疟原虫三种检查方法的比较和评价

通过对疟原虫三种检查方法的观察，比较，离心浓集法检查疟原虫，阳性检出率显著高于薄片法及厚血片法，平均每年视野可见疟原虫的个数是薄血片法的１０倍。     

江苏省南通市疟疾诊断参比实验室病例复核结果分析

目的 分析南通市疟疾诊断参比实验室对2014—2021年国家传染病报告系统疟疾病例的实验室镜检复核结果,评价南通市疟疾诊断参比实验室疟疾诊断能力。方法 收集南通市2014—2021年国家传染病报告系统的疟疾病例的血涂片和全血样本,南通市与江苏省血吸虫病防治研究所疟疾诊断参比实验室开展市、省两级实验室复核,以省级疟疾诊断参比实验室镜检和核酸检测（PCR）复核结果一致为标准,比较分析南通市疟疾诊断参比实验室复核结果。结果 2014—2021年,南通市与江苏省两级实验室复核297例病例血涂片和血样。省级镜检和PCR复核结果一致,复核结果定性为292例阳性,5例阴性。南通市镜检复核结果与省级复核结果定性符合率100%(297/297),无错判和漏判;阳性血片虫种符合率96.23%(281/292),恶性疟原虫、间日疟原虫、卵形疟原虫和三日疟原虫符合率分别为99.57%(234/235)、62.50%(5/8)、89.47%(34/38)、72.73%(8/11)。经一致性检验,市、省两级实验室虫种分型Kappa值为0.89;恶性疟原虫、间日疟原虫、卵形疟原虫和三日疟原虫分型Kappa值分别为0...     

2018-2019年湖北省疟疾镜检结果分析

目的 了解湖北省发热患者疟原虫血涂片制作质量和实验室人员疟原虫镜检能力,为制定和调整本省消除疟疾后监测策略和措施提供科学依据。方法 对2018-2019年湖北省全部网络报告疟疾病例血涂片和从各市(州)疾控中心抽检的疟原虫阴性血涂片进行镜检复核,从血涂片制作、染色、清洁度、镜检结果及虫种符合情况进行综合分析。结果 2018-2019年湖北省共复核疟原虫血涂片2 136张,血涂片制作、染色、清洁度合格率分别为82.77%、81.88%、85.25%,不同地区血涂片质量差异有统计学意义(χ²=157.702、113.984、60.519,P均<0.05)。血涂片质量主要存在的问题是厚血膜脱落、厚薄血膜过大或过小、厚血膜溶血不全和染色过浅。2018-2019年湖北省网络报告病例285例,实验室镜检复核285例样本,疟疾镜检阳性病例258例,总体疟疾镜检阳性率为90.53%(258/285),虫种符合率为89.92%(232/258),恶性疟原虫、间日疟原虫、三日疟原虫和卵形疟原虫镜检虫种符合率分别为93.85%、100.0%、80.00%、50.00%,差异有统计学...     

聚合酶链反应与镜检法对疟区人群调查结果的比较

目的：比较聚合酶链反应（ＰＣＲ）法与镜检法用于疟疾流行区人群调查的效果。方法：参照文献合成恶性疟原虫（Ｐｆ）与间日疟原虫（Ｐｖ）各一对特异性引物，用５％ｃｈｅｌｅｘ－１００提取滤纸血滴的疟原虫ＤＮＡ，进行ＰＣＲ检测，血片用吉氏染色，油镜下查全厚血膜，结果：ＰＣＲ法与镜检法检出疟区居民阳性带虫经分别为１３．４９％与７．０５％显示ＰＣＲ法比镜检示可提高带虫率６．４４％，人：ＰＣＲ法比镜检法有更高的准确     

对四个医院门诊检验室镜检疟原虫的考核

为加强疟疾的防治工作,我省各地建立了许多发热患者镜检站,以便及时发现疟疾患者,进行治疗.然而镜检站检验疟原虫技术水平的高低,不仅关系到患者治疗的问题,而且对疟疾的控制与传播有直接的影响.为了对疟疾防治工作提供科学依据,我们对两个省辖市级医院及两个公社医院的门诊检验室(及镜检站)检验疟原虫的情况进行了调查,并以厚血膜法作为对照比较.     

云南省昭通市疟疾的实验室诊断研究

目的通过多种实验室方法综合诊断昭通市疟原虫疑似病例,为疟疾防治提供参考。方法用疟原虫检测试纸条(immune colloidal gold technique,ICGT)先做快速检测,然后按照镜检标准制作厚、薄血涂片,经常规吉氏染色后在油镜下(×1 000)的薄血膜观察疟原虫形态,鉴定虫种。最后针对间日疟原虫(Plasmodium vivax)、恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)、三日疟原虫(Plasmodium malariae)和卵形疟原虫(Plasmodium ovale)4种疟原虫的18s rRNA基因进行巢式PCR扩增。结果 10份县区采集的疑似病例,快速试纸条1532未做,3份可诊断为恶性疟,其它6例皆不能明确诊断;显微镜下4份可明确诊断为恶性疟,其中1201为高密度恶性疟,3份可明确诊断为间日疟,1649县级初次镜检误诊为间日疟,省级镜检确诊为卵形疟,1532县级初次镜检误诊为恶性疟,省级镜检未发现疟原虫;所有病例皆经省级采用巢式PCR扩增,4份确诊为恶性疟,3份确诊为间日疟,1649确诊为卵形疟,1532和A无条带。经快速检测、镜检、巢式PCR,证实昭通市2013年9月以来报告的10例疟疾病例分别为3例间日疟、4例恶性疟、1例卵形疟、2例阴性。结论基层镜检技术不稳定;胶体金法诊断结果不能作为确诊依据,镜检准确性依赖于镜检人员技术水平,剿式PCR法诊断最为准确;疟疾确诊需逐级复核和多种实验室方法综合判断。     

非洲赤道几内亚儿童疟疾感染实验室检测及临床诊治分析

目的评价荧光定量PCR法和显微镜镜检法在疟疾临床检测及虫种鉴定中的应用,了解不同型别儿童疟疾病例的临床特征,指导疟疾高发地区门诊对疟疾的早期识别、快速诊断和尽早治疗。方法收集在几内亚首都马拉博医院儿科就诊的150例疑似疟疾患儿的末梢血样,应用荧光定量PCR和镜检法对样品进行同步检测,对两种检测方法进行分析评价,并根据不同型别疟疾病例的临床资料,分析不同型别疟疾病例的临床特征。结果荧光定量PCR法检出阳性率为84.00%,镜检法检出率为74.67%,差异有统计学意义(P0.05);且PCR法在疟原虫密度大于(l~5)×102copy/m L时,可对感染的疟原虫虫种做准确的鉴定,鉴别出恶性疟、三日疟、卵形疟、间日疟的例数分别为93、19、12、2,与镜检法的82、17、11、2例比较,在恶性疟虫种鉴别上差异有统计学意义(P0.05),但在其他虫种鉴别中差异无明显差异(P0.05)。该地区儿童疟疾病例以恶性疟原虫感染为主,临床主要表现为发热、贫血、咳嗽、呕吐、腹泻、抽搐等,死亡10例,其中恶性疟9例。结论在疟疾感染检测和疟原虫型别鉴定中,荧光定量PCR法较传统的镜检法在灵敏度及特异性方面更具优势,对马拉博地区疟疾病例的快速诊断及早期治疗具有重大意义。     

吖啶橙与瑞氏染色法检测伯氏疟原虫的初步研究

目的 :比较吖啶橙 (AO)与瑞氏染色法检测伯氏疟原虫的实用性。方法 :10倍倍比稀释经血液腹腔接种传代感染 4～ 6天的伯氏疟小鼠尾血 ,同时制薄血片。以AO法和瑞氏法染色后高倍镜检 ,记录每片发现三次原虫的平均时间。结果 :AO法与瑞氏法检测发现疟原虫的时间有差别 ,前者较后者快。结论 :AO法是检测人体疟原虫的一种简便、快速、敏感、实用的方法。     

浓集法检查疟原虫

根据疟原虫侵入红细胞利用营养成分比重减轻，经离心浓度的原理，自行设计了一种检查疟原虫方法。经与薄箅片镜检法比较，阳性率提高近１０倍；与厚血片镜检法比较疟原虫形态不发生变化。该法易掌握，不需特殊仪器。     

两种疟原虫染色镜检效果比较

目的比较疟原虫血膜瑞氏染色法与姬氏染色法的优缺点。方法选取本院2016年1月至12月,疟原虫阳性患者3例,及未找到疟原虫患者7例为研究对象,每人抽取静脉血液2 m L为一份,每份血液样本制作疟原虫血涂片10张,共制得100张血涂片,随机分配50张做瑞氏染色,50张做姬氏染色。待血膜自然干燥后,变换顺序交由2位形态学经验丰富的医生镜检观察。结果瑞氏组中厚血膜脱落数为5张,薄血膜脱落数为2张;姬氏组厚血膜脱落数为6张,薄血膜均未脱落,从镜检来看,瑞氏组细胞胞质显示不清,有粘连,血膜背景暗红色,虫体结构模糊,颜色暗淡不清晰,核呈红褐色,浆呈暗蓝色,核质显示不清;姬氏组胞质显示清楚,少粘连,血膜显示背景青蓝色,虫体结构清晰,颜色鲜亮,核呈鲜红色,浆呈天蓝色,核质显示清楚。结论通过两组血膜结果比较,姬姆萨染色的疟原虫血膜稍优于瑞氏染色的疟原虫血膜。     

荧光素染色法检验间日疟原虫效果观察

为了比较荧光素染色法与常规染色法检验疟原虫的效果,我们对160例发热疑为疟疾的患者进行了检查.结果如下:材料与方法一、在疟疾流行季节,对医院门诊发热疑为疟疾的患者自耳垂取血约3立方毫米,在载玻片上制成半厚血膜(比厚血膜薄些).干后用甲醇固定,于2个月后用荧光素染色镜检.另外,同一患者按常规方法在载玻片上制成厚、薄血膜用吉氏染液染色镜检作为.对照.     

疟疾的病原诊断

周围血涂片染色镜检疟原虫仍是当前确诊疟疾最可靠的方法。其中厚血膜用以检出疟原虫,薄血膜用于虫种的鉴定。目前常用的染剂为吉氏和瑞氏染剂。但由于若干因素的影响,可导致原虫的漏检,特别是对于低原虫血症,所以病原诊断一直是疟疾防治工作中实际存在和亟需加以研究的问题。本文谨就疟疾病原诊断的应用方面综述如下。常用血检方法申影响疟原虫检出的若干因素一、周围血液中疟原虫的密度一般认为,每立方毫米血液     

上海市20家医院疟疾血片镜检考核结果分析

目的对20家医院疟疾血片镜检考核结果进行分析,发现不足并提出提高镜检能力的建议。方法对镜检实验室进行盲样考核。结果二级及以上医院的正确率为97.2%,一级医院的正确率为77.8%两者比较差异具有统计学意义（χ2=7.27,P〈0.05）,间日疟原虫血片的镜检正确率为85.0%,恶性疟原虫血片的镜检正确率为71.2%,两者比较差异具有统计学意义（χ2=8.6,P〈0.05）。结论二级及以上医院比一级医院镜检能力强,镜检人员对间日疟原虫的检出能力强于恶性疟原虫     

薄血膜片与厚血膜片对猴肝囊原虫检出率的比较

薄血膜片与厚血膜片对猴肝囊原虫检出率的比较吴军＊赛白胡黎娅（中国实验动物云南灵长类中心，昆明６５０２１６）在检查猴肝囊原虫时，一般采用薄血片法。在薄血膜片中能清晰地观察到寄生在动物红细胞中原虫的形态特征，也便于同猴疟原虫相区别。但猴肝囊原虫在猴外周血...     

基于CRISPR/Cas9的PALM基因敲除约氏疟原单克隆虫株的构建

目的：基于CRISPR/Cas9技术构建并鉴定Plasmodium yoelii 17XNL PALM基因敲除单克隆虫株。方法：根据PlasmoDB数据库中的约氏疟原虫P.yoelii 17XNL PALM基因序列信息,设计引物与sgRNA。PCR扩增左、右同源臂,将同源臂和sgRNA与载体pYCm-golden-blue连接,构建用于基因敲除的CRISPR工具质粒pYCm-PALM KO。pYCm-PALM KO CRISPR质粒电转染至P.yoelii 17XNL裂殖体,尾静脉注射感染小鼠,24 h后采血查获疟原虫后,给予小鼠6 mg/mL乙胺嘧啶喂水进行药物压力筛选基因敲除疟原虫。此后每2天鼠尾采血涂片镜检疟原虫,喂药8 d时提取疟原虫基因组DNA进行PCR鉴定,最终经测序确定是否发生PALM基因敲除。将已证实存在PALM基因敲除疟原虫的鼠血采用有限稀释法接种小鼠,8 d后采血镜检疟原虫,PCR鉴定,筛选获取单克隆虫株。将获取的PALM基因敲除的单克隆虫株和P.yoelii 17XNL各接种至6只昆明小鼠体内,每只接种1×10⁵感染疟原虫的红细胞(iRBC)...     

巢氏PCR检测血片中低密度间日疟原虫的研究

【摘要】目的 探讨巢式PCR应用于检测低密度疟原虫血片DNA的方法。 方法 以健康人抗凝血为稀释液提取不同浓度梯度间日疟原虫血片DNA,测定其最低检出限,将一份含有高密度间日疟原虫的抗凝血样按照1：10、1：100、1：1000、1：2000、1：4000、1：8000、1：16000、1：32000比例进行稀释,制成9个浓度梯度血样。每个浓度血样按照厚血膜5ul、薄血膜2ul同时制作2张血片,连续稀释（9个稀释度）一份含有高密度间日疟原虫的EDTA抗凝血样本,制作标准血片,同时进行所制得的血片中厚、薄血膜通过显微镜计数后,分别用以提取DNA,进行和巢式PCR检测。 结果 间日疟原虫血片厚血膜的检出限为1：16000（08个虫/μl血）,薄血膜检出限为1：100,与镜下计数水平一致。 结论 巢式PCR适用于低密度血片中间日疟原虫DNA的检测,具有较高的检测意义。     

吖啶橙荧光素染色技术在疟原虫检查中的应用

<正> 吖啶橙荧光素染色检查疟原虫是一种快速镜检技术。国外30年代开始应用,国内从70年代陆续有报道,而且在技术方法上不断更新,为了提高疟原虫的检出率,我们于1981年12月使用该技术和吉氏染色对阳性猴间日疟原虫血片和带虫普查血片进行了对照检查。一、材料和方法(1)显微镜:日本产(双筒),目镜10×,物镜40×,镜筒滤光片选用BG—12厚片,目镜滤光片选用浅黄色。(2)荧光灯:浙江温州产,多用光源。(3)猴间日疟阳性血片:该血片系上海寄生虫病研究所1981年3月13日制作。用于免     

检查疟原虫的三种方法比较

血涂片检查疟原虫是临床检验中的常用项目 ,制备血涂片有两种方法 ,即簿血膜和厚血膜 ,现在也采用试管法 ,试管法对疟原虫的检出率有所提高 ,现用厚血膜、薄血膜、试管法对 15 0例疟原虫检查的标本进行比较。1　材料1.1　标本来源　 1999年 1月至2 0 0 2年 12月在东方市人民医院门诊就诊的病人 15 0例。1.2　仪器　 9Ｍ0 2 11显微镜 ,日本生产。广州市富城科教仪器厂生产的80 0离心机。1.3　瑞氏染液2　方法2 .1　按常规的血涂片制作一个厚血膜和一个薄血膜 ,在一支一次性试管中加入 2 0 0ｕｌ生理盐水 ,然后加入 2 0 0ｕｌ新鲜血标本 ,摇匀…     

血涂片镜检在临检工作中的重要性

目的 论证血涂片镜检在临床检验中的重要性.方法 结合临床检验工作,收集大量血涂片资料,分析血液分析仪在血常规检验中的不足,阐述血涂片镜检在临床诊断中的重要性.结果 在血细胞异常增高或降低、白血病、疟原虫等疾病诊断时,血涂片镜检能全面、直观的反映血细胞的病理变化.结论 增强血涂片镜检工作能有效提高疾病诊断的准确率,为临床医生提供更全面直观的诊断依据.     

套式/多重PCR检测疟疾感染的应用研究

目的了解标签引物-套式/多重PCR技术在检测疟疾感染中的现场应用价值。方法随机采取我省疟疾流行区有发热症状的居民及家庭成员的耳垂血79份,同时制作厚血片和滤纸血样本各1份,用标签引物-套式/多重PCR检测所采集滤纸血样本中的疟原虫,并与镜检法进行比较。结果79份样本中,用标签引物-套式/多重PCR技术检出间日疟原虫阳性6例,镜检初检出10例间日疟原虫阳性,经复查血片后有4例排除了疟疾感染。镜检复核阳性的6例样本PCR均为阳性。以镜检复核为标准,两法阳性和阴性符合率为100%。结论标签引物-套式/多重PCR检测疟疾感染具高度敏感性和特异性,对疟疾鉴别诊断和明确诊断具有重要价值。