褪黑激素对小鼠睾丸生精细胞凋亡和睾丸间质细胞nNOS表达的影响

目的：观察外源性褪黑激素(MT)对睾丸生精细胞凋亡和nNOS表达的影响，探讨MT诱导生精细胞凋亡的可能机制。方法：20d和30d小鼠，应用化学发光法检测血清睾酮浓度，TUNEL测定生精细胞凋亡，免疫组化，SABC法观察nNOS在睾丸中的表达。结果：20d和30d实验组血清中睾酮水平明显下降，TUNEL阳性生精细胞数显著增多，TUNEL阳性生精细胞数与睾酮浓度呈负相关；20d实验小鼠中睾丸间质nNOS阳性细胞数与对照组相比明显减少，且与睾酮浓度呈正相关，而与TUNEL阳性生精细胞数呈负相关。结论：MT具有促进生精细胞凋亡的作用，与睾酮分泌受抑制有关；青春期前MT引起生精细胞凋亡可能还与nNOS表达有关。     

睾丸波形蛋白表达与生精细胞凋亡的关系

睾丸的生精上皮具有高度增殖能力,生精过程中细胞增殖与凋亡的动态平衡,对于维持精子的生成的数量和质量具有重要的作用。外来化学毒物可以直接引起睾丸损伤,导致生精细胞过量凋亡,从而导致精子生成减少。生精细胞凋亡时细胞骨架蛋白改变的研究成为一个热点,睾丸波形蛋白表达发生了异常改变,但睾丸波形蛋白表达与生精细胞凋亡的相关性还需进一步研究。     

生精细胞凋亡及其调控

在细胞生物学领域,细胞凋亡的实现调控着细胞死亡和增殖的平衡,故具有重要的生物学意义。生精细胞的凋亡在生精过程中具有极其重要的作用。近年来,睾丸内细胞凋亡的研究在国内外已成为热点之一。本文将就生精细胞凋亡的的阶段性、生理意义、形态特点、激素调节、基因调控等诸多方面的研究概况作一综述。     

细胞凋亡与生殖

关于细胞凋亡的一般特点及细胞凋亡与疾病的关系,作者已有综述［１,２］,本文就细胞凋亡与生殖的关系作一综述。１细胞凋亡是生殖调节的机制之一。精原细胞是具有高度增殖能力的细胞,精原细胞不断分裂繁殖,再经两次成熟分裂,最后经变态成为精子。在这一过程中又不断有生精细胞的退化死亡。睾丸中多达７５％的生精细胞要凋亡,这或许是清除多余的或有缺陷的生殖细胞的一种机制［３］。睾丸就是通过精原细胞不断地分裂、分化,同时过量的生精细胞又不断地凋亡,调节精子发生。Ｈｉｋｉｍ等［４］报告人生精细胞的凋亡有种族差异,中国人…     

谷胱甘肽对染锰大鼠生精细胞凋亡与增殖的影响

目的:研究谷胱甘肽(GSH)对染锰大鼠生精细胞凋亡与增殖的作用及机制。方法:雄性SD大鼠48只随机分为6组,各组给锰途径为腹腔注射。采用TUNEL法检测生精细胞凋亡指数(AI);免疫组织化学法检测生精细胞增殖细胞核抗原(PCNA)表达。结果:与空白对照组比较,GSH对照组和15mg/kg GSH组生精细胞AI与生精细胞PCNA增殖指数(PI)均无显著性差异;与各自对应的单纯染锰组比较,15mg/kg GSH组和30mg/kg GSH组生精细胞AI均显著降低而PI均显著升高;30mg/kg组与15mg/kg组比较,生精细胞AI显著升高而PI显著降低;各组大鼠生精细胞AI和PI呈负相关。结论:15mg/kg和30mg/kg氯化锰可诱发大鼠睾丸生精细胞凋亡,两者存在剂量-效应关系;各组大鼠睾丸生精细胞AI和PI呈显著负相关;GSH对锰诱发大鼠生精细胞凋亡具有拮抗作用;GSH可能拮抗锰对大鼠生精细胞增殖的抑制作用。     

凋亡生精细胞的观察

用瑞－姬法观察凋亡生精细胞的各种形态，即凋亡的初级精母细胞、次级精母细胞、精子细胞，并观察了凋亡的前列腺上皮细胞的形态，就生精细胞凋亡原因进行了分析。     

N-硝基-L-精氨酸甲酯对大鼠隐睾生精细胞凋亡的影响

目的：研究N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)对实验性大鼠隐睾生精细胞凋亡的影响及其作用机制。方法：手术建立大鼠单侧隐睾模型，术后分别注射L-NAME及生理盐水，7d后采用流式细胞术检测2组大鼠隐睾生精细胞凋亡，免疫组化法检测隐睾内Bcl-2和Bax基因表达变化。结果：实验组隐睾重量较对侧正常睾丸重量减轻的程度低于对照组，生精细胞凋亡百分比及Bax表达较对照组低，而Bcl-2表达较对照组高。结论：L-NAME可通过调控Bcl-2和Bax的表达抑制隐睾导致的生精细胞凋亡。     

整合素α_5、β_1抗体对睾丸生精细胞凋亡的影响

目的观察整合素α_5、β_1抗体体内干预试验对Wistar大鼠睾丸生精细胞凋亡的作用。方法腹腔内注射α_5、β_1抗体,采用原位末端脱氧核糖核酸转移酶标记技术,分析Wistar大鼠生精细胞凋亡情况。结果α_5、β_1试验组大鼠睾丸生精细胞明显减少(P0.001)。结论α_5、β_1抗体具有阻止Wistar大鼠生精细胞凋亡的作用。     

衰老大鼠睾丸生精细胞增殖凋亡及相关因素的变化

目的:观察衰老大鼠睾丸生精细胞增殖、凋亡及相关因素的变化。方法:D-半乳糖连续腹腔注射制作亚急性衰老的大鼠模型。SP免疫组织化学法观察睾丸生精细胞衰老过程中增殖细胞核抗原(PCNA)和端粒酶的表达,TUNEL法观察生精细胞的凋亡,原位杂交、Western印迹分析观察生精细胞p53基因的表达。结果:与正常大鼠相比,衰老大鼠睾丸PCNA阳性细胞率显著下降,端粒酶阳性细胞数明显减少,凋亡管数和凋亡阳性细胞率显著升高,p53 mRNA阳性细胞率和p53蛋白含量均有所升高。结论:衰老大鼠睾丸生精细胞增殖能力下降、凋亡增多,睾丸机能减退。     

砷染毒对大鼠睾丸凋亡诱导因子表达及生精细胞凋亡的影响

目的:探讨砷染毒对大鼠睾丸凋亡诱导因子(AIF)表达及生精细胞凋亡的影响。方法:雄性SD大鼠被随机分为对照组和染砷组。采用自由饮用方式进行连续染毒6个月。采用免疫印迹及实时荧光定量PCR检测AIF表达水平;采用TUNEL法观察生精细胞凋亡的情况。结果:免疫印迹及实时荧光定量PCR结果显示,与对照组比较,染砷组大鼠睾丸内AIF蛋白及mRNA表达水平均显著增高。TUNEL法检测结果显示与对照组比较,染砷组生精上皮凋亡细胞平均灰度值显著增高。结论:砷染毒时AIF介导的非caspase依赖性凋亡途径可能参与了大鼠生精细胞凋亡。