过氧化氢对牛脑微血管内皮细胞损伤及药物的保护作用

应用年脑微血管内皮细胞（ＢＣＭＥＣ）培养技术，研究氧自由基过氧化氢（ＨＰ）地ＢＣＭＥＣ损伤的作用。３０％ＨＰ与ＢＣＭＥＣ共同孵育３０ｍｉｎ，可明显损伤ＢＣＭＥＣ；甘糖酯（０．４、０．８、１．６ｍｇ／ｍｌ）可显著保护ＨＰ引起的ＢＣＭＥＣ损伤，乳酸酶（ＬＤＨ）释放减少，提示甘糖脂对脑血管内皮细胞的保护作用与其抗氧自由基有关。     

冰片对过氧化氢损伤后大鼠心肌微血管内皮细胞的保护作用

目的 研究冰片对心肌微血管内皮细胞的保护作用。方法 体外培养的大鼠心肌微血管内皮细胞(cardiac microvascular endothelial cells, CMECs),采用CCK-8(cell counting kit-8)检测细胞活力,建立过氧化氢H₂O₂损伤CMECs模型,确定实验适宜的H₂O₂浓度及冰片治疗浓度。将CMECs分为对照组、H₂O₂损伤组及冰片治疗组。通过检测氧化应激反应多种中间产物含量及线粒体功能等,观察比较冰片对H₂O₂诱导的CMECs损伤的保护作用。结果 H₂O₂损伤组与对照组比较,乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)、NADPH氧化酶、氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione, GSSG)含量明显增加,还原型谷胱甘肽(reduced ...     

阿魏酸钠对培养大鼠大脑微血管内皮细胞缺氧损伤的保护作用

目的：研究缺氧对脑微血管内皮细胞（brain microvascular endothelial cells,BMEC）的损伤及阿魏酸钠（Sodium ferulate）对它的保护作用.方法：取体外培养的大鼠脑皮质微血管内皮细胞,置于95%N2和5%CO2的缺氧盒中12h造成内皮细胞缺氧.用透射电镜观察BMEC的超微结构变化.用内皮细胞线粒体活性和内皮细胞死亡率来评价内皮细胞活力,并用乳酸脱氢酶（LDH）漏出量作为评价损伤的指标.结果：体外培养大鼠脑皮质BMEC缺氧12h后,细胞超微结构损伤,细胞存活率及线粒体活性明显降低,LDH释放量显著增加.阿魏酸钠可显著对抗缺氧对BMEC的损伤.结论：阿魏酸钠对大鼠脑皮质BMEC缺氧损伤具有保护作用.     

同型半胱氨酸对脑微血管内皮细胞损伤的研究

目的：观察同型半胱氨酸（Homocysteine,Hcy）对大鼠脑微血管内皮细胞（Rat cerebral microvascular endothelial cecl,RCMEC）的损伤效应,以揭示Hcy致动脉粥样硬化的可能机制.方法：①将不同浓度的Hcy分别加入培养的RCMEC中孵育2、4、6、8、10 h后,测定细胞乳酸脱氢酶（LDH）释放率;②观察同型半胱氨酸损伤组和对照组细胞生长曲线以及相差显微镜下、透射电镜下结构改变.结果：Hcy使RCMEC的LDH释放率明显增加,破坏细胞形态结构并抑制其生长.结论：Hcy可能通过氧化应激损伤机制对RCMEC产生毒性损伤作用.     

兔脑微血管内皮细胞的培养及鉴定

目的：建立简便、有效的兔脑微血管内皮细胞体外原代培养方法。方法：兔脑皮质通过匀浆、过筛分离处理后接种，原代培养兔脑微血管内皮细胞，并通过Ⅷ因子相关抗原免疫组化染色和透射电镜观察鉴定。结果：培养的细胞呈典型的“铺路石”状生长，Ⅷ因子相关抗原免疫组化染色为阳性。结论：该方法可方便获取较纯净的脑微血管内皮细胞。     

丹参酮ⅡA对脑微血管内皮细胞损伤的防护作用

目的:观察丹参酮ⅡA对β淀粉样蛋白(Aβ_(1-42))诱导的脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cell,BMEC)损伤模型活性的影响。方法:建立Aβ_(1-42)致BMEC损伤模型,用不同质量浓度(10 mg·L~(-1)、30 mg·L~(-1)、50 mg·L~(-1))的丹参酮ⅡA干预,MTT法检测细胞活性,微板法检测上清液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)水平,Western blot法检测核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)相关蛋白表达结果。结果:与模型组比较,丹参酮ⅡA的3个剂量组BMEC活力显著升高(P<0.05)。与模型组比较,丹参酮ⅡA的3个剂量组LDH活性显著降低(P<0.05)。与模型组比较,丹参酮ⅡA的3个剂量组NF-κB p65蛋白表达显著减低,IKB-α蛋白表达显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,丹参酮ⅡA的3个剂量组NF-κB p65磷酸化表达水平显著降低(P<0.05)。结论:丹参酮ⅡA能提高Aβ_(1-42)致BMEC损伤模型的BMEC的活力,降低LDH活性、NF-κB p65蛋白表达、NF-κB p65磷酸化表达水平,升高IKB-α蛋白表达。     

大鼠脑微血管内皮细胞的培养

血管内皮细胞在动脉粥样硬化的发病机制中发挥重要作用。本文通过胶原酶消化、密度梯度离心等技术建立一种程序简便、经济、稳定、获得细胞纯度较高的体外分离、长期培养大鼠脑微血管内皮细胞的方法。     

丹参酮ⅡA对脑微血管内皮细胞损伤的防护作用

目的:观察丹参酮ⅡA对β淀粉样蛋白(Aβ_(1-42))诱导的脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cell,BMEC)损伤模型活性的影响。方法:建立Aβ_(1-42)致BMEC损伤模型,用不同质量浓度(10 mg·L~(-1)、30 mg·L~(-1)、50 mg·L~(-1))的丹参酮ⅡA干预,MTT法检测细胞活性,微板法检测上清液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)水平,Western blot法检测核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)相关蛋白表达结果。结果:与模型组比较,丹参酮ⅡA的3个剂量组BMEC活力显著升高(P0.05)。与模型组比较,丹参酮ⅡA的3个剂量组LDH活性显著降低(P0.05)。与模型组比较,丹参酮ⅡA的3个剂量组NF-κB p65蛋白表达显著减低,IKB-α蛋白表达显著升高,差异均有统计学意义(P0.05)。与模型组比较,丹参酮ⅡA的3个剂量组NF-κB p65磷酸化表达水平显著降低(P0.05)。结论:丹参酮ⅡA能提高Aβ_(1-42)致BMEC损伤模型的BMEC的活力,降低LDH活性、NF-κB p65蛋白表达、NF-κB p65磷酸化表达水平,升高IKB-α蛋白表达。     

灯盏花素对大鼠脑微血管内皮细胞损伤的保护作用

目的 观察灯盏花素对谷氨酸致原代培养的大鼠脑微血管内皮细胞（rBMECs）损伤的保护作用。方法 灯盏花素（200、100、50 μmol/L）作用于rBMECs 24 h后，加入谷氨酸（终浓度为1 mmol/L）培养18 h，MTT法检测rBMECs细胞活性，并按试剂盒方法检测细胞上清液中乳酸脱氢酶（LDH）水平、细胞中丙二醛（MDA）水平和超氧化物歧化酶（SOD）活性。结果 谷氨酸（l mmol/L）使原代培养的rBMECs明显受到损伤，灯盏花素高、中浓度（200、100 μmol/L）可显著对抗谷氨酸造成的rBMECs损伤，抑制LDH释放，降低MDA水平，增强SOD活性。结论 灯盏花素对谷氨酸所致原代培养的rBMECs损伤具有明显的保护作用，其机制与增强细胞抗氧化能力有关。     

去铁胺对过氧化氢所致牛肺动脉内皮细胞损伤的影响

观察铁离子螯合剂－去铁胺对过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）所致牛肺动脉内皮细胞损伤的影响。发现经去铁胺处理的内皮细胞对Ｈ２Ｏ２毒性作用的敏感性降低，Ｈ２Ｏ２对这种内皮细胞的损伤明显减轻：细胞乳酸脱氢酶释放减少、硫代巴比妥酸反应产生减少；细胞中过氧化氢酶和超氧化物歧化酶的活性受到保护。结果说明细胞内铁离子在Ｈ２Ｏ２所致内皮细胞损伤中起重要作用。     

钩端螺旋体糖脂蛋白对培养血管内皮细胞的粘附导致细胞内吞与病损

作者提取不同群、型和毒力的构端螺旋体糖脂蛋白,以Rhodamine B荧光素和胶体金标记制备成探针,与体外培养的牛主动脉内皮细胞作用,以荧光显微镜和扫描电镜观察记录其过程,并以内皮细胞LDH、AcP漏出率和蛋白含量及细胞形态学作为细胞毒指标。结果表明,钧端螺旋体糖脂蛋白通过对培养血管内皮细胞的粘附,导致细胞内吞与病损。该过程可能属于一种特殊的受体介导内吞过程。     

静脉注射过氧化氢对小鼠红细胞膜的损伤

小鼠静脉注射H_2O_2后,其血浆LPO和Pl—Hb的含量均较对照组为高,且Pl—Hb和LPO呈明显正相关;全血谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶的活性与对照组比较均无明显差异。结果提示静脉注射H_2O_2的量超过了小鼠红细胞的抗氧化保护能力;H_2O_2对小鼠红细胞膜脂质的过氧化损伤明显,使红细胞膜结构和功能破坏,导致溶血。     

牡蛎糖胺聚糖对H2O2所致血管内皮细胞氧化损伤的保护作用

目的了解牡蛎糖胺聚糖（O-GAG）对过氧化氢所致血管内皮细胞（VECs）氧化损伤的保护作用及其机制。方法采用人脐静脉内皮细胞株ECV304体外培养的方法,建立H2O2诱导的血管内皮细胞损伤模型,实验分为正常对照组、损伤模型组（过氧化氢50 mg/L）、肝素组（肝素200 mg/L,过氧化氢50 mg/L）、O-GAG保护组（O-GAG 10、50、100、200、400、800 mg/L,过氧化氢50 mg/L）、O-GAG对照组（O-GAG 100、200、400 mg/L）。采用噻唑蓝（MTT）比色法观察O-GAG对血管内皮细胞增殖活性的影响,黄嘌呤氧化酶法检测细胞超氧化物歧化酶（SOD）活性。结果与正常对照组相比,损伤模型组细胞的增殖活性和SOD的活活性均明显降低（F=137.23、135.40,q=5.26、5.34,P〈0.01）,而O-GAG对照组（100、200 mg/L）的细胞增殖活性明显增高（q=3.40、3.81,P〈0.05）。与损伤模型组相比,O-GAG各保护组（50-800 mg/L）细胞增殖活性明显增加（q=3.40-5.23,P〈0.05、0.01）,SOD活性明显升高（q=4.46-5.07,P〈0.01）。结论O-GAG对过氧化氢所致血管内皮细胞的氧化损伤具有保护作用,其作用机制可能与增加细胞内SOD活性有关。     

甘糖酯对氧化低密度脂蛋白损伤血管内皮细胞的作用

①目的　探讨甘糖酯对氧化低密度脂蛋白 (oxLDL)损伤的血管内皮细胞的作用。②方法　将VEC 30 4内皮细胞株培养后 ,分为两组 :治疗组先给予oxLDL ,再加入不同浓度的甘糖酯 (2 5、5 0、10 0mg/L) ;保护组先给予不同浓度 (2 5、5 0、10 0mg/L)甘糖酯 ,再与oxLDL作用。培养一定时间后 ,取上清液测定丙二醛 (MDA)和乳酸脱氢酶 (LDH)含量。③结果　治疗组 3种浓度甘糖酯均可以降低oxLDL造成的MDA升高 ,而且随着浓度的增高其作用也有增加的趋势 (F =6 6 .12 ,q =6 .5～ 18.3,P <0 .0 5 ) ;浓度较高 (10 0mg/L)甘糖酯可降低oxLDL造成的LDH升高 (F =15 .99,q=8.9,P <0 .0 5 )。保护组 3种浓度甘糖酯均可使MDA含量降低 ,与对照组比较差异有显著性 (F =5 6 .98,q=16 .7～ 5 5 .2 ,P <0 .0 5 ) ;且不同浓度组间差异有显著性 (q =18.9～ 38.6 ,P <0 .0 5 ) ;较大浓度(10 0mg/L)甘糖酯可使LDH含量降低 ,与对照组比较 ,差异有显著性 (F =19.13,q =9.8,P <0 .0 5 )。 ④结论　甘糖酯对oxLDL造成的血管内皮细胞的过氧化损伤有修复和保护作用     

阿魏酸川芎醇酯对内皮细胞氧化损伤的保护作用

目的 观察川芎嗪衍生物阿魏酸川芎醇酯(TMPF)对H2O2引起的脐静脉内皮细胞(ECV304)氧化性损伤的保护作用,并探讨其作用机制.方法 H2O2引起内皮细胞氧化性损伤,观察TMPF对内皮细胞氧化损伤的保护作用.结果 TMPF对H2O2引起内皮细胞氧化性损伤有明显的保护作用,能减少内皮细胞脂质过氧化物丙二醛(MDA)的生成,提高超氧化物歧化酶(SOD)活性,并能提高损伤细胞NO的分泌量.结论 TMPF可有效保护H2O2引起内皮细胞氧化性损伤,维持或恢复细胞正常的生理功能.     

脂质过氧化物与抗氧化剂对内皮细胞前列环素合成的影响

以氢过氧化枯烯作为引发剂、激发和促进培养人血管内皮细胞的脂质过氧化反应;并以硒、维生素E、超氧化物歧化酶作为抗氧化剂,测定细胞脂质过氧化物的含量与培养液中6-酮-前列腺素F_1α的含量。结果表明:氢过氧化枯烯能增加细胞的脂质过氧化物蓄积,并减少内皮细胞的前列环素合成,而各种抗氧化剂的添加,通过减少细胞的脂质过氧化物蓄积,可阻止其对内皮细胞前列环素合成的抑制作用。     

甘糖酯对急性脑梗死病人中性粒细胞与内皮细胞黏附的影响

①目的　观察甘糖酯 (PGMS)对急性脑梗死病人中性粒细胞 (PMN)与内皮细胞黏附的影响。②方法　选择急性脑梗死病人和健康人各 2 0例 ,采血制备PMN悬液 ,将VEC 30 4内皮细胞株培养后 ,观察脑梗死组与对照组PMN与内皮细胞的黏附率 ;并将PGMS(5 0、1 0 0mg/L)与内皮细胞培养后 ,观察内皮细胞与脑梗死病人PMN的黏附率。③结果　脑梗死组与对照组相比PMN与内皮细胞的黏附率明显增高 (t =6 .377,P <0 .0 5 ) ;PGMS 1 0 0mg/L组与PGMS 5 0mg/L组和脑梗死组相比PMN与内皮细胞的黏附率降低 (F =1 3.4 9,q =1 2 .5 7、8.5 2 ,P <0 .0 5 )。④结论　急性脑梗死后PMN与内皮细胞的黏附性明显增高 ,甘糖酯可以减少内皮细胞与PMN的黏附     

双氧水心包腔注入对心包疾患诊断的价值(附20例报告)

本文对20例心包积液患者进行双氧水心包腔注入造影,摄片层观察了心包的厚度和形态,并同已知病因进行了对比。结果表明本法简便易行,对心包积液性质的判别、鉴别诊断、手术选择及预后估计均具有一定的参考价值。     

康寿灵含药血清对H2O2诱导的SH-SY5Y神经细胞损伤的保护作用

目的观察康寿灵含药血清对过氧化氢(H2O2)诱导的SH-SY5Y神经细胞损伤的保护作用。方法采用体外细胞培养的方法,建立SH-SY5Y神经细胞H2O2损伤模型。通过观察细胞形态,测定细胞存活率(MTT法)、乳酸脱氢酶(LDH)活性,检测康寿灵含药血清对SH-SY5Y神经细胞损伤的保护作用。结果同模型组比较,体积分数为0.05、0.10、0.15的康寿灵含药血清能减轻H2O2引起的SH-SY5Y神经细胞的损伤,明显提高细胞的存活率,减少LDH的释放量。结论康寿灵含药血清对H2O2诱导的SH-SY5Y神经细胞损伤具有明显的保护作用。