ELISA检测梅毒抗体假阳性产生的原因分析

梅毒是由苍白螺旋体所引起的危害人类健康的一种性传播性疾病，可侵犯全身各脏器，造成多器官病变、功能失常、组织破坏甚至死亡。近年来梅毒患者数量呈逐年上升趋势，受到社会各界的广泛关注，梅毒螺旋体抗体检测在输血前及手术前安全筛查中的意义已远远超出其自身病原体筛查的范畴。梅毒主要通过血液和性传播，早期梅毒有较强的传染性。血清学检测是诊断梅毒的重要依据之一，它在梅毒的诊断、治疗及研究方面均有重要意义^[1]。因此选择特异性、敏感性高的实验室检测方法有助于梅毒的诊治。     

3TP法与ELISA法检测梅毒螺旋体抗体价值的比较

目的对3TP法与ELISA方法在梅毒螺旋体抗体检测能力及其在临床应用中的价值进行比较。方法应用3TP法与ELISA方法分别对85份确诊病例与体检正常TPHA方法确证为梅毒特异性抗体阴性的人员血清180份进行同时检测,检测结果进行χ2统计分析。结果总计265份标本检测3TP法阳性符合率100%,假阳性2例,灵敏度为100%,特异度98.9%;ELISA方法阳性符合率98.8%,假阴性1例,假阳性2例,灵敏度为98.8%,特异度为98.9%。两种方法间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 3TP法与ELISA方法均具有高灵敏度、高特异度的特点,二者之间无统计学差异(P>0.05),3TP法可以替代现行的梅毒血清学筛检的ELISA方法;3TP法适用于自动生化分析仪,具有简便、快速的优势,可实现对血清梅毒抗体的定量检测,便于疗效和预后观察。     

微波ELISA法快速检测抗HAV-IgM

近年来微波技术在ELISA法检验中的应用多有报道。我们自开展了微波ELISA法快速检测乙肝病毒5项标志物和丙型肝炎抗体的工作后,接着又进行了微波ELISA法快速检测甲型肝炎病毒免疫球蛋白M型抗体（抗HAV-IgM）的尝试,取得了令人满意的效果,反应时间由115min缩短为11min,提高效率10倍多,现将其方法报告如下。1 材料与方法1.1 标本:采取门诊或住院病人血清,以标准方法测定ALT高于上限2.5倍（100U/L）为检测病例,其血清标本于-24℃冰箱保存备检。1.2 酶标试剂盒:ELISA抗HAV-IgM试剂盒,上海实业科华生物技术有限公司生产,批号950230。1.3 仪器:DG3022型酶标免疫检测仪,波长292nm,南京华东电子管厂生产。1.4 600W上菱牌家用微波炉,输出功率选择为20％。     

老年患者梅毒螺旋体抗体阳性临床分析

 目的 探讨老年患者梅毒螺旋体( Treponema pallidum,TP)抗体阳性的临床价值.方法 对98例老年人采用酶联免疫吸附试验( ELISA)筛查梅毒抗体阳性标本,分别进行梅毒螺旋体血球凝集试验(treponema pallidum hemagglutination assay,TPHA)检测和快速血浆反应素诊断试验(rapid plasma regaining,RPR)检测,对实验结果 进行统计分析.结果 98例TP- ELISA阳性标本,用TPHA法检测阳性48例,阳性符合率48.98％.RPR法检测阳性44例,该44例仅16例用TPHA确证阳性.结论 老年人梅毒血清学试验阳性,只提示其体内有抗类脂抗体或抗TP抗体存在,不能作为感染梅毒螺旋体的绝对依据.     

梅毒螺旋体抗体三种检测方法的价值比较

目的比较三种血清梅毒螺旋体抗体(TPHA)检测方法,优选一种简便、准确的TPHA检测方法。方法采用临床上常用的胶体金法、酶联免疫吸附试验法(ELISA法)、化学发光微粒子免疫分析法(CMIA法)对400例标本进行TPHA检测,分别计算ELISA法、CMIA法、胶体金法检测结果的阳性率、灵敏度和特异度。结果 CMIA法检测TPHA的阳性率、灵敏度和特异度分别为74.50%、99.67%和100%;胶体金法的阳性率、灵敏度和特异度分别为41.25%、55.18%和100%;ELISA法的阳性率、灵敏度和特异度分别为60.25%、80.60%和93.46%。CMIA法检测阳性率和敏感性明显高于ELISA法和胶体金法(P<0.05),而特异性高于ELISA法(P<0.05)。结论CMIA法检测TPHA特异性强、灵敏度高,具有很高的临床应用价值。     

淋球菌ELISA检测技术的研究

ELISA检测技术检测34例淋病患者泌尿生殖道的脓性分泌物及10例健康人泌尿生殖道的渗出物,与常规检测技术比较,结果10例健康人各法检测均为阴性,34例淋病患者:GS镜检阳性20例(58.8％),巧克力平板培养阳性26例(76.5％);ELISA法均为阳性000％),经统计处理,P<0.01,ELISA法与常规检测有非常明显的差异,ELISA法检测淋病患者泌尿生殖道脓性分泌物淋球菌抗原物质,具有敏感性高,特异性强,时间短等特点,为淋病的快速准确诊断提供了依据。     

酶联免疫试验法检测梅毒的体会

微量絮状试验（VDRL），快速血浆反应素环状卡片试验（RPR），自动反应素试验（APT）等，对普及快速、准确诊断梅毒，虽有各自的优点，但总体而言这些试验的敏感性及特异性都较差，易出现漏检和误判。2003年3月-2006年11月，我院对327人份静脉血采用梅毒螺旋体酶联免疫试验法（TP-ELISA）检测，准确率可达90％以上。     

双抗体夹心ELISA法检测石头鱼毒素

目的 建立石头鱼毒素neoVTX的酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法,为该毒素的检测、中毒诊断及治疗提供依据.方法 以过碘酸钠法偶联马抗-HRP,利用双抗体夹心ELISA方法检测neoVTX.结果 该法的线性范围在磷酸盐缓冲液(PBS)中为4～512 ng/ml,线性回归方程为Y=1.676X-1.140(r2=0.9728,n=8,P＜0.0001),在血浆中检测线性范围为4～2048 ng/ml,线性回归方程为y=0.3094X-0.1208(r2=0.9907,n=10,P＜0.0001).牛血清白蛋白、卵清蛋白及人血浆对检测结果无干扰.结论 成功建立了石头鱼毒素的双抗体夹心ELISA检测方法,该法有较高的灵敏度和特异性,适用于溶液中及血浆中微量neoVTX的样品分析.     

患者输血前抗-HCV检测结果分析及意义

丙型肝炎病毒(HCV)呈世界性分布，我国主要以输血及输注血液制品为主要传播途径。估计抗-HCV阳性人群约有3000万。为了解输血前患者HCV的感染情况，笔者对23106例输血前患者进行抗-HCV检测，并对检测结果。     

小儿幽门螺旋杆菌血清抗体检测与胃粘膜抗原检测的对比

幽门螺旋杆菌 (ＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒＰｙｌｏｉ,ＨＰ)的检测方法可分为侵入性和非侵入性两类 ,前者需通过胃镜检查取胃粘膜活检标本进行 ,后者主要包括13Ｃ或14 Ｃ—尿素呼气试验和血清学试验。但13Ｃ或14 Ｃ—尿素呼气试验价格昂贵。近年国外报告一种ＨＰ粪便抗原检测的新方法 ,国内仅极少医院开展应用。本研究通过直接从胃粘膜活组织检测抗原对照来评价ＨＰ血清学抗体检测方法的可靠性及准确性。1　资料和方法1 1　一般资料　 1999年 12月～ 2 0 0 0年 12月 ,南京市儿童医院对 6 7例因上消化道不适等症状的儿童同时进行ＨＰ血清学抗…     

HBcAg ELISA法测定的临床分析

目的研究ELISA法测定HB cAg在HBV感染者中的阳性检出率、分布规律及与其他乙肝标志物的关系,探讨其在反映HBV复制及传染性和观察疗效方面的临床价值。方法采用ELISA法对416例HBV感染者进行血清乙肝6项指标测定,按其不同阳性结果分9种模式对比分析。结果416例HBV感染者中HB cAg ELISA法测定阳性总检出率达56.7%,而70例未感染者及65例抗-HB s单项阳性者中无阳性检出。结论ELISA测定血清HB cAg在HBV感染者中的阳性检出具有特异性,并可作为疑有抗-HBe阳性“逆转”为HBeAg阳性者的筛选检测,对判断HBV复制程度、病程、疗效及预后评估均有临床价值。     

两种方法检测乙肝HBsAg效果对比

目的 :考察胶体金联免疫吸附与酶联免疫吸附试验的灵敏度与特异性。方法 :用乙肝表面抗原胶体金联免疫吸附试剂 (GCISA)和酶联免疫试剂 (ELISA)检测各种肝炎病人血清 90 9份 ,正常人血清 173份及乙肝表面抗原质控标准品。结果 :GCISA和ELISA分别检出 773和 770份阳性样品 ,总符合率为97 0 %。检测乙肝表面抗原质控标准品 ,GCISA的灵敏度为 1ng/ml,ELISA为 1～ 2ng/ml,且两种方法都只与HBsAg有特异反应 ,与乙肝病毒核心抗原、e抗原无交叉反应。结论 :GCISA检测血清中的HBsAg特异性强 ,灵敏度与ELISA一致 ,在检测单份样品时较ELISA简单快速 ,观察结果直观 ,不需仪器设备。     

应用ELISA法检测正常人群EBV_(IgG)抗体的研究

本文用ELISA法检测不同年龄组正常人群中爱泼斯坦-巴尔病毒(Epstein-Barrvirus,简称EBV)IgG抗体。北京地区血清标本418份,阴性者8份(1.91%),阳性者410份(98.1%);长治郊区血清标本158份,阴性者9份(5.69%),阳性者149份(94.3%);宜昌市血清标本142份均阳性(100%)。经X~2检验,P<0.005,各地区之间有显著性差异。由此可知EBV感染极其广泛,应引起重视。     

我国不同人群抗输血传播病毒抗体的检测

1997年 ,Ｎｉｓｈｉｚａｗａ等[1 ] 应用代表性差异分析法 (ｒｅｐｒｅ ｓｅｎｔａｔｉｏｎａｌｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅａｎａ1ｙｓｉｓ,ＲＤＡ) ,从 1名非甲～非庚型输血后肝炎患者血清中获得 1个新的病毒克隆 ,后将其命名为输血传播病毒 (ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｄｖｉｒｕｓ,ＴＴＶ)。随后许多国家开展了相关的研究工作。国内的研究表明 ,中国人群中存在ＴＴＶ感染 ,且该病毒具有嗜肝性[2 ] 。我们应用ＥＬＩＳＡ方法对2 96例不同人群进行了抗＿ＴＴＶ的流行病学调查。1　材料与方法1.1　调查对象随机选取 1995年 1～ …     

基于双抗体夹心ELISA建立人血浆肌钙蛋白Ⅰ的定量测定技术

目的 基于双抗体夹心ELISA技术建立人血浆肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)定量检测方法,便于基层医疗机构使用.方法 基于抗原、抗体筛选,包被抗体、酶标抗体用量优化,建立双抗体夹心ELISA检测cTnI的方法.测定cTnI标准抗原,利用Curve Expert软件建立定量公式,根据临床大型仪器实测结果校准定量公式,实现ELISA测定D值到血浆中cTnI浓度的直接定量.结果与结论 双抗体夹心ELISA测量cTnI的敏感性可达0.1 ng/ml,敏感性满足临床要求.小样本临床样品的评价实验显示,双抗体夹心ELISA定量结果与临床大型仪器测得的浓度差异无统计学意义(t=0.058,P＞0.05).所建立的双抗体夹心ELISA法可用于定量检测人血浆cTnI.     

利用Monica质控图进行ELISA操作考核的探讨

目的　探讨ELISA操作考核方法。方法　以HBsAg低值质控血清ELISA定性检测为例 ,用Monica质控图进行操作考核。 结果　根据Monica质控图中垂线长短及中点所处的位置 ,可以判断被考核者检测结果的精密度与准确度。结论　用Monica质控图进行ELISA操作考核 ,方法实用 ,简便可行。     

儿童梅毒4种检测方法的灵敏度及特异性比较

目的比较快速血浆反应素试验(rapid plasma reagin,RPR)、胶体金试验(colloidal gold test for syphilis,SYP)、酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)、凝集法(treponema pallidum particle assay,TPPA)诊断儿童梅毒的灵敏度及特异性。方法选择本院120例确诊为梅毒的患儿及60例非梅毒患儿进行RPR、SYP、ELISA、TPPA实验,统计4种方法检测梅毒的阳性率、灵敏度、特异性及阳性预测值。结果 ELISA阳性率为94.2%、阳性预测值为95.8%、特异性为95.0%,RPR阳性率为43.3%,SYP灵敏度为66.7%。TPPA灵敏度、特异性及阳性预测率均不高。结论 ELISA的阳性预测值及特异性较高,适合住院、门诊儿童的梅毒筛查,SYP可作为阳性标本的确认试验,必要时可采用联合试验进行检测。建议对儿童梅毒检测,不采用TPPA。     

肝癌患者血清及肿瘤组织VEGF的表达及意义

目的探讨肝癌患者血清及组织中VEGF的表达情况及其在预测肝癌侵袭和患者预后的意义。方法将64例手术切除肝细胞肝癌患者分为复发组(n=42)与未复发组(n=22),采用酶联免疫吸附和免疫组化方法检测患者的术前血清及标本中VEGF的表达情况,分析其与临床病理指标关系并进行复发风险多因素分析。结果血清VEGF的浓度为334.50±247.62pg/ml,明显高于健康对照组(P<0.01)。复发组血清VEGF浓度明显高于未复发组(P<0.05)。已复发组VEGF的阳性率为85.7%,未复发组为54.5%(P<0.05)。VEGF阴性组的1、2、3年无瘤生存率分别为81.3%、68.8%及62.5%,VEGF阳性组的分别为52.1%、33.3%及29.1%(P<0.01)。多因素分析表明术前播散结节、微转移灶及VEGF的表达水平是影响预后的危险因素。结论肝癌患者血清及肿瘤组织中VEGF的表达水平明显升高,与肝癌患者的术后复发相关,可预测患者的复发风险。     

肾移植受者外周血IL-2 ELISA检测与PBL IL-2 mRNA 实时定量PCR检测的比较

目的 研究ELISA检测肾移植受者外周血IL-2水平与实时定量PCR(RT-FQ-PCR)检测外周血淋巴细胞(PBL)IL-2mRNA表达结果的一致性和准确性.方法 对20例肾移植受者,采用ELISA和RT-FQ-PCR法分别测定术前、术后7天谷浓度(C0)和峰浓度(C2)时间外周血IE-2和PBL IL-2 mRNA水平;同时选取15例慢性移植肾肾病(CAN)和5例非CAN患者,测定方法同上.结果 外周血IL-2水平与PBL IL-2 mRNA表达在术前和手术1年后呈正相关(R2分别为0.58和0.40,P均＜0.01),在术后7天C0及C2时间无明显线性关系(R2分别为0.15和0.08,P均＞0.05).术后7天,C2对应外周血IL-2和PBL IL-2 mRNA表达抑制率分别为16.31%±9.59%和69.92%±7.10%;C2与IL-2 mRNA表达抑制率呈正相关,与IL-2抑制率无明显相关性(R2=0.02,P＞0.05).IL-2 mRNA表达抑制率与IL-2抑制率无明显相关性.结论 外周血IL-2 ELISA检测可以用于肾移植受者术前和术后稳定期免疫状态检测以及免疫耐受研究等,但不能用于肾移植受者围手术期免疫状态和C2效应检测.     

动物狂犬病中和性抗体竞争ELISA检测试剂盒的研制

目的研制一种能够定量检测狂犬病血清中和抗体的直接竞争ELISA试剂盒,以满足我国动物狂犬病免疫监测的需要。方法以表达狂犬病病毒糖蛋白的真核细胞培养物为包被抗原,捕获抗体为具有病毒中和活性的酶标单克隆抗体,标准血清为经荧光抗体病毒中和试验（FAVN）准确定量的犬血清。结果本试剂盒的最低检测限为0.25U/ml,线性检测范围为0.25～8U/ml,标准曲线的平均板内变异系数为2.8%,板间平均变异系数为4.9%,在4℃下至少可以存放6个月。结论本研究提供了一种操作安全、定量准确的动物狂犬病中和抗体检测试剂盒,具有良好的实际应用前景。