人白细胞介素1β(IL-1β)在诱导人黑色素瘤A375-S2细胞凋亡过程中的细胞周期阻滞作用和对线粒体Bcl-2家族蛋白的调节

目的研究人白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)体外诱导人黑色素瘤A375-S2细胞凋亡的机制。方法通过Hoechst33258荧光染色,观察A375-S2细胞在IL-1β作用下的形态学变化。使用琼脂糖凝胶电泳法检测IL-1β对细胞DNA降解的影响。应用流式细胞分析技术研究IL-1β对A375-S2细胞周期的影响。利用Westernβlot方法检测IL-1β对细胞线粒体内Bcl-2家族蛋白表达的调节作用。结果IL-1β(1nM)能够诱导A375-S2细胞凋亡,72h时细胞体变小,细胞核呈现固缩、断裂,并出现因凋亡引起的DNA梯状条带。IL-1β可将细胞周期阻滞在G0/G1期,并具有时间依赖性。IL-1β诱导细胞凋亡过程中,抗凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-xL的表达减少,促凋亡蛋白Bax的表达增加。结论IL-1β通过将细胞周期阻滞在G0/G1期,上调线粒体内Bax/Bcl-2和Bax/Bcl-xL的表达比例诱导A375-S2细胞凋亡。     

维生素E琥珀酸酯诱导耐药白血病K562／ADM细胞凋亡

目的：研究维生素E琥珀酸酯(Vitamin E succinate，VES）对多药耐药白血病K562／ADM细胞的诱导凋亡作用及分子机制。方珐：以体外培养的K562／ADM细胞为研究对象，采用噻唑蓝(Methyl thiazolyl tetrazolium，MTT）比色法检测细胞增殖活性，Wright-Giemsa染色、DNA凝胶电泳和流式细胞术(Flow cytometry，FCM）检测细胞凋亡；FCM测定细胞Fas，Bcl-2、P53蛋白表达水平。结果：VES可显著抑制K562／ADM细胞的生长及增殖；光镜下可见K562／ADM细胞呈典型凋亡的形态学改变；DNA凝胶电沫显示典型的凋亡DNA梯形条带，FCM细胞周期分析显示G1期阻滞，亚G1期细胞比例增高；Fas蛋白表达明显上调，Bcl-2蛋白表达下调，p53蛋白表达无明显变化。结论：VES可诱导K562／ADM细胞凋亡，作用机制可能与其上调Fas表达和下调Bcl-2表达有关。     

消瘤1号诱导MCF-7人乳腺癌细胞凋亡的研究

目的:研究中成药消瘤1号诱导MCF-7人乳腺癌细胞的凋亡作用,并通过分析其作用后MCF-7细胞Bax和Bcl-2蛋白表达的变化,探讨其诱导MCF-7细胞凋亡的分子机制。方法:采用细胞培养技术,用1、10、100、1000μg·mL-1的消瘤1号处理MCF-7细胞24h,PI染细胞,流式细胞仪测定细胞周期的变化,Western Blot法检测Bax和Bcl-2蛋白的表达。结果:流式细胞仪检测结果表明细胞阻滞在G0/G1期;Weston Blot法测定结果表明消瘤1号能够增加细胞中Bax蛋白表达,减少Bcl-2蛋白表达,且该2种蛋白的表达依赖于消瘤1号的浓度。结论:消瘤1号可通过调节Bax/Bcl-2蛋白表达的变化诱导MCF-7细胞凋亡。     

蟛蜞菊内酯对人肾癌细胞的体外生长抑制作用

目的　探讨蟛蜞菊内酯对人肾癌细胞的生长抑制作用及相关机制。 方法　采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法观察蟛蜞菊内酯对肾癌细胞活力的影响;通过流式细胞分析检测蟛蜞菊内酯对肾癌细胞凋亡和细胞周期的影响;通过免疫印迹法检测细胞凋亡和细胞周期相关蛋白的表达水平。 结果　蟛蜞菊内酯能够以剂量依赖的方式抑制肾癌细胞 ACHN 和 786-O 的生长;蟛蜞菊内酯能显著诱导肾癌细胞发生凋亡和 G0/G1 期阻滞。蟛蜞菊内酯能明显上调促凋亡蛋白 Bax 的表达,抑制抗凋亡蛋白 Bcl-2 和 Bcl-xL 的表达。此外,蟛蜞菊内酯还可抑制细胞周期相关蛋白 cyclin D1、CDK4 及 CDK6 的表达。 结论　蟛蜞菊内酯可诱导肾癌细胞凋亡并发生细胞周期阻滞,从而影响细胞活力,抑制其生长,可作为肾癌治疗的潜在药物。     

消瘤平体外诱导人白血病HL-60细胞凋亡及机制研究

目的研究消瘤平对人白血病细胞增殖的抑制及诱导凋亡的作用,揭示其抗白血病的部分作用机制。方法体外常规培养HL-60细胞,以不同浓度的消瘤平作用于细胞,MTT法检测细胞生长抑制率;流式细胞术检测凋亡率和细胞周期;ELISA法检测培养上清液中Caspase-3、Fas和Bcl-2的含量。结果与空白对照组相比,作用24 h后,消瘤平显著抑制HL-60细胞的增殖,且呈时间和剂量依赖性;提高HL-60细胞的凋亡率,并诱导出现G2-M细胞周期阻滞;消瘤平作用48 h后,Caspase-9和Fas蛋白表达量增加,Bcl-2表达减少。结论消瘤平抑制人白血病HL-60细胞的作用机制与阻滞细胞周期于G2-M期和诱导细胞凋亡有关,其诱导凋亡作用可能通过上调Caspase-9、Fas和下调Bcl-2而实现。     

姜黄素诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡

目的 研究姜黄素对人乳腺癌细胞株MCF-7细胞增殖抑制和诱导凋亡作用.方法 MTT法检测姜黄素对MCF-7细胞的增殖抑制作用;流式细胞术(FCM)PI单染检测细胞周期;Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡;Western blot法检测Bcl-2和Bax蛋白的表达.结果 姜黄素对MCF-7细胞生长有明显抑制作用,并呈剂量、时间依赖性;姜黄素能使MCF-7细胞阻滞在G1/S期,可以诱导细胞凋亡,Bax蛋白表达上调,而Bcl-2的表达减少.结论 姜黄素对人乳腺癌MCF-7细胞的增殖具有显著的抑制作用并可诱导细胞凋亡.其分子作用机制可能与其上调Bax基因表达水平的同时下调Bcl-2基因表达水平,从而诱导细胞凋亡有关.     

新型金属铜络合物对SMMC-7721细胞增殖与凋亡的影响

目的研究新型金属铜络合物(N-Cu)在体外对人肝癌SMMC-7721细胞增殖与凋亡的影响及其作用机制。方法将不同浓度的N-Cu(0.3～24μmol.L-1)作用于体外培养的SMMC-7721细胞,应用MTT法检测细胞生长抑制率,FCM法检测细胞周期及凋亡率,RT-PCR和Western blot法检测细胞中Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA和蛋白表达的变化。结果 N-Cu可明显抑制SMMC-7721细胞的增殖,呈明显的量效与时效关系。随着药物浓度的增加,G0/G1期的细胞比率上升,G2/M和S期细胞比率下降,并促进凋亡率增加。N-Cu可上调细胞中Bax、Caspase-3基因及蛋白的表达,抑制Bcl-2基因及蛋白的表达,且均呈剂量依赖性。结论一定浓度的N-Cu可抑制SMMC-7721细胞的增殖并诱导其凋亡,阻滞细胞周期于G0/G1期。上调Bax、Caspase-3基因及蛋白的表达,降低Bcl-2/Bax比值,可能是其诱导细胞凋亡的重要机制。     

胡椒碱对乳腺癌阿霉素耐药细胞株 MCF -7/ADM 细胞的逆转作用

目的：探讨胡椒碱对人乳腺癌阿霉素（ADM）耐药细胞株 MCF -7/ ADM 的逆转作用及其机制。方法采用 CCK -8法观察胡椒碱联合阿霉素（ADM）对乳腺癌耐药株 MCF -7/ ADM 细胞生长增殖的影响;应用免疫印迹技术（Western - blot）测定胡椒碱联合 ADM 对MCF -7/ ADM 细胞表面 P -糖蛋白（P - gp）表达的影响。结果60,80,100μmol / L 胡椒碱试验组细胞耐药逆转倍数分别为1.62,2.08,3.78倍,差异有统计学意义（ P ﹤0.05）。胡椒碱能显著抑制 MCF -7/ ADM 细胞膜 P - gp 蛋白的表达,其作用随浓度的增加而增强。结论胡椒碱与 ADM 共同作用于 MCF -7/ ADM 细胞,可使细胞对 ADM 的敏感性增强。胡椒碱具有部分逆转 MCF -7/ ADM 细胞耐药的作用,其逆转作用机制可能与通过下调 P - gp 的表达有关。     

吡唑啉酮衍生物镉(Ⅱ)配合物诱导食管癌细胞凋亡与Bax和Bcl-2的关系

目的 研究吡唑啉酮衍生物镉(Ⅱ)配合物(Ls-17)对人食管癌细胞(Eca-109)的凋亡诱导作用及对细胞Bax和Bcl-2蛋白表达的影响.方法 MTT法检测Ls-17对Eca-109细胞的增殖抑制作用,流式细胞术检测细胞凋亡、周期分布变化及线粒体膜电位的改变,caspase活性法检测caspase-3和9的变化,Western blot法分析Bax和Bcl-2蛋白的表达.结果 Ls-17对Eca-109细胞增殖抑制的IC50值为25.12 mg·L-1,使细胞周期阻滞在G2/M期而导致细胞凋亡;能降低线粒体膜电位水平并激活caspase-3和9,使Bax/Bcl-2的比值增大.结论 Ls-17能够抑制Eca-109细胞增殖和诱导细胞凋亡,其机制可能与下调Bcl-2的表达,使Bax/Bcl-2的比值升高有关.     

败酱草单萜环烯醚酯类对HepG2、MCF7细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨败酱草单萜环烯醚酯类（patrinia monoterpene iridoid ether esters,PMIEE）对HepG2和MCF7细胞增殖抑制和凋亡的影响。方法 HepG2和MCF7细胞经PMIEE作用后,采用CCK8法检测细胞增殖抑制情况;Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡及周期情况;细胞划痕实验检测细胞迁移状况;Western blot法检测Bcl-2、Bax、caspase3、cdc2和CyclinB1的表达情况。结果 CCK8、划痕实验和Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测显示,PMIEE对HepG2和MCF7细胞均有显著的增殖抑制、促凋亡率和降低迁移率作用（P<0.05）,呈一定量效关系,且PMIEE对HepG2细胞的周期阻滞以G2/M期为主,MCF7细胞以G0/G1期为主;Western blot结果显示,PMIEE可显著下调2种细胞Bcl-2、cdc2、CyclinB1的表达,上调Bax和caspase3的表达水平。结论 PMIEE可诱导HepG2和MCF7细胞增殖抑制和凋亡,下调Bcl-2、cdc2和CyclinB1表达及上调Bax和caspase3表达,其抗癌的潜在机制可能与此有关。