大豆发酵制品中总异黄酮的含量测定

目的建立一种测定大豆发酵制品——淡豆豉中异黄酮类成分含量的紫外分光光度法分析方法。方法以染料木素为对照品，利用染料木素与氢氧化钠产生反应，在271nm波长处有最大吸收点，用紫外分光光度法测定淡豆豉中总异黄酮的含量。结果淡豆豉中总异黄酮的含量为9．884mg／g，加样回收率为99．3％，相对标准偏差为2．1％。结论方法简便、准确、重现性好，可作为测定淡豆豉中总异黄酮的含量的一种手段，适用于淡豆豉及其它豆制品的日常分析和质量控制。     

淡豆豉药材发酵前后活性成分的变化研究

目的对淡豆豉药材发酵前后的异黄酮苷和苷元成分、总异黄酮、纤溶酶的含量进行测定,并对其含量变化进行比较。方法采用HPLC法测定淡豆豉中大豆苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素的含量,紫外可见分光光度法测定淡豆豉中总异黄酮的含量,纤维蛋白平板法测定淡豆豉纤溶酶活力。结果原料大豆经过发酵后,大豆苷、染料木苷含量减少,大豆苷元、染料木素含量增加,总异黄酮无明显变化,黑大豆中苷元成分略高于黄大豆。发酵过程还产生一种具有溶栓作用的纤溶酶。结论淡豆豉发酵过程为结合型糖苷向游离型苷元转化的过程,同时产生原料大豆中没有纤溶酶活性,不同原料大豆的发酵,其活性成分也有差异。     

UPLC法测定中药淡豆豉中3种主要异黄酮苷元的含量

目的：建立同时测定淡豆豉中3种异黄酮苷元（大豆苷元、黄豆黄素、染料木素）的超高效液相色谱（UPLC）分析方法。方法：采用UPLC色谱系统,C18色谱柱（100mm×2．1mm,1．71xm）,乙腈-0．1％甲酸水溶液（24：76）为流动相,样品经80％甲醇提取后,用UPLC—UV进行分析检测,检测波长260nm。结果：淡豆豉中大豆苷元、黄豆黄素、染料木素在5min完全分离并进行含量测定,大豆苷元、黄豆黄素、染料木素在相应的浓度范围内呈现良好线性关系,其平均加样回收率分别为100．5％,99．06％,97．84％。结论：本方法快速、准确,灵敏度高,可用于同时测定淡豆豉中大豆苷元、黄豆黄素和染料木素的含量,为更好地评价淡豆豉药材质量提供新方法。     

正交设计优选淡豆豉中染料木素的提取工艺

目的:建立淡豆豉中染料木素最佳提取工艺方案。方法:采用正交实验方法,考察颗粒度、乙醇浓度、提取次数、提取时间对淡豆豉中染料木素提取量的影响,确定最佳提取工艺。利用染料木素与氢氧化钠产生反应,在271nm波长处有最大吸收点,用紫外分光光度法测定淡豆豉中染料木素的含量。结果:淡豆豉中染料木素最佳提取方案为A3B1C3D1,即细颗粒,70%乙醇,提取3次,每次1h。结论:该工艺简单、节约、稳定性好,可以推广应用。     

鹰嘴豆总异黄酮含量的紫外分光光度法校正测定

目的建立校正紫外分光光度法测定鹰嘴豆总异黄酮含量的方法。方法采用紫外分光光度法,以染料木素(Genistein)为标准品,测定不同比例染料木素和芒柄花素混合标准液的总异黄酮浓度以及校正前后样品的回收率,检测波长262nm和250nm。结果混合标准液中不同异黄酮含量的比例严重影响测定精确度(测定值/实际值),回归分析显示测定精确度与混合标准液在262nm和250nm处的吸光度之比呈显著线性相关,通过该相关性可校正计算混合溶液异黄酮测定值,加样回收试验表明校正前后的平均回收率分别为93.74%和97.95%。结论该校正方法简单、可靠,可显著提高鹰嘴豆总异黄酮的测定精确度。     

大豆加工品大豆黄卷和淡豆豉的质量评价

目的对不同品种大豆(黑豆、青豆、黄豆、褐豆)为原料加工的大豆黄卷和淡豆豉进行含量测定,分析大豆黄卷和淡豆豉的实验室加工品和市售品中异黄酮含量的差异,为大豆黄卷和淡豆豉的制备研究及临床用药提供科学依据。方法以不同品种大豆为原料加工大豆黄卷和淡豆豉,采用紫外分光光度法测定总黄酮含量,使用HPLC法对药材中大豆苷、大豆苷元、染料木素、染料木苷含量进行测定。采用C_(18)色谱柱(250mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-1%醋酸溶液为流动相,进行梯度洗脱,检测波长260 nm,柱温30℃,流速1.0 ml·min~(-1)。结果黄豆加工成的大豆黄卷中结合型糖苷大豆苷和染料木苷总量最大,含量范围为0.1090%～0.1431%,黑豆加工成的淡豆豉中游离型苷元大豆苷元和染料木素总量最大,含量范围为0.0937%～0.1628%。结论黄豆适宜加工成大豆黄卷,黑豆适宜加工淡豆豉,这也是市售品大豆黄卷和淡豆豉质量参差的原因。     

不同发酵条件对淡豆豉中总异黄酮含量及蛋白酶活力的影响

目的:建立淡豆豉中总异黄酮的含量测定方法,研究不同发酵条件对淡豆豉中总异黄酮及蛋白酶活力的影响。方法:采用UV法,以染料木素为标准品,在最大吸收峰261 nm处测定黑豆、自然发酵的淡豆豉、米曲霉发酵的淡豆豉、黑曲霉发酵的淡豆豉中总异黄酮含量;以福林法测定蛋白酶活力。结果:黑豆中的总异黄酮的含量为7.77mg·g~(-1),自然发酵淡豆豉总异黄酮为8.08 mg·g~(-1),米曲霉发酵淡豆豉总异黄酮为8.87 mg·g~(-1),黑曲霉发酵淡豆豉总异黄酮含量为10.99 mg·g~(-1)。平均加样回收率100.09%,100.34%,99.76%,99.87%,相对标准偏差为为1.10%,1.28%,1.22%,1.24%。酶活力测定结果为:黑豆190.7 U·g~(-1)、自然发酵淡豆豉309.4 U·g~(-1),米曲霉发酵淡豆豉474.9 U·g~(-1),黑曲霉发酵淡豆豉500.0 U·g-1。结论:UV法作为检验淡豆豉中异黄酮含量的一种手段,方法简便、准确、重现性好。单一菌种发酵淡豆豉异黄酮含量和酶活力均高于黑豆和自然发酵淡豆豉。     

21种不同产地中药淡豆豉中5种活性成分的对比

目的:对不同产地市售淡豆豉中总异黄酮、大豆皂苷、多糖、总蛋白、纤溶酶的含量进行测定,并进行聚类分析,为淡豆豉的工艺研究和质量评价应用提供科学依据。方法:采用紫外分光光度法,以染料木素为对照品,测定总异黄酮的含量,测定波长为260 nm,染料木素在0.996 4~14.946 mg·L-1呈良好线性关系;采用香草醛-高氯酸比色法,以齐墩果酸为对照品,测定大豆皂苷的含量,测定波长520 nm,齐墩果酸在2.2~11 mg·L-1呈良好线性关系;采用苯酚-硫酸比色法,以葡糖糖为对照品,测定多糖的含量,测定波长490 nm,葡糖糖在0.002 5~0.02 g·L-1呈良好线性关系;采用考马斯亮蓝法测定总蛋白的含量,测定波长595 nm;采用纤维蛋白平板法测定豆豉纤溶酶活力,以尿激酶为对照品,尿激酶在100~10 000 U·mL-1呈良好线性关系。使用SPSS 16.0以淡豆豉中5种有效成分的含量为参数组合对市售淡豆豉进行聚类分析。结果:各地市售淡豆豉主要活性成分含量有明显差异,这21种淡豆豉中总异黄酮的质量分数最低为0.518 mg·g-1,最高为4.511 mg·g-1;大豆皂苷的质量分数最低为0.873 mg·g-1,最高为8.623 mg·g-1;多糖的质量分数最低为0.28%,最高为1.81%;总蛋白的质量分数最低为4.675%,最高为36.133%;7号样品中淡豆豉无纤溶酶活性,其他有活性的产品,纤溶酶活性最低为15.49 U·g-1,活性最高为1 752.08 U·g-1。聚类分析的树状图结果与地理位置有明显的对应关系。结论:21批不同产地淡豆豉中活性成分存在明显差异。     

红车轴草总异黄酮粉剂中总异黄酮含量测定研究

目的建立红车轴草总异黄酮粉剂中总异黄酮含量的测定方法，从而对该品进行质量控制。方法采用紫外分光光度法直接测定粉剂中总异黄酮含量，测定波长为250nm。结果回归方程为：Y=0．1312X＋0．0095，相关系数r=0．9997，平均回收率为98．3％，RSD为2．06％，线性范围为1．0040～5．0200mg／ml。结论紫外分光光度法测定该粉剂中总异黄酮含量结果准确、方便、快捷、重现性好。     

淡豆豉中豆豉多糖、大豆异黄酮的超声提取及含量检测

目的:提取中药淡豆豉中大豆异黄酮和豆豉多糖,并分别检测两种活性成分的含量。方法:采用超声提取大豆异黄酮和豆豉多糖;聚酰胺薄膜层析定性、HPLC定量检测大豆异黄酮;硫酸-苯酚法显色,在紫外分光光度计下对豆豉多糖的含量进行检测。结果:实验结果表明,聚酰胺薄膜层析法最佳展开剂系统为甲醇∶醋酸∶水(18∶1∶1)。HPLC最佳流动相:甲醇∶乙酸∶水(12∶1∶10),染料木苷、大豆苷元和染料木素在20 min内分离良好。中药淡豆豉含有染料木苷1076.8μg/g、大豆苷元310.48μg/g、染料木素141.93μg/g、豆豉多糖0.91%。结论:精密度实验和加样回收实验均RSD<3%,证明检测方法及结果准确、可靠。     

淡豆豉与黑豆提取物抗癌细胞增殖作用及4种异黄酮成分的含量测定

目的:探讨淡豆豉和黑豆提取物对乳腺癌MCF-7细胞增殖的调节作用,并检测提取物中4种异黄酮成分的含量。方法:MTT法观察淡豆豉和黑豆提取物对乳腺癌细胞株MCF-7细胞增殖率的影响,Annexin/PI法流式细胞仪分析检测细胞的早期凋亡,高效液相色谱法检测淡豆豉和黑豆提取物中4种异黄酮成分大豆苷、染料木苷、大豆苷元和染料木素的含量变化。结果:淡豆豉和黑豆提取物对MCF-7细胞的增殖均有抑制作用且诱发癌细胞凋亡,但高浓度淡豆豉提取物的抑制癌细胞增殖作用明显高于黑豆(P0.05)。淡豆豉提取物中大豆苷、大豆苷元和染料木素的含量显著高于黑豆提取物(P0.01),但染料木苷的含量未见明显变化。结论:淡豆豉提取物与黑豆相比具有较强的抑制癌细胞增殖作用,淡豆豉中含量较高的异黄酮成分大豆苷、大豆苷元和染料木素,可能是其较强的抗癌细胞增殖作用的物质基础。     

淡豆豉发酵制备过程异黄酮变化规律研究

目的 基于淡豆豉的发酵过程,研究其中大豆异黄酮（SIF）类物质的变化规律。方法 采用紫外-可见分光光度法测定发酵原料中SIF类物质含量。采用高效液相色谱法同时定量原料及不同发酵阶段样品中9个SIF,以乙腈和0.1%醋酸溶液为流动相,检测波长为254 nm。结果 发酵原料马料豆中异黄酮质量分数为（3 244.41±925.57）μg·g^–1,9个SIF中苷类占99.10%,苷元占0.90%,SIF主要以丙二酰基葡萄糖苷、葡萄糖苷形式存在。经过前处理（泡、蒸）,样品中苷类占95.71%,苷元占4.29%,SIF主要以葡萄糖苷形式存在。前酵结束时,样品中苷类占52.11%,苷元占47.89%,SIF主要以葡萄糖苷和苷元形式存在。后酵阶段苷类持续减少,苷元持续增多,后酵第七天时,样品中苷类全部转化为苷元,SIF总量为（1 940.20±29.12）μg·g^–1,相较于紫外-可见分光光度法测定所得马料豆中SIF含量损失了约38%。若继续发酵,则苷元含量减少,且以染料木素减少最为明显。结论 相较于雄黑豆,马料豆更适宜用于发酵淡豆豉。发酵过程中,异黄酮苷类转化为苷元,同时伴随着苷元的破坏分解,故苷元含量表现为先升高后降低,苷类最大程度转化为苷元时,淡豆豉达到“发透”水平。《中华人民共和国药典》2020年版中淡豆豉的含量测定项标准不足以评价优劣,建议结合原料种类及发酵原理进一步优化。     

北五味子不同部位总木脂素的含量测定

目的：首次对北五味子果实、藤茎、果柄、种仁、种皮、果肉中总木脂素的含量进行测定,建立北五味子总木脂素的含量测定方法。方法：采用紫外分光光度法,在570nm波长处检测总木脂素含量。结果：在0．01～0．05mg吸光度与其总木脂素含量呈良好的线性关系,总木脂素平均回收率为98．15％,RSD：2．52％。结论北五味子不同部位中总木脂素的含量为果肉最多,藤茎最少。     

大豆与其生物发酵制品淡豆豉异黄酮含量研究

目的:探讨大豆与其生物发酵制品淡豆豉中异黄酮的含量变化。方法:大豆通过传统的发酵方法制备成淡豆豉,通过比色法测定了大豆和淡豆豉总黄酮含量;高效液相色谱法对大豆和淡豆豉中大豆黄素和染料木素含量进行测定。结果:大豆总黄酮含量0.637mg.g-1,游离苷元含量0.152mg.g-1;淡豆鼓中总黄酮含量0.731mg.g-1,游离苷元含量1.701mg.g-1。结论:大豆和淡豆豉总黄酮含量基本相当,淡豆豉中大豆异黄酮游离苷元含量是大豆中的10～40倍。     

永川豆豉中大豆异黄酮的提取工艺研究及成分分析

目的从永川豆豉中提取大豆异黄酮,并对其有效成分进行定性、定量分析。方法市售永川豆豉干燥粉碎过筛后用石油醚脱脂,分别采用醇提法、大孔树脂法、超声提取等方法进行大豆异黄酮的提取,用薄层色谱法、化学法进行定性检验,并用紫外进行定量分析。结果三种方法均可提取出大豆异黄酮;大豆黄素在250 nm处有最大吸收,含量约为0.46%;染料木素在258 nm处有最大吸收,含量约为0.41%。结论运用超声技术从豆豉中提取大豆异黄酮简便、快速并节约溶剂。     

云南地区大叶千斤拔不同种质的异黄酮含量比较

目的：建立大叶千斤拔中异黄酮含量测定方法,对比云南不同地区大叶千斤拔的药材质量,初步明确影响异黄酮含量的因素。方法：以染料木素为对照品,对紫外分光光度法测定大叶千斤拔中异黄酮的含量进行方法学考察,并用此方法测定采自云南不同地区野生及栽培的26份大叶千斤拔中异黄酮的含量。结果：采集野生样品中异黄酮的平均含量为0．990‰,其中屏边县的种质含量最高,为1．553‰,而绿春县（B）的种质含量最低,为0．652‰。分别栽培在3个地点的同一份大叶千斤拔种质,异黄酮含量有明显差异;在同一栽培条件下不同来源的大叶千斤拔种质异黄酮含量也有明显差异。结论：种质和环境因子对大叶千斤拔有效成分的积累均有影响。     

中药淡豆豉高效发酵菌株的筛选

目的：以大豆异黄酮的含量为指标,筛选淡豆豉的高效发酵茵株并进行初步鉴定.方法：将从自然发酵淡豆豉中分离出来的菌株在无菌条件下分别接种于大豆中进行纯种发酵实验,通过比较各个菌株发酵后淡豆豉中主要药效成分大豆异黄酮（染料木素和大豆黄素）的含量,筛选高效发酵菌株,并对菌株的菌落形态、菌体特征和生理生化特征进行鉴定.结果：从自然发酵淡豆豉中分离出两株高效的发酵菌株,经鉴定均为枯草芽孢杆菌.     

紫外分光光度法测定黑面神药材中总三萜类成分含量

目的：运用紫外分光光度法测定黑面神药材中总三萜类成分的含量,从而为有效控制药材质量提供依据。方法：以药材中主要成分三萜类的熊果酸为考察指标,以5％香草醛一冰乙酸及高氯酸为显色剂,采用紫外分光光度法在547nm波长处测定样品的吸光度。结果：总三萜类成分在8．28～49．68μg范围内呈良好线性关系,其回归方程为Y=10．507X＋0．0077,r=0．9995,黑面神中总三萜类成分的含量约为3．89％。结论：紫外分光光度法适合黑面神药材中总三萜类成分的含量测定,该方法操作简便,结果稳定,重现性好。     

紫外分光光度法测定黄芩中总黄酮含量

目的:建立一种测定黄芩中总黄酮类成分含量的分析方法。方法:以黄芩中的活性成分黄芩苷为标准品,在其紫外最大吸收峰278 nm处测定样品中总黄酮的含量。结果:用紫外分光光度法在278 nm处对试样中总黄酮进行含量测定。生药中总黄酮的含量以黄芩苷计算为13.7%,相对标准偏差为1.3%。平均加样回收率为100.9%。结论:方法简便,重现性好,可作为检验黄芩中总黄酮的含量的一种手段,适用于黄芩药材及其制剂的日常分析和质量控制。     

细菌型淡豆豉发酵底物及前酵、后酵工艺研究

目的:研究细菌型淡豆豉发酵底物及前酵、后酵工艺。方法:分别以黄豆和黑豆为底物,以枯草芽孢杆菌为发酵菌种,以4种异黄酮成分的含量为指标考察淡豆豉前酵和后酵工艺。结果:以黄豆和黑豆为底物前酵过程都出现大豆苷和染料木苷的含量下降,大豆苷元和染料木素含量上升的结果,后酵样品中除黄豆后酵组大豆苷元的含量继续升高外,其他异黄酮成分的含量均有不同程度的下降;发酵后黄豆组结合型糖苷含量低于黑豆组,苷元含量则高于黑豆组。结论:从结合型糖苷的降解和苷元的转化角度分析,生产细菌型淡豆豉不需要后酵过程,以黄豆为底物优于黑豆。