颊黏膜中分化鳞状细胞癌角蛋白谱的分析

目的：研究口腔颊黏膜鳞状细胞癌角蛋白谱的特点.方法：颊黏膜中分化鳞状细胞癌活检标本,提取角蛋白,进行SDS-PAGE电泳和利用免疫印迹（Western-blot）杂交方法,研究颊黏膜中分化鳞状细胞癌中角蛋白谱的表达.结果：颊黏膜中分化鳞状细胞癌中出现了单层角蛋白上皮如CK18、19,而CK10表达缺失.结论：变异性表达的CK18、19以及不表达CK10,是颊黏膜中分化鳞状细胞癌的一个较为普遍的现象.     

舌体高分化鳞状细胞癌角蛋白谱的分析

目的:研究口腔舌体高分化鳞状细胞癌角蛋白谱的特点。方法:舌体高分化鳞状细胞癌及正常舌体组织活检标本,提取角蛋白,进行SDS-PAGE电泳和利用免疫印迹(Western-blot)杂交方法对比研究舌体高分化鳞状细胞癌及正常舌体组织中角蛋白谱的表达。结果:舌体高分化鳞状细胞癌中出现了单层上皮角蛋白如CK18、19。结论:舌体高分化鳞状细胞癌变异性表达的CK18、19和CK10的不表达,是舌癌发生演变过程的结果,舌癌角蛋白谱的变化与肿瘤的变化有密切关系,可以作为研究肿瘤生物学特征的重要指标。     

细胞角蛋白19mRNA在口腔鳞状细胞癌中表达的研究

目的探讨口腔鳞状细胞癌（OSCC）患者癌组织中细胞角蛋白（CK）19 mRNA的变化和其发生的可能机制以及CK19 mRNA检测的临床应用价值。方法收集未接受过放疗和化疗的20例OSCC患者的手术标本（包括癌组织20块、癌旁组织20块和颈清扫的淋巴结43枚）,采用荧光定量聚合酶链式反应（FQ-PCR）法检测组织内CK19 mRNA的表达,比较CK19 mRNA在上述组织中的相对表达量。结果CK19 mRNA在OSCC癌组织内表达比其在正常口腔黏膜内表达高1.85倍,比其在癌旁组织内表达高1.66倍。9例患者颈清扫淋巴结内CK19 mRNA表达阳性,阳性率为45%（9/20）,而9例患者的22枚淋巴结中CK19 mRNA表达阳性率是81.8%（18/22）,占20例患者43枚淋巴结的41.9%（18/43）。淋巴结CK19 mRNA阳性患者的癌组织与癌旁组织和正常口腔黏膜的表达量比CK19 mRNA阴性患者低。结论CK19 mRNA在OSCC癌组织中的表达高于其在癌旁组织和正常口腔黏膜内的表达,可能是由于癌组织中CK19的合成明显增加所致。淋巴结中CK19 mRNA的表达可以作为检测OSCC淋巴结微转移的指标之一,运用FQPCR法检测淋巴结中CK19 mRNA的表达来检测OSCC的淋巴结微转移比普通病理法检测更灵敏。     

细胞角蛋白19在口腔鳞状细胞癌中的表达及意义

目的:研究细胞角蛋白19 (cytokeratin 19,CK19)在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达,探讨两者之间的相关性.方法:收集正常口腔黏膜、单纯上皮增生、上皮异常增生和OSCC患者活检标本49例,采用免疫组织化学、蛋白质印迹比较各组织中CK19的表达;收集未接受过放疗和化疗的OSCC患者16例及健康人群17例的血清,采用ELISA方法检测血清中CK19的可溶性片段CYFRA21-1的水平.采用SPSS17.0软件包进行数据处理.结果:CK19表达于有上皮异常增生的复层鳞状上皮基底上层和OSCC尤其是低分化鳞癌的癌细胞中,随上皮异常增生程度加重,CK19表达的阳性率、表达强度显著增加.OSCC患者血清CYFKA21-1含量显著高于健康对照组(P＜0.01).结论:CK19表达增加是口腔黏膜癌变过程中的早期事件,其异常表达可作为早期诊断OSCC的辅助指标之一.     

细胞角蛋白CK19在口腔粘膜癌变过程中的变化

目的：探讨口腔粘膜癌变过程中CK19的变化。方法：收集正常口腔粘膜、上皮单纯增生、上皮异常增生和口腔鳞癌活检标本共53例，用免疫组化、电泳和Western杂交方法研究上皮中CK19的表达。结果：CK19表达于有上皮异常增生的复层鳞状上层和口腔鳞癌尤其是低分化鳞癌的癌细胞中。随病变程度加重，CK19表达的阳性率，表达强度和占细胞角蛋白构成比显著增加。结论：CK19表达于粘膜上皮的基底上层可作为口腔癌前病变的辅助标志，CK19表达增加是 口腔粘膜病变过程中的早期事件。     

口腔扁平苔藓中细胞角蛋白19的表达及意义

目的:探讨细胞角蛋白19(keratin 19,CK19)在口腔扁平苔藓(OLP)中的表达以及其病理意义.方法:采用免疫组化法检测17例OLP和14例正常颊黏膜中CK19的表达,采用RT-PCR方法分别在OLP患者和正常人颊黏膜中比较CK19 mRNA的表达.结果:正常颊黏膜中CK19均在基底细胞胞浆内呈强阳性表达,只有5例(29.4%)OLP基底细胞呈弱阳性表达,其余为阴性表达;RT-PCR结果显示在OLP组织中CK19 mRNA表达显著高于正常黏膜(P＜0.05).结论:CK19的表达下调与颊部OLP黏膜上皮更新能力下降密切相关.     

细胞角蛋白19和间隙连接蛋白43在4-亚基硝氧喹啉诱发大鼠舌黏膜癌变过程中表达的研究

目的 研究4-亚基硝氧喹啉（4NQO）诱发大鼠口腔黏膜癌变过程中细胞角蛋白19（CK19）和间隙连接蛋白43（Cx43）的表达,探讨口腔黏膜癌变过程中CK19与Cx43的相关性。方法 利用4NQO诱导SD大鼠的口腔黏膜癌变,运用免疫组织化学的方法检测CK19、Cx43在口腔黏膜癌变过程中各阶段的动态变化。结果 在大鼠正常舌黏膜组织中,CK19阳性染色的细胞散在分布于黏膜基底层;随着大鼠舌黏膜上皮异常增生程度的增加,CK19表达于黏膜基底上层;在口腔鳞状细胞癌（OSCC）组织中,CK19阳性染色细胞分布在黏膜各层。CK19在正常舌黏膜、轻度上皮异常增生、中度上皮异常增生、重度上皮异常增生、OSCC组织中阳性表达率分别为30.00%、50.00%、58.33%、80.00%、91.67%,差异有统计学意义（P<0.05）。在正常舌黏膜中Cx43蛋白主要表达于大鼠舌黏膜上皮细胞的细胞膜上,上皮的基底层、棘层和颗粒层呈阳性染色。随着大鼠舌黏膜上皮异常增生程度的增加,Cx43的表达明显下降。Cx43在正常舌黏膜、轻度上皮异常增生、中度上皮异常增生、重度上皮异常增生、OSCC组织中阳性表达率分别为100.00%、85.71%、66.67%、40.00%、33.33%,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 在大鼠舌黏膜癌变过程中,CK19蛋白表达水平随病变程度加重显著升高,提示CK19与口腔上皮细胞的癌变有关;Cx43蛋白表达水平随病变程度加重显著下降,Cx43表达下降是口腔黏膜癌变的早期事件。CK19与Cx43蛋白表达呈负相关,CK19和Cx43的联合检测对OSCC的早期诊断有重要的作用,有利于提高OSCC早期诊断的灵敏度和特异性。     

口腔鳞状细胞癌中RhoA的表达及作用

目的探讨口腔鳞状细胞癌组织及其转移灶、癌旁组织、增生鳞状上皮和正常口腔黏膜中RhoA的表达及其意义。方法采用免疫组化检测40例口腔鳞状细胞癌,RT-PCR技术分析口腔鳞状细胞癌组织、癌旁组织、口腔鳞状细胞癌转移灶、鳞状上皮增生和正常口腔黏膜组织中RhoA的表达情况。结果RhoA在非癌组织均不表达或弱表达,40例口腔鳞癌中25例表达RhoA,阳性率为62.50%;两者之间具有显著差异(P<0.05)。低分化鳞癌中RhoA的阳性率为66.67%,中、高分化鳞癌中RhoA的阳性率为60.71%;两者之间有统计学差异(P<0.05)。16例有淋巴结转移的鳞癌组织中13例表达RhoA,阳性率为81.25%,24例无淋巴结转移的鳞癌组织中12例表达RhoA,阳性率为50%;两者之间有统计学差异(P<0.05)。RT-PCR检测RhoA mRNA的表达水平,鳞癌组织中RhoA mRNA光密度相对值明显高于癌旁组织、增生鳞状上皮和正常口腔黏膜组织(P<0.01),低于转移灶(P<0.05)。结论RhoA的表达与鳞状细胞癌分化程度、转移程度有关,有望作为鳞状细胞癌预后和转移的参考指标。     

细胞角蛋白10、13、14和19在OLP中的表达研究

目的:研究口腔扁平苔藓(OLP)中细胞角蛋白(CK)的表达变化.方法:采用免疫组化SP法检测7例正常颊黏膜和17例OLP颊部病变中细胞角蛋白的表达部位和强度.结果:在对照组和OLP颊部病变中CK19表达阴性,CK10、CK13表达于复层上皮的基底上层.在对照组中CK14主要表达于基底层,在OLP颊部病变中CK14可扩展至基底上层;与对照组比较OLP中CK10、CK14出现过度表达,而CK13表达下调,有时甚至无表达.结论:OLP中CK表达的转变与OLP病变上皮的异常角化、增殖和分化有关.     

口腔颌面部肿瘤

口腔颌面部鳞癌化疗的临床研究；口腔鳞癌COX-2表达和肿瘤血管生成的研究；颊黏膜中分化鳞状细胞癌角蛋白谱的分析；口腔鳞状细胞癌中COX-2、VEGF和EGFR的表达及意义；口腔癌前病变及口腔癌中D9S171微卫星位点变化的研究；促凋亡分子Bad真核表达载体构建及其在人基底细胞癌细胞中的表达；雌激素受体在人舌癌细胞系中的表达。[编者按]     

口腔鳞状细胞癌细胞基质金属蛋白酶2表达与颈淋巴结微转移的关系

目的探讨口腔鳞状细胞癌(鳞癌)细胞基质金属蛋白酶(MMP)-2的表达与颈淋巴结微转移的关系。方法采用RT-PCR方法,检测47例口腔鳞癌组织标本、15例正常组织的MMP-2 mRNA的表达;对10个正常淋巴结、47例口腔鳞癌患者的335个淋巴结采用免疫组化方法检测其细胞角蛋白(CK)的表达。结果口腔鳞癌MMP-2 mRNA的表达率为40.4%,高于正常对照组的6.67%(P<0.05);47例患者中角蛋白阳性23例,阳性率为48.9%(23/47);以淋巴结微转移阳性、阴性分组,阳性组MMP-2 mRNA的表达率为84.2%,阴性组MMP-2 mRNA的表达率为25.0%,有显著性差异(P<0.005)。结论MMP-2的表达与颈淋巴结微转移呈显著相关性。     

口腔鳞癌淋巴微转移中血管内皮生长因子C与诱导型一氧化氮合酶的相关性表达

目的　探讨血管内皮生长因子C(VEGF-C)与诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在口腔癌微转移中的作用及表达的相关性。方法　对47例口腔鳞癌组织标本、15例正常口腔黏膜采用RT-PCR方法检测其VEGF-C、iNOS mRNA 的表达;对10个正常淋巴结、47例口腔鳞癌患者的355个淋巴结采用免疫组织化学方法检测其细胞角蛋白(CK)的表达。结果　47例口腔鳞癌标本VEGF-C、iNOS mRNA的表达率分别为57·4%、68·1%,高于正常对照组的20·0%、 33·3%(P<0·05);27例VEGF-C mRNA阳性标本中, iNOS mRNA阳性占88·9%(24/27),二者存在明显相关性(P< 0·01);47例标本中CK阳性率为48·9%(23/47),VEGF-C、iNOS表达与CK呈正相关关系。VEGF-C、iNOS阳性组中淋巴微转移率分别为63·0%、65·6%,高于阴性组的30·0%、13·3%(P<0·05)。结论　在口腔癌微转移的机理中 VEGF-C与iNOS的表达具有相关性。     

细胞角蛋白在牙龈鳞癌颈淋巴结中的表达及临床意义

目的　研究细胞角蛋白（CK-AE1/AE3）在牙龈鳞状细胞癌颈淋巴结 中的表达及临床意义。方法　将17例牙龈鳞癌患者病理报告为阳性的28枚淋巴结及139枚阴性淋巴结重新切片,应用广谱细胞角蛋白单克隆抗体（AE1/AE3）作为免疫标志物,采用免疫组织化学（SP法）检测抗体在淋巴结中的表达。结果　167枚淋巴结中,28枚HE染色阳性的淋巴结CK表达均为阳性;另有11枚HE染色阴性淋巴结CK表达为阳性,其位于Ⅰ区6枚,Ⅱ区5枚,共分布在9例患者中。结论　采用CK（AE1/AE3）作为免疫标志物的免疫组化法检测牙龈鳞状细胞癌的淋巴结,较传统HE染色法更为准确,有利于早期发现微转移灶,从而为牙龈癌的治疗及预后判断提供依据。     

半连续切片角蛋白免疫组化染色检测口腔鳞状细胞癌颈淋巴转移的精度研究

目的 探讨半连续切片角蛋白免疫组化染色检测口腔鳞状细胞癌颈淋巴转移的精度。方法 取26例接受单侧五区淋巴清扫术的原发口腔鳞状细胞癌患者的颈淋巴结1638枚，将淋巴结半连续切片，同时进行苏木素-伊红染色检测和角蛋白免疫组化检测，并比较两种检测方法的精度。结果 26例患者的1638枚淋巴结中，苏木素-伊红染色检测患者转移率80．77％（21／26），总淋巴结转移率3．17％（52／1638）；角蛋白免疫组化检测患者转移率100％．总淋巴结转移率9．89％（162／1638）；苏木素-伊红染色检测存在转移灶的52枚淋巴结，经过免疫组化检测均有转移。结论 角蛋白免疫组化检测淋巴结内的鳞状细胞癌转移灶阳性率高于常规苏木素-伊红染色检测。半连续切片的角蛋白染色能全面反应淋巴结转移的真实情况。     

VEGF、MMP-9、TIMP-2在口腔颌面部鳞癌中的表达研究

目的：研究口腔鳞癌中VEGF、MMP-9和TIMP-2基因的表达与临床病理因素之间的关系及意义。方法：应用免疫组织化学Envision法检测VEGF、MMP-9和TIMP-2在50例口腔鳞癌中的表达,分析其与口腔鳞癌的临床及病理参数之间的关系。结果：VEGF在口腔鳞癌中阳性表达率与其有无淋巴结转移相关,有淋巴结转移者VEGF的表达量较无淋巴结转移者明显增加（P〈0.05）。MMP-9的表达率与其临床分期及有无淋巴结转移相关;临床分期越高,MMP-9的表达越高（P〈0.05）;有淋巴结转移者MMP-9的表达量较无淋巴结转移者明显增加（P〈0.05）。TIMP-2的阳性表达率与T分类、临床分期和有、无淋巴结转移转移有关。随着T分类、临床分期的增高,TIMP-2的表达率明显降低（P〈0.05）;有淋巴结转移者TIMP-2的表达较无淋巴结转移者明显降低（P〈0.05）。结论：VEGF、MMP-9的高表达和TIMP-2的低表达与口腔鳞癌淋巴结转移明显相关。MMP-9的高表达和TIMP-2的低表达与口腔鳞癌的临床分期和疾病进展有一定关系。     

骨形成蛋白信号通路中Smad4和Smad7在口腔鳞癌中的表达变化

目的：观察口腔鳞癌和癌旁正常组织中Smad4和Smad7表达量的变化,探讨Smad4和Smad7对口腔鳞癌发生和发展的影响。方法：收集临床和病理学诊断为OSCC的病例72例。取癌组织和癌旁正常组织做切片,用SP免疫组化法分别检测Smad4和Smad7在口腔鳞癌和正常组织中的表达,采用SPSS11.5软件包对数据进行统计学分析。结果：Smad4蛋白在癌旁正常组织中的阳性表达率为69.44%,在口腔鳞癌组织中的阳性表达率为45.83% (P<0.05),且随着分化程度的降低其阳性表达率降低;有淋巴结转移者阳性表达率为22.50%,无淋巴结转移者阳性表达率为65.63% (P<0.05)。Smad7蛋白在癌旁正常组织中的阳性表达率为19.44%,在口腔鳞癌组织中的阳性表达率为83.33%(P<0.05),且随着分化程度的降低其阳性表达率升高;有淋巴结转移者阳性表达率为92.50%,无淋巴结转移者阳性表达率为68.75% (P<0.05)。结论：Smad4在癌组织中表达明显减少,且分化程度越低,表达越少,Smad4在有淋巴结转移的组织中比在无淋巴结转移的组织中表达低;Smad7的作用则相反。Smad4的表达缺失可能促进了口腔鳞癌的发展和转移,Smad7的过表达促进了口腔鳞癌的发展和转移;BMP/Smads信号传导通路受到抑制,可能会导致口腔鳞癌的继续发生和发展。     

口胶粘膜癌前病变及鳞癌角蛋白表达的免疫组化研究

目的研究口腔粘膜标本中角蛋白的表达与分布。方法利用多克隆抗角蛋白抗体A(575)，采用免疫组化技术。结果从正常口腔粘膜，轻、中、重度异常增生到鳞癌角蛋白表达显著增强。A(575)在所有鳞癌标本中均为阳性，但染色强度深浅不一，且随鳞癌分化程度降低而降低，染色弱的病例其临床分期高，更易发生淋巴结转移。结论角蛋白表达的增强在强化上皮细胞中的致癌基因上起作用，这种强化的积累将加速癌前疾病的进展，因此，A575染色可能为预后提供参考依据。