术对所有老人外周血中Th17和Treg的表达进行检测。结果三组血清中HIF-1α和IL-18的水平存在显著差异(P0.05),观察组对照组健康组;三组外周血中Th17和Treg细胞的表达率(%)存在显著差异(P0.05),观察组对照组健康组;观察组和对照组外周血Th17/Treg比值显著高于健康组(P0.05),而观察组和对照组间无显著差异(P0.05);血清HIF-1α、IL-18,Th17和Treg与吸烟量呈正相关(P0.05),HIF-1α、IL-18、Th17、Treg和Th17/Treg与FEV1/预计值和FEV1/FVC均呈负相关(P0.05)。结论 COPD且吸烟的老年患者外周血中HIF-1α、IL-18、Th17和Treg水平均上升,HIF-1α、IL-18、Th17和Treg可能参与了COPD持续性炎症反应的形成,吸烟可能导致并促进炎症反应加重。     

调节性T细胞、辅助T细胞在慢性阻塞性肺疾病患者肺功能降低中的作用

目的探讨调节性T细胞(Treg)、辅助T细胞(Th)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺功能降低中的作用。方法采用肺功能仪观察COPD患者肺功能变化,采用酶联免疫吸附法检测血清γ-干扰素(IFN)、白介素(IL)-4、IL-17变化,采用流式细胞术检测外周血Treg表达。结果与正常组比较,COPD患者肺功能参数降低,6 min步行距离缩短,血清IL-4、外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg降低,而血清IFN-γ、IL-17升高(P<0.05或P<0.01)。相关分析结果显示,COPD患者Treg与IL-17呈负相关,IL-17、IFN-γ与IL-4呈负相关;Treg与IL-4呈正相关,IFN-γ与Th1/Th2、IL-17呈正相关;最大呼气流量(PEF)与IL-17呈负相关,FEV1/FVC与IFN-γ、Th1/Th2呈负相关;FEV1与IL-4、Treg呈正相关,FEV1/FVC与Treg呈正相关(P<0.05或P<0.01)。结论 COPD患者Treg表达降低,免疫抑制功能明显下降,失去对炎性细胞的抑制作用,引起Th1/Th2失衡或Th17细胞过表达,导致COPD发生和肺功能降低。     

序贯免疫疗法对乳腺癌患者血清雌激素及炎性因子的影响

目的探讨序贯免疫治疗对乳腺癌患者血清雌激素及Treg细胞与转化生长因子(TGF)-β1、白细胞介素(IL)-10的影响。方法选取乳腺癌患者100例,根据治疗方案不同分为对照组与试验组。比较两组血清雌激素及Treg细胞、CD4~+、CD8~+、TGF-β1、干扰素(IFN)-γ及IL-4、IL-6、IL-10等指标变化关系。结果试验组雌激素、TGF-β1、Treg细胞及辅助性T细胞(Th)1、Th2细胞因子水平明显低于对照组,IFN-γ及CD4~+、CD8~+水平明显高于对照组(均P<0.05)。结论序贯免疫治疗可提高机体树突细胞-细胞因子诱导杀伤细胞(DC-CIK)对肿瘤细胞杀伤作用,控制雌激素对肿瘤细胞活性刺激,降低TGF-β及Treg细胞比率,抑制自身免疫的进行,提高T淋巴细胞等免疫细胞活性,较传统治疗方案耐药性低、副作用小、临床疗效理想,可作为临床治疗的有效方案。     

外周血Th17/Treg失衡及Irisin浓度在老年慢性阻塞性肺疾病合并冠心病中的临床价值

目的 分析外周血中Irisin浓度及Th17/Treg失衡情况在老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并冠心病(CHD)中的临床价值。方法 选取老年COPD合并CHD患者110例作为病例组,并以50例健康体检者作为对照组。所有患者采用流式细胞术检测外周血中辅助型(Th)17及调节性T细胞(Treg)水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测血清中Irisin浓度,并研究其与患者肺功能参数[第1秒用力呼气量(FEV1)、用力肺活量(FVC)、FEV1/FVC、FEV1/Pred]的相关性。结果 与对照组相比,病例组FEV1、FVC、FEV1/FVC、FEV1/Pred均显著降低(P<0.001)。病例组Th17比例及Th17/Treg比值显著高于对照组(P<0.001),Treg比例及血清Irisin水平显著低于对照组(P<0.001)。Treg及Irisin水平与FEV1、FVC、FEV1/FVC、FEV1/Pred均呈正相关(P<0.05),而Th17及Th17/Treg表达水平与肺功能指标呈负相关(P<0.05),其中Th17与FVC相关性无统计学...     

Th17及调节性T细胞及相关因子在颈动脉粥样硬化发生过程中的作用及其机制

目的探讨T辅助性17(Th17)细胞及CD4+CD25+Foxp3+调节性T(Treg)细胞及相关因子在颈动脉粥样硬化(AS)患者外周血中的表达水平及Th17细胞影响AS发病的机制。方法选取2012年7月至2014年7月来该院治疗的AS患者(60例)为研究组,选取同期来该院体检的健康人群为对照组(40例),采用流式细胞术检测AS患者及正常人外周血中Th17细胞及Treg细胞水平,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测两组人群外周血中白介素(IL)-17以及转化生长因子(TGF)-β的水平;采用RT-PCR法检测两组人群外周血中转录因子RORγT及Foxp3的mRNA水平。结果 AS患者中Th17细胞比例,血清IL-17水平及外周血RORγT mRNA水平显著高于AS对照组;Treg细胞比例、血清TGF-β水平及外周血Foxp3mRNA水平显著低于对照组(P0.01)。结论 Th17细胞及相关因子可能参与促进AS的产生,Treg细胞及相关因子可能参与抑制AS的产生,阻断AS患者体内的IL-17可能作为治疗AS的潜在手段。     

COPD患者血清CRP、IL-1β、IL-17水平变化及临床意义

目的探讨CRP、IL-1β、IL-17在慢性阻塞性肺疾病发病过程中水平变化及临床意义。方法检测COPD急性期组、COPD稳定期组、健康对照组血清CRP、IL-1β、IL-17的浓度水平。结果 (1)AECOPD、COPD稳定期组、健康对照组血清CRP、IL-1β、IL-17浓度水平各组间比较差异具有统计学意义(P0.05);(2)AECOPD、COPD稳定期、健康对照组的FEV1%各组间比较差异具有统计学意义(P0.05);(3)COPD吸烟组的血清CRP、IL-1β、IL-17浓度水平较COPD不吸烟组均显著升高(P0.05);(4)急性期组及稳定期组血清IL-1β、IL-17水平呈直线正相关(r=0.685、0.419,P均0.05);(5)急性期组、稳定期组IL-1β、IL-17均与CRP呈正相关,与FEV1%呈负相关(P均0.05)。结论血清CRP、IL-1β、IL-17可能与COPD的炎症反应及疾病严重程度有关。     

扩张型心肌病患者Treg/Th17的检测及意义

目的:探讨扩张型心肌病(DCM)患者外周血中Treg/Th17的水平及意义.方法:采用流式细胞术和ELISA法检测30例DCM患者和30例健康对照组Treg/Th17的水平.结果:DCM患者较正常组,外周血Treg细胞比例明显降低,而Th17细胞比例明显增高.Treg细胞相关细胞因子(TGF-β1和IL-10)的血浆水平明显降低,而Th17相关细胞因子(IL-17,IL-6,IL-23)水平明显增加.结论:DCM患者体内Treg细胞与Th17细胞平衡发生负向偏倚.     

U94 of human herpesvirus 6 inhibits in vitro angiogenesis and lymphangiogenesis

Human herpesvirus 6 (HHV-6) is a lymphotropic virus, but recent observations showed that also vascular endothelial cells (ECs) are susceptible to infection, both in vivo and in vitro. The observation that lymph nodes are a site of viral persistence suggests that lymphatic ECs (LECs) might be even more relevant for HHV-6 biology than vascular ECs. Here, we provide evidence that HHV-6 can infect LECs in vitro and establish a latent infection. Thus HHV-6 infection induces the loss of angiogenic properties both in LECs and in vascular ECs, as shown by the inability to form capillary-like structures and to seal wound scratches. The antiangiogenic effects observed in infected cells are associated to the expression of HHV-6 U94/rep, a latency-associated gene. In fact, transfection of U94/rep or addition of recombinant U94/REP protein to ECs inhibits the formation of in vitro capillary-like structures, reduces migration of ECs, and blocks angiogenesis, rendering rat aortic rings insensitive to VEGF-induced vasculogenetic activity. The ability of U94/rep to block different angiogenetic steps may lead to approaches in the potential control of the proliferation of blood and lymphatic vessels.     

NK细胞和Treg细胞亚群在宫颈癌患者外周血中表达及临床意义

目的分析自然杀伤(NK)细胞和调节性T细胞(Treg)亚群在宫颈癌患者外周血中的表达及其与宫颈癌的关系。方法120例老年宫颈癌患者作为观察组及120例健康体检的女性作为对照组;采用流式细胞术检测患者外周血中NK细胞和Treg细胞亚群,并采用Logsitic回归分析NK细胞和Treg细胞亚群与宫颈癌的关系。结果观察组NK细胞水平明显低于对照组(P<0.05),Treg细胞水平明显高于对照组(P<0.05);不同临床分期患者NK细胞水平存在明显差异,Ⅰ期NK细胞水平最高,Ⅳ期NK细胞水平最低(P<0.05),不同临床分期患者Treg细胞水平存在明显差异,Ⅰ期Treg细胞水平最低,Ⅳ期Treg细胞水平最高(P<0.05);NK细胞及Treg细胞是影响宫颈癌分期的独立性影响因素(P<0.05)。结论在宫颈癌患者血中NK细胞呈显著低表达状态,Treg细胞呈高表达状态,且NK细胞及Treg细胞是影响宫颈癌发生及发展的独立性影响因素。     

巴曲酶对体外培养下内皮祖细胞数量及功能的影响

目的探讨巴曲酶(DF-521)对内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)数量和功能的影响。方法采用密度梯度离心法从外周血获取单个核细胞,将其接种在细胞培养板中,分为对照组、低剂量干预组(DF-5210.05BU/ml)、中剂量干预组(DF-5210.1BU/ml)和高剂量干预组(DF-5210.2BU/ml)。激光共聚焦显微镜鉴定"FITC标记的荆豆凝集素"和"DiI标记的乙酰化低密度脂蛋白"双染色阳性细胞为正在分化的EPCs,流式细胞仪检测其表面标记并进一步鉴定EPCs。MTT比色法、改良的Boyden小室及黏附能力测定EPCs的增殖、迁移和黏附能力。结果与对照组比较,不同浓度DF-521干预组均随浓度增加明显提高EPCs的数量;中剂量干预组作用24h时对EPCs的数量影响最为显著,较对照组增加近1倍(P<0.05)。DF-521对于EPCs的增殖、迁移、黏附能力也有显著的改善(P<0.05)。结论DF-521可增加体外培养条件下EPCs的数量并改善其功能。     

分娩发动后外周血及蜕膜中NK、NKT细胞的构成变化和外周血中Th细胞变化

目的探讨孕足月产妇分娩发动前后蜕膜与外周血单个核细胞中自然杀伤（NK）细胞、自然杀伤T（NKT）细胞的构成变化,并分析外周血单个核细胞产生Th1、Th2型细胞因子的变化。方法随机选取正常孕足月孕妇分为分娩发动经阴道分娩组（分娩组）32例和分娩未发动行选择性剖宫产术组（剖宫产组）34例,分离蜕膜及外周血中单个核细胞后采用流式细胞术检测NK、NKT细胞的构成变化;另检测两组外周血单个核细胞培养后Th1／Th2平衡变化。结果分娩组蜕膜中NK、NKT细胞比例均低于剖宫产组（P〈0．01）,而外周血中NK、NKT比例均高于剖宫产组（P〈0．01）。分娩组外周血中单个核细胞培养后Th1细胞比例高于剖宫产组（P〈0．01）,Th2细胞比例与剖宫产组无统计学差异（P〉0．05）。结论分娩发动后NK、NKT细胞在体内重新分布,机体存在Th1偏倚,推测母胎界面的免疫变化与分娩发动有关。     

人尿源干细胞的分离培养及体外成神经细胞分化研究

目的从正常成人尿液中分离提取间充质干细胞(MSC)来源的人尿源干细胞(hUSC),并研究比较其在不同诱导液中的体外成神经分化能力。方法提取正常成人来源hUSC,经体外培养、扩增,流式细胞术鉴定,用4种不同配方的成神经诱导液分别诱导hUSC向神经细胞分化,在诱导至第14天时,光镜下观察细胞形态改变,并用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法鉴定Nestin、S100、β3-tublin和NF-200基因表达。采用SPSS 13.0统计软件对数据进行分析。组间比较采用t检验和方差分析。结果从正常成人提取的hUSC成功表达MSC表面标志物(CD27~+、CD44~+、CD73~+、CD90~+、CD31~-、CD34~-、CD45~-、HLA-DR~-)。hUSC在B、C、D成神经诱导液中诱导培养14 d后,细胞胞体回缩饱满、折光度变强,呈现神经元样突起。相比A成神经诱导液,B、C和D成神经诱导液中细胞Nestin、S100表达水平增高,B和D成神经诱导液中细胞β3-tublin、NF-200表达水平降低。其中C成神经诱导液中细胞Nestin表达水平高于B和D成神经诱导液中的细胞,B成神经诱导液中细胞S100表达水平高于C和D成神经诱导液中细胞,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论 hUSC具备MSC特性;B、C、D成神经诱导液均有助于hUSC向神经类细胞方向分化,提示在优化诱导条件下,hUSC能向神经干细胞(NSC)及胶质细胞亚群分化。     

Structural and functional aspects of the liver and liver sinusoidal cells in relation to colon carcinoma metastasis

Nowadays, liver metastasis remains difficult to cure. When tumor cells escape and arrive in the liver sinusoids, they encounter the local defense mechanism specific to the liver. The sinusoidal cells have been widely described in physiologic conditions and in relation to metastasis during the past 30 years. This paper provides an "overview" of how these cells function in health and in diseases such as liver metastasis.     

Gastric cancer and the epoch of immunotherapy approaches

The incidence of gastric cancer(GC) fell dramatically over the last 50 years, but according to IARC-Globocan 2008, it is the third most frequent cause of cancerrelated deaths with a case fatality GC ratio higher than other common malignancies. Surgical resection is the primary curative treatment for GC though the overall 5-year survival rate remains poor(approximately 20%-25%). To improve the outcome of resectable gastric cancer, different treatment strategies have been evaluated such as adjuvant or perioperative chemotherapy. In resected gastric cancer, the addition of radiotherapy to chemotherapy does not appear to provide any additional benefit. Moreover, in metastatic patients, chemotherapy is the mainstay of palliative therapy with a median overall survival of 8-10 mo and objective response rates of merely 20%-40%. Therefore, the potential for making key beneficial progress is to investigate the GC molecular biology to realize innovative therapeutic strategies, such as specific immunotherapy. In this review, we provide a panoramic view of the different immune-based strategies used for gastric cancer treatment and the results obtained in the most significant clinical trials. In detail, firstly we describe the therapeutic approaches that utilize the monoclonal antibodies while in the second part we analyze the cell-based immunotherapies.     

祖细胞和干细胞与缺血性疾病的治疗

缺血性疾病是严重危害人类健康的疾病之一,主要包括缺血性脑血管疾病、缺血性心血管疾病、下肢缺血性疾病等。祖细胞和干细胞都是具有自我复制能力的多潜能细胞,在一定条件下,它们可以分化成多种功能细胞。根据干细胞所处的发育阶段分为胚胎干细胞和成体干细胞,虽然胚胎干细胞具有万能分化型功能,但伦理学方面的争议使其研究困难重重,而成体干细胞相较胚胎干细胞,不仅避免了伦理学方面的争议问题,而且无移植后免疫排斥反应。本文主要讨论成体干细胞和祖细胞在缺血性疾病中的应用。近年来,关于祖细胞和干细胞在缺血性疾病中应用的研究日益增多,受到了广泛的关注,为我们提供了一条治疗缺血性疾病的新思路。     

Cytotoxic T-cells and antibody-producing cells isolated from liver and spleen of immunized rats

Summary Liver, strategically positioned within the circulation system, is a major trap for circulating tumor cells. Trapping and killing of tumor cells may be mediated by Kupffer cells und natural killer cells. In addition to these spontaneously cytotoxic cells, we isolated T-killer cells and antibody-producing cells from the liver after immunization with xenogeneic cells. Since tumor surveillance may include T-killer cells and antibody-dependent killer cells, the liver is able to attack tumor cells by natural and induced cytotoxic mechanisms.