实时荧光定量PCR技术检测患儿手足口病病原体

目的采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）技术检测患儿手足口病原体,以了解本地该病病毒流行特征,为防治手足口病提供病原学诊断依据。方法收集手足口病疑似病例65例（按年龄组分为小于3岁组39例,3~6岁组26例）患儿的咽拭子、疱疹液,用FQ-PCR技术检测标本中肠道病毒通用型（EV）、肠道病毒71型（EV71）及柯萨奇病毒A组16型（CoxA16）,并与ELISA法进行比较。结果 65例手足口病患儿疑似组FQ-PCR检出EV阳性51例,阳性率为78.5%,其中小于3岁34例,3~6岁阳性17例,小于3岁组EV检出率明显高于3~6岁组（P〈0.05）;EV71阳性45例,COXA16阳性16例;咽拭子标本阳性率为72.3%（47/65）;疱疹液标本阳性率为81.25%（13/16）;ELISA法检测EV阳性29例,阳性率为44.6%（29/65）,CoxA16阳性22例,阳性率为33.8%（22/65）。结论采用FQ-PCR技术进行手足口病病原体检测有助于早期、快速的对手足口病做出病原学诊断。2012年安康地区手足口病病原体以EV71为主,CoxA16次之。     

咸阳市2012年手足口病病原学监测结果分析

目的：分析咸阳市手足口病病原体构成特征的变迁,为手足口病防控提供科学依据。方法对2012年咸阳市手足口病病例资料及咽拭子标本检测结果进行分析。结果共送检手足口病病例咽拭子标本549份,检出肠道病毒（EV ）阳性标本126份,阳性检出率为22．95％,其中 EV71阳性77份（占61．11％）、柯萨奇病毒 A组（CoxA）16型（CoxA16）阳性10份（占7．94％）、CoxA10阳性9份（占7．14％）、其他未分型 EV 阳性30份（占23．81％）,未检出CoxA6阳性标本。不同病情病例EV71阳性检出率比较差异有统计学意义（P＜0．05）。发病高峰期及非高峰期送检标本阳性检出率比较差异有统计学意义（P＜0．05）。不同试剂阳性检出率比较差异无统计学意义（P＞0．05）。结论咸阳市2012年手足口病病原体以EV71型为主,首次检出CoxA10。重症病例EV71阳性检出率高于普通病例。在手足口病发病高峰期采样,可以提高EV阳性检出率。     

2012～2013年杭州市萧山区手足口病病原谱及临床特征分析

目的：了解杭州市萧山区手足口病（H FM D ）病原谱及临床特征。方法采用荧光定量反转录聚合酶链反应,对2012年5月至2013年7月就诊的208例H FM D疑似患儿咽拭子标本（45份）和粪便标本（208份）进行病原体检测,结合患儿临床资料分析检测结果。结果208例患儿中,肠道病毒（EV ）检出率为83．17％,其中EV71、柯萨奇病毒A16（CoxA16）和其他EV亚型所占比例分别为55．49％、13．29％和31．21％;男、女性患儿EV检出率比较差异无统计学意义（P＞0．05）。5岁及其以下患儿以EV71感染为主,5岁以上患儿以其他EV亚型感染为主。HFMD患儿临床症状主要为发热伴疱疹,各种类型临床症状患儿均以EV71感染为主。粪便标本EV检出率高于咽拭子标本（P＜0．05）。结论 EV71和其他EV亚型是该地区 HFMD患儿常见病原体,CoxA16感染流行趋势有所下降。加强EV、EV71和CoxA16检测有助于 HFMD的预防和控制。     

2013-2016年柳州市手足口病病原监测结果分析

目的 掌握柳州市2013-2016年手足口病病原学流行特征及病原谱变化情况,为制定柳州市手足口病预防控制措施提供科学依据.方法 收集柳州市2013-2016年医院和县级疾病预防控制中心送检的手足口病病例咽拭子、肛拭子及疱疹液标本,应用实时荧光定量-聚合酶链反应(real-time PCR) 技术对标本中的肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16 型(CoxA16)及非EV71和CoxA16的其他肠道病毒(EV)进行核酸检测.结果 2013-2016年共收集临床诊断手足口病病例标本3 503份,实验室确诊EV阳性标本2 720份;2013-2016年柳州市每年手足口病主要病原体均有变化,除EV71和CoxA16外,还存在着较高比例的EV;手足口病发病有明显季节性,主要集中在每年3-9月;5岁以下儿童为主要发病的人群,其中1～3岁儿童发病最多,男性发病例数高于女性;EV71为引起重症及死亡手足口病的主要病原体,死亡病例未见CoxA16.结论 EV是引起柳州市2013-2016年手足口病流行的主要病原体,但每年病原谱在不断变化,EV71是引起重症及死亡手足口病的主要病原体.     

山东省枣庄市2015年手足口病病原学分析

目的：分析手足口病病原谱变化,为防控提供科学依据。方法：自2015年1月至12月采集山东省枣庄市妇幼保健院临床诊断为手足口病病例的咽拭予进行其他型、EV71、CoxA16等肠道病毒核酸检测。结果：900例被检测患儿中868例为肠道病毒阳性,阳性率为96．44％,其中其他型肠道病毒感染率最高,占67．44％。EV71、CoxA16检出率分别为：18．78％,10．22％。肠道病毒阳性病例主要集中在5岁以下儿童,占98．22％。结论：2015年5-6月为枣庄市手足口病高发时间,引起手足口病的主要病原是其他型别肠道病毒。     

2008-2011年辽宁省锦州市手足口病病原监测结果分析

目的 了解辽宁省锦州地区手足口病的病原学特征及变化趋势,为手足口病防治工作提供参考依据。 方法 日常监测工作中收集2008-2011年锦州地区294例手足口病临床确诊患儿的330份样本检测结果,其中咽拭子274份,粪便标本56份,进行病原学检测。 结果 294例被检测患儿中246例为肠道病毒阳性,阳性率为83.67％,其中肠道病毒71型(EV71)阳性率30.61%,柯萨奇A组16型(Cox A16)阳性率32.31%,EV71、Cox A16混合感染阳性率0.34%,其他肠道病毒阳性率20.41%。330份标本中咽拭子阳性率82.12％(225／274),粪便阳性率71.43%(40/56)。2008-2011年病例的咽拭及粪便标本采用不同检测方法、不同试剂的阳性检出率差异无统计学意义(P﹥0.05)。 结论 锦州市儿童手足口病病原体以EV71和Cox A16为主,每年略有不同,近年其他肠道病毒感染率逐年增高。手足口病患者的咽拭和粪便标本的阳性检出率无差异。     

实时荧光聚合酶链反应检测患儿手足口病病原体

目的采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测患儿手足口病病原体,为防治手足口病提供依据。方法收集手足口病疑似患儿189例(按年龄分为<3岁组113例、3～5岁组76例)及39例手足口病密切接触儿童的咽拭子、疱疹液,用FQ-PCR检测标本中的肠道病毒通用型(EV)、肠道病毒71型(EV71)及柯萨奇病毒A组16型(CoxA16),并与酶联免疫吸附试验(ELISA)结果进行比对。结果 189例手足口病患儿疑似组FQ-PCR检测EV阳性141例,阳性率为74.6%,其中<3岁阳性91例、3～5岁阳性50例,3～5岁组EV检出率明显低于<3岁组(P<0.05);EV71阳性135例,CoxA16阳性65例;咽拭子标本阳性率为74.5%(120/161),疮疹液标本阳性率为82.1%(23/28);ELISA检测EV阳性76例(40.2%);39例手足口病密切接触者FQ-PCR检测EV阳性率为33.3%(13/39),ELISA检测阳性率为17.9%(7/39)。结论 FQ-PCR是一种特异性强、灵敏度高、检测较快速、效率高的方法,对检测手足口病病原体及进行相关流行病调研有重要价值。     

内江地区手足口病肠道病毒核酸检测及流行特征分析

目的分析内江地区2014年1月至2015年12月手足口病的病原学特征,为手足口病的预防控制提供病原学依据。方法选取2014年1月至2015年12月临床疑似手足口病685例作为研究对象。采集疑似手足口病患儿发病1周内的疱疹液、咽拭子或肛拭子标本,用实时荧光RT-PCR进行肠道病毒通用型(EV)、柯萨奇病毒A组16型(CoxA16)和肠道病毒71型(EV71)核酸扩增,并分析患儿性别、年龄以及近2年流行时间的分布。结果 685例疑似手足口病中,肠道病毒阳性599例,检出率87.45%(599/685),其中EV71型、CoxA16型、肠道病毒其他型分别占肠道病毒感染阳性的16.53%(99/599)、12.35%(74/599)和71.12%(426/599)。EV71与CoxA16型手足口病的患儿以0~4岁儿童为主,性别差异无统计学意义(P0.05);4-7月与10-11月为该地2个发病高峰。结论对内江地区类似手足口病症状的儿童进行病原学检测,及早发现并治疗,有利于疫情控制及应对突发事件,是降低手足口病死亡率的关键。     

2012年杭州地区手足口病病原体流行特征分析及临床意义

目的对2012年4月至9月手足口病（HFMD）流行期间对449例HFMD患儿的临床特点及病原学流行特征进行分析,旨在为手足口病的防治工作提供依据.方法收集449例手足口病患儿资料,用荧光定量RT-PCR法进行肠道病毒通用型、肠道病毒71型（EV71）和柯萨奇病毒A组16型（CA16）定量分型.结果449例HFMD临床诊断病例中,肠道病毒通用型阳性数为331例,包含203例EV71型和109例CA16型,肠道病毒总阳性率为69.5%（331/476）,其中EV71占42.6%（203/476）,CA16占22.9%（109/476）,EV71/CA16两者兼有者占3.8%（18/476）,非EV71、CA16的其他肠道病毒占4.6%（22/476）.2012年送检标本中EV71与CA16检出率的差异无统计学意义（χ^2=1.432,P=0.231）.结论2012年HFMD患儿以EV71型和CAl6型流行为主.而重症手足口病多发生于年龄〈3岁的儿童,且重症患儿基本为EV71型感染.故小年龄组HFMD患儿应成为HFMD流行期间重点监测对象,并给予积极治疗,以防止成为重症HFMD患儿,从而降低重症HFMD病死率.     

248例手足口病病原体检测结果分析

目的：对2012年3～6月珠海市妇幼保健院248例手足口病病例进行病原体检测和分析。方法收集临床诊断为手足口病病例的标本248份,先用通用引物实时荧光PCR扩增肠道病毒作为初筛手段,然后分别使用EV71和CoxA16型特异性引物对初筛阳性标本进行分类检测并结合临床资料进行综合分析。结果在上述标本中检出肠道病毒215例（阳性率为86．7％）,其中EV71阳性病例为89例,CoxA16阳性病例为48例,分别占肠道病毒阳性病例的41．4％（89／215）、22．3％（48／215）。3岁以下儿童感染率为87．9％（189／215）,重症病例EV71阳性检出率为73．9％（17／23）。EV71和CoxA16阳性检出率与儿童患者的性别无关（P＞0．05）。结论儿童感染手足口病病原体以EV71为主,CoxA16次之,前者易致儿童重症手足口病。3岁以下儿童是该病的高危人群。     

韶关市1190例手足口病病原体检测结果分析

目的分析韶关地区手足口病病原体分布情况。方法收集2011年1月～12月的1190例手足口病患者的咽拭子,采用实时荧光PCR方法检测肠道病毒71型（EV71）和柯萨奇病毒A组16型（CoxAl6）。结果在1190份标本中病毒核酸阳性率为11．51％（137／1190）,其中Ev71占60．58％（83／137）,CoxAl6占39．42％（54／137）;6月份高发,占29．08％（346／1190）;男女比例为1．64：1,且0～4岁的患儿占93．11％。结论韶关地区2011年手足口病病原体以Ev71为主,6月份高发,主要分布在0-4岁,男性多于女性,实时荧光PCR可用于手足口病病原体的检测,对手足口病的诊疗和防控具有重兽膏义。     

手足口病患儿机体免疫功能临床研究

目的：探讨手足口病（HFMD）患儿机体免疫功能的变化。方法将236例HFMD患儿分为3组,肠道病毒71型（EV71）感染组（EV71组）99例,柯萨奇病毒A组16型感染110例（CoxA16组）,有严重合并症的患儿27例纳入重症组。另将24例疝气患儿纳入对照组。检测并比较患儿外周血各类淋巴细胞亚群百分比的差异。结果HFMD患儿CD3^＋、CD3^＋CD4^＋亚群百分比较对照组下降,且重症患儿更为明显（P＜0．05）。CD3^＋ CD8^＋亚群百分比仅重症组低于对照组（P＜0．05）。重症组CD3^-CD16^＋ CD56^＋亚群百分比较EV71组、CoxA16组和对照组升高（P＜0．05）。HFMD患儿CD3^-CD19^＋、CD19^＋CD23^＋亚群百分比高于对照组,且EV71组升高更明显（P＜0．05）。HFMD患儿CD4^＋CD25^＋ T亚群百分比高于对照组（P＜0．05）。结论 HFMD患儿存在不同程度的免疫功能紊乱;CD3^＋、CD3^＋CD8^＋和CD3^-CD16^＋CD56^＋亚群百分比检测可用于监测HFMD患儿病情。     

436例手足口病监测病例病原检测结果分析

目的 对江西省赣州市2012年的手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)监测病例进行病原检测分析,为制定疾病预防控制措施提供实验室参数.方法 采用Real Time RT-PCR法进行肠道病毒通用核酸(PE)、柯萨奇病毒A组16型(CoxA16)和肠道病毒71型(EV71)特异性核酸检测.并统计HFMD的感染类型及其年龄、性别、地域及发病季节分布情况.结果 疱疹液、肛拭子、咽拭子的HFMD的检出率分别为100.00％、86.31％、73.80％,三者差异有统计学意义(x2=21.48,P＜0.01).咽拭子、肛拭子和疱疹液对EV71和CoxA16基因型总检出率分别为52.67％、58.66％和86.67％,三者差异有统计学意义(x2=8.33,P＜0.05).HFMD监测病例数轻型感染占82.83％、重型感染占15.54％,以EV71感染为主(44.92％).4岁及以下病例占90.49％(390/431);男女比例2.11∶1(296/140);发病地域居于前三位的依次为南康市(14.22％)、赣县(13.76％)和寻乌县(12.84％)；在5月和10月份发病最多(均为14.51％,62/427),其次为9月份(13.58％,58/427).结论 2012年赣州地区儿童HFMD监测病例以EV71感染为主,且多为轻型,南康市、赣县和寻乌县所占比例较高.     

广西壮族自治区南宁市50例非手足口病幼儿肠道病毒感染状况分析

目的了解肠道病毒在非手足口病幼儿中的感染情况,为预防控制手足口病在儿童中的流行提供依据。方法采用实时荧光定量PCR方法,对50例≤3岁儿童的肛拭子标本共50份进行肠道病毒、肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A16型(CoxA16)核酸检测。结果共检出17份肠道病毒核酸阳性,阳性率为34%,均为其他肠道病毒。结论健康儿童中存在其他肠道病毒的隐性感染。开展手足口病流行病学和病原学研究,将有助于提出更好的预防和控制措施。     

2010年湖北省襄阳市手足口病病原学监测结果分析

目的 了解2010年湖北省襄阳市手足口病各主要病原的流行趋势,为制定2011年的手足口病预防控制措施提供实验依据.方法 应用荧光RT-PCR对392份手足口病例标本进行检测.结果 襄阳市手足口病的发病年龄集中在1～3岁;男童明显多于女童;3-5月,襄阳市有一个手足口病的流行高峰.手足口病的病原体有从Cox A16...