N-花生四烯酰乙醇胺及其类似物的神经保护作用

N-花生四烯酰乙醇胺（anandamide,AEA）属于内源性大麻素类长链脂肪酸衍生物,可通过大麻素受体（CB1/CB2）和（或）非CB1/CB2受体途径发挥神经保护作用。AEA类似物包括脂氨基酸类、脂肪酰乙醇胺类和甲基氟膦酸酯类化合物等。AEA类似物在生物活性及化学结构上与AEA相似,但作用靶点及作用机制并不完全相同,非CB1/CB2受体途径介导的神经保护活性及对脂肪酸酰胺水解酶活性的调节作用为该类化合物的重要特征。由于AEA作用于多靶点所致的许多副作用,给其临床试验和应用带来一定困难,而AEA类似物可能既具备AEA的神经保护活性又避免其毒副作用,因此研究AEA类似物的神经保护作用具有重要的理论意义和应用价值。本文主要对AEA及其类似物的神经保护活性和其作用机制进行综述。     

蛋白激酶C 参与内源性大麻素花生四烯乙醇胺对L型钙电流的抑制作用

目的：研究内源性大麻素物质花生四烯乙醇胺是否通过改变蛋白激酶C（ PKC）活性从而抑制心肌L型钙电流,并进一步探讨可能改变PKC活性的信号途径。方法应用全细胞膜片钳技术记录单个心肌细胞的L型钙电流（P ＜0 n．05）;应用PepTag非放射性蛋白激酶C检测系统（ Promega）检测PKC活性;Elisa试剂盒测定细胞中二脂酰甘油（ DAG）的含量;western blot 技术测定磷脂酶Cβ（ PLCβ）和磷酸化磷脂酶C β（ p-PLCβ）表达。结果应用花生四烯乙醇胺灌流心肌细胞后显著抑制心肌L型钙电流（ P ＜0．05）,预先应用大麻素1型受体（ CB1）阻断剂AM251或PKC非特异性激动剂佛波醇酯（PMA）可以完全阻断此抑制效应,而大麻素2型受体（CB2）阻断剂AM630没有阻断花生四烯乙醇胺抑制L型钙电流的作用。检测心肌细胞PKC活性发现,花生四烯乙醇胺明显抑制PKC活性（ P ＜0．05）,同样预先应用AM251或PMA完全阻断花生四烯乙醇胺对PKC活性的抑制效应,而AM630无此效应。应用花生四烯乙醇胺没有影响心肌细胞DAG含量和PLCβ的磷酸化。结论本实验首次证明内源性大麻素花生四烯乙醇胺激活心肌细胞CB1受体后抑制细胞PKC的活性,从而抑制L型钙电流,此过程没有PLCβ-DAG途径参与。     

戊四唑癫痫大鼠脑组织一氧化氮含量和一氧化氮合酶活性变化

探讨一氧化氮在戊四唑癫病发机制中的作用。方法每天注射戊四唑建立在鼠癫痫模型,测定癫病发作后大鼠大脑皮质,海马一氧化氮和一氧化氮合酶活性变化,结果癫痫发作后海马ＮＯ含量和ＮＯＳ活性显著升高,结 戊四唑诱导的癫痫中具有致痫性。     

地高辛抗体对大鼠再灌注心肌一氧化氮合酶同工酶表达的影响

目的：观察心肌缺血再灌注（myocardial ischemia reperfusion,MIR）时大鼠心肌组织、血清NO水平及一氧化氮合酶（NOS）同工酶蛋白表达的变化和内洋地黄素特异性抗体对MIR时心肌NO系统损伤的保护作用。方法：采用左冠状动脉前降支结扎30min,复灌45min建立在体大鼠MIR模型,Sprauge-Dawley大鼠随机分成7组,每组10只：假手术组,MIR模型组,生理盐水组,维拉帕米组,小、中、高剂量地高辛抗血清组（9、18、36mg/kg）。各组于再灌注45min后立即取左室心尖部缺血区心肌并断尾取血,检测心肌匀浆和静脉血中NO含量,心肌匀浆中的内皮型一氧化氮合酶（eNOS）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）水平,免疫组织化学SABC法检测心肌组织eNOS、iNOS;光镜下观察心肌组织形态学变化。结果：MIR时心肌组织NO水平明显降低,但血清中NO水平无明显变化;eNOS表达明显减少,iNOS表达明显增加,心肌组织结构发生明显损伤;中、高剂量地高辛抗血清能有效降低心肌组织iNOS表达,恢复心肌细胞eNOS活性,提高心肌组织和血液中的NO水平,减轻MIR导致的心肌组织结构损伤。结论：内洋地黄素特异性抗体对MIR造成的心肌NO系统损伤具有明显的保护作用,其作用机制可能通过拮抗内洋地黄素,调节心肌NOS同工酶的表达紊乱而实现。     

异丙肾上腺素的心肌毒性作用及对一氧化氮合酶的影响

异丙肾上腺素 (Isoproterenol,ISO)是肾素能 β 受体兴奋剂 ,有增加心脏收缩力和心率的作用 ,在治疗缓慢性心律失常尤其是房室传导阻滞、心脏骤停时是首选的抢救药物 ,也是抗哮喘药物之一。但很早以前就发现ISO存在特异性心肌毒性 ,了解其心肌损害作用的机制 ,对临床合理用药和防治其心肌毒性的发生有重要意义。我们用ISO制备大鼠心肌坏死模型 ,探讨ISO的心肌毒性作用及相关机制 ,并分别观察ISO对心肌一氧化氮合酶 (NOS) 3种亚型的影响。1　材料与方法1 1　动物及试剂　成年SD大鼠 6 0只 ,雌雄各半 ,体重 180～ 2 2 0g ,由浙江大学…     

香菇多糖对巨噬细胞一氧化氮和一氧化氮合酶活性的影响

目的研究香菇多糖(LTN)诱导巨噬细胞的一氧化氮(NO)生成和一氧化氮合酶(iNOS)的活性,探讨LTN的免疫调节作用机理.方法采用Griess反应和荧光法测定不同剂量的LTN作用小鼠腹腔巨噬细胞后NO的生成量和iNOS活性.观察mRNA转录抑制剂、蛋白质合成抑制剂和iNOS抑制剂对巨噬细胞NO的生成和iNOS活性的影响.结果LTN能使小鼠腹腔巨噬细胞NO生成增加,iNOS活性增高,并呈作用剂量依赖关系.3种抑制剂均能抑制LTN诱导的小鼠腹腔巨噬细胞N0的生成和iNOS活性.结论LTN能刺激小鼠腹腔巨噬细胞提高iNOS活性和NO的生成.提示LTN的免疫调节作用机制可能与LTN刺激巨噬细胞NO生成有关.     

孟鲁司特钠的心肌保护作用及对一氧化氮合酶的影响

目的观察白三烯受体拮抗剂孟鲁司特钠对大鼠心肌坏死的保护作用及一氧化氮合酶（NOS）的影响。方法大鼠sc异丙肾上腺素（2 mg·kg^-1）造成心肌坏死模型，ig不同剂量孟鲁司特钠，测定血清乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸磷酸激酶（CK）、丙二醛（MDA）及心肌一氧化氮（NO）含量和坏死心肌面积，免疫组化检测心肌NOS 3种同功酶的表达。结果大鼠预先给予孟鲁司特钠10或30 mg·kg^-1可降低血清LDH，CK，MDA含量，缩小心肌坏死面积。孟鲁司特钠30 mg·kg^-1还能激活内皮型NOS（eNOS）表达，抑制诱导型NOS（iNOS）表达，促进心肌NO释放。结论孟鲁司特钠通过拮抗白三烯的致炎作用及激活eNOS、抑制iNOS表达，对大鼠异丙肾上腺素心肌坏死具有保护作用，在心肌缺血治疗中有潜在应用前景。     

香菇多糖对巨噬细胞一氧化氮和一氧化氮合酶活性的影响

目的研究香菇多糖(LTN)诱导巨噬细胞的一氧化氮(NO)生成和一氧化氮合酶(iNOS)的活性,探讨LTN的免疫调节作用机理.方法采用Griess反应和荧光法测定不同剂量的LTN作用小鼠腹腔巨噬细胞后NO的生成量和iNOS活性.观察mRNA转录抑制剂、蛋白质合成抑制剂和iNOS抑制剂对巨噬细胞NO的生成和iNOS活性的影响.结果LTN能使小鼠腹腔巨噬细胞NO生成增加,iNOS活性增高,并呈作用剂量依赖关系.3种抑制剂均能抑制LTN诱导的小鼠腹腔巨噬细胞N0的生成和iNOS活性.结论LTN能刺激小鼠腹腔巨噬细胞提高iNOS活性和NO的生成.提示LTN的免疫调节作用机制可能与LTN刺激巨噬细胞NO生成有关.     

注射用鼠神经生长因子对急性脑梗死患者血清神经元特异性烯醇化酶和一氧化氮合酶活性的影响

目的 探讨注射用鼠神经生长因子（NGF）对急性脑梗死患者血清神经元特异性烯醇化酶（NSE）和一氧化氮合酶（NOS）活性的影响。方法 选择2015年3月—2017年7月住院治疗的急性脑梗死患者92例,随机分为常规组（n=46）和mNGF组（n=46）。常规组按常规方法给予抗血小板聚集、降颅压、降脂稳定斑块、控制血压血糖、抗感染、维持水电平衡等,根据患者个体情况应用脱水剂及加强营养;mNGF组在常规治疗基础上加用鼠NGF肌肉注射治疗,30 μg/次,1次/d,共治疗28 d。对比两组治疗后总有效率,观察并比较两组治疗前后NIHSS评分、Barthel指数及血清NSE、一氧化氮（NO）、NOS水平。结果 mNGF组治疗后总有效率（89.13%）明显高于常规组（67.39%）,两组治疗后总有效率比较差异有统计学意义（P<0.05）。与治疗前比较,两组治疗28 d后NIHSS评分明显下降（P<0.05）、Barthel指数明显增高,同组治疗前后比较差异均有统计学意义（P<0.05）;但mNGF组变化程度大于常规组,组间差异有统计学意义（P<0.05）。两组治疗前NSE、NO及NOS水平无统计学差异;两组治疗14 d、28 d后NSE、NO及NOS水平明显下降,同组治疗前后比较差异有统计学意义（P<0.05）;但mNGF组下降幅度明显大于常规组,组间差异有统计学意义（P<0.05）。结论 注射用鼠NGF治疗能有效降低急性脑梗死患者血清NSE和NOS活性,从而发挥对缺血脑损伤的保护作用,促进神经功能的恢复。     

1992—2010年 N-花生四烯酰乙醇胺研究文献计量分析

摘 要：通过文献计量学方法分析内源性大麻素 N-花生四烯酰乙醇胺（anandamide,AEA）的研究现状。以 anandamide 为关键词在 ISI Web of Knowledge 数据库中检索相关文献,对其发表时间、语种、作者、期刊来源、学科类别和被引用次数等进行分析。共检索相关文献3 015篇,主要作者、国家、期刊、学科类别、发表时间依次为：Di Marzo V（220篇）、美国（1 254篇）、Br J Pharmacol（189篇）、生物化学与分子生物学类（2 631篇）、2009年（318篇）。AEA 领域的研究正逐渐受到世界各国研究者的重视,但其产业化、规模化发展还需要很长的发展过程。     

血脂康对急性冠脉综合征患者内皮功能的影响

目的观察血脂康对急性冠脉综合征患者血清一氧化氮（NO）及一氧化氮合酶（NOS）的影响。方法随机选择急性冠脉综合征病患者67例．将其随机分为血脂康治疗组35例，阿托伐他汀组32例，并对两组患者治疗前后血清NO及NOS含量水平进行对比分析。结果血脂康和阿托伐他汀均可升高急性冠脉综合征患者血清NO及NOS水平，其作用无明显差异（P〉0．05）。结论血脂康可抑制脂质过氧化反应．保护血管内皮功能，对急性冠脉综合征的防治具有重要意义。     

1,25-二羟维生素D_3对脊柱结核患者外周血单个核细胞的NO及iNOS的影响研究

目的:研究1,25-二羟维生素D3(DHVD3)作用下脊柱结核患者外周血单个核细胞(PBMC)中一氧化氮(NO)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)含量变化,探讨其对脊柱结核患者的免疫调节作用。方法:患者PBMC分为试验组(加入DHVD3)和对照组(加入培养基),接种卡介苗后培养;采用硝酸还原酶法测定不同时间点(0、3、6、9、12d)试验组和对照组培养上清液中NO的相对吸光度值,分析其变化规律;于第6天收获2组培养细胞,提取细胞总RNA,逆转录后,定量聚合酶链反应(PCR)扩增,对目的基因iNOS及参照基因3-磷酸甘油醛脱氢酶的mRNA进行分析,用相对定量方法2-ΔΔCt比较其差异。结果:细胞培养第6天,试验组NO的相对吸光度值和iNOS的mRNA含量均高于对照组(P<0.05)。结论:DHVD3可使脊柱结核患者PBMC内iNOS的含量增加,进而促进NO的分泌,从而增强单个核细胞对结核杆菌的吞噬作用。     

一氧化氮合酶抑制剂的研究进展

一氧化氮（NO）具有广泛的生理功能,哺乳动物体内的NO是由NO合酶（NOS）氧化L－精氨酸而合成的,合成后的NO迅速跨膜扩散释放,NO合成失调能介导多种疾病产生,特异性NOS抑制剂能通过调控NO的合成,对NOS表达相关的各种疾病的防治具有重要的临床意义,本文对近年来NOS抑制剂的研究作一概述。     

Nitric Oxide Synthase Inhibition by Pentacycloundecane Conjugates of Aminoguanidine and Tryptamine

This paper describes the synthesis and in‐vitro activity of pentacycloundecane‐conjugated aminoguanidine and tryptamine analogues on nitric oxide synthase (NOS) using rat brain homogenate. Both aminoguanidine and tryptamine‐derived NOS inhibitors show selectivity towards the inducible and neuronal isoforms of the NOS enzyme, but are weak inhibitors and complete inhibition of the enzyme occurs only at high millimolar concentrations. In view of the increased NOS inactivation observed with alkyl substitution of these structures, the present study aimed to evaluate the effect of the pentacycloundecane cage moiety as an alkyl substituent on the in vitro NOS inhibition of aminoguanidine and tryptamine compounds. Comparison of the IC₅₀ values of aminoguanidine (IC₅₀ = 2.306×10^–3 M) and 8‐imino‐N‐guanidino‐pentacyclo‐undecane 2 (IC₅₀ = 8.803×10^–5 M) revealed a more than 26‐fold increase in potency. The ability of tryptamine to inhibit NOS activity was also markedly improved by the various pentacycloundecane substituents. The compounds, 3‐hydroxy‐4‐[3‐(2‐aminoethyl)indole]‐azahexacyclo[5.4.1.0^2,6.0^3,10.0^5,9.0^8,11]dodecane 4 and 8‐[3‐(2‐aminoethyl) indole]‐pentacyclo[5.4.0^2,6.0^3,10.0^5,9]undecane 7 showed the best activity of the tryptamine analogues with a more than 3‐fold increase in nitric oxide synthase inhibition. The results confirmed that the pentacycloundecane structure substantially enhanced the NOS inhibitory potency as observed for the six new NOS inhibitors.     

蝶啶类一氧化氮合酶抑制剂的研究

综述了近年来对一氧化氮化合酶（NOS）结构的研究近况和以四氢生物蝶呤（BH4)为靶点的蝶啶类NOS抑制剂的研究进展，重点讨论了在蝶啶的2－，4－，5－，6－，7－位进行修饰所得的化合物的构效关系。     

甲氨蝶呤对诱导型一氧化氮合酶的抑制活性及其机制研究

目的揭示甲氨蝶呤(MTX)对诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的抑制活性及其机制,明确MTX、四氢生物蝶呤(BH4)和iNOS之间的相互作用。方法采用试剂盒方法测定MTX对iNOS的体外抑制活性,并采用计算机对接程序(DOCK)模拟MTX和iNOS的结合方式。结果浓度为112μmol/L的MTX对iNOS的抑制率为100%,其IC50为(44.64±4.47)μmol/L;MTX可完全占据BH4与iNOS的结合“腔穴”而与iNOS稳定结合。结论MTX是一种BH4的竞争性iNOS抑制剂,通过与iNOS活性位点的直接作用,进而抑制NO的产生。     

大鼠生后肾内皮型一氧化氮合酶的定量分析

为探讨内皮型一氧化氮合酶在大鼠生后肾发育中的作用,采用SD大鼠按生后年龄随机分为6组,即新生组、生后3天组、5天组、7天组、14天组和成年组,用免疫印记技术和光密度分析法对各组大鼠生后肾内皮型一氧化氮合酶进行定量检测,以测得的一氧化氮合酶最大量为1(100%),计算蛋白相对含量,SPSS10.0统计软件包统计分析。结果显示,新生组酶含量最高为1,随年龄增长酶含量逐渐减少,至第7天达到最少为44.60±2.41%,以后又增高至14天达成年水平为71.55±4.35%。提示大鼠生后不同年龄组肾内皮型一氧化氮合酶有明显的变化规律,NO可能在肾脏的成熟与发育中起重要作用。     

一氧化氮合酶抑制剂对实验性骨关节炎PGE2的调节作用

目的: 探讨一氧化氮合酶(nitric oxide synthase, NOS)抑制剂在实验性骨关节炎(osteoarthritis, OA)关节滑液中对前列腺素E2(prostaglandin E2, PGE2)的调节作用,为研制针对NO治疗OA的药物提供理论依据. 方法: 采用兔右后腿膝关节伸直位石膏管固定建立实验性OA模型,同时建立对照组,分别给予NOS抑制剂L-硝基精氨酸甲酯(L-NAME)或环氧化酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布, 检测各实验组关节滑液中的NO水平与PGE2的含量. 结果: L-NAME 石膏固定组的NO水平和PGE2浓度, 明显比单纯石膏固定组低,两者的差异有显著的统计意义(P<0.01),而塞来昔布 石膏固定组的NO水平,与单纯石膏固定组NO水平比较,两者的差异没有显著的统计学意义(P>0.05).结论: 实验性OA关节滑液中, NOS抑制剂L-NAME不仅能有效降低OA关节滑液中NO的水平,同时下调PGE2的浓度,而COX-2抑制剂对NO的水平无明显影响.     

Pharmacokinetics and Pharmacodynamics of 7-Nitroindazole,a Selective Nitric Oxide Synthase Inhibitor,in the Rat Hippocampus

Purpose. This study was conducted to assess the pharmacokinetics and pharmacodynamics of 7-nitroindazole (7-NI), a selective inhibitor of neuronal nitric oxide synthase (NOS). Methods. Male Sprague-Dawley rats were equipped with peritoneal/venous cannulae and a microdialysis probe in the hippocampal cortex. Rats received 7-NI in peanut oil (25 mg/kg) ip every 2 h for 14 h or peanut oil alone. Blood samples were obtained at timed intervals for serum 7-NI; brain tissue microdialysate for determination of extracellular 7-NI and NO was obtained every 20 min. A pharmacokinetic-pharmacodynamic model was constructed to evaluate the effects of 7-NI on NOS activity. Results. Consistent with previous reports, NOS activity in controls evidenced circadian variation. These cyclic changes in NO production were incorporated into the model of 7-NI effects on NOS. 7-NI produced a rapid (within 2 h) decrease in hippocampal NO. Under the conditions of this experiment, 7-NI produced an 50% decrease in hippocampal NO, which was sustained during 7-NI administration. The decrease in NOS activity by 7-NI was concentration-dependent with an apparent IC₅₀ of 17 g/ml. Conclusions. Multiple ip injections of 7-NI result in a predictable, sustained decrease in NO production in the hippocampus. The pharmacokinetic-pharmacodynamic model developed allows design of dosing regimens that can produce designated changes in brain NO content, facilitating use of 7-NI to probe the pharmacological implications of NO in the central nervous system.     

一氧化氮合成酶抑制剂的研究进展

一氧化氮（NO）具有广泛的生理功能。哺乳动物体内的NO是由NO合成酶（NOS）氧化L－精氨酸而合成的,合成后的NO迅速跨膜扩散释放。NO合成失调能介导多种疾病产生。特异性NO抑制剂能通过调控NO的合成,对NOS表达相关的各种疾病的防治具有重要的临床意义。本文对近年来NOS抑制剂的研究作一概述。