K-ras基因突变表达与结直肠癌的相关性分析

目的:探讨K-ras基因突变表达与结直肠癌的相关性。方法:采用实时荧光定量PCR方法检测89例患者结直肠癌组织中K-ras基因2号外显子12、13编码子突变情况,并结合病理资料进行分析。结果:89例患者结直肠癌组织中K-ras基因突变者为37例,突变率为41.6%。其中12编码子突变为29例,突变率为32.6%。13编码子突变为8例,突变率为9.0%。K-ras基因突变与肿瘤大小、分化程度无明显相关,与浸润深度、淋巴结转移、肝转移有相关性。淋巴结转移越多K-ras基因突变率越高,有肝转移者K-ras基因突变率高。结论:K-ras基因突变在结直肠癌的发生、发展中起重要作用,而且与浸润深度、淋巴结转移和肝转移密切相关。     

乳腺癌中P16基因改变及其生物学意义

采用聚合酶链反应——单链构象多态性分析(PCR—SSCP)法对30例乳腺癌及其癌旁组织和10例转移淋巴结标本中P16基因改变进行分析,并对P16基因改变与乳腺癌发生的年龄、病理类型及乳腺癌的分级与预后作了探讨。结果发现:①30例乳腺癌中有2例缺失,8例突变;②10例转移淋巴结标本中有6例突变;③癌旁组织中有2例突变。三者之间突变率相差显著(P<0.01);④P16基因改变与乳腺癌发生年龄、病理类型无关,与乳腺癌分级及5年生存率相关。结论:P16基因以突变、缺失方式参与乳腺癌发生发展,检测P16基因有无异常可辅助诊断病程及预后。     

结直肠癌组织中MTS1／p16基因表达检测的意义

为探讨人结直肠癌组织中MTS1/p16基因的缺失情况,利用逆转录聚合酶链反应来检测取自结直肠癌患者的60例手术切除组织标本中MTS1/p16基因的等位缺失情况,其中结直肠癌组织35例,癌旁组织15例及结直肠正常粘膜组织10例。结果显示,17.14%(6/35)的结直肠癌组织标本出现MTS1/p16基因的等位缺失,而癌旁组织及结直肠正常粘膜均未出现MTS1/p16基因的缺失。提示MTS1/p16基因的缺失在结直肠癌进展过程中可能起着一定的促进作用。     

nMSP-DHPLC检测粪便SEPT9基因甲基化及其在结直肠癌诊断中的应用

目的探讨粪便SEPT9(septin 9)基因甲基化检测在结直肠癌早期诊断中的应用价值。方法常规提取87例结直肠癌手术切除癌组织、癌旁正常结肠组织及其术前粪便DNA,应用巢式甲基化特异性PCR(nested methyl-ation specific PCR,nMSP)结合变性高效液相色谱(denatured high performance liquid chromatography,DHPLC)技术检测结直肠癌组织、癌旁组织及粪便SEPT9基因甲基化水平;比较结直肠癌组织和粪便中SEPT9甲基化检测在结直肠癌诊断中的敏感性和特异性。结果在87例结直肠癌中,癌组织SEPT9检出率为80.5%(70/87),癌旁组织检出率为8.0%(7/87),二者比较差异有统计学意义(P<0.01),特异性为91.9%;结直肠癌粪便SEPT9基因甲基化检测结果与组织检测结果基本一致。SEPT9基因甲基化与大于65岁老年患者和右半结肠癌显著相关。结论结直肠癌组织SEPT9基因甲基化异常发生率高,尤其是老年和右半结肠癌患者;粪便SEPT9基因甲基化异常可作为结直肠癌早期诊断的肿瘤标志物。     

Detection of SEPT9 gene methylation by nMSP-DHPLC in stool DNA and its employment in early diagnosis of colorectal cancer

目的 探讨粪便SEPT9(septin 9)基因甲基化检测在结直肠癌早期诊断中的应用价值.方法 常规提取87例结直肠癌手术切除癌组织、癌旁正常结肠组织及其术前粪便DNA,应用巢式甲基化特异性PCR(nested methylation specific PCR,nMSP)结合变性高效液相色谱(denatured high performance liquid chromatography,DHPLC)技术检测结直肠癌组织、癌旁组织及粪便SEPT9基因甲基化水平;比较结直肠癌组织和粪便中SEPT9甲基化检测在结直肠癌诊断中的敏感性和特异性.结果 在87例结直肠癌中,癌组织SEPT9检出率为80.5%(70/87),癌旁组织检出率为8.0%(7/87),二者比较差异有统计学意义(P<0.01),特异性为91.9%;结直肠癌粪便SEPT9基因甲基化检测结果与组织检测结果基本一致.SEPT9基因甲基化与大于65岁老年患者和右半结肠癌显著相关.结论 结直肠癌组织SEPT9基因甲基化异常发生率高,尤其是老年和右半结肠癌患者;粪便SEPT9基因甲基化异常可作为结直肠癌早期诊断的肿瘤标志物.     

乳腺癌组织PTEN基因突变的PCR-SSCP分析

目的 了解抑癌基因PTEN在乳腺癌组织中的突变频率和突变类型，探讨PTEN突变与散发性乳腺癌的关系。方法 应用聚合酶链反应一单链构象多态性分析（PCR-SSCP）方法以及DNA测序技术，扩增45例散发性乳腺癌PTEN基因的9个外显子，根据构象改变检测其基因突变情况。结果 45例乳腺癌组织中检测到1例外显子2第24位密码子由A-C的错义突变，突变使蛋白结构由甲硫氨酸突变为亮氨酸。结论 散发性乳腺癌中存在PTEN抑癌基因的突变，但突变率很低。     

结直肠癌中CD166和TSPAN-1蛋白的表达及其临床意义

目的：观察CD166和TSPAN-1基因在结直肠癌组织中的表达及与临床病理因素的关系。方法：采用免疫组化SP法检测CD166和TSPAN-1蛋白在120例结直肠癌组织、20例结肠腺瘤组织及40例癌旁正常结直肠黏膜组织中的表达。结果：CD166蛋白在正常黏膜、结直肠腺瘤、结直肠癌中阳性率分别为0、20％、55％,组间差异具有统计学意义（P〈0．01）;TSPAN-1蛋白在正常黏膜、结直肠腺瘤、结直肠癌组织中阳性率分别为5％、20％、92％,组间差异均具有统计学意义（P〈0．05）;CD166和TSPAN—1蛋白的表达与结直肠癌的组织学分级及TNM分期有关（P〈0．01）;CD166和TSPAN-1在结直肠癌组织中的表达强度呈正相关（r=0．524,P〈0．001）。二者表达完全一致率高达36．7％（44／120）。结论：CD166和TSPAN—1基因的高表达与结直肠癌的侵袭和发展有关,两者在结直肠癌的细胞增殖、浸润和转移中具有协同作用。联合检测两者的表达对于进一步理解结直肠癌的生物学行为和判断预后有一定价值。     

Survivin在结直肠腺癌、腺瘤和癌旁正常组织中的表达及临床意义

目的通过对Survivin蛋白在结直肠腺癌组织、腺瘤组织和癌旁正常组织中表达的研究,探索Survivin在结直肠腺癌发生发展过程中的表达水平。方法应用免疫组化法(immunohistochemistry,IHC)、原位杂交法(in situhybridization,ICH)检测Survivin在30例癌旁正常组织,60例结直肠腺瘤(37例伴中低度异型增生、23例伴重度异型增生),60例结直肠腺癌组织标本中的表达情况;结合临床资料分析其表达与临床病理特征间的关系。结果Survivin在癌旁正常组织、腺瘤伴中低度异型增生,腺瘤伴重度异型增生和结直肠腺癌组织中的阳性表达率分别为10.00%、13.51%、52.17%和73.34%。Survivin mRNA在癌旁正常组织、腺瘤伴中低度异型增生、腺瘤伴重度异型增生和结直肠腺癌组织中的阳性表达率分别为6.67%、10.81%、43.48%和63.33%。Survivin的表达与结直肠癌的肿瘤淋巴结转移(tumor node metastasis,TNM)分期、浸润深度、淋巴转移和肝转移具有相关性,而与患者性别、年龄、肿瘤大小、部位、分化程度和组织学类型无关。结论 Survivin在结直肠组织中不同程度的表达与结直肠黏膜癌变的发生、发展有密切关联,有望成为结直肠癌临床诊断及监测的一个特异性生物标志物。     

组织蛋白酶B与金属硫蛋白在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的探讨组织蛋白酶B(CatB)和金属硫蛋白(MT)表达与结直肠癌淋巴结和肝转移的关系。方法采用免疫组化方法检测82例结直肠癌患者原发灶、正常肠黏膜、转移淋巴结和肝转移灶组织中CatB、MT的表达,对比分析CatB、MT表达与临床分期和病理类型的关系。结果结直肠癌原发灶、正常肠黏膜、转移淋巴结和肝转移灶中CatB表达阳性率分别为48.8%、20.7%、66.7%、59.1%,MT表达阳性率分别为53.7%、26.8%、71.4%、72.7%。结直肠癌原发灶、转移淋巴结和肝转移组织中CatB、MT表达阳性率均高于正常肠黏膜组织。转移淋巴结和肝转移灶中CatB、MT表达阳性率高于癌原发灶和无转移淋巴结组织。Dukes C、D期CatB、MT表达阳性率高于Dukes A、B期(χ2=11.0244、10.9338,P<0.01)。低分化腺癌和黏液腺癌CatB、MT表达阳性率高于高分化和中分化腺癌(χ2=10.9338、10.1148,P<0.01)。结论CatB、MT表达增强与结直肠癌的浸润和淋巴结、肝转移有关,可作为评价结直肠癌患者预后的重要指标。     

DMBT1基因在结肠癌组织内的表达及其临床意义

为探讨DMBT1基因表达与结肠癌转移的关系 ,应用RT PCR的方法检测结肠癌组织及其相应癌旁正常组织内DMBT1基因的表达。结果显示 ,结肠癌组织内及其相应癌旁正常组织内DMBT1基因的表达率分别为 36 1% (13/ 36 ) ,91 7% (33/ 36 ) ;伴有淋巴结转移的癌组织DMBT1表达率 (13 0 % )均低于不伴淋巴结转移的组织 (76 9% ) (P <0 0 5 ) ;肿瘤浸润至深肌层以下DMBT1表达率降低 (P <0 0 5 ) ;Dukes分期A +B期表达率为 73 3% (11/ 15 ) ,C +D为 9 5 % (2 / 2 1) ,两者有显著差异 (P <0 0 1)。实验表明 ,DMBT1基因表达率降低与结肠癌转移存在相关性 ,提示该基因在抑制肿瘤转移中发挥重要作用     

肿瘤坏死因子受体在大肠癌中的表达及其意义

目的　探讨大肠癌组织中肿瘤坏死因子受体 (TNFR2 )表达的数目与临床病理因素及肿瘤分期间的关系。方法　用免疫组织化学SABC法检测 97例大肠癌组织、81例癌旁组织及 13例正常肠粘膜中TNFR2 的表达。结果　大肠癌组织中TNFR2 表达比癌旁组织及正常组织显著高表达 (P <0 .0 0 1) ,且癌旁组织TNFR2 表达亦显著高于正常组织 (P <0 .0 5 )。在大肠癌组织中 ,TNFR2 表达与肿瘤分化程度和浆膜浸润无关 (r =- 0 .0 91,P =0 .44 3;r =0 .10 ,P =0 .396 ) ,而与淋巴结转移呈负相关 (r =- 0 .313,P =0 .0 0 7) ,即肿瘤有淋巴结转移时TNF2 表达低。同时 ,DukeA期和B期患者TNFR2 表达显著高于DukeC期 (P <0 .0 0 1)。结论　TNFR2 检测对判断大肠癌恶性程度 ,预测肿瘤淋巴结转移趋势及肿瘤分期有重要价值     

LRP16基因在肺癌中的表达及其临床意义

目的研究肺癌组织中LRP16基因的蛋白表达水平及其临床病理意义。方法收集54例原发型肺癌患者手术切除的新鲜组织标本和部分临床病理资料,用Westernblot方法检测肿瘤组织及癌旁正常肺组织中LRP16蛋白的表达水平,并分析其与临床病理资料间的联系。以肿瘤组织LRP16蛋白的表达较癌旁正常肺组织高2倍为LRP16过表达的标准。结果54例肺癌标本中有15例LRP16过表达,过表达率约27.8%(15/54)。23例肺腺癌中有11例(47.8%)LRP16过表达,27例肺鳞癌中有4例(14.8%)LRP16过表达,二者比较差异显著(P<0.05)。在2例大细胞癌和2例小细胞癌中,LRP16均呈极低表达或未表达。肿瘤直径>3cm的10例仅2例(20.0%)LRP16过表达,直径=3cm的44例中有13例(29.5%)LRP16过表达,二者比较无显著性差异(P>0.05)。有肺门或(及)纵隔淋巴结转移的20例中有10例(50.0%)LRP16过表达,而无转移的34例中仅5例(14.7%)LRP16过表达,二者比较差异显著(P<0.05)。结论LRP16基因在肺腺癌组与鳞癌组、有淋巴结转移组与无淋巴结转移组表达均有较大差异,提示其不仅是一个肺癌相关基因,而且可能与肺癌的分子分期相关。     

EGFR和p53在结直肠癌中的表达及临床意义

目的探讨结直肠癌患者肿瘤组织中表皮生长因子受体和p53过表达与临床病理特征的关系及临床意义。方法收集2010年7月～2011年7月在我院手术切除的结直肠癌组织标本78例,采用免疫组织化学法检测癌组织中EGFR和p53的表达。分析EGFR和p53表达与结直肠癌患者各临床病理参数之间的关系。结果 EGFR和P53在结直肠癌组织中的阳性表达率分别为38.5%和71.8%,EGFR和P53双阳率为32.1%;结直肠癌组织中EGFR的阳性表达与癌组织的浸润深度、淋巴结转移及远处转移有显著相关性（P〈0.05）;p53的阳性表达与结直肠癌的分化程度、浸润深度及淋巴结转移和远处转移有显著相关性（P〈0.05）;而二者均与结直肠癌的发病年龄、性别无统计学意义上相关（P〉0.05）;EGFR和P53双阳性表达与淋巴结转移和远处转移的关系密切（P〈0.05）。结论 EGFR和P53蛋白的表达与结直肠癌的侵袭转移密切相关;联合检测EGFR和P53可作为临床判断结直肠癌预后、筛选高危转移患者的有效指标;并可以为临床提供针对EGFR和突变型p53的靶向治疗提供理论依据。     

ERCCI与BRCA1在非小细胞肺癌及癌旁组织中的表达及临床意义

目的探讨DNA修复基因ERCCI与BRCA1在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及临床意义。方法应用免疫组织化学方法检测32例肺癌,24例癌旁组织ERCCI与BRCA1的表达。结果NSCLC中ERCCI与BRCA1在癌旁组织内表达高于癌组织,且差异具有统计学意义（P〈0.05）;BRCA1在淋巴结有无转移之间表达差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论NSCLC中,ERCCI与BRCA1在癌旁组织的表达高于癌组织,BRCA1可作为判断预后的一项指标。     

食管癌ras,P^53基因突变的研究

目的通过检测食管鳞状细胞癌ｒａｓ、ｐ５３基因的突变状况,探讨基因突变在食管癌发生、发展过程中的意义及对预后的影响。方法采用银染—ＰＣＲ—ＳＳＣＰ法检测４２例食管鳞癌组织中Ｈ—ｒａｓ第１２位密码子及ｐ５３基因５、６、７、８外显子突变的状况。结果２例出现ｒａｓ基因突变。１６例出现ｐ５３基因突变（３８１％）。基因突变与癌的分化程度,淋巴结转移和预后关系密切。结论突变的ｒａｓ、ｐ５３基因可能共同参与了食管癌的发生与进展。突变的ｐ５３基因与食管癌的发展与转移有关并影响预后。     

EphB-2受体及HER-2与EGFR在结直肠癌中的表达与意义

目的探讨EphB-2受体、HER-2、EGFR的表达与结直肠癌生物学行为的关系。方法采用免疫组化染色检测86例结直肠癌组织标本中EphB-2受体、HER-2、EGFR的表达水平,以结直肠腺瘤组织标本47例作为对照。结果在癌旁无瘤黏膜、结直肠腺瘤和结直肠癌3组中,EphB-2受体的表达阳性率分别为100%（86/86）、95.7%（45/47）和83.7%（72/86）;HER-2表达阳性率分别为34.9%（30/86）、42.6%%（20/47）和74.4%（64/86）;EGFR表达阳性率分别为39.5%（34/86）、46.8%（22/47）和65.1%（56/86）,癌旁无瘤黏膜、结直肠腺瘤与结直肠癌阳性率比较差异具有统计学意义（P〈0.05）。在结直肠癌中EphB-2受体的表达与结直肠癌的分化程度、浸润深度、淋巴结转移有关,而HER-2、EGFR的表达与结直肠癌的浸润深度、淋巴结转移有关。结论 EphB-2受体、HER-2、EGFR对结直肠癌生物学行为有明显影响,可作为临床判断结直肠癌的生物学行为及预后的重要参考指标。     

结直肠癌的发生与人乳头状瘤病毒16/18的相关性研究

用原位杂交的方法对结直肠癌组织和结直肠正常粘膜组织内人乳头状瘤病毒16／18（HPV16／18）感染进行了检测，探讨HPV16／18与大肠癌的发生及组织学分化程度等的关系，结果发现，30例结直肠癌组织HPV16／18阳性者19例，阳性率为63．3％，30例结直肠正常组织HPV16／18均为阴性，两者之间比较差异非常显著（P＜0．01），HPV16／18感染和患者性别，年龄，肿块的大小，浸润深度，原发部位，组织学分化程度及是否有淋巴转移均无关。HPV16／18病毒不仅在鳞状上皮中增生繁殖，在腺上皮细胞中也能增生繁殖，并且HPV16／18感染参与了结直肠癌的发生过程。     

肺癌MMP-9和VEGF的表达及意义

目的探讨肺癌组织中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和血管内皮生长因子（VEGF）的表达及其意义。方法采用免疫组化S-P法检测20例癌旁正常肺组织、84例肺癌组织中MMP-9和VEGF的表达。结果肺癌组织MMP-9和VEGF表达显著高于癌旁正常肺组织（P〈0.01）。小细胞肺癌和腺癌MMP-9表达高于鳞癌（P〈0.01）。肺癌MMP-9表达有淋巴结转移者高于无淋巴结转移者（P〈0.01）,Ⅲ期和Ⅳ期高于Ⅰ期和Ⅱ期（P〈0.05）。肺癌VEGF表达有淋巴结转移者高于无淋巴结转移者（P〈0.05）,Ⅲ期和Ⅳ期高于Ⅰ期和Ⅱ期（P〈0.05）。肺癌MMP-9和VEGF的表达呈正相关（P〈0.05）。结论MMP-9和VEGF表达与肺癌侵袭转移密切相关。     

乙醛脱氢酶1在结直肠癌中的表达及临床意义

目的检测乙醛脱氢酶1(ALDH1)在结直肠癌中的表达,探讨其与结直肠癌临床病理特征的关系。方法收集西南医院2006-2010年送检的结直肠癌组织及正常结直肠组织标本各75例,取结直肠癌与正常结直肠组织标本各70份,采用免疫组织化学法检测其ALDH1的表达,采用Real time RT-PCR、Western blotting检测其余各5例结直肠癌及正常结直肠组织中ALDH1的表达情况。结果免疫组织化学染色表明,ALDH1主要表达于结直肠癌肿瘤细胞和正常结直肠黏膜上皮细胞的胞质内,且在正常结直肠组织的阳性表达率(83%)显著高于结直肠癌组织(37%,P=0.000)。ALDH1 mRNA在正常结直肠组织的表达水平是结直肠癌组织的1.4~17倍。Western blotting检测结果显示,ALDH1在正常结直肠组织中的表达是结直肠癌组织的1.02~3.99倍。统计分析显示,ALDH1的表达与结直肠癌患者的年龄、性别以及肿瘤部位、浸润深度、分化程度、淋巴结转移、Dukes’分期等无相关性(P>0.05)。结论 ALDH1在正常结直肠组织中的表达显著高于结直肠癌组织,其表达与结直肠癌患者的临床病理特征之间无显著相关性。     

雄激素受体对结直肠癌预后的意义

为探讨雄激素受体对结直肠癌病人的预后意义 ,作者以放射配基结合分析法测定结直肠癌及癌旁粘膜AR水平 ,结合 30例病人年龄、性别、肿瘤部位 (结、直肠 )、分化程度 (高、中、低 )、Dukes分期 (A、B、C、D)以及结直肠癌DNA及CEA水平 ,与随访结果一起纳入生存资料的Cox回归模型分析。结果显示 ,直肠癌较结肠癌预后差 (P <0 0 1)。Dukes分期与生存期呈负相关 (P <0 0 1)。结直肠癌旁粘膜AR水平与病人生存期呈正相关 (P <0 0 5 )。其他因素如性别、年龄、分化程度、癌组织AR、DNA及CEA水平与生存期不相关。提示结直肠癌旁粘膜AR水平为结直肠患者生存的保护性因素 ,具有重要的预后意义