复合瘤苗TVPBH治疗肿瘤的临床应用研究

目的重点评价人用复合瘤苗的安全性及有效性。方法应用３０例恶性实体瘤手术切除的自身肿瘤组织制成多因素处理的病毒异种化瘤苗ＴＶＰＢＨ,对术后患者进行主动免疫治疗,以１５例患者作为对照。结果发现治疗组患者外周血ＣＤ＋４／ＣＤ＋８细胞比值及ＮＫ细胞活性在治疗后显著高于术前水平（Ｐ＜０．０１）,对照组变化不显著（Ｐ＞０．０５）;两组ＴＮＦ－α和ＩＬ－２含量在治疗前后均有显著变化（Ｐ＜０．０１）,治疗组变化辐度高于对照组（Ｐ＜０．０５）;治疗过程中未观察到明显的毒副作用;通过透射电镜还观察到瘤苗中的新城疫病毒（ＮＤＶ）对来源于消化道的肿瘤细胞易感而对乳腺来源的瘤细胞不易感。结论ＴＶＰＢＨ是一种高特异性的安全有效的免疫制剂。远期疗效在进一步观察中。     

新城鸡瘟病毒诱导小鼠腹腔巨噬细胞产生肿瘤坏死因子的细胞毒…

目的 观察新城鸡瘟病毒Ｌ系（ＮＤＶ－Ｌ）诱导小鼠腹腔巨噬细胞（ＰＥＭΦ）产生的肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）对肿瘤细胞的细胞毒性作用。方法 采用噻唑蓝（ＭＴＴ）和＾３Ｈ－脱氧胸苷（＾３Ｈ－ＴｄＲ）标记肿瘤细胞的方法。结果 ＮＤＶ－Ｌ可诱导小鼠ＰＥＭΦ产生ＴＮＦ－α其产生的量随ＮＤＶ－Ｌ感染量的增加而活性增强，当ＮＤＶ－Ｌ感染剂量一定时，ＴＮＦ－α释放量在ＮＤＶ－Ｌ作用ＰＥＭΦ２４ｈ时为最强（１００     

树突状细胞诱导的细胞毒T淋巴细胞抑制移植瘤细胞增殖

目的　研究树突状细胞（ Ｄ Ｃ）体外诱导的细胞免疫能否抑制裸鼠移植瘤肿瘤细胞增殖。方法　联合应用粒／巨细胞集落刺激因子（ Ｇ Ｍ  Ｃ Ｓ Ｆ）及白介素４（ Ｉ Ｌ４）直接从肝癌患者外周血中培养出 Ｄ Ｃ;以源于人肝癌细胞系 Ｈｅｐ Ｇ２ 细胞的肿瘤抗原粗提物刺激 Ｄ Ｃ; Ｄ Ｃ 激活同源的 Ｔ 淋巴细胞产生细胞 毒性 Ｔ 淋 巴细胞 （ Ｃ Ｔ Ｌ）; 建立 人肝癌 细胞 系 Ｈｅｐ Ｇ２ 裸鼠移植瘤模型; Ｃ Ｔ Ｌ 治疗人肝癌细胞系 Ｈｅｐ Ｇ２ 裸鼠移植瘤;检测移植瘤标本肿瘤细胞 Ｐ Ｃ Ｎ Ａ 表达水平。结果　 Ｄ Ｃ诱导的 Ｃ Ｔ Ｌ抑制 Ｈｅｐ Ｇ２ 裸鼠移植瘤细胞增殖从而抑制移植瘤生长。结论　经肿瘤抗原激活的 Ｄ Ｃ 作为一新概念上的抗肿瘤疫苗有可能在肿瘤的治疗中发挥重要作用。     

ＥＢ病毒相关的Ｔ／ＮＫ细胞淋巴增殖性疾病的研究进展

ＥＢ病毒相关的Ｔ／ＮＫ细胞淋巴增殖性疾病（ＥＢＶ Ｔ／ＮＫＬＰＤ）包括慢性活动性ＥＢＶ感染（ＣＡＥＢＶ）、ＥＢＶ相关的噬血细胞性淋巴组织细胞增生症（ＥＢＶ-ＨＬＨ）和Ｔ／ＮＫ恶性疾患等。以Ｔ或ＮＫ细胞的异位感染为特征,发病的潜在机制复杂,包括Ｔ或ＮＫ细胞遗传学异常。频繁的致死转归是由于ＥＢＶ感染的Ｔ／ＮＫ细胞恶性转化和发生ＨＬＨ和ＣＡＥＢＶ。治疗策略尚需进一步探讨和完善。     

新城疫病毒处理瘤细胞的免疫实验研究

目的：观察新城疫病毒（简称ＮＤＶ）对体外培养的肿瘤细胞免疫原性的影响。方法：将经新城疫病毒处理的小鼠肝癌细胞Ｈ２２为活瘤进行免疫接种。结果：ＮＤＶ处理瘤细胞制备的瘤苗可完全排斥再次接种未经病毒处理瘤细胞的生长,瘤苗能增强小鼠体内细胞免疫。结论：ＮＤＶ处理后的瘤细胞能使肿瘤生长减慢、荷瘤生存期明显延长。     

树突状细胞体外诱导高效而特异的抗肿瘤免疫

为研究肿瘤患者外周血树突状细胞（ＤＣ）能否在体外诱导高效而特异的抗肿瘤免疫反应，作者自骨肉瘤患者外周血中分离ＤＣ。以源于人骨肉瘤细胞系ＨＯＳ－８６０３肿瘤细胞的肿瘤相关抗原（ＴＡＡ）激活ＤＣ，以粒／巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）及白介素－４（ＩＬ－４）联合刺激ＤＣ，ＤＣ激活同源的Ｔ淋巴细胞，被激活的Ｔ淋巴细胞及其上清液杀伤ＨＯＳ－８６０３肿瘤细胞。发现以ＴＡＡ激活并经ＧＭ－ＣＳＦ及ＩＬ－４联合刺激的ＤＣ能够诱导同源Ｔ淋巴细胞增殖、分化为细胞毒性Ｔ细胞（ＣＴＬ），该ＣＴＬ及其上清液对ＨＯＳ－８６０３肿瘤细胞有高效而特异性的杀伤作用。结果表明，肿瘤患者外周血ＤＣ在体外能够诱导出高效而特异的抗肿瘤免疫反应，提示ＤＣ作为一新概念上的肿瘤疫苗将在肿瘤治疗及预防中发挥重要作用。     

鸡新城疫病毒抗肿瘤作用及其机制的研究进展

鸡新城疫病毒（ｎｅｗｃａｓｔｌｅ ｄｉｓｅａｓｅ ｖｉｒｕｓ,ＮＤＶ）感染机体可以诱导产生干扰素、白细胞介素、肿瘤坏死因子等细胞因子,这些细胞因子能够在患瘤机体内发挥抗肿瘤作用。ＤＮＶ的随着蛋白（ｈｅｍａｇｇｌｕｔｉｎｉｎ－ｎｅｕｒａｍｉｄａｓｅ,ＨＮ蛋白）具有增加瘤细胞对淋巴细胞的粘附力、刺激淋巴细胞的分化和改变肿瘤细胞的免疫原性等作用,同时ＮＤＶ可以激活患瘤机体的免疫细胞,使免疫细胞发挥细胞毒     

p53及B7重组痘苗病毒抗肿瘤的实验研究

目的：探索点突变 ｐ５３重组痘苗病毒诱导的抗瘤免疫反应及 Ｂ７对其加强作用,为重组抗原疫苗用于肿瘤免疫治疗提供实验依据。方法：选择人 １３５位 Ｃｙｓ→Ｔｙｒ点突变ｐ５３作为肿瘤相关抗原模型,观察以表达该点突变 ｐ５３的重组痘苗病毒ｒＶＶ－ｐ５３ＦＬ单独和联合表达 Ｂ７的重组痘苗病毒 ｒＶＶ－Ｂ７所诱导的 ＣＴＬ及对荷瘤小鼠的免疫保护和治疗作用。结果：以 ｒＶＶ－ｐ５３ＦＬ经静脉免疫 ＢＡＬＢ／ｃ小鼠能够诱导以 ＣＤＳ＋ Ｔ细胞为主的特异性 ＣＴＬ。ｒＶＶ－ｐ５３ＦＬ能够保护部分小鼠免遭肿瘤细胞的攻击。以ｒＶＶ－ｐ５３ＦＬ治疗荷瘤小鼠,可显著延长小鼠平均存活期。ｒＶＶ－Ｂ７与ｒＶＶ－ｐ５３ＦＬ以１：１的比例混合接种可部分加强ｒｖｖ－ｐ５３ＦＬ的治疗作用。结论：肿瘤细胞内过度表达的突变Ｐ５３蛋白可作为ＣＴＬ识别和攻击的靶抗原,以突变Ｐ５３蛋白作为肿瘤抗原的疫苗可诱导机体产生 ｐ５３特异性的抗瘤免疫反应。共刺激分子 Ｂ７可加强肿瘤抗原诱导的抗瘤免疫反应。     

新城鸡瘟病毒诱导小鼠腹腔巨噬细胞产生肿瘤坏死因子的细胞毒活性研究

目的观察新城鸡瘟病毒Ｌ系（ＮＤＶ－Ｌ）诱导小鼠腹腔巨噬细胞（ＰＥＭΦ）产生的肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）对肿瘤细胞的细胞毒性作用。方法采用噻唑蓝（ＭＴＴ）和３Ｈ－脱氧胸苷（３Ｈ－ＴｄＲ）标记肿瘤细胞的方法。结果ＮＤＶ－Ｌ可诱导小鼠ＰＥＭΦ产生ＴＮＦ－α，其产生的量随ＮＤＶ－Ｌ感染量的增加而活性增强。当ＮＤＶ－Ｌ感染剂量一定时，ＴＮＦ－α释放量在ＮＤＶ－Ｌ作用ＰＥＭΦ２４ｈ时为最强（１００Ｕ／ｍｌ）。用３Ｈ－ＴｄＲ标记肿瘤细胞（小鼠乳腺癌细胞系Ｃａ７６１－８６和小鼠肥大细胞瘤Ｐ８１５）做ＴＮＦ－α的细胞毒试验，表明其具有明显的杀伤活性。结论ＮＤＶ－Ｌ诱导小鼠腹腔巨噬细胞产生的ＴＮＦ－α具有明显的细胞毒活性。     

树突状细胞局部免疫抗瘤作用的初步研究

目的：探讨树突状细胞（ＤＣ）瘤内注射的局部免疫方式对小鼠Ｈ２２肿瘤的治疗效果。方法：体外诱导生成树突状细胞,经Ｈ２２肿瘤裂解抗原致敏,实验分为对照组、ＤＣ组和ＤＣ＋ＣｐＧ-ＯＤＮ组,分别与Ｔ细胞共培养,收获的Ｔ细胞与肿瘤细胞共培养,观察其对肿瘤细胞的杀伤。体内试验：ＢＡＬＢ／ｃ小鼠皮下接种Ｈ２２肿瘤细胞制作成荷瘤鼠,第４天时进行局部瘤内免疫治疗,分为３组：生理盐水组、ＤＣ组和ＤＣ＋ＣｐＧ-ＯＤＮ组,免疫治疗１０天后处死小鼠,观察其治疗小鼠Ｈ２２肿瘤的效果。结果：体外实验中,对照组、ＤＣ组和ＤＣ＋ＣｐＧ-ＯＤＮ组的肿瘤杀伤率分别为（１０.８０±３.２７）％、（３８.２６±５.６０）％和（４２.６６±９.００）％,后两组杀伤率均高于对照组（Ｐ＜０.０１）;体内实验中,生理盐水组、ＤＣ组和ＤＣ＋ＣｐＧ-ＯＤＮ组的平均瘤重（ｇ）分别为１.８０４±０.４２２、１.２１６±０.３３５和０.７３３±０.１９１（Ｐ＜０.０１）。结论：ＤＣ瘤苗局部瘤内注射可抑制小鼠Ｈ２２肿瘤的生长,联合应用非甲基化ＣｐＧ-ＯＤＮ可以明显提高抑瘤效果。     

p53抗原肽及B7重组痘苗病毒抗肿瘤的研究

目的：探索点突变ｐ５３抗原肽重组痘苗病毒诱导的抗瘤免疫效应,以及Ｂ７对之的加强作用,为重组抗原肽疫苗用于肿瘤免疫治疗提供实验依据。方法：选择人１３５位Ｃｙｓ→Ｔｙｒ点突变ｐ５３为肿瘤相关抗原模式,观察包含该点突变ｐ５３抗原肽ｐ５３１２５～１４５的重组痘苗病毒ｒＶＶ－ｐ５３Ｍ单独和联合应用表达Ｂ７的重组痘苗病毒ｒ－ＶＶ－Ｂ７诱导的ＣＴＬ及对荷瘤小鼠的免疫保护和治疗效应。结果：以ｒＶＶ－ｐ５３Ｍ经静脉免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠能够诱导以ＣＤ８＾＋Ｔ细胞为主的特异性ＣＴＬ。ｒＶＶ－ｐ５３Ｍ能以１：１的比例混合接种可加强ｒＶＶ－ｐ５３Ｍ诱导的抗瘤免疫反应。结论：以痘苗病毒为载体的ｐ５３抗原肽疫苗代夫人工合成抗原肽,有潜在临床应用价值,共刺激分子Ｂ７与肿瘤抗原相结合是一种有效的免疫治疗策略。     

HSV-tk基因在人乳腺癌细胞中的表达及其诱导杀伤的特性研究

ＨＳＶ ｔｋ基因转移联合ＧＣＶ的方法已成为肿瘤基因治疗的重要策略之一[1] 。ＨＳＶ/ＴＫ ＧＣＶ系统通过直接作用或旁观者效应杀伤肿瘤细胞 ,被杀死的瘤细胞经抗原递呈细胞如ＤＣ处理后 ,递呈给Ｔ细胞 ,从而产生了肿瘤特异性免疫。自杀基因疗法在治疗肿瘤时 ,瘤细胞的接种作用和凋亡现象均能刺激机体免疫系统 ,通过免疫反应可能达到消灭肿瘤、保护宿主以防肿瘤复发和转移的长期作用[2 ] 。本研究利用逆转录病毒将Ｈｙ ｔｋ基因转入人乳腺癌细胞株ＭＣＦ 7中 ,经潮霉素筛选获得了稳定表达ｔｋ的ＭＣＦ 7/ＴＫ细胞克隆 ,在ＧＣＶ作用下 ,其…     

树突状细胞诱导的抗大肠癌免疫预防裸鼠移植瘤发生并抑制其生长

目的　研究大肠癌患者外周血树突状细胞（ Ｄ Ｃ）体外诱导抗肿瘤免疫反应能否预防裸鼠移植瘤发生及抑制裸鼠移植瘤生长。方法　联合应用粒／巨噬细胞集落刺激因子（ Ｇ Ｍ Ｃ Ｓ Ｆ）及白介素４（ Ｉ Ｌ４）从大肠癌患者外周血中培养出 Ｄ Ｃ;人大肠癌细胞系 Ｌ Ｏ Ｖ Ｏ 细胞的肿瘤抗原粗提物刺激 Ｄ Ｃ; Ｄ Ｃ激活同源的 Ｔ 淋巴细胞; Ｄ Ｃ激活的 Ｔ 淋巴细胞预防性接种于裸鼠皮下,观察随后接种的人大肠癌细胞系 Ｌ Ｏ Ｖ Ｏ 移植瘤发生率;观察 Ｄ Ｃ 激活的 Ｔ 淋巴细胞抑制已接种于裸鼠的人大肠癌细胞系 Ｌ Ｏ Ｖ Ｏ 移植瘤生长。结果　 Ｄ Ｃ 体外激活的 Ｔ 淋巴细胞明显能预防裸鼠人大肠癌细胞系 Ｌ Ｏ Ｖ Ｏ 移植瘤发生（预防组 １０％ , 对照组 １００％ , Ｐ＜ ０００１）; Ｄ Ｃ 体外激活的 Ｔ 淋巴细胞抑制该移植瘤生长〔对照组、治疗组 及加强 治疗组 肿瘤 大小分 别为 ８７３ｍ ｍ ２ ±１９ｍ ｍ ２ 、５６９ｍ ｍ ２ ±１７ｍ ｍ ２ 、３６１ｍ ｍ ２ ±２６ｍ ｍ ２ , Ｐ＜ ００５ 及 Ｐ＜ ００１〕。结论　大肠癌患者外周血 Ｄ Ｃ体外诱导的抗肿瘤细胞免疫反应不仅能预防人大肠癌细胞系 Ｌ Ｏ Ｖ Ｏ 裸鼠移植瘤发生,而且能抑制该移植瘤生长     

树突状细胞体外诱导高效而特异的抗结肠癌免疫

为达到以结肠癌患者外周血树突状细胞（ＤＣ）在体外诱导抗结肠癌免疫反应的目的，以结肠癌细胞系ＬＯＶＯ肿瘤细胞的肿瘤抗原粗提物激活并经ＧＭ－ＣＳＦ及ＩＬ－４联合刺激的结肠癌患者外周血树突状细胞（ＤＣ）体外能够诱导自体混合Ｔ淋巴细胞增殖、分化为ＣＴＬ，该ＣＴＬ及其上清液对ＬＯＶＯ肿瘤细胞均有强大的杀伤力，而对ＨｅｐＧ２肿瘤，该ＣＴＬ细胞及ＨＯＳ－８６０３肿瘤细胞仅有微弱的细胞毒作用。结果表明结肠癌患者外周血ＤＣ体外能够诱导高效而特异抗结肠癌免疫反应。提示ＤＣ作为一新概念上的肿瘤疫苗可能在肿瘤治疗及预防中发挥重要作用     

新城疫病毒对人胃癌细胞的抑制杀伤作用

目的：研究新城疫病毒（ＮＤＶ）对人胃癌细胞株的作用。方法：利用ＭＴＴ方法检测ＮＤＶ对人胃癌细胞株的杀伤性。结果：ＮＤＶ作用后的人胃癌细胞株的细胞活性比对照的细胞活性有显著下降（Ｐ〈０．０１），且ＮＤＶ血凝效价值显著升高，表明ＮＤＶ能杀死肿瘤细胞。结论：ＤＮＡ能够直接杀死肿瘤细胞，可作为治疗肿瘤的一种新生物制剂。     

肿瘤基因疫苗—肿瘤免疫治疗的新途径

肿瘤细胞能表达肿瘤相关抗原（ＴＡＡ）。ＴＡＡ基因的克隆与鉴定为肿瘤基因疫苗的研究奠定了基础。肿瘤基因疫苗以ＴＡＡ为攻击靶点,诱导机体产生ＴＡＡ特异性抗肿瘤免疫,能够刺激宿主产生ＴＡＡ特异性抗体和能溶解肿瘤细胞的细胞毒Ｔ淋巴细胞,并获得对相应肿瘤的免疫保护能力。接种肿瘤基因疫苗的小鼠能够排斥同种移植瘤的形成,延长荷瘤小鼠的生存期。     

溶瘤病毒可击溃癌细胞与肿瘤保护层

<正>近日,牛津大学的研究人员开发了一种新型溶瘤病毒,可击溃癌细胞和肿瘤保护层。更重要的是,这种全新的免疫疗法有望彻底杜绝癌症复发。实体瘤由肿瘤实质和肿瘤间质组成,实质即为讨厌的肿瘤细胞,而肿瘤间质是肿瘤组织中除肿瘤细胞外其他成分的统称,其中癌相关成纤维细胞(Cancer associated fibroblasts,CAF)是肿瘤间质中主要的细胞类型。CAF通常通过诱导细胞增殖、炎症、血管生长和转移,促进肿瘤进展。研究人员研究出一种集灭癌细胞和破CAF的全新溶瘤病毒enadenotucirev,经过基因改造后可表达一种特殊的蛋白质,称为双特异性T细胞接头(bispecific T-cell engager,     

肿瘤微环境与炎症反应及溶瘤病毒治疗的关系

炎症反应在清除病原体、创伤愈合和抗肿瘤免疫中发挥重要作用,被肿瘤细胞劫持的炎性细胞和细胞因子也是肿瘤微环境重要的参与者;许多肿瘤起源于感染和慢性炎症,肿瘤微环境中炎症细胞和炎症介质的蓄积具有促进恶性细胞增殖和存活、促进血管生成和肿瘤转移,以及逆转获得性免疫反应的作用,也改变了肿瘤细胞对激素和化疗药物的敏感性。炎症反应在肿瘤的发生和消除中发挥的作用比较复杂。溶瘤病毒治疗肿瘤,是充分利用溶瘤病毒选择性感染和杀伤肿瘤细胞的特性。在肿瘤微环境中,溶瘤病毒所诱导的针对肿瘤细胞和病毒的天然免疫反应具有双重效应:既能引起肿瘤细胞的损伤,促进溶瘤病毒抗肿瘤的疗效,也能识别、清除隐藏于肿瘤组织内部的溶瘤病毒,降低溶瘤病毒的效应。     

树突状细胞体外诱导抗肿瘤免疫通过诱导肿瘤细胞凋亡抑制裸鼠移植瘤生长

研究树突状细胞（ＤＣ）体外诱导的细胞免疫抑制裸鼠移植瘤生长作用及其机理。方法：联合应用粒／巨噬细胞集落刺激因子ＫＭ－ＣＳＦ）及白介素－４（ＩＬ－４）直接从肝癌患者外周血中培养出ＤＣ,以人肝癌细胞系ＨｅｐＧ２肿瘤细胞的肿瘤抗原粗提物刺激ＤＣ,ＤＣ激活同源的Ｔ淋巴细胞,建立裸鼠人肝癌细胞系ＨｅｐＧ２移植瘤模型,以被激活的Ｔ淋巴细胞治疗裸鼠ＨｅｐＧ２移植瘤并观察治疗效果,检测移植瘤标本肿瘤细胞凋亡情况。结果：ＤＣ诱导的Ｔ细胞免疫能够诱导裸鼠人肝癌细胞系ＨｅｐＧ２移植瘤肿瘤细胞大量凋亡从而抑制裸鼠ＨｅｐＧ２移植瘤生长。结论：经肿瘤抗原激活的ＤＣ作为一新概念上的抗肿瘤疫苗有可能在肿瘤的治疗中发挥重要作用。     

抗癌药物诱导人B淋巴细胞白血病细胞的凋亡及周期特异性

目的探讨抗癌药物对人Ｂ淋巴细胞白血病细胞株Ｎａｌｍ－６细胞凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）的影响及周期特异性。方法临床常用的抗癌药物与Ｎａｌｍ－６细胞相互作用８～２４小时后,利用低倍体ＤＮＡ－ＦＣＭ测定法和ＴｄＴ测定＋ＤＮＡ染色法进行检测。结果ＡＤＲ、ＶＰ１６、ＣＰＴ、ＭＴＸ和Ａｒａ－Ｃ能明显诱导细胞凋亡,主要作用于Ｓ期。ＣＰＭ、６ＭＰ和ＰＲＤ则有较低的凋亡细胞诱导率,ＣＰＭ在大剂量时主要引起细胞坏死。６ＭＰ诱导Ｇ１和Ｓ期细胞凋亡,ＰＲＤ诱导Ｇ１期细胞凋亡,ＣＰＭ诱导凋亡作用无明显的周期特异性。结论抗癌药物能诱导人Ｂ淋巴白血病细胞株Ｎａｌｍ－６细胞凋亡。低倍体ＤＮＡ－ＦＣＭ测定法能检测细胞的凋亡率,ＴｄＴ测定＋ＤＮＡ染色法能呈现凋亡细胞与细胞周期的关系。临床上可利用此两种方法检测肿瘤细胞的凋亡率,抗癌药物的疗效及其周期特异性。从而有助于化疗方案的设计及预后的评估。