肝纤愈对免疫性肝纤维化大鼠胶原代谢水平的影响

目的建立大鼠免疫损伤性肝纤维化的实验模型,研究中药复方肝纤愈对血清层黏蛋白(Laminin,LN)、透明质酸(Hyaluronic acid,HA)、血清Ⅲ型前胶原(Precollagen typeⅢ,PCⅢ)、肝脏羟脯氨酸(Hydroxyproline,Hyp)含量的影响,探讨其抗肝纤维化的作用机制。方法在以人血白蛋白诱导的免疫损伤性肝纤维化大鼠模型基础上,肝纤愈大、小剂量(12．2、6．1g/kg),灌胃给药,连续8周,以鳖甲软肝片和秋水仙碱为阳性对照药,放射性免疫方法测定大鼠血清中HA、LN、PCⅢ含量,化学法测定肝脏羟脯氨酸含量。同时观察肝脏组织病理学改变。结果肝纤愈大剂量组可明显降低人血白蛋白诱导免疫性肝纤维化大鼠模型血清中HA、LN、PCⅢ的含量,同时可降低大鼠肝脏中羟脯氨酸的含量。肝脏组织病理学有显著改善。结论肝纤愈通过对肝脏胶原物质代谢的影响而产生抗肝纤维化作用。     

软肝饮对免疫性肝纤维化大鼠胶原代谢水平的影响

目的：建立大鼠免疫损伤性肝纤维化的实验模型,研究中药复方软肝饮对血清层粘;连蛋白(Laminin,LN)、透明质酸(Hyaluronic acid,HA)、血清Ⅲ型前胶原(Precollagen typeⅢ,PCⅢ)、肝脏羟脯氨酸(Hydroxyproline,Hyp)含量的影响,探讨其抗肝纤维化的作用机制。方法：在以人血白蛋白(HSA)诱导的免疫损伤性肝纤维化大鼠模型基础上,软肝饮小剂量(1g／kg),大剂量(2g／kg)灌胃给药,连续8周,以鳖甲软肝片和秋水仙碱为阳性对照药;放射性免疫方法测定大鼠血清中HA、LN、PCⅢ含量;化学法测定肝脏羟脯氨酸含量。结果：软肝饮两个剂量组可明显降低HSA诱导免疫性肝纤维化大鼠模型血清中HA、LN、PCⅢ的含量,同时可降低大鼠肝脏中羟脯氨酸的含量。结论：软肝饮通过对肝脏胶原物质代谢的影响而产生抗肝纤维化的治疗作用。     

肝康颗粒对肝纤维化大鼠肝组织及血清PCⅢLN影响的实验研究

目的:通过观察中药复方肝康颗粒对肝纤维化(Hepatic Fibrosis)大鼠肝组织Ⅲ型前胶原(Precollagen TypeⅢ)层粘连蛋白(Laminin)表达以及血清PCⅢ、LN含量的影响,探讨肝康颗粒抗肝纤维化的治疗效果和其作用机制。方法:选取SD雄性大鼠皮下注射四氯化碳(CCl4)植物油溶液和自由饮用酒精的方法制备肝纤维化大鼠模型,检测大鼠血清Ⅲ型前胶原、层粘连蛋白的含量;显微镜下观察肝组织的变性程度及肝纤维化程度;用免疫组化方法检测肝组织PCⅢ、LN的表达。结果:肝康颗粒能显著降低肝纤维化大鼠的血清PCⅢ、LN含量,减低肝组织炎症活动度及纤维化程度。PCⅢ的检测结果表明:与正常对照组比较,病理模型组肝组织中Ⅲ型胶原明显增生,具有显著性差异(P<0.01);与病理模型组比较,肝康颗粒大剂量、肝康颗粒中剂量、大黄蛰虫丸三个治疗组肝组织中Ⅲ型胶原含量明显减少,有显著性差异(P<0.05)。LN的检测结果表明:正常对照组大鼠肝组织LN含量很低;病理模型组大鼠肝组织层粘连蛋白含量与正常对照组相比明显增多,具有显著性差异(P<0.01);肝康颗粒大剂量、中剂量、大黄蛰虫丸三个治疗组与病理模型组比较,肝组织中LN含量明显减少,有显著性差异(P<0.05)。结论:肝康颗粒可明显降低肝纤维化大鼠肝组织及血清中PCⅢ、LN的含量,有效减轻大鼠肝组织炎症程度及纤维化程度。     

酒精性肝纤维化与DDR2关系及复方甘草酸苷治疗对其影响的实验研究

目的观察酒精性肝纤维化与盘状结构域受体2（DDR2）的关系以及复方甘草酸苷（GGT）治疗对二者的影响。方法48只大鼠随机分为正常对照组、模型组、停酒组、未停酒组、停酒治疗组及未停酒治疗组（n=8）。模型组酒精灌胃16周后,与正常对照组一起处死。其余4组于酒精灌胃16周后分别予以停酒、不停酒、停酒+GGT治疗、不停酒+GGT治疗4周,至20周末全部处死。检测各组血清透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)及Ⅳ型胶原(CⅣ)含量,取肝组织进行HE染色及Masson染色观察其组织病理学变化,实时荧光定量PCR和Western blot蛋白印迹法分别检测肝组织DDR2 mRNA和蛋白表达。结果酒精灌胃16周后,大鼠肝组织呈明显肝纤维化病理表现,血清HA、LN、PCⅢ、CⅣ水平和肝组织胶原面密度及DDR2表达均较正常对照组升高(P＜0.01)。停酒治疗组与停酒未治疗组、未停酒治疗组与未停酒未治疗组比较,上述各指标均降低(P＜0.05)。结论CGT对酒精性肝纤维化具有一定的治疗作用,其作用可能与下调DDR2的表达相关。     

褪黑素对大鼠免疫性肝纤维化的影响

目的　了解褪黑素(MT)对大鼠免疫性肝纤维化的影响并初步探讨其机制。方法　①大鼠腹腔注射(ip)猪血清(自制)制造模型;②MT分早期(与造模同时)、晚期(造模开始8周后)给药,并均分为10μg·kg-1与1000μg·kg-1两个剂量组;③阳性对照药选用秋水仙碱(col);④处死大鼠后用放射免疫法检测血清透明质酸(HA)水平,并测定其肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量及脾淋巴细胞功能等。结果　①造模第8周,模型组大鼠血清唾液酸(SA),肝脏Hyp含量及肝纤维化程度明显升高,脂多糖(LPS)诱导的脾细胞增殖反应明显降低;而血清丙氨酸氨基转换酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转换酶(AST)及总蛋白(TP)含量,刀豆素A(ConA)诱导的脾细胞增殖反应与正常对照组比较无显著性。第12周模型组血清ALT、SA、HA含量,腹腔巨噬细胞(PMΦ)产生的白细胞介素1(IL1)水平,肝脏Hyp含量及肝纤维化程度明显升高,ConA和LPS诱导的脾细胞增殖反应明显降低。而血清AST、TP含量与正常对照组比较无显著性。②MT早期给药,1000μg·kg-1可使肝纤维化大鼠升高的血清SA、肝脏Hyp含量及肝纤维化程度明显降低。MT10μg·kg-1与1000μg·kg-1均可恢复肝纤维化大鼠低下的LPS诱导的脾细胞增殖反应。③MT晚期给药,10μg·kg-1和1000μg·kg-1均可使肝纤维化大鼠升高的血清ALT、SA和HA水     

复合因素诱导脂肪性肝纤维化模型的建立

目的 采用复合因素诱导建立大鼠脂肪性肝纤维化模型.方法 SD大鼠,随机分为正常组、对照组、脂肪性肝纤维化模型组.对照组予以高脂乳剂灌胃,模型组予以高脂乳剂灌胃配合小剂量40?l4花生油溶液(1 ml/kg)皮下注射,对比造模.试验4、6、8周后分批处死,检测肝功能[血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬酸氨基转移酶(AST)]、肝纤维化指标[血清透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原氨端肽(PⅢNP)、Ⅳ型胶原(CⅣ)以及肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量],并进行病理组织学和电镜观察.结果 模型组大鼠4周起血清ALT、AST、HA、LN、PⅢNP、CⅣ及肝组织Hyp含量均有增高趋势,8周后各指标显著增高.病理组织学检查提示,造模8周后,模型组大鼠肝小叶间纤维增生,部分纤维细胞向肝细胞间延伸;电镜观察提示肝星状细胞转变成肌成纤维细胞,周围有大量胶原纤维沉积.结论 采用高脂乳剂灌胃结合小剂量CCl4花生油溶液皮下注射持续8周,可成功复制出大鼠脂肪性肝纤维化模型.     

五灵胶囊对大鼠实验性肝纤维化的治疗作用

目的　研究五灵胶囊对大鼠肝纤维化的作用 .方法　采用以四氯化碳为主的复合因素致大鼠肝纤维化 ,观察五灵胶囊对肝组织病理学、肝组织和血清中羟脯氨酸 (HYP)、 , 型前胶原 (PC ,PC )含量的影响 .结果　病理学检查显示 ,模型组大鼠肝细胞损伤严重 ,胶原纤维大量增生 ,形成假小叶 .五灵胶囊组大鼠肝细胞结构破坏不明显 ,肝纤维化程度轻 ,在 3.0 g· kg- 1时治疗效果最好 .各治疗组的肝组织 HYP含量均较模型组明显下降 ,尤以五灵胶囊组 (3.0 g·kg- 1 )下降幅度最大 (P<0 .0 1) .各治疗组的血清 PC 及肝PC 含量均较模型组明显下降 (P<0 .0 1) .此外五灵胶囊组(3.0 g· kg- 1 )还可显著降低血清 PC 含量 (P<0 .0 1) .结论　五灵胶囊可有效地治疗肝纤维化     

吴茱萸总生物碱对大鼠肝纤维化的防治作用

目的研究吴茱萸总生物碱（totalalkaloidsofEvodiarutaecarpa,TAE）对四氯化碳（carbontetrachloride,CCl。）致大鼠实验性肝纤维化的防治作用,探索其作用机制。方法采用40％CCl。皮下注射12周复制大鼠肝纤维化模型,检测各组大鼠血清丙氨酸转氨酶（alaninetransaminase,ALT）、天冬氨酸转氨酶（aspartatetransaminase,AST）,层黏连蛋白（1aminin,LN）、透明质酸（hyalurnicacid,HA）、Ⅲ型前胶原（precollagentype1ii,PCⅢ）、丙二醛（malonaldehyde,MDA）、超氧化物歧化酶（superoxidedismutase,SOD）和肝组织中羟脯氨酸（hydroxyproline,Hyp）水平,并对肝脏进行病理学检查。结果模型组大鼠肝脏有明显胶原沉积、脂肪变性和肝纤维化,部分大鼠形成完整的假小叶;血清ALT、AST、MDA、SOD、LN、HA、PCⅢ和肝组织中Hyp含量明显高于正常组（P〈0．05,或P〈0．01）。给药10周末,TAE50,1.0mg／kg组肝小叶结构明显改善,脂肪变性减轻,胶原纤维间隔减少,ALT、AST、MDA、LN、HA、PCⅢ及肝组织中Hyp水平明显下降。结论TAE50,100mg／kg灌胃给药对CCl4致大鼠实验性肝纤维化有保护作用,其作用机制与抗脂质过氧化有关。     

男性酒精性肝硬化患者脂联素、抵抗素水平与肝纤维化相关性研究

目的:探讨酒精性肝硬化男性患者血清脂联素、抵抗素水平与肝纤维化指标相关性。方法:采用ELISA法分别检测40例酒精性肝硬化患者和正常对照组的脂联素、抵抗素水平及透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、层粘蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(CⅣ)等肝纤维化指标,对其相关性进行分析。结果:酒精性肝硬化组脂联素、抵抗素以及HA、PCⅢ、LN、CⅣ水平显著高于对照组,差异有统计学意义;Spearman相关性分析显示脂联素、抵抗素水平与HA、PCⅢ、LN、CⅣ均呈正相关,差异具有统计学意义。结论:酒精性肝硬化患者血清脂联素、抵抗素水平增高,抵抗素以及脂联素在其肝纤维化的进程中可能起着重要作用。     

活血肥瘀中药治疗肝纤维化作用靶点和机制研究

1．研究内容与方法：应用CCl4、高脂饮食和乙醇等复合因素制备大鼠肝纤维化模型,研究活血化瘀中药方剂——抗纤Ⅰ号（丹参、当归、莪术、三棱、鳖甲、土鳖虫、郁金等）对肝纤维化的预防和治疗作用。将中药方剂制成水煎醇提制剂和胶囊制剂研究抗肝纤维化有效的剂型。在中药或中药与硒联合应用后,用全自动生化分析仪测定血清ALT、AST、A／G;放射免疫测定法检测血清透明质酸（HA）、层黏蛋白（LN）、Ⅲ型前胶原（PCⅢ）、血清脯氨酸肽酶（PLD）、Ⅳ型胶原（Ⅳ-C）和肝组织羟脯氨酸（Hyp）含量。常规HE染色和Masson染色,光镜下观察肝脏病理改变和纤维化程度;电镜下观察肝组织超微结构变化情况。     

百令疏肝胶囊对二甲基亚硝胺诱导的大鼠肝纤维化作用

目的：研究百令疏肝胶囊对二甲基亚硝胺诱导的大鼠肝纤维化的作用。 方法：用二甲基亚硝胺诱导肝纤维化模型。酶联免疫法测定血清Ⅲ型前胶原肽、层粘连蛋白、基质金属蛋白酶抑制因子1的浓度,化学比色法测定血清白蛋白的浓度和肝组织羟脯氨酸的含量。使用Motic Med 6.0数码医学图像分析系统测量肝纤维化面积。 结果：百令疏肝胶囊高（450 mg·kg^-1）、中（270 mg·kg^-1）和低（90 mg·kg^-1）剂量组的血清Ⅲ 型前胶原肽水平[分别为（34.46±13.95)、(36.15±9.46)和(40.58±7.72) ng·ml^-1]、基质金属蛋白酶抑制因子1水平[分别为（16.65±4.24)、(16.66±4.34)和(18.99±6.05) ng·ml^-1]、层粘连蛋白水平[分别为（12.94±4.29)、(12.96±3.21)和(15.32±8.00 ）ng·ml^-1]和肝组织纤维化面积[分别为（0.02240±0.01337)、(0.02176±0.01460)和(0.02384±0.01405）μm²]显著低于模型组的相应值[（49.38±10.95) ng·ml^-1、(30.84±14.48)ng·ml^-1、(30.22±17.00) ng·ml^-1、(0.03929±0.01732） μm²];高、中剂量组的肝组织中羟脯氨酸水平分别为(0.77±0.09)、（0.81±0.09）μg·mg湿重^-1,显著低于模型组的(1.06±0.33)μg·mg湿重^-1;高剂量组的肝组织中白蛋白水平为（34.02±4.17 ）g·L^-1,显著高于模型组的（30.25±4.21） g·L^-1。 结论：百令疏肝胶囊对二甲基亚硝胺诱导的大鼠肝纤维化具有治疗作用。     

转基因骨髓源性肝干细胞移植对肝纤维化大鼠细胞外基质积聚的影响

目的 探讨尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)基因修饰骨髓源性肝干细胞(BDLSC)移植对四氯化碳(CCl4)诱导的肝纤维化大鼠肝脏细胞外基质(ECM)积聚的影响.方法 体外将携带人uPA基因的腺病毒(AduPA)转染BDLSC.采用皮下注射CCl4方法 建立大鼠肝纤维化模型.将纯系Fisher大鼠随机分为正常组、模型组、BDLSC组(尾静脉注入2×104BDLSC)和BDLSC-uPA组(尾静脉注入2×106AduPA转染的BDLSC),各9只.观察各组大鼠肝功能和血清ECM水平的变化;采用半定量逆转录(RT)-PCR方法 检测大鼠肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原(COL Ⅰ、COLⅢ)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、3、9及金属蛋白酶组织抑制物(TIMP)-1、2 mRNA的表达.结果 BDLSC-uPA组大鼠肝功能明显改善;血清ECM水平和羟脯氨酸含量明显低于模型组和BDLSC组;肝组织COL Ⅰ mRNA(38.9±2.7)、COLⅢ mRNA(8.5±1.6)表达均明显低于模型组和BDLSC组(均P<0.05),MMP-2mRNA(157.5±32.6)、MMP-3 mRNA(105.5±14.6)、MMP-9 mRNA(187.5±22.8)表达均高于模型组和BDLSC组(均P<0.05),而TIMP-1、2 mRNA的表达则差异无统计学意义(P>0.05).结论 uPA基因修饰BDLSC移植可能通过上调MMP的表达,促进ECM的降解,从而改善纤维化大鼠的肝功能,抑制大鼠肝纤维化.     

慢性肝炎肝硬化患者血清胆碱酯酶与肝纤维化血清标志物的相关性分析

目的:探讨慢性肝炎、肝硬化患者血清胆碱酯酶(CHE)活性与血清肝纤维化标志物的相关性。方法:用放射免疫法(RIA)测定176例慢性肝炎、肝硬化病人和92例健康查体者血清肝纤维化标志物透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(Ⅳ·C)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)水平,同时用全自动生化分析仪测定血清CHE水平。结果:随着慢性肝炎、肝硬化患者肝组织炎症和纤维化程度升高,肝纤维化血清标志物HA、LN、Ⅳ·C,PCⅢ水平逐渐升高,血清CHE活性逐渐降低,血清CHE活性与HA、LN、Ⅳ·C、PCⅢ水平呈显著负相关(P均<0.01),相关系数分别为:-0.966、-0.958、-0.964、-0.971。结论:血清CHE水平是反映肝实质细胞损伤和肝纤维化程度的敏感可靠指标。     

非酒精性脂肪性肝病抵抗素、脂联素与肝纤维化相关性研究

目的:研究非酒精性脂肪肝(NAFLD)患者抵抗素、脂联素水平与肝纤维化指标的关系。方法:采用ELASA法检测NAFLD患者和正常对照组的抵抗素、脂联素水平及Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、透明质酸(HA)、Ⅳ型胶原(C)、层粘蛋白(LN)水平。结果:NAFLD组脂联素显著低于对照组,抵抗素水平显著高于对照组,抵抗素水平与WHR、BMI、FBG、TG、FINS、HOMA-IRI、PC、PC、HA和LN呈显著正相关,脂联素水平与WHR、BMI、FBG、TG、FINS、HOMA-IRI、PC、PC、HA和LN呈显著负相关,抵抗素与脂联素水平呈显著负相关。结论:NAFLD患者血清抵抗素水平增高,脂联素水平降低,NAFLD患者肝纤维化进程中抵抗素与脂联素可能起重要作用。     

葡萄籽原花青素预防大鼠肝纤维化的实验研究

目的观察葡萄籽原花青素(GSPE)抑制四氯化碳(CCL4)诱导大鼠肝纤维化形成的效果,并探讨其可能的作用机制。方法 50只大鼠随机选取20只分为空白对照组(10只)和溶剂组(10只),其他大鼠采用CCL4腹腔注射法,每周2次,8周制造大鼠肝纤维化模型,将造模成功的24只大鼠分为模型组(12只)和GSPE干预组(12只)。GSPE干预组从第5周给予GSPE 150 mg/(kg.d)灌胃,8周后处死大鼠,留取肝脏和血清,采用自动生化分析仪检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL),放射免疫法检测血清透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ),肝组织碱水解法检测羟脯氨酸(HyP),化学比色法检测肝组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH),同时取固定部位肝脏组织HE染色,观察其肝纤维化程度。结果与空白对照组比较,模型组大鼠血清中的ALT、AST、TBIL、HA、LN、PCⅢ水平均显著升高(P<0.05),肝组织中GSH和SOD降低,MDA和Hyp含量升高(P<0.05);与模型组比较,GSPE干预组大鼠血清ALT、AST、TBIL、HA、LN、PCⅢ水平均显著降低(P<0.05),肝组织中GSH和SOD升高,MDA和Hyp含量降低(P<0.05);与模型组比较,GSPE干预组肝组织纤维化病变明显减轻,差异有统计学意义(P<0.05)。结论GSPE对CCL4诱导的大鼠肝纤维化形成具有明显的抑制作用,其作用机制可能与保护肝细胞、抑制脂质过氧化和抑制胶原合成有关。     

苦参素联合安珐特治疗慢性乙肝肝纤维化临床观察

目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)肝纤维化的有效治疗方法。方法采用苦参素胶囊联合安珐特(复方牛胎肝提取物片)口服治疗CHB患者116例(治疗组),并与单用安珐特片治疗90例(对照组)进行对照分析;观察两组治疗前后肝功能(TBil、ALT、AST、ALB)及血清Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)等指标变化情况。结果治疗组肝功能及血清肝纤维化各项指标均有明显改善,与治疗前及对照组比较差异有高度显著性(P均<0.01),治疗组疗效优于对照组(P<0.05)。结论苦参素联合安珐特治疗CHB具有较好的保肝和抗肝组织纤维化作用。     

γ-干扰素治疗免疫性大鼠肝纤维化的实验研究

目的观察γ-干扰素对猪血清诱导的大鼠免疫性肝纤维化的抑制作用.方法用猪血清腹腔注射复制免疫损伤性肝纤维化模型,9周后给大鼠每天肌肉注射γ-干扰素10万国际标准单位,共21天,以正常和模型组作为对照,第12周处死动物,测定体重、HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C并进行肝纤维化分级.结果γ-干扰素治疗组大鼠的肝纤维化生化指标HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C放免测定值较模型组明显下降(P＜0.01)而接近正常对照组(P＞0.05),肝纤维化的分级程度较模型组减轻(P＜0.01),大鼠体重较正常组和模型组稍有下降(P＞0.05).结论γ-干扰素能有效抑制猪血清诱导的大鼠免疫性肝纤维化,其作用表现为IFN-γ不仅能够抑制 胶原纤维进一步形成,更有强劲的促进胶原降解的作用.     

血清Ⅲ、Ⅳ型胶原及板层素对肝纤维化的诊断价值

目的：探索诊断早期肝纤维化的敏感指标。方法：用放射免疫法检测２３６例各型肝病患者血清Ⅲ型胶原（ＴｐｙｅⅢｃｏｌａｇｅｎ,ＰＣⅢ）、Ⅳ型胶原（ＴｐｙｅⅣｃｏｌａｇｅｎ,Ⅳ－Ｃ）和板层素（Ｌａｍｉｎｉｎ,ＬＮ）水平。结果：各类肝病患者血清ＰＣⅢ、Ⅳ－Ｃ和ＬＮ水平随病情进展而逐渐升高。以ＰＣⅢ≥１３５μｇ／Ｌ、Ⅳ－Ｃ≥１３０μｇ／Ｌ为诊断肝纤维化的临界点,其敏感度、特异性、准确率分别达８０％以上。结论：表明ＰＣⅢ、Ⅳ－Ｃ及ＬＮ可作为肝纤维化诊断较为敏感的指标,其中Ⅳ－Ｃ对早期肝纤维化的诊断优于ＰＣⅢ及ＬＮ,对肝癌的诊断有一定意义