补中益气汤对 III 度脱垂性内痔组织中 Fibulin-5 表达影响的研究

目的：探讨补中益气汤对III度脱垂性内痔组织中Fibulin-5蛋白及其mRNA表达的影响。方法：将59例证型为脾虚气陷的Ⅲ度脱垂性内痔患者依门诊号顺序,按随机数字表法分为3组,其中治疗组（A组）20例,对照组（B组）20例,空白组（C组）19例;A组病人口服草木犀流浸液片,同时服用补中益气汤;B组病人口服草木犀流浸液片;C组仅做空白对照,不服用任何药物,均治疗1周。疗程停止后第2天,分别于A、B、C组患者中收取肛垫组织标本各10例,重新对应分组为A1、B1、C1组,采用PCR、Western-blot技术从基因-蛋白层次系统研究比较各组患者内痔组织中Fibulin-5 mRNA与蛋白的表达分布差异。结果：Fibulin-5溶解曲线、β-Actin溶解曲线提示引物具有特异,且无杂带、无杂信号。3组间Fibulin-5 mRNA表达水平比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。组间的两两比较：A1组Fibulin-5 mRNA表达水平高于B1组（P＜0.05）;A1组Fibulin-5 mRNA表达水平高于C1组（P＜0.05）;B1组Fibulin-5 mRNA表达水平高于C1组（P＜0.05）。从Fibulin-5蛋白条带发现,A1组中Fibulin-5蛋白表达最强且集中。3组间Fibulin-5蛋白表达水平比较,差异有统计学意义（F=12.581,P＜0.05）。组间的两两比较：A1组Fibulin-5蛋白表达水平高于B1组（P＜0.05）;A1组Fibulin-5蛋白表达水平高于C1组（P＜0.05）;B1组与C1组Fibulin-5蛋白表达水平相当,差异无统计学意义（P>0.05）。结论：补中益气汤可促进Ⅲ度脱垂性内痔组织中Fibulin-5蛋白及Fibulin-5mRNA的表达;Fibulin-5蛋白及Fibulin-5mRNA的表达水平的降低,可能是脱垂性内痔形成的病理学机制之一。     

加味补中益气汤治疗Ⅲ度大鼠内痔分子生物学作用机制分析

目的:分析加味补中益气汤治疗Ⅲ度内痔分子生物学作用机制。方法:选取健康SD大鼠20只,平均体重208.16±20.49g,三月龄,随机将大鼠分成两组,观察组(10只)、对照组(10只),肛周注射75%冰醋酸法造模,而后观察组大鼠使用加味补中益气汤灌胃,对照组无菌蒸馏水灌胃,观察大鼠便血及痔核脱出评分改变状况,取大鼠肛垫组织标本,Western blot法检测组织内Fibulin-5蛋白表达状况,Real-time PCR法检测组织内Fibulin-5mRNA表达状况,检测处死时大鼠血清D-二聚体(D-D)、纤维蛋白原(FIB)含量及部分活血凝血活酶时间(APTT)、血浆凝血酶原时间(PT)和凝血酶原时间(TT)状况。结果:灌药14天后,观察组大鼠痔核脱出及便血评分显著降低,较造模后差异有统计学意义(P0.05);观察组大鼠Fibulin-5mRNA与Fibulin-5蛋白表达均高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);观察组大鼠血清FIB、D-D含量及TT、PT时间较对照组显著降低,APTT时间较对照组升高,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:加味补中益气汤可改善大鼠痔相近动物模型出血情况,缓解肛周局部溃疡及水肿症状。     

补中益气汤灌胃大鼠血清对TGF-β1介导A549细胞MRP1表达影响随机平行对照研究

[目的]观测补中益气汤灌胃大鼠血清对TGF-β1介导A549细胞MRP1表达影响。[方法]血清药理学法,制备灌胃大鼠血清:使用随机平行对照方法,将20只SPF级SD大鼠,按随机数字表法分为2组,10只/组,补中益气汤组以2m L生药量5.67g/kg灌胃,空白血清组等量生理盐水,1次/d,连续3d,末次灌胃1h后,腹主动脉取血,提取上清。血清干预:取人肺腺癌A549细胞,接种于培养瓶中,37℃,5%CO2培养箱中培养;细胞密度达70%,饥饿12h,空白组(A组)加空白血清;TGF-β1组(B组)加空白血清及TGF-β1;补中益气汤+TGF-β1组(C组)加补中益气汤血清及TGF-β1,培养48h。观测MRP1蛋白表达(免疫细胞化学法和Western blot法)、MRP1基因表达(Realtime PCR法)。[结果]MRP1主要在细胞膜表达,各组细胞中均可见棕黄色阳性产物表达,TGF-β1组(B组)和补中益气汤+TGF-β1组(C组)棕黄色颗粒阳性表达量均高于空白组(P0.05);补中益气汤+TGF-β1组(C组)低于TGF-β1组(B组)(P0.05);Western blot结果与组化结果一致。Realtime PCR结果为TGF-β1组(B组)和补中益气汤+TGF-β1组(C组)基因表达水平均高于空白组(P0.05);补中益气汤+TGF-β1组(C组)低于TGF-β1组(B组)(P0.05)。[结论]补中益气汤血清干预TGF-β1诱导A549细胞EMT过程,细胞中MRP1在蛋白和基因水平均降低。     

补中益气汤对A549/DDP移植瘤裸鼠中Bad,NF-κB,caspase-9,Survivin,mTOR表达的影响

探讨补中益气汤对A549/DDP移植瘤裸鼠中Bad,NF-κB,caspase-9,Survivin,m TOR表达的影响。BALB/C裸鼠60只随机分为空白对照组、荷瘤对照组、顺铂组和补中益气汤高剂量+顺铂组(高联组)、补中益气汤中剂量+顺铂组(中联组)、补中益气汤低剂量+顺铂组(低联组),培养A549/DDP细胞(浓度为5×106个/m L),接种于各组,观察各组成瘤情况。给予相应治疗,14 d后取瘤组织固定、切片,免疫组织化学方法、Real-time PCR方法检测各组裸鼠移植瘤中Bad,NF-κB,caspase-9,Survivin,m TOR蛋白和mRNA的表达水平。结果显示补中益气汤联合顺铂可降低移植瘤体积,中联组和高联组的抑瘤率与顺铂组比较,差异有统计学意义(P0.05);与荷瘤对照组比较,中联组和高联组Bad,NF-κB,Survivin,m TOR的蛋白和mRNA的表达明显减少(P0.05),caspase-9的蛋白和mRNA在中联组和高联组的表达逐渐增多,与荷瘤对照组比较,差异有统计学意义(P0.05);Bad,NF-κB,caspase-9的mRNA,中联组和高联组与顺铂组、低联组、荷瘤对照组比较有统计学意义(P0.05),低联组、顺铂组、荷瘤对照组两两比较,无统计学差异,各因子蛋白和mRNA的表达中联组和高联组比较,无统计学意义。结果表明补中益气汤与顺铂联合作用可抑制A549/DDP移植瘤的生长,补中益气汤抑制A549/DDP移植瘤的作用可能是通过调节Bad,NF-κB,caspase-9,Survivin,m TOR,促进细胞凋亡实现的。     

补中益气汤对肺腺癌荷瘤裸鼠移植瘤LRP蛋白表达的影响

目的通过观察补中益气汤对肺腺癌荷瘤裸鼠移植瘤中LRP蛋白表达影响,探讨补中益气汤治疗肺腺癌的作用机制。方法体外培养A549/DDP及A549细胞,接种于BALB/c nu/nu裸鼠腋窝皮下,荷瘤成功后给予低、中、高剂量补中益气汤治疗。实验共分为10组:即A组(A549/DDP荷瘤对照组)、B组(A549/DDP荷瘤+顺铂组)、C组(A549/DDP荷瘤+顺铂+低剂量补中益气汤组)、D组(A549/DDP荷瘤+顺铂+中剂量补中益气汤组)、E组(A549/DDP荷瘤+顺铂+高剂量补中益气汤组)、a组(A549荷瘤对照组)、b组(A549荷瘤+顺铂组)、c组(A549荷瘤+顺铂+低剂量补中益气汤组)、d组(A549荷瘤+顺铂+中剂量补中益气汤组)、e组(A549荷瘤+顺铂+高剂量补中益气汤组)。测量移植瘤体积并计算药物抑瘤率,蛋白质印迹法检测移植瘤组织LRP蛋白的表达。结果顺铂对A549/DDP移植瘤体积无显著影响(P0.05),而使A549移植瘤体积显著缩小(P0.05);补中益气汤使A549/DDP及A549移植瘤体积均缩小(P0.05,P0.05),顺铂抑瘤率均增加(P0.05,P0.05),随着中药剂量的增加,移植瘤体积逐渐缩小,顺铂抑瘤率逐渐增加;顺铂使A549/DDP移植瘤组织中LRP蛋白表达增加(P0.05),A549移植瘤组织中LRP蛋白表达减少(P0.05);补中益气汤使A549/DDP移植瘤组织中LRP蛋白表达减少(P0.05),以中剂量效果最为显著,补中益气汤使A549移植瘤组织中LRP蛋白表达也减少(P0.05),但低、中、高剂量之间效果无显著差异。结论在对顺铂敏感及顺铂耐药的肺腺癌移植瘤组织中,补中益气汤均可使移植瘤体积缩小,顺铂的抑瘤率增加,LRP蛋白的表达下调。     

补中益气汤含药血清对caco-2细胞SGLT1、P38MAPK通路及NHE3表达影响的研究

目的探讨补中益气汤含药血清对人结肠腺癌细胞(caco-2细胞)钠葡萄糖共转运体蛋白1(SGLT1)、P38MAPK通路及钠-氢交换体3(NHE3)蛋白及基因表达的影响。方法根据血清药理学方法制备补中益气汤含药血清,将caco-2细胞分为正常组、根皮苷组、根皮苷+补中益气汤含药血清组和根皮苷+空白大鼠血清组。检测各组SGLT1蛋白和基因、P38MAPK/Ezrin通路蛋白和NHE3蛋白的表达。结果与根皮苷组比较,根皮苷+补中益气汤含药血清组caco-2细胞SGLT1蛋白表达有所上调(P 0.05),且呈浓度依赖关系;根皮苷+15%补中益气汤含药血清组caco-2细胞SGLT1mRNA,NHE3蛋白及P38MAPK/Ezrin通路磷酸化蛋白表达均有所增加,与根皮苷组比较差异有显著性(P 0.05);根皮苷+补中益气汤含药血清组的SGLT1mRNA及NHE3、P-P38MAPK、P-Ezrin蛋白表达均高于根皮苷+15%空白血清组,差异有统计学意义(P 0.05)。结论补中益气汤含药血清可上调caco-2细胞SGLT1的基因和蛋白表达、增加NHE3蛋白表达,这可能与其促进P38MAPK和Ezrin磷酸化有关。     

补中益气汤含药血清对caco-2细胞SGLT1、P38MAPK通路及NHE3表达影响的研究北大核心CSCD

目的探讨补中益气汤含药血清对人结肠腺癌细胞(caco-2细胞)钠葡萄糖共转运体蛋白1(SGLT1)、P38MAPK通路及钠-氢交换体3(NHE3)蛋白及基因表达的影响。方法根据血清药理学方法制备补中益气汤含药血清,将caco-2细胞分为正常组、根皮苷组、根皮苷+补中益气汤含药血清组和根皮苷+空白大鼠血清组。检测各组SGLT1蛋白和基因、P38MAPK/Ezrin通路蛋白和NHE3蛋白的表达。结果与根皮苷组比较,根皮苷+补中益气汤含药血清组caco-2细胞SGLT1蛋白表达有所上调(P <0.05),且呈浓度依赖关系;根皮苷+15%补中益气汤含药血清组caco-2细胞SGLT1mRNA,NHE3蛋白及P38MAPK/Ezrin通路磷酸化蛋白表达均有所增加,与根皮苷组比较差异有显著性(P <0.05);根皮苷+补中益气汤含药血清组的SGLT1mRNA及NHE3、P-P38MAPK、P-Ezrin蛋白表达均高于根皮苷+15%空白血清组,差异有统计学意义(P <0.05)。结论补中益气汤含药血清可上调caco-2细胞SGLT1的基因和蛋白表达、增加NHE3蛋白表达,这可能与其促进P38MAPK和Ezrin磷酸化有关。     

电针刺激后大鼠血清对成骨细胞OPG、RANKL mRNA及其蛋白表达的影响

目的观察电针刺激去卵巢骨质疏松症模型大鼠的血清对体外培养成骨细胞的骨形成因子骨保护素(osteoprotegerin, OPG)和骨吸收因子(receptor activator for nuclear factor-?B ligand, RANKL)mRNA表达及其蛋白浓度的影响。方法将45只雌性SD大鼠,随机分为空白组(A组)、模型组(B组)、电针刺激组(C组),每组15只。除A组外,B组、C组均切除双侧卵巢。造模成功后,C组给予电针刺激,B组正常饲养,A组不做任何处理,常规正常饲养。12周后,采用水合氯醛麻醉各组大鼠,心脏采血,经过处理后加到体外培养的大鼠成骨细胞培养液中。采用碱性磷酸酶(ALP)检测成骨细胞活性,RT-qPCR法检测大鼠血清对OPG、RANKL mRNA表达的影响,ELISA法检测大鼠血清对OPG、RANKL蛋白浓度的影响。结果各组大鼠血清处理成骨细胞后,与A组比较,B组ALP的活性明显降低(P0.05),C组电刺激后成骨细胞内ALP的活性明显增加(P0.05)。与B组比较,A组及C组OPG mRNA表达及其蛋白浓度表达明显降低(P0.05);与A组比较,C组OPG mRNA表达及其蛋白浓度均明显降低(P0.05)。与B组比较,C组及A组RANKL mRNA表达及其蛋白浓度表达明显降低(P0.05);与A组比较,C组RANKL mRNA及蛋白浓度明显降低(P0.05)。C组大鼠骨密度明显高于B组(P0.05)。结论电刺激后的大鼠血清可以提升ALP、OPG水平,降低RANKL水平,其治疗骨质疏松症的机制可能与此有关。     

补脾益气方对哮喘模型大鼠肺组织核因子KappaB抑制剂的激酶β表达的影响

目的:探讨补脾益气方对哮喘模型大鼠肺组织核因子Kappa B(NF-κB)抑制剂的激酶β(the kinase of nuclear fac-tor-kappa B inhibitor β,IKKβ)的调控作用及对白介素8(IL-8)含量的影响。方法:SPF级雄性Wistar大鼠随机分为对照组(A)、哮喘组(B)、补脾益气方治疗组(C)。卵蛋白致敏和激发复制出哮喘模型,按照10 g.kg-1体重给予C组大鼠中药ig 1次/d,共21d。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织IKKβ的mRNA表达水平,采用免疫组化检测肺组织IKKβ的蛋白表达水平,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定支气管肺泡灌洗液IL-8的含量。结果:①肺组织IKKβ的mRNA的表达:B组显著高于A组(P<0.01);C组显著低于B组(P<0.05)。②肺组织IKKβ的蛋白表达水平:B组显著高于A组(P<0.01);C组显著低于B组(P<0.01)。③肺泡灌洗液IL-8含量:B组显著高于A组(P<0.01);C组显著低于B组(P<0.01)。结论:哮喘组大鼠肺组织IKKβmRNA和蛋白的表达水平显著增强,补脾益气方能有效抑制其表达,降低肺泡灌洗液IL-8含量,证明补脾益气方能有效抑制IKKβ信号转导的途径。     

罗勒多糖对HLECs中VEGFR-2/3表达的影响

目的研究罗勒多糖对人淋巴管内皮细胞(HLECs)的血管内皮细胞生长因子受体-2/3(VEGFR-2/3)表达的影响,揭示罗勒多糖抗肿瘤转移的分子机制。方法乏氧条件下体外培养HLECs,实验分为3组,A组为不加罗勒多糖处理的空白对照组,B组(罗勒多糖,200μg·m L~(-1)),C组(罗勒多糖,400μg·m L~(-1)),观察各组HLECs体外成管能力;实时荧光定量PCR检测罗勒多糖处理的HLECs中VEGFR-2/3 mRNA的表达;免疫细胞化学分析VEGFR-2/3蛋白的表达差异。结果 HLECs体外成管数目分别为:29.6±5.47(A组),23.6±3.68(B组),19.2±2.00(C组);与A组比较,B、C组均能减少HLECs的体外成管数目(P0.05)。VEGFR-2 mRNA相对表达量分别为:1(A组),0.59±0.25(B组),0.90±0.13(C组);与A组比较,B、C组VEGFR-2 mRNA相对表达量下降,但差异没有统计学意义。VEGFR-3 mRNA相对表达量分别为:1(A组),0.52±0.19(B组),0.19±0.09(C组);与A组比较,B、C组VEGFR-3 mRNA相对表达量均下降,差异有统计学意义(P0.05)。VEGFR-2蛋白表达累积光密度分别为:2.51±0.03(A组),2.42±0.03(B组),2.12±0.03(C组);与A组比较,B、C组VEGFR-2 mRNA相对表达量下降,但差异没有统计学意义。VEGFR-3蛋白表达累积光密度分别为:3.72±0.28(A组),2.91±0.26(B组),2.82±0.20(C组);与A组比较,B、C组VEGFR-3蛋白相对表达量均下降,差异有统计学意义(P0.05)。结论罗勒多糖可降低HLECs体外成管能力和并显著下调VEGFR-3的表达,这可能是罗勒多糖抑制淋巴管新生,抗肿瘤转移的分子机制。     

补中益气汤对肺腺癌荷瘤裸鼠A549/DDP细胞顺铂耐药的影响

目的:探讨补中益气汤对肺腺癌荷瘤裸鼠肿瘤细胞A549/DDP顺铂耐药的影响,并确定最佳用药浓度。方法:36只BALB/C裸鼠随机分为空载组,模型组,顺铂组,补中益气汤低、中、高剂量(1.46,2.92,5.84 g·kg~(-1))组。空载组接种转化生长因子-β_1(transforming growth factor-β_1,TGF-β_1)空载慢病毒转染的A549/DDP细胞,余接种TGF-β_1稳定过表达的A549/DDP细胞。药物干预后处死裸鼠。称量小鼠瘤重,计算抑瘤率;镜下计数肿瘤肝、脾、肺转移情况;病理观察肺组织形态学改变;免疫组化、蛋白免疫印迹法(Western blot),实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测移植瘤中肺耐药相关蛋白(lung resistance-related protein,LRP),多药耐药相关蛋白(multidrug resistance-related protein,MRP),P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)表达情况。结果:与模型组比较,补中益气汤组瘤重降低,肺转移结节数量减少,随着补中益气汤剂量增加,瘤重逐渐减小,抑瘤率上升,高剂量组效果最为明显(P0.05)。肝、脾未见明显转移结节。病理切片显示,模型组肺部结构紊乱,出现明显肺损伤,补中益气汤组肺泡、肺泡囊、肺间隔形态逐渐恢复,高剂量组效果最好。与空载组比较,模型组LRP,MRP,P-gp蛋白和mRNA表达均明显上调(P0.05);与模型组和顺铂组比较,补中益气汤中、高剂量组LRP,MRP,P-gp蛋白和mRNA表达明显下调(P0.05);高剂量组下调效果最为明显。结论:补中益气汤能抑制肺腺癌移植瘤生长及转移,减轻肺损伤,改善A549/DDP顺铂耐药,该作用有一定的量效关系,高剂量(5.84 g·kg~(-1))为最佳裸鼠体内用药浓度。     

补中益气汤含药血清对A549/DDP中p-Akt和P-gp表达的影响

目的:研究补中益气汤含药血清逆转人肺腺癌顺铂耐药细胞株(A549/DDP)耐顺铂(DDP)作用及其对磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p-Akt)和P-糖蛋白(P-gp)表达的影响.方法:采用血清药理学方法制备含药血清,随机对照法将24只SD大鼠分为空白对照组(给生理盐水10 mL·kg-1),补中益气汤高、中、低剂量组(11.34,5.67,2.84 g·kg-1,10 mL·kg-1),每日ig给药1次,连续7d后提取血清.将A549/DDP分为空白血清组,补中益气汤高、中、低剂量含药血清组,阻滞剂组,高剂量含药血清联合阻滞剂(LY294002)组,MTT法检测各组细胞对DDP的IC50,并计算耐药逆转倍数.免疫细胞化学法检测各组细胞中p-Akt和P-gp蛋白的表达;逆转录-多聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测各组细胞中Akt和P-gp的mRNA表达.结果:与空白血清组比较,补中益气汤中剂量以上的含药血清可明显降低A549/DDP对DDP的IC50(P＜0.05),并呈浓度依赖效应,与阻滞剂联合效果最佳(P＜0.05);与A549/DDP空白血清组相比,补中益气汤中、高剂量含药血清组,阻滞剂组和高剂量联合阻滞剂组的p-Akt和P-gp的表达显著下降(P ＜0.01,P＜0.05),其中以高剂量联合阻滞剂组下降最多(P＜0.01);与A549/DDP空白血清组相比,中、高剂量含药血清组,阻滞剂组和高剂量联合阻滞剂组的P-gp的mRNA表达量都显著减少(P＜0.01,P＜0.05),中、高剂量含药血清组,高剂量联合阻滞剂组的p-Akt的mRNA表达量也显著减少(P＜0.05).结论:补中益气汤含药血清可逆转A549/DDP细胞的顺铂耐药,与LY294002联合应用效果更佳,其逆转机制可能与减少细胞内p-Akt和P-gp的表达,增强A549/DDP对DDP的敏感性有关.     

急慢性白血病行血液分析检验的价值分析以及中西医治疗的展望

目的:对急慢性白血病行血液分析检验的价值进行分析。方法:50例急慢性白血病患者,按急慢性程度分为A组和B组,各25例。另选取50例健康人(C组)、50例严重细菌感染患者(D组)进行对比实验。对所有受检者进行血液分析,并对比白细胞计数、血红蛋白水平、C反应蛋白水平指标。结果:A组、B组、D组的白细胞计数均高于C组(P0.05),但A组、B组均高于D组(P0.05),A组、B组比较,差异无统计学意义(P0.05);A组、B组的血红蛋白水平均低于C组、D组(P0.05),但A组与B组相比、C组与D组比较,差异无统计学意义(P0.05);D组C反应蛋白水平均高于其他三组(P0.05),A组、B组高于C组(P0.05),但A组与B组比较,差异无统计学意义(P0.05)。血小板:D组C组B组A组(P0.05);红细胞水平:(C组和D组)B组A组(P0.05),C组、D组比较,差异无统计学意义(P0.05);平均红细胞体积:(C组和D组)B组A组(P0.05),C组、D组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:血液分析对诊断急慢性白血病及严重细菌感染与急慢性白血病的鉴别诊断具有十分重大的临床价值,而且以健康人作为参考,确诊率更高。     

补中益气汤对A549荷瘤小鼠脾组织Fas蛋白表达的影响

目的:研究补中益气汤对A549荷瘤小鼠脾组织中Fas蛋白表达的影响。方法:建立A549荷瘤小鼠模型进行体内抗肿瘤实验,采用随机对照法将30只BALB/c小鼠分为正常组、空白对照组、中药高剂量组、中药低剂量组、西药组,除正常组外,余组荷瘤,成功后,每天灌胃相应药物1次,连续10天后取材。采用免疫组织化学检测脾组织中Fas蛋白的表达;逆转录-多聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测脾组织中Fas的mRNA表达。结果:正常组中Fas蛋白在细胞膜有表达,空白对照组出现较多棕黄色颗粒,与正常组比较,Fas表达明显升高(P<0.01);补中益气汤及顺铂作用后,Fas蛋白表达减少,与空白对照组比较,中药低剂量组、西药组Fas表达明显下降(P<0.05),中药高剂量组下降最显著(P<0.01)。中药高剂量组、中药低剂量组、西药组比较,Fas表达无明显变化(P>0.05)。与正常组比较,空白对照纽Fas的mRNA的表达量明显增加(P<0.01);经补中益气汤及顺铂作用后,Fas mRNA的表达减少,中药高剂量组、中药低剂量组及西药组与空白对照组的差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05),而该3组的Fas mRNA的表达与正常组无明显差异。结论:补中益气汤可下调A549荷瘤小鼠脾脏中Fas蛋白的表达,从而促进机体免疫系统对肺癌细胞的杀伤。     

补中益气汤对小鼠肠道mBD-2表达的影响

目的 研究补中益气汤对小鼠肠道上皮细胞天然免疫效应分子β防御素-2(mouse β-defensin 2,mBD-2)表达的影响.方法 取SPF级C57BL/6小鼠,随机分为正常对照组和补中益气汤高、中、低剂量组,给予生理盐水和不同剂量补中益气汤(50,25,12.5 g·kg-1)灌胃,7d后取小鼠肠道组织,分别用RT-PCR法和免疫组化法检测小鼠肠道上皮细胞mBD-2 mRNA和蛋白表达.结果 正常对照组小鼠肠道组织不表达mBD-2.经补中益气汤刺激后,在mRNA水平和蛋白水平均检测到肠道上皮细胞mBD-2的表达,补中益气汤高剂量组作用效果明显,与中、低剂量组比较差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).结论 补中益气汤在体内可以诱导小鼠肠道上皮细胞天然免疫效应分子mBD-2的表达,这可能是其抗炎抑菌的作用机理之一.     

补中益气汤对肺腺癌顺铂耐药细胞株裸鼠移植瘤作用及其机制的研究

目的探讨补中益气汤对肺腺癌顺铂耐药细胞株A549/DDP裸鼠移植瘤的作用机制。方法 60只裸鼠随机分为6组,空白对照组给予生理盐水0.5ml灌胃,其余5组以5×106/L的A549/DDP接种于裸鼠皮下,待成瘤后,分别给予生理盐水0.5ml灌胃,0.2ml顺铂腹腔注射同时生理盐水灌胃,0.2ml顺铂腹腔注射顺铂和高、中、低剂量的补中益气汤灌胃。观察A549/DDP细胞在各组裸鼠的致瘤率,计算抑瘤率;采用免疫组化方法、RT-PCR(real time PCR)检测移植瘤组织中PI3K、AKT的表达水平。结果补中益气汤高、中、低剂量组能不同程度的抑制移植瘤的生长,其中以高、中剂量组最显著,与顺铂组抑瘤率比较有明显的统计学差异(P0.05);移植瘤中PI3K、AKT蛋白表达和mRNA基因的表达在补中益气汤高、中、低剂量组中均有下降,高、中剂量组降低较多,与顺铂组和小剂量比较有统计学差异(P0.05)。结论补中益气汤联合顺铂对肺腺癌移植瘤的增殖有明显的抑制作用,补中益气汤能通过调控PI3K、AKT基因和蛋白的表达而干预顺铂的耐药机制,这种干预作用具有一定的量效关系。     

莪术油对血瘀证肝纤维化小鼠 TGF-β1、Smad 2、Smad 3表达的影响

目的 观察莪术油对血瘀证肝纤维化小鼠TGF-β1、Smad 2、Smad 3表达的影响。方法 72只KM小鼠随机分为7组,即A正常组,B模型组,C莪术油治疗组[分高(C1)、中(C2)、低(C3)剂量组],D秋水仙碱组,E丹酚酸B组。除B组12只外,其余每组10只。除A组常规饲养外,其余组予"四氯化碳+去甲肾上腺素+胎牛血清白蛋白+乙醇+高脂低蛋白饮食"12周制造血瘀证肝纤维化小鼠模型。造模成功后,除A、B组外分别予相应药物灌胃5周,同时继续予40%四氯化碳维持小鼠肝纤维化;予A、B组灌胃与C1组同等剂量的生理盐水5周。末次灌胃24 h后取材,HE、Masson染色观察肝组织病理变化;免疫组化、 RT-PCR分别检测TGF-β1、Smad 2、 Smad 3蛋白和mRNA表达。结果 ①病理改变:B组与A组比较,肝纤维化程度明显加重(P0. 01);C(1～3)、D、E组分别与B组比较,肝纤维化程度均有明显不同程度减轻(P0. 01或P0. 05);尤其C1组最为显著(P0. 001)。②免疫组化和RT-PCR结果:B组与A组比较,TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白表达半定量分析和mRNA表达均显著升高(P0. 01);C(1～3)、D、E组分别与B组比较,TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白表达半定量分析和mRNA表达均显著有不同程度降低(P0. 01或P0.05)。结论 莪术油可通过下调TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白和mRNA表达来减轻血瘀证肝纤维化小鼠的肝纤维化程度。     

补中益气汤对脾虚大鼠胃粘膜TFF1mRNA与蛋白表达的影响

目的:观察脾虚大鼠胃粘膜TFF1mRNA与蛋白表达变化及补中益气汤对其表达的影响,并探讨相关作用机制。方法:SD大鼠随机分为空白对照、脾虚损伤、补中益气汤、非脾虚损伤组。脾虚损伤组、补中益气汤组大鼠给予100%大黄水煎剂灌胃,一天2次,连续10天。第11天补中益气汤组给予补中益气汤灌胃治疗7天。第18天,除空白对照组外,另三组灌服消炎痛溶液造成胃粘膜损伤,采用逆转录PCR(RT-PCR)检测TFF1mRNA,采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测TFF1蛋白表达的变化。结果:与非脾虚损伤组比较,脾虚损伤组大鼠胃粘膜TFF1mRNA、TFF1蛋白表达明显降低;与脾虚损伤组比较,补中益气汤组大鼠胃粘膜TFF1mRNA、蛋白明显上调。结论:脾虚大鼠消炎痛攻击后胃粘膜TFF1mRNA、蛋白表达显著下调,提示脾虚大鼠胃粘膜防御能力减弱,补中益气汤可提高脾虚大鼠消炎痛攻击后胃粘膜TFF1mRNA与蛋白的表达,这可能是补中益气汤保护胃粘膜,降低脾虚大鼠胃粘膜易损性的机理之一。     

补中益气汤联合盆底康复治疗盆腔脏器脱垂临床研究

目的 探讨补中益气汤联合盆底康复治疗盆腔脏器脱垂临床效果。方法 将78例盆腔脏器脱垂患者根据随机数字表法分为对照组、试验组各39例。对照组予盆底康复治疗，试验组同时予补中益气汤治疗，4周为1个疗程，共3个疗程，对比2组治疗效果。结果 试验组总有效高于对照组(P<0.05);试验组中医症状积分低于对照组(P<0.05);试验组胰岛素样生长因子1(IGF-1)、转化生长因子β1(TGF-β1)水平高于对照组，试验组基质金属蛋白酶2(MMP-2)水平低于对照组(P<0.05);试验组阴道收缩肌电值、阴道动态压力、阴道收缩持续时间高于对照组(P<0.05)。结论 补中益气汤联合盆底康复治疗盆腔脏器脱垂疗效较好，能有效缓解症状，改善盆底肌力，值得临床应用。     

比较含红芪和含黄芪的补中益气汤含药血清对SAMP8鼠脾淋巴细胞抗免疫老化的作用

比较研究含红芪和黄芪补中益气汤对快速老化小鼠8(SAMP8)脾淋巴细胞免疫功能的影响。通过MTT法检测Con A诱导SAMP8鼠脾脏淋巴细胞增殖能力的影响。流式细胞术检测含药血清对T淋巴细胞亚群分化百分比的影响。ELISA法检测培养上清液中IL-2和IFN-γ的表达。qRT-PCR法检测含药血清对T淋巴细胞CD28 mRNA表达的影响,蛋白印迹法检测SAMP8鼠脾脏CD28蛋白的表达含量。含红芪和含黄芪的补中益气汤含药血清均能提高SAMP8鼠T淋巴细胞的增殖能力;对SAMP8小鼠T淋巴细胞亚群的分化作用不明显,没有统计学差异;均可促进培养上清液中IL-2和INF-γ的分泌,且分泌IL-2水平,补红组优于补黄组(P0.05);均能增加T淋巴细胞中CD28 mRNA的表达量,且红芪组优于黄芪组(P0.05);均能提高SAMP8鼠脾脏CD28蛋白的表达,且红芪组与黄芪组无明显差异。含红芪和黄芪的补中益气汤含药血清可以通过提高脾淋巴细胞的增殖和增加CD28分子百分比的表达发挥抗免疫老化的作用,在抗免疫衰老方面红芪补中益气汤和黄芪补中益气汤作用相似。