胃癌细胞株hTERT基因启动子区甲基化分析

目的检测人端粒酶反转录酶(hTERT)基因启动子区甲基化状态。方法采用TRAP法检测细胞端粒酶活性,免疫荧光法观察hTERT表达;选择hTERT启动子中-692～-403bp共290bp为靶序列,采取亚硫酸氢钠修饰和测序法(BSP)检测2种胃癌细胞株中靶序列甲基化状态并作分析。结果端粒酶和hTERT在SGC-7901和BGC-823胃癌细胞株中都有表达;PCR扩增产物测序测出-634～-403bp共232bp,经比对与亚硫酸氢钠转化前源序列对应良好,此序列段26个CpG胞嘧啶中,BGC-823细胞株有25个发生甲基化,SGC-7901细胞株全部发生甲基化,经检索此序列段含2个MZF-2结合域即2个锌指基序,但仅可结合MZF-2一个转录调节因子。结论高甲基化改变了DNA的空间结构可能是hTERT启动子高甲基化上调hTERT表达的原因之一,从而阻断了MZF-2与锌指基序的结合。     

16S rRNA全基因序列分析鉴定我国南方蜱中单核细胞埃立克体

目的 :测定蜱中单核细胞埃立克体的 16SrRNA全基因序列 ,鉴定病原菌。方法 :应用从16SrRNA基因构建的特异和通用引物进行PCR ,从越原蜱标本中分段扩增查菲埃立克体DNA ,进行克隆和序列测定 ;将其连成完整序列与埃立克体族中其他微生物进行同源性比较 ,并以相等数量定位碱基的核苷酸序列进行遗传发育分析。结果 :测定序列全长 146 3bp ,与美国查菲埃立克体分离株的 16SrRNA基因序列相差 6个核苷酸 ,同源性为 99.6 % ,遗传发育分析两者无明显差异 ;与犬埃立克体、尤氏埃立克体、小鼠埃立克体的同源性为 97.5%～ 98.0 % ,属于同一个基因群 ;与其他埃立克体种的同源性为 83.0 %～ 92 .9%。结论 :首次报道了我国南方蜱中埃立克体的 16SrRNA全序列 ,确定了其分类位置 ,为进一步开展疫源地调查奠定了基础     

西安地区TTV毒株分子结构特点的初步研究

目的 :研究西安地区TTV(Transfusiontransmittedvirus)基因组结构是否为环状 ;对西安地区TTVDNA部分序列直接测序分析 ,比较其与中国 1株同源性。方法 :自行在TTV基因组首尾端设计一套环形检测引物 ,检测西安地区肝炎患者TTVDNA阳性血清 ,有无特异性片段。参照文献设计一套套式检测引物 ,内引物扩增片段长为 197bp ,将 197bp处特异性条带从低熔点凝胶中切下 ,纯化后以自带引物直接测序法测序 ,测得的 143bp序列与Genebank注册的BDH1同源性比较。结果 :环形引物套式PCR扩增在 30 0bp处出现特异性条带 ,提示西安地区TTV毒株可能首尾相连。西安地区TTV毒株与BDH1同源性为 6 5 .0 % ,差异率 35 .0 % (>30 % ) ;143bp中的 6 2bp序列与BDH1同源性达 75 .8%。结论 :西安地区TTVDNA结构可能有环形株存在 ,西安地区可能存在新的TTV基因型     

鼠疫耶尔森菌菌株91001全基因组序列测定及初步分析

目的 测定对人不致病的鼠疫耶尔森菌布氏田鼠疫源地菌株91001的全基因组序列,并通过比较基因组学研究,探索鼠疫耶尔森菌致病性的遗传学机制和进化路线。方法 采用全基因组鸟枪法测定91001菌株的全基因组序列,利用比较基因组方法对91001与另外2株鼠疫耶尔森菌(CO92和KIM)的全基因组进行比较研究。结果 91001菌株的基因组包括1条染色体和4个质粒(pPCP1、pCD1、pMT1和pCRY)。pPCP1质粒长度为9609bp,与参考菌株基本一致;pCD1质粒是编码Ⅲ型分泌系统的质粒,长度为70159bp,编码情况与参考菌株基本相同,但重排导致了质粒的结构与参考菌株存在差异;pMT1质粒长度为106642bp,保留了较多的原始质粒片段,毒力相关基因与参考菌株没有差异;pCRY质粒是本研究中新发现的质粒,在国内外研究中未曾报道,这一质粒长度为21742bp,具有独立复制能力,有一群编码Ⅳ型分泌系统的基因。91001菌株的染色体长度为4595065bp,有4037个编码序列(CDS),其中141个是假基因;染色体中存在着非常丰富的插入序列,由于存在IS序列介导的基因组重排,91001菌株染色体的结构与参考菌株存在较大差异。通过比较基因组学分析,初步确定了91001菌株甘油降解阳性、硝酸盐还原阴性、阿拉伯糖分解代谢阴性以及蜜二糖分解阳性的遗传基础。结论 根据质粒结构、染色体基因组重排、硝酸盐还原阴性的机制以及假基因的分布等信息,推测以91001菌株为代表的田鼠型菌株是原始鼠疫耶尔森菌进化过程中的另一个分支,与现有菌株存在着比较明显的差异;而91001菌株独特的致病性可能与基因组中的假基因或大片段缺失有关。     

河南新乡2008年手足口病病原分离鉴定及病毒基因组特征

目的:对2008年分离自河南新乡手足口病患者粪便标本的病原进行分离鉴定及全基因组序列测定,并同相关毒株序列进行同源性比对和进化分析,以了解新分离病毒基因组序列特征及可能的传播来源.方法:将手足口病患者粪便标本接种敏感细胞进行分离传代培养,制备抗原片进行间接免疫荧光检测,采用特异性引物进行PCR鉴定,将病毒基因组分为8个片段进行RT-PCR扩增,扩增产物纯化后进行PCR测序.通过末端重叠序列拼接成全长病毒基因组序列,利用生物信息学软件对序列进行比对分析,绘制进化树.结果:测序获得的3株EV71病毒基因组全长均为7 405 nt,VPI氨基酸序列同源性达100%.Blast分析表明F3(F8)-Henan-08毒株均与安徽阜阳2008年分离的EV71毒株同源性最高,而F4-Henan-08毒株与我国台湾省2004年分离的EV71毒株同源性最高.序列进化分析表明,新分离毒株属于C4基因亚型.结论:新分离的河南EV71毒株与安徽阜阳分离的毒株可能具有相同来源.     

策勒黑羊BMPR-IB基因exon6的多态性分析

本实验利用限制性内切酶Eco471检测策勒黑羊骨形态发生蛋白受体基因(BMPR-IB)外显子6(exon 6)序列限制性片断长度多态性(RFLP),结果显示:30只策勒黑羊BMPR-IB基因exon 6酶切后出现140bp、11Obp和30bp长度的片段.BB型3只,占9.09%; B+型12只,占36.36%; ++...     

新疆南疆地区羊口疮病毒的分离鉴定及其遗传进化分析

为确定新疆喀什等地区羊场发生的疑似羊口疮(ORF)的病原,利用GSFs细胞从送检的羊口鼻痂皮中分离获得的毒株,通过PCR鉴定确定该病原为羊口疮病毒(ORFV),命名为ORFV/XJ-NJ/2017/China株。然后对该分离株的B2L基因和ORFV121基因进行克隆,测序,并与其它ORFV序列进行遗传进化分析。结果表明:ORFV/XJ-NJ/2017/China的B2L基因全长为1097bp,编码365个氨基酸,ORFV121基因长889bp,编码296个氨基酸,与Gen Bank中收录的其他ORFV流行株相比,B2L基因核苷酸的同源性为94.7%~98.5%,与疫苗株的核苷酸同源性为97%,推导的氨基酸同源性为95%~97%,;ORFV121基因核苷酸的同源性为93.6%~99.1%,推导的氨基酸同源性87.7~98%。利用软件构建系统进化树分析,根据B2L基因遗传进化树分析结果表明,该分离株与印度分离株亲缘关系最近;由ORFV121基因遗传进化分析结果表明,该分离株与我国NA1/11分离株亲缘关系最近.根据B2L基因和ORFV121基因的遗传进化分析,其分离得到的病毒株可能是国内外流行重组后产生的一个变异株,为羊口疮病毒的后续研究提供依据。     

利用微卫星标记分析新疆天山马鹿3个群体的遗传多样性

本文利用5个微卫星标记对新疆天山马鹿遗传多样性进行了检测分析。统计了天山马鹿三个群体的等位基因组成、平均有效等位基因数(E)和平均基因纯合率(Rh),利用等位基因频率计算出各群体的平均遗传杂合度(h)、多态信息含量(PIC)。结果表明5个微卫星位点在哈密1、04团和151团天山马鹿三个群体的平均多态信息含量分别为0.5462、0.5477、0.5895,除微卫星位点BM5004外均为高度多态,可作为有效的遗传标记用于天山马鹿遗传多样性分析;天山马鹿三个群体总平均PIC、h、Rh和E分别为:0.5611、0.5902、0.5826和2.9。分析认为天山马鹿遗传变异度相对较高,遗传多样性较为丰富。     

人胃癌抑制消减cDNA文库的构建及文库质量分析

目的 :构建人胃癌抑制消减cDNA文库 ,为进一步大批量筛选、克隆胃癌特异性表达的基因奠定基础。方法 :从胃癌和癌旁正常组织分离poly(A) +RNA ,经反转录后 ,利用抑制消减杂交(SSH)方法 ,通过两轮杂交和两次抑制PCR构建了两种组织间差异表达基因的cDNA消减文库。结果与结论 :挑取 80 0个克隆进行PCR扩增检测是否有插入片段 ,结果显示其中 750个克隆有插入片段 ,片段大小范围为 2 50～ 70 0bp。为进一步大批量筛选、克隆胃癌特异性表达的基因奠定了基础。     

单次激发FSE序列对肝血管瘤与肝囊肿的鉴别诊断价值

目的:探讨单次激发FSE序列对肝血管瘤与囊肿的鉴别诊断价值.方法:分别采用短TE(80～90 ms)和长TE(600～700 ms)单次激发FSE序列,对45例患者(肝囊肿病灶30个,肝血管瘤病灶33个)进行MR平扫,对比分析2种病变的信号特征.结果:在短TE时,肝囊肿和血管瘤都显示为边界清楚的明显高信号病灶;在长TE时,囊肿显示为明显高信号,而血管瘤则有较明显信号衰减呈中等信号强度.在长TE时肝血管瘤和囊肿的对比躁声比(CNR)分别为3.65±3.25和56.6±26.4,两者比较差异有极显著性意义(P＜0.01),而且囊肿与血管瘤的CNR值没有重叠,应用此标准所有63个病灶都得出正确诊断.结论:采用短TE和长TE的单次激发FSE序列,可用来鉴别肝囊肿和肝血管瘤.     

Optimization of the system of medical service of students of Cadet Schools of the Ministry of Defense of the Russian Federation

One of the factors of the successful military career guidance Cadet schools students is preserving and promoting their health. Medical support of children and adolescents aged 10-17 years should include the full range of medical and preventive measures defined for this group. The state of providing outpatient care for pupils at the Cadet School in St. Petersburg was studied. These results show that full medical care in accordance with the standards can be based only on children's health clinics. It is important that the organization of medical support pupils cadet schools should be cooperate with civilian health care.     

带状疱疹83例误诊原因分析

带状疱疹是由水痘—带状疱疾病毒引起的皮肤科常见疾病。其主要的病理损害,一是受累神经的严重炎症性浸润,继而导致受侵犯神经节内神经细胞变性、坏死;二是皮肤的水泡。迅速抑制神经节和相应的感觉神经纤维的充血、水肿和坏死,防止粘连形成,达到迅速镇痛、改善皮损,缩短病程及防止后遗症的发生是治疗的关键。因而,尽早明确诊断,     

Estimation of accumulated dose of radiation by method of ESR-spectrometry of dental enamel of mammals

ESR-spectrometry was used to investigate radiation-induced paramagnetic centers in enamel of mammals: carnivores (polar bear and fox), ungulates (reindeer, European bison, moose), and man. Values at half the microwave power saturation of the radiation signal, P_1/2, evaluated at room temperature, was found to range from 16 to 26 mW for animals and man. A new approach to discrimination of the radiation induced signal from the total ESR spectrum of reindeer enamel is proposed. ‘Dose-response’ dependencies of enamel of different species mammals were measured within the dose range from 0.48 up to 10.08 Gy. Estimations of ‘radiosensitivity’ enamel of carnivores and ungulates showed good agreement with radiosensitivity enamel of man by ESR method.     

Analysis of the results of the international comparison of activity measurements of a solution of Fe

The results of an international comparison of activity measurements of a solution of ⁵⁵Fe organized by the BIPM in 2005 are reported and analysed. This exercise, which follows the procedures of the CIPM mutual recognition arrangement to update older comparisons, is a renewal of the comparison organized by the BIPM that took place in 1978. A EUROMET comparison was organized in 1996 specifically to compare activity measurements of a ⁵⁵Fe solution by means of liquid-scintillation techniques. Results of these three comparisons are presented and discussed in this paper.

The radionuclide solution was provided by the NPL, which also distributed the samples to the participants. The activity of the ampoules was measured by 16 laboratories using 12 methods producing 25 results. Some general considerations on uncertainty assessments pertaining to the different techniques used are drawn. The outcome of four different estimators is compared from which the presence of at least one outlier can be confirmed. Further measurements should be made to try to reduce the discrepancy between the results. To date the outcome of the present comparison does not show an improvement to that of the 1996 comparison.     

Evaluation of the results of various technics of non-surgical therapy of varicocele

A new method of non-surgical treatment of varicocele syndrome is described: it consists in sclerotherapy of spermatic vein by trans-femoral percutaneous catheterization with balloon-catheters. In 8 cases venous thrombosis has been induced by direct electric clotting. The techniques and a 6 months follow-up are discussed. It is pointed out that this procedure should be considered as the method of choice for tubular lesions and sub-fertility prophylaxis in young people and in childhood.     

延迟性脾破裂误漏诊原因分析

目的探讨延迟性脾破裂误漏诊原因和预防措施.方法回顾性分析总结12例延迟性脾破裂中的诊断和误漏诊的经验与教训.结果本组延迟性脾破裂的误漏诊5例(41.66%).对多发伤与脾破裂并存可能认识不足,外伤史轻微或伤员隐瞒外伤史,缺乏腹痛-缓解-突然再腹痛的典型病史,缺乏“对冲性脾破裂”力学分析和整体化诊断思路等为其误漏诊的主要原因.结论详细的外伤史和全面系统检查,重视腹以外多发伤掩盖腹内脏器伤及延迟性脾破裂可能.确立外伤-腹内脏器伤-脾破裂整体化诊断思路.不间断地辅以B超检查脾形态学变化和腹内有无积液,腹腔穿刺确定有无血腹、X线胸腹部检查观察左侧胸肋角和膈肌运动情况、必要时CT检查以尽早发现脾包膜下血肿,降低延迟性脾破裂误漏诊率.