急性水肿性胰腺炎大鼠胰腺微血流变化和环氧合酶-2的表达

目的　探讨环氧合酶 2 (COX 2 )mRNA的表达在急性水肿性胰腺炎 (AEP)大鼠胰腺局部微血管变化中的作用。方法　皮下注射蛙皮缩胆囊肽 (Caerulein)诱发急性水肿性胰腺炎。RT PCR检测胰腺COX 2mRNA表达。分光光度法检测胰腺炎指标 :血浆髓过氧化酶 (MPO)和血清淀粉酶 (AMS)的活性。异硫氰酸荧光素标记红细胞 (FITC RBC)技术对胰腺活体进行局部微血管观察。结果　COX 2mRNA在正常对照组各时点均呈低水平表达 ,而在AEP组表达在Caerulein诱发后上调 ;与正常组相比 ,AEP组血清淀粉酶 (AMS)、血浆髓过氧化酶 (MPO)活性水平增加 (P <0 0 5 ) ;与对照组相比 ,AEP组的胰腺微血管改变如下 :胰腺毛细血管血流 4～ 8h减少、功能毛细血管密度 4～ 8h减少、毛细血管在 8h趋于通透。结论　COX 2在AEP组中的表达上调是客观反映胰腺微循环功能损害 ,如毛细血管灌流、血流及组织水肿等的指标。     

"清下1号"对急性水肿性胰腺炎胰腺局部微循环的作用

中西医结合治疗急性胰腺炎(AP)取得了可喜的成绩,但疗效的作用机制尚不清楚.我们运用蛙皮素(caerulein)诱发急性水肿性胰腺炎(AEP)动物模型,观察我院常用中药复方"清下1号"(MCP-1)对AEP胰腺微循环的影响,为阐明AP中西医结合治疗作用原理以及临床经验的推广提供依据. 1.材料与方法:健康成年雄性Wist-ar大鼠36只,随机分为(1)对照组(n=12),于实验开始后经皮下注射生理盐水;(2)AEP自然病程组,于实验开始后1 h、2 h经大鼠左背腹膜后间隙皮下注射蛙皮素5.5μg/kg和7.5μg/kg;(3)MCP-1治疗组,于最后一次注射蛙皮素后1h经鼻饲管给予MCP-1 20 ml/kg.     

急性胰腺炎外周循环和胰腺微循环血小板内皮细胞粘附分子-1的表达

目的　探讨急性胰腺炎 (AP)外周循环和胰腺微循环中血小板内皮细胞粘附分子 1(PECAM 1)表达的变化规律。方法　Wistar大鼠 48只 ,诱发AP动物模型 ,用流式细胞仪分析脾静脉和下腔静脉血中多形核白细胞 (PMN )PECAM 1的表达。结果　 ( 1)在急性水肿性胰腺炎(AEP)动物模型中 ,外周循环和胰腺微循环PMNPECAM 1的表达水平在AEP 2、4h组相近 ,自 4h开始 ,外周循环PMNPECAM 1的表达上调直至 8h ;胰腺微循环PMNPECAM 1的表达下调直至 8h ,在AEP 8h组 ,差异有显著性 ( P <0 .0 5 )。 ( 2 )在急性坏死性胰腺炎 (ANP)模型中 ,胰腺微循环PMNPECAM 1的表达下调 ;外周循环组PMNPECAM 1的表达未见明显变化 ,在ANP 4、6h组 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　AEP胰腺微循环和外周循环PMNPECAM 1的表达呈逆向性 ,在胰腺微循环呈下调趋势 ,在外周循环呈上调趋势 ;ANP胰腺微循环PMNPECAM 1的表达呈加速性下调 ,该结果显示 ,在ANP早期 ,抑制PMNPECAM 1的过度表达可能有助于改善AP病理改变。     

促发水肿型胰腺炎向坏死型胰腺炎转变的机理研究

目的:借助于一种新的大鼠模型,研究急性水肿性胰腺炎(AEP)向出血坏死性胰腺炎(AHNP)转变的机理.方法:Sprague-Dawley大鼠52只,随机分为三组:Ⅰ组,假手术组;Ⅱ组,采用胰管结扎及静脉推注蛙皮素(100μg/kg)、促胰液素(10μg/kg)以诱发AEP;Ⅲ组,在AEP模型的基础上静注10%高分子右旋糖酐(分子量110000)500mg/kg诱发AHNP.各组分别于造模型后3、gh行组织学及电镜等检查.结果:AEP和AHNP组大鼠血清淀粉酶浓度均明显增高;AHNP组胰腺细胞质膜Ca~(2 )-ATPase活性明显降低.AHNP组3h及9h时腹水量明显多于AEP组,胰实质出血或/和坏死明显,并有胰腺组织细胞内钙沉积、小静脉扩张、红细胞沉积、粒细胞聚集等现象.电镜观察显示:AEP组有大小不等的酶原颗粒聚集于细胞内.AHNP组见毛细血管内皮细胞坏死、剥脱,基膜不完整.结论:静注大剂量Dextran-110在AEP模型基础上通过引起胰微血管损害而促发AHNP.     

急性坏死性胰腺炎大鼠脑脊液髓磷脂碱性蛋白水平变化的初步研究

目的:研究急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠24h内脑脊液髓磷脂碱性蛋白(MBP)水平的动态变化。方法:应用5%和1%的牛磺胆酸钠分别诱导ANP和急性水肿性胰腺炎(AEP)大鼠模型,同时设立假手术对照组。分别于模型诱发后3、6、9、12及24h,经大鼠小脑延髓池抽取脑脊液。以酶联免疫吸附(ELISA)法测定标本中的MBP含量。结果:诱发ANP后3h,脑脊液MBP水平明显高于AEP组和假手术组(P<0.01);6h和9h时仍维持于较高水平(P<0.05),12h开始缓慢降低。而AEP组和假手术组的MBP水平无明显变化,在24h内维持于较低水平。结论:ANP大鼠早期时脑脊液MBP水平已异常升高,提示脑组织髓鞘结构已有损害。检测脑脊液MBP水平变化对临床胰腺炎病人并发脑功能障碍的诊断和预后评估具有重要意义。     

中药复方TCMP-1对急性胰腺炎血小板内皮细胞粘附分子-1表达变化的研究

目的 探讨急性水肿性胰腺炎(AEP)血小板内皮细胞粘附分子-1(PECAM-1)表达的变化规律及中药复方TCMP-1对AEP的治疗作用。方法 Wistar大鼠54只,诱发AEP动物模型,并给予TCMP-1干预,用流式细胞仪分析脾静脉血中多形核白细胞(PMN)PECAM-1的表达。结果 (1)在AEP自然病程组中,外周循环和胰腺微循环PMN PECAM-1的表达水平在AEP 2、4 h组相近,自AEP 4 h组开始,外周循环PECAM-1的表达上调直至AEP 8 h组;胰腺微循环PECAM-1的表达下调直至AEP 8 h组;在AEP 8 h组,PMN PECAM-1的表达有显著性差异(P<0.05)。(2)在AEP 8 h治疗组与AEP 8 h自然病程组中,体循环PMN PECAM-1的表达有显著性差异(P<0.05)。结论 (1)下调体循环PMN PECAM-1的表达水平或抑制PMN PECAM-1的过度表达,可以阻止胰腺微循环中PMN与内皮细胞的粘附。(2)抑制PMN PECAM-1的过度表达是中药复方TCMP-1实现其疗效作用的主要机制之一。     

急性胰腺炎大鼠的心功能改变及生长抑素的干预作用

本研究拟通过观察急性胰腺炎大鼠心功能的改变及生长抑素对其干预效果 ,进一步探讨“胰 心综合症”的发病机制 ,现报告如下。材料和方法1.动物及分组 :10～ 12周龄的雄性SD大鼠 ,体重 2 0 0～2 5 0g,购自第一军医大学动物中心。心导管及急性胰腺炎模型SD大鼠分为A组 :急性胰腺炎组 (10只 ) ;B组 :生长抑素干预组 (10只 )。2 .实验方法 :大鼠术前禁食 2 4h ,不禁水 ,经右侧颈总动脉插管 (PE5 0 )至左心室 (以出现典型波形为成功标志 ) ,记录左心室压力变化率最大值 (±dp/dtmax)和左心室收缩末压(LVESP)。急性胰腺炎模型A组 :用逆行胰…     

肠道缺血再灌注在出血坏死性胰腺炎早期炎症反应中的作用

目的 探讨肠道缺血再灌注(IIR)在出血坏死性胰腺炎(HNP)早期炎性反应中的作用.方法 根据随机数字表法将80只大鼠分为4组,每组20只:假手术组(SO组),急性水肿型胰腺炎组(AEP组),急性水肿型胰腺炎合并肠道缺血再灌注组(AEP+ IIR组)和出血坏死性胰腺炎组(HNP组).于建立模型后0、1、2、3、6h分别检测小肠系膜微循环红细胞流速(EV)、功能毛细血管密度(FCD)及白细胞黏附数(LA),并测定血清TNF-α及IL-6水平.多组比较采用方差分析,两两比较采用t检验.结果 AEP组EV在1h明显下降,在3h升高,但仍显著低于SO组(t=9.60,P＜0.05);而AEP+ IIR组及HNP组EV则持续下降,直至6h升高,但仍显著低于AEP组(t=6.03,6.12,P＜0.05).AEP组FCD在3h时显著低于SO组(t=8.20,P＜0.05);而AEP+ IIR组及HNP组FCD在3h后显著低于AEP组(t=35.60,23.80,P＜0.05).AEP组LA在1h较SD组明显升高(t=75.00,P＜0.05),在3h达到峰值;而AEP+ IIR组及HNP组LA在1、2、3、6h均显著高于AEP组(t=23.00,29.50,53.00,38.70,23.10,48.20,39.20,47.50,P＜0.05).与SO组比较,AEP组TNF-α在1h显著升高(t=77.00,P＜0.05),3h后逐渐下降,而AEP+ IIR组及HNP组TNF-α在2h后显著高于AEP组(t=23.50,18.10,P＜0.05).AEP组IL-6水平在1、2、3、6h持续高于SO组(t=93.50,146.00,243.60,209.20,P＜0.05),而AEP+ IIR组及HNP组IL-6在1h与AEP组比较,差异无统计学意义(t =2.30,2.03,P＞0.05),但在2h后显著高于AEP组(t=35.63,29.80,P＜0.05).结论 IIR可进一步加重AEP早期炎性反应,提示IIR是HNP早期发生、发展的重要促进因素.     

急性胰腺炎大鼠肾素和血管紧张素Ⅱ水平的变化及卡托普利的治疗效果

我们复制大鼠急性胰腺炎模型 ,检测其血浆淀粉酶、肾素、血管紧张素II水平的变化 ,结合胰腺组织病理学观察 ,探讨肾素、血管紧张素Ⅱ在急性胰腺炎病变发展中的作用以及卡托普利对其的治疗效果 ,报道如下。材料与方法1.实验分组 :选择体重 30 0～ 35 0g的健康SD大鼠 (购自浙江省医学科学院实验动物中心 ) 6 3只 ,随机分成对照组、急性胰腺炎组和卡托普利干预组 ,每组 2 1只 ,分别进行以下处理。急性胰腺炎组 :采用十二指肠闭襻法复制大鼠急性胰腺炎模型[1] 。在诱发急性胰腺炎模型后即刻、10h、2 4h各取 7只动物 ,经腹主动脉抽血检测有关指…     

大鼠急性胰腺炎细胞凋亡异常及Fas/FasL系统表达的研究

我们用大鼠制作急性水肿性胰腺炎(AEP)和急性坏死性胰腺炎(ANP)模型,检测胰腺炎时细胞凋亡异常以及凋亡通路Fas、FasL蛋白表达情况,进一步探讨细胞凋亡在急性胰腺炎发生发展中的作用和地位。一、材料和方法1.实验动物及方法:健康雄性SD大鼠3 0只,随机分为3组:AEP组、ANP组和对照组,每组10只。模型制作:大鼠常规喂养,手术前禁食不禁饮12h。1%硫喷妥钠溶液4ml/kg体重腹腔内注射麻醉,无菌操作下切开大鼠腹部,显露十二指肠及胰胆管。用钝5号注射器针头穿过十二指肠对系膜缘经乳头逆行插入胰胆管,用血管夹分别夹闭近肝门处胆总管及针头插…     

铁死亡在重症急性胰腺炎引起的急性肾损伤中的作用及其机制

目的:探讨铁死亡在重症急性胰腺炎(SAP)诱发急性肾损伤(AKI)的作用及其机制。方法:胰腺炎建模后24 h,将36只SD大鼠(购自青岛大学医学部实验室动物中心)采用完全随机分组法分为3组( n＝12)：假手术组(SO组)、重症急性胰腺炎组(SAP组)、铁死亡抑制剂Ferrostatin-1干预组(SAP＋...     

急性坏死性胰腺炎大鼠脑髓鞘损伤的初步观察

目的:研究急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠24 h内脑脊液和血清髓鞘碱性蛋白(MBP)水平的动态变化.方法:分别诱导SD大鼠ANP和急性水肿性胰腺炎(AEP)模型,同时设立假手术组.分别于模型诱导后3、6、9、12、24 h抽取小脑延髓池脑脊液和腹腔动脉血液.以ELISA法测定脑脊液、血清中MBP的含量.透射电镜观察髓鞘超微结构变化.结果:ANP组大鼠诱导后3 h,脑脊液MBP水平明显高于AEP组和假手术组(P<0.01),6、9 h时仍维持在较高水平(P<0.05),12、24 h时则降至较低水平.ANP组、AEP组和假手术组血清MBP水平无显著差异(p>0.05),在24 h内维持于较低水平.电镜检查,3-9 hANP组脑髓鞘主要呈轻度的损伤性改变,如空泡化、板层结构散乱等改变.结论:大鼠ANP早期存在脑组织髓鞘结构损害,表现为脑脊液MBP水平明显升高.     

转化生长因子-β1和结缔组织生长因子在慢性胰腺炎组织中的表达及其意义

我们通过建立大鼠慢性胰腺炎 (CP)模型 ,用免疫组织化学技术 ,对转化生长因子 β1(TGF β1)和结缔组织生长因子(CTGF)在CP形成过程中的表达进行动态观察 ,探讨其作用。一、材料和方法1.试剂与仪器 :三硝基苯磺酸Sigma公司产品 ,恒流静脉泵TE 3 11型 ,Teru mo公司产品 ,兔抗大鼠TGF β1单克隆抗体 ,兔抗大鼠Ⅰ型胶原多克隆抗体SantaCruz公司产品 ,兔抗大鼠CTGF单克隆抗体和EnVisionTM试剂盒购自Dako公司。2 .模型制备[1] :48只SD大鼠 (必凯公司 ) ,体重 2 5 0～ 3 0 0 g ,随机分为两组 :(1)CP组 (n =2 4)。氯胺酮 (10 0mg/kg)…     

外源性脂多糖在大鼠急性胰腺炎中的作用

目的　观察外源脂多糖(LPS)在水肿性胰腺炎(AEP)重症化的作用及其对核因子(NF) κB激活的水平的影响。方法　用LPS(10mg/kg体重)对AEP大鼠进行干预,并与未干预AEP大鼠和正常大鼠进行比较。在复模后分别于12、2 4、3 6、72h用流式细胞术(FCM )检测了NF κB激活的水平。同时进行胰腺病理分级。结果　LPS干预组中的NF κB激活的水平在各个时间段均有所增高(P <0 .0 5 )。LPS加剧了组织炎性浸润程度,使AEP大鼠发生重症化。结论　NF κB的活化作为始动因子激活一系列的炎症介质,引起胰腺组织快速的炎症反应。LPS可以作为研究AEP重症化的预处理剂     

粘附分子基因表达在大鼠急性坏死性胰腺炎肺损伤中的作用

目的　研究急性坏死性胰腺炎 (ANP)大鼠肺组织细胞间粘附分子 1(ICAM 1)mRNA的表达情况及其与肺损伤的关系。方法　将 33只Wistar大鼠随机分为正常对照组和胰腺炎不同时间点 (1、4、12和 2 4h)各组 ,用逆行胰胆管注射方法制备ANP模型。采用逆转录聚合酶链反应法检测ANP大鼠肺组织中ICAM 1mRNA表达 ,同时观察肺组织髓过氧化物酶 (MPO)及病理改变。结果造模ANP 1h后大鼠肺组织中ICAM 1mRNA(0 82± 0 0 3)比正常对照组 (0 41± 0 0 4)的表达水平高 (P <0 0 5 ) ,并持续升高至 12h及 2 4h(分别为 1 17± 0 0 5及 1 11± 0 0 4) ,同时伴有肺组织病理损害 ,其严重程度与ICAM 1mRNA表达、MPO及肺MPO与ICAM 1mRNA表达均呈正相关 ,相关系数分别为0 85、0 85及 0 96 (P <0 0 5 )。结论　ANP大鼠早期肺组织中ICAM 1mRNA呈过度表达 ,肺损伤严重程度与ICAM 1mRNA表达的高低有关。肺组织中ICAM 1过度表达及中性粒细胞浸润是ANP肺损害发生的原因之一。     

利多卡因对脓毒症大鼠肺组织高迁移率族蛋白B1mRNA表达的影响

目的 探讨利多卡因对脓毒症大鼠肺组织高迁移率族蛋白B1( HMGB1) mRNA表达的影响.方法 雄性Wistar大鼠50只,体重200 ～ 250 g,采用随机数字表法,将其随机分为5组(n＝10):假手术组(S组)、脓毒症组(L组)、低、中和高剂量利多卡因组(LL1组、LL2组和LL3组).除S组外,其他4组采用盲肠结扎穿孔术制备大鼠脓毒症诱发急性肺损伤模型.LL1组、LL2组和LL3组分别于术毕、术后1、2h时腹腔注射利多卡因5、10、20 mg/kg,S组和L组给予等容量生理盐水.分别于术后24、48 h时处死5只大鼠,取肺组织,测定HMGB1 mRNA表达、髓过氧化物酶(MPO)活性和NF-κB活性,光镜下观察肺组织病理学结果.结果 与S组比较,其他4组肺组织HMGB1 mRNA表达上调,MPO活性升高(P<0.05);与L组比较,LL1组、LL2组和LL3组肺组织HMGB1 mRNA表达下调,MPO活性降低(P<0.01);LL1组、LL2组和LL3组肺组织HMGB1 mRNA表达依次下调,MPO活性依次降低(P<0.05).LL1组、屿LL2和LL3组肺组织NF-κB活性逐渐降低,肺组织损伤程度逐渐减轻.结论 利多卡因减轻脓毒症大鼠急性肺损伤的机制与下调肺组织HMGB1基因表达有关,其下调HMGB1基因表达的机制与抑制NF-κB活化有关.     

氯化钆对大鼠急性出血坏死性胰腺炎肺损伤的影响

目的　观察氯化钆对大鼠急性出血坏死性胰腺炎 (AHNP )肺损伤的影响 ,探讨肝脏Kupffer细胞在该病理过程中的作用。方法　 42只Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、氯化钆预防组( 10mg/kg)、氯化钆对照组 ( 10mg/kg)。假手术组仅翻动腹腔脏器数次即关腹 ;模型组经胆胰管逆行注射 5 %牛磺胆酸钠 ( 1ml/kg ,0 .1ml/min)诱发AHNP ;氯化钆预防组在AHNP造模前 1d经尾静脉注射氯化钆溶液。 3组动物于术后 3h ,6h分批取材 :( 1)经腹主动脉取血 ,测定血清淀粉酶、TNFα和IL 1(假手术组加测血AST和ALT) ;( 2 )取右肺一部分匀浆 ,测定MPO ;另一部分经 10 %甲醛固定 ,行组织病理学观察 ;( 3 )取左肺进行肺泡灌洗 ,分离收集并纯化肺泡巨噬细胞 ;提取核蛋白后采用化学发光ELISA法检测NF κB (p65 )的表达情况 ;( 4 )留取胰腺组织行组织病理学观察。氯化钆对照组经尾静脉注射氯化钆溶液 2 4h后处死 ,取血测定血AST和ALT。结果　氯化钆预防组在造模后 3h及 6h ,肺组织MPO水平、血清TNFα及IL 1水平、肺泡巨噬细胞NF κB(p65 )的表达水平均显著低于模型组 (均为P <0 .0 1) ;肺组织病理学改变显著减轻。血清淀粉酶及胰腺病理改变两组无显著差别。结论　预防性应用氯化钆可明显减轻AHNP大鼠所并发的肺损伤 ;肝脏Kupffer细     

肿瘤坏死因子-α对大鼠坏死性胰腺炎肺损伤的影响

目的　探讨肺内肿瘤坏死因子 α(TNF α)在大鼠急性坏死性胰腺炎 (ANP)所致肺损伤中的作用。方法　将大鼠分为正常对照、ANP和TNF α抗体预处理 3组 ,后两组又分为 1、3、6、12h 4组 ,每组 6只。胰胆管注入 3 %牛磺酸钠诱发ANP。肺灌洗获得巨噬细胞 ,培养后检测TNF α水平、肺泡灌洗液 (BALF)中蛋白含量 ,取肺组织测髓过氧化物酶 (MPO)水平。逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测巨噬细胞TNF αmRNA表达。结果　ANP和TNF α抗体预处理组各指标均较正常对照升高 (P <0 .0 5 )。TNF α水平与MPO及BALF蛋白含量呈正相关 (P <0 .0 1) ,TNF αmRNA的表达及TNF α水平与肺损害程度呈正相关 (P <0 .0 1)。结论　肺泡巨噬细胞TNF α的过表达与ANP大鼠所致肺损伤有密切关系。     

磷脂酶A2与NF-κB活化在大鼠急性坏死性胰腺炎肺损伤中的作用

目的:探讨磷脂酶A2 (PLA2 )与NF -κB活化在大鼠急性坏死性胰腺炎肺损伤中的作用。方法:Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、PLA2 抑制剂组。每组按不同时点(3h、6h、12h) ,分别测定血清淀粉酶、脂肪酶、PLA2 、TNFα、IL - 1、IL -6水平;测定肺组织MPO、PLA2 、TNFα、IL - 1、IL - 6水平;行肺、胰腺组织病理学检查;化学发光ELISA法检测肺泡灌洗液巨噬细胞NF -κB(P65)表达情况;每组12只用于观察2 4h死亡率。结果:PLA2 抑制剂组血清淀粉酶、脂肪酶、PLA2 ,肺组织及血清TNFα、IL - 1、IL - 6水平显著低于模型组(P值均小于0 0 1) ;肺组织MPO、PLA2 水平亦降低;肺泡灌洗液巨噬细胞NF -κB活性显著下降,同时肺脏及胰腺病理损害明显减轻;2 4h死亡率明显降低。结论:PLA2 可通过激活肺组织NF -κB ,上调多种细胞因子的表达而产生肺损害作用;阻断磷脂酶A2 可有效地减轻胰腺炎肺损伤     

罗格列酮对大鼠急性胰腺炎肺损伤黏附分子表达的作用

目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)激动剂罗格列酮(ROSI)对大鼠急性胰腺炎肺损伤(APALI)黏附分子的作用及其机制.方法 雄性Wistar大鼠54只,随机分为假手术组(SO组)、急性胰腺炎组(SAP组)和罗格列酮预处理组(ROSI组).胆胰管逆行注射5%牛磺胆酸钠制备急性胰腺炎模型.ROSI组造模前30 min经股静脉注射10%二甲基亚砜(DMSO)溶解的罗格列酮(6 mg/kg);SO组、SAP组则注射等量10%DMSO.术后3 h、6 h、12 h分批剖杀大鼠,每个时间点6只.检测血清淀粉酶(AMY)、肺组织髓过氧化物酶(MPO)、肺湿干比(W/D),取肺组织行病理学检查;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、P-选择素和E_选择素mRNA表达水平.结果 SAP组各时间点AMY、MPO、W/D和肺组织病理评分均较S0组升高(P<0.05);ROSI组上述指标较SAP组下降,AMY、MPO、W/D和病理评分在6 h、12 h差异有统计学意义(P<0.05).SAP组ICAM-1、P-选择素和E-选择素mRNA表达在12 h达高峰,均较SO组12 h升高(P<0.05),ROSI组上述指标mRNA表达在12 h点均较SAP组下降(P<0.05).结论 罗格列酮通过抑制肺组织IcAM-1、P-选择素和E-选择素的表达,减轻急性胰腺炎肺损伤程度.