妊娠期调节性T细胞与雌激素水平变化对母胎免疫耐受的影响

目的:探讨不同妊娠期外周血调节性T细胞与雌激素水平变化对母胎免疫耐受的影响。方法:选择非妊娠妇女30例为对照组,早、中、晚孕及产后3天妇女各30例为研究组;应用流式细胞术检测外周血CD4+ CD25+ Treg及Foxp3+细胞占CD4+ T细胞的比例,用电化学免疫发光法测定其外周血E2含量。结果:外周血E2含量、CD4+ CD25+ Treg、CD25+ Foxp3+ Treg占CD4+细胞的比例分别为:非妊娠对照组(211.30±107.30)pmol/L、(10.99±2.64)%、(2.12±0.83)%;早孕组(16644.00±12131.20)pmol/L、(12.63±3.05)%、(2.99±1.22)%;中孕组(90846.60±36335.20)pmol/L、(19.48±5.11)%、(3.92±1.46)%;晚孕组(109354.1±40671.6)pmol/L、(17.44±5.36)%、(3.47±1.15)%;产后组(420.70±214.80)pmol/L、(13.86±2.61)%、(2.56±0.74)%。各妊娠组CD4+ CD25+ Treg和CD25+ Foxp3+ Treg均明显高于非妊娠对照组(t值分别为2.22,8.90,5.91和3.22,5.83,5.21;P均<0.05);中孕期达高峰;晚孕略有下降,但仍维持高水平,与中孕组比较无统计学差异(t=1.51和1.30,P>0.05);产后3天下降明显,但仍高于非妊娠对照组(t=4.24和2.13,P<0.05)。外周血E2含量从早孕到晚孕逐渐升高,产后迅速下降,但仍明显高于非妊娠对照组(t=4.78,P<0.01)。各妊娠组均明显高于非妊娠对照组(t值分别为7.42,13.66,14.69;P均<0.01);中、晚孕组明显高于早孕组(t=10.61和11.59,P<0.01),中、晚孕组比较无统计学差异(t=1.86,P>0.05)。结论:妊娠期CD4+ CD25+ Treg增殖和Foxp3+表达在诱导母胎免疫耐受和维持正常妊娠过程中发挥重要作用,而高水平E2对CD4+ CD25+ Treg增殖和Foxp3+表达起促进作用。     

正常妊娠外周血CD4＋CD25＋FOXP3＋Treg细胞和雌二醇水平变化的研究

目的探讨外周血CD4＋CD25＋FOXP3＋Treg细胞百分率和雌二醇水平在正常妊娠整个过程中的变化。方法采用三色荧光标记流式细胞术检测正常非妊娠健康女性（对照组）,早早孕组、早孕组、中孕组、晚孕组各35例妇女外周血CD4＋CD25＋FOXP3＋Treg细胞百分率;采用电化学发光酶免分析技术分别检测以上各对象外周血雌二醇水平。结果对照组和早早孕组外周血雌二醇水平明显低于早孕组、中孕组、晚孕组（P〈0．05）,并且随孕周增大而升高（P〈0．05）;对照组和早早孕组外周血CD4＋CD25＋FOXP3＋Treg细胞百分率明显低于早孕组、中孕组、晚孕组（P〈0．05）,并且随孕周增大而升高（P〈0．05）,晚孕组略低于中孕组,但无统计学意义（P〉0．05）。结论正常妊娠过程孕8周左右之后CD4＋CD25＋FOXP3＋Treg细胞百分率和雌二醇水平均呈现明显升高,并且随孕周增大而升高,正常的CD4＋CD25＋FOXP3＋Treg细胞百分率和外周血雌二醇水平在维持正常妊娠过程中发挥重要作用。     

CD4~+ CD25~+调节性T细胞在上皮性卵巢癌患者外周血中的表达及临床意义

目的:研究上皮性卵巢癌患者外周血中CD4+ CD25+调节性T细胞数量及其相关基因Foxp3 mRNA的表达特点,探讨CD4+CD25+调节性T细胞在诱导肿瘤免疫耐受中的作用。方法:采用流式细胞术检测卵巢浆液性囊腺癌和粘液性囊腺癌患者外周血中CD4+ CD25+调节性T细胞数量变化;采用半定量RT-PCR方法检测卵巢浆液性囊腺癌和粘液性囊腺癌患者外周血PBMC中Foxp3 mRNA表达水平。结果:卵巢浆液性囊腺癌和粘液性囊腺癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞数量均明显升高(P<0.05);Foxp3 mRNA在卵巢浆液性囊腺癌和粘液性囊腺癌患者外周血PBMC中表达明显增高(P<0.05)。结论:CD4+ CD25+调节性T细胞可能在卵巢癌免疫耐受中发挥重要作用。     

新生儿脐带血CD4＋CD25high调节性T细胞Foxp3的表达探析

目的：对新生儿脐带血CD4＋CD25high细胞中调节性Treg细胞的Foxp3表达进行研究。方法：采用密度梯度离心法提取新生儿（A组）脐带与成年人（B组）外周血液中的单个细胞核后,使用流式细胞仪测定CD4＋CD25high细胞中的Treg细胞数量,并对细胞内的转录因子（Foxp3）进行检测,并记录检测结果。结果：A组CD3＋CD4＋细胞中Treg细胞所占比例为（3．86±1．63）％,明显高于B组的（0．87±0．74）％：A组Treg细胞中表达Foxp3的比例为（23．21±8．9）％,明显低于B组的（71．3±11．6）％,差异均有统计学意义（P〈O．01）。结论：虽然新生儿脐带血中CD4＋CD25high的细胞数量较高,但新生儿Foxp3细胞相对于成年人却相对较低,这也进一步说明新生儿Treg细胞的Foxp3表达能力尚未完全发育并未成熟。     

慢性苯中毒患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞水平变化

[目的]通过测定慢性苯中毒患者、苯接触者及对照组体检者外周血中调节性T细胞(Treg)数量的变化,探讨慢性苯中毒发生的免疫学机制.[方法]采用流式细胞仪技术对30例慢性苯中毒患者、30例苯接触者及30例对照组体检者外周血标本中单个核细胞的CD4+CD25+Treg细胞进行检测,比较慢性苯中毒患者、苯接触者及对照组体检者之间CD4+CD25+ Treg细胞表达的差异.[结果]与对照组比较,慢性苯中毒患者外周血单个核细胞中CD4+CD25+ Treg细胞百分比明显降低(P＜0.05);与苯接触者比较,慢性苯中毒患者单个核细胞中CD4+CD25+ Treg细胞百分比明显降低(P＜0.05);苯接触者外周血单个核细胞中CD4+CD25+Treg细胞百分比与对照组相比,差异无统计学意义(P＞0.05).[结论]慢性苯中毒患者存在细胞免疫紊乱. CD4+CD25+Treg细胞百分比的减少可能为慢性苯中毒发生的致病机制之一.CD4+CD25+Treg有可能被作为监测长期苯作业人群的一个生物学指标.     

干扰素对慢性丙肝患者T淋巴细胞亚群及甲状腺功能的影响

目的分析干扰素对慢性丙肝患者CD_4~+CD_(25)~+Treg细胞及甲状腺功能的影响,为临床治疗提供参考依据。方法选取医院2012年5月-2015年5月收治的80例慢性丙型病毒性肝炎患者,依据随机数表法分成观察组与对照组,各40例;对照组予以常规药物治疗,观察组予以干扰素治疗,观察两组患者治疗后各项指标水平变化及不良反应率。结果治疗后,观察组CD_4~+CD_(25)~+Treg细胞为(7.52±1.10)%、对照组为(8.21±1.13)%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);观察组谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TbiL)、直接胆红素(DbiL)低于对照组(P<0.05);两组不良反应率比较差异无统计学意义。结论干扰素对慢性丙型肝炎患者的治疗效果比较确切,对甲状腺的功能影响较小,能够明显地改善患者的肝功能,降低CD_4~+CD_(25)~+Treg细胞水平,调节机体免疫应答反应,促进患者康复。     

HBV宫内感染新生儿外周血调节性T细胞表达

目的 探讨CD4⁺CD25⁺调节性T细胞(Treg)在乙肝病毒(HBV)宫内感染新生儿外周血中的表达和意义。方法 选择乙肝表面抗原(HBsAg)阳性孕妇及其分娩新生儿79例,用酶联免疫吸附试验检测孕妇和新生儿外周血HBV标志物,实时荧光定量PCR 检测母亲和新生儿外周血 HBV DNA 含量,用流式细胞仪检测新生儿外周血CD4⁺CD25⁺ Treg和CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺ Treg水平。结果 宫内感染HBV新生儿外周血CD4⁺CD25⁺ Treg和CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺ Treg占CD4⁺T细胞比例分别为(10.57±2.25)%和(1.67±0.37)%,均高于未感染新生儿,差异有统计学意义(P<0.05),随产妇HBV DNA载量增加,新生儿外周血CD4⁺CD25⁺ Treg和CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺ Treg增加,CD4⁺CD25⁺ Treg比例高于阴性组(P<0.05);CD4⁺CD25⁺ Treg和CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺ Treg均与产妇HBV DNA载量呈正相关(r=0.430、0.409,P<0.05)。结论 Treg可能通过抑制机体细胞免疫反应影响乙肝病毒清除,新生儿HBV宫内感染可能与Treg表达上调有关。     

乳腺癌患者外周血中调节性T细胞的表达及意义

[目的]探讨乳腺癌患者外周血中调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)数量的变化及意义。[方法]选取35例未经治疗的乳腺癌患者、35例术后并化疗后的乳腺癌患者和25例健康人,采集其外周抗凝血,用流式细胞术检测CD4+CD25+CD127-调节性T细胞的表达。[结果]未经治疗的乳腺癌患者外周血中CD4+CD25+CD127-的表达显著高于健康人,差异有统计学意义;术后并化疗后的乳腺癌患者外周血中CD4+CD25+CD127-的表达与正常人无明显差异。[结论]乳腺癌患者外周血中CD4+CD25+CD127-调节性T细胞的比例增加可能引起乳腺癌免疫逃逸,并可能在乳腺癌的发生发展中起重要作用。     

职业性三氯乙烯药疹样皮炎患者外周血调节性T细胞水平研究

  目的  研究职业性三氯乙烯药疹样皮炎（occupational medicamentosa-like dermatitis due to trichloroethylene,OMLDT）患者外周血调节性T细胞及T细胞亚群比例在不同病期中的动态变化特点。
  方法  采用流式细胞术对28例OMLDT患者分别于急性期和临床治愈期进行外周血CD4+CD25+调节性T细胞（regulatory T cells,Tregs）及T细胞亚群比例检测,并与28例非接触三氯乙烯的健康对照进行比较。
  结果  OMLDT临床治愈期CD4+CD25+ Tregs比例为2.40% ±0.42%,比急性期（比例0.97% ±0.52%）明显增加,但仍低于健康对照组（4.77% ±0.81%）,差异均有统计学意义（P < 0.01）。OMLDT临床治愈期的CD4+ T细胞比例为43.29% ±2.67%,显著高于急性期的30.57% ±8.63%,差异有统计学意义（P < 0.01）,但与健康对照组（42.96% ±2.48%）相比差异已无统计学意义（P > 0.05）。OMLDT CD8+ T细胞比例在临床治愈期为28.61% ±5.14%,低于急性期的42.68% ±13.07%,差异有统计学意义（P < 0.01）,但与健康对照组（28.38% ±4.92%）相比差异已无统计学意义（P > 0.05）。
  结论  OMLDT患者调节性T细胞免疫紊乱,治疗后随病情好转有明显改善,提示三氯乙烯致药疹样皮炎与机体T细胞免疫调节功能紊乱有关。
     

CD4+CD25+T细胞在溃疡性结肠炎患者中的表达及意义

目的研究溃疡性结肠炎（UC）患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞和其特异性标志物Foxp3的表达及其在UC不同病期的变化,探讨其在UC发病机制中的意义。方法研究纳入2007年2月至2008年12月在我院就诊的UC患者40例,其中活动期23例,缓解期17例;同时选择33例肠易激综合征（IBS）患者及32名健康者作为对照。用流式细胞仪检测UC患者、IBS患者和正常对照者的外周血CD4＋CD25＋T细胞阳性率,用RT-PCR检测外周血单个核细胞（PBMC）中Foxp3mRNA的表达,用酶联免疫吸附实验检测血清中白细胞介素-10（IL-10）和转化生长因子-β（TGF—β）的浓度。结果活动期和缓解期UC患者、IBS患者、正常对照者外周血CD4＋T细胞总数相比差异无统计学意义（P=0．126）。CD4＋CD25＋T细胞在CD4＋T细胞中所占比例在活动期和缓解期UC患者中均明显低于IBS患者和正常对照组（P均〈0．01）,活动期患者较缓解期患者更低（P〈0．001）,并且与疾病活动指数（r=-0．660,P〈0．001）及红细胞沉降率（r=-0．572,P=0．001）均呈显著负相关,而IBS患者和正常对照者间差异没有统计学意义（P=0．343）。PBMC中Foxp3mRNA的表达在活动期和缓解期UC患者均明显低于IBS患者和正常对照组（P均〈0．001）。而血清IL-10和TGF—β的浓度在活动期和缓解期UC患者、IBS患者和正常对照者4组间无明显差异（P均〉0．05）。结论活动期UC患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞明显降低,缓解期UC患者的表达有所升高,并且与临床疾病活动相关,提示这类细胞可能参与了UC疾病的发生发展,Foxp3表达降低可能是导致CD4＋CD25＋T细胞发育障碍的重要因素。     

转录因子FOXP3与CD4+CD25+调节性T细胞

Foxp3是近年来发现的一种影响调节性T细胞发育的关键转录因子,是forkhead/winged-helix转录因子家族的新成员,可能是CD4~ CD25~ Treg表面特异性标志。在小鼠中常以foxp3     

Treg细胞及Foxp3在子宫内膜异位症患者的表达及临床意义

目的观察调节性T细胞(regulatory T cells,Treg cells)在子宫内膜异位症(endometriosis,EMT)患者外周血中的频率及转录因子Foxp3在异位内膜、在位内膜和正常内膜组织中的表达,旨在探讨Treg细胞及Foxp3与EMT的关系。方法选取35例EMT患者作为研究组,15例因畸胎瘤行手术的患者为对照组,采集两组患者的外周血,应用流式细胞技术检测两组外周血中Treg细胞的频率;留取35例EMT患者的异位内膜组织,20例EMT患者中因不孕或月经异常行宫腔镜检查术者的在位内膜组织,15例因妇科良性疾病行宫腔镜检查术者的正常内膜组织,采用免疫组化法检测比较异位内膜、在位内膜及正常内膜组织中Foxp3的表达。结果 Treg细胞在EMT患者外周血中的频率显著低于对照组(P0.05);转录因子Foxp3在异位内膜组织中表达的阳性率显著高于在位内膜及正常内膜组织(P0.05)。结论 Treg细胞频率在EMT患者外周血中显著下降,在异位内膜组织中显著升高,Treg细胞分布失衡与EMT的发病关系密切。     

实验性抗磷脂综合征小鼠CD4~+CD25~+调节性细胞及foxp3表达的变化

目的:观察实验性抗磷脂综合征(experimental anti-phospholipid antibody syndrome,EAPS)进展过程中小鼠CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)数量和功能变化。方法:以重组人β2糖蛋白1(rhβ2GP1)主动免疫BALB/c小鼠建立实验性APS模型,免疫12周后检测抗β2糖蛋白1抗体(anti-β2-GP1)、抗心磷脂抗体(ACA)、流产率(%)、活化部分凝血活酶时间(aPTT)、血小板计数(PLT PBC)。以流式细胞术检测小鼠PBMC中CD4+CD25+Treg细胞频率,RT-PCR检测转录因子Foxp3 mRNA的表达水平。结果:模型小鼠anti-β2-GP1、aCL水平明显升高,aPTT延长,PLT PBC降低,流产率提高,差异有统计学意义(P0.05)。模型小鼠PBMC中foxp3基因表达在4周短暂高于对照组(P0.05),8周后随着APS进展开始逐渐降低,12周后明显低于对照组(P0.05)。PBMC中CD4+CD25+Treg细胞频率8周前与对照组相比差异无统计学意义(P0.05),12周后逐渐减少,明显低于对照组(P0.05)。结论:CD4+CD25+Treg数量和功能下降参与抗磷脂综合征的发病机制。     

尖锐湿疣患者外周血Treg/Th17细胞平衡及相关转录因子的表达

目的探讨Treg/Th17细胞失衡在尖锐湿疣(CA)发病及复发机制中的作用及意义。方法选取52例CA患者(初发27例,复发25例)作为研究组,30例健康者为正常对照组,采用流式细胞术(FCM)检测其外周血Treg、Th17细胞的比例,实时荧光定量PCR检测外周血单个核细胞中Foxp3 mRNA和RORγt mRNA的表达水平。结果 CA患者外周血Treg细胞比例、Foxp3 mRNA表达水平高于正常对照组,复发组高于初发组,差异均有统计学意义(均P0.05);Th17细胞比例、RORγt mRNA表达水平低于正常对照组,复发组Th17细胞比例低于初发组,差异有统计学意义(均P0.05);Treg/Th17比值高于正常对照组[4.60(3.20,8.68)vs 1.39(1.05,2.05)],复发组高于初发组[8.19(4.21,10.81)vs 3.52(2.47,4.85)],差异均有统计学意义(均P0.05)。结论 CA患者存在Treg/Th17细胞失衡,复发患者Treg/Th17细胞失衡更显著,并可能在CA发病及复发机制中起重要作用。     

手术前后卵巢癌患者外周血T细胞亚群及CD4~+CD25~+调节性T细胞表达及临床意义

目的:探讨手术前后卵巢癌患者外周血T细胞亚群及CD4+CD25+调节性T细胞的变化及其临床意义。方法:采用流式细胞术检测80例卵巢癌患者外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞及CD4+CD25+调节性T细胞水平。结果:与对照组相比,卵巢癌患者外周血中CD3+,CD4+,CD4+/CD8+比值及NK细胞含量均降低(P0.05),CD8+升高(P0.05);随着疾病进展Ⅲ期+Ⅳ期与Ⅰ期+Ⅱ期比较CD3+,CD4+,CD4+/CD8+比值及NK细胞含量均降低(P0.05),CD8+升高(P0.05)。卵巢癌患者外周血CD4+CD25+细胞比例高于正常对照组(P0.05);手术后卵巢癌患者T细胞亚群比例与术前比较并未明显恢复(P0.05),但CD4+CD25+调节性T细胞水平有所恢复(P0.05)。结论:卵巢癌患者免疫功能低下,术后短期并不能恢复,CD4+CD25+调节性T细胞水平升高,术后明显恢复,提示其在免疫耐受中起重要作用。     

稽留流产患者外周血CD~4+ CD25~+ Foxp3~+调节性T细胞的表达及意义

目的:探讨CD4+ CD25+ Foxp3+调节性T细胞在稽留流产患者外周血中的比例变化。方法:选取16例稽留流产患者,采用细胞内染色的流式细胞术及定量PCR方法分别在蛋白质和mRNA水平检测其外周血中CD4+ CD25+ Foxp3+的表达,并与正常妊娠和正常育龄妇女进行比较。结果:稽留流产患者外周血单个核细胞(PBMCS)CD4+ T细胞中CD25high细胞明显低于正常妊娠和正常育龄妇女,CD4+ CD25+ Foxp3+的表达显著降低。结论:稽留流产患者CD4+ CD25+ Foxp3+的表达明显减少,提示稽留流产的发生可能与患者外周血中CD4+ CD25+ Foxp3+下降有关;而在妊娠早期CD4+ CD25+ Foxp3+的表达明显升高,表明其可能是调控母-胎间免疫耐受形成的重要因素,参与了正常妊娠的维持。     

外周血中Th17细胞和Treg细胞与子痫前期关系的meta分析

目的:系统评价外周血中Th17细胞及Treg细胞与子痫前期的相关性,探讨两者数量变化与子痫前期发病的关系。方法:检索PubMed、Web of science、中国期刊网全文数据库(CNKI)、万方数字化期刊数据库和维普数据库中关于外周血中Th17细胞及Treg细胞数量变化与子痫前期关系的病例对照研究。检索时限均为建库至2016年3月1日。同时手工检索郑州大学图书馆馆藏的7种妇产科杂志和8种免疫学杂志,并对纳入文献的参考文献进行追索。由两名评价员按照纳入及排除标准分别对文献进行筛选、资料提取和质量评价,采用RevMan 5.3软件对纳入文献的相关数据进行meta分析。结果:共纳入11篇文献,其中中文文献7篇,英文文献4篇,共计266例子痫前期孕妇和266例健康孕妇。11篇文献纽卡斯尔渥太华量表质量评分均≥5分,质量较优。meta分析结果显示,子痫前期孕妇外周血中Th17细胞数量高于健康孕妇(MD=1.41,95%CI0.71~2.10)(P0.0001);子痫前期孕妇外周血中Treg细胞数量低于健康孕妇(MD=-1.54,95%CI1.75~-1.33)(P0.00001)。结论:子痫前期孕妇外周血中Th17细胞数量增多以及Treg细胞数量减少与子痫前期的发病密切相关。