核因子-κB/p65 siRNA对舌鳞状细胞癌Tca8113细胞增殖、细胞周期及迁移能力的影响

目的 研究下调核因子-κB(NF-κB)/p65的表达对舌鳞状细胞癌Tca8113细胞的增殖、周期及迁移能力的影响,并探讨其相关的分子机制.方法 应用脂质体2000将NF-κB/p65 siRNA转染舌鳞状细胞癌Tca8113细胞,用Real-time PCR和Western blotting技术分别检测p65 mRNA及其蛋白的表达,采用CCK-8试剂盒和流式细胞术分别检测NF-κB/p65 siRNA对Tca8113细胞增殖和细胞周期的影响,Boyden小室法分析其对Tca8113细胞迁移能力的影响.进一步用Real-time PCR和Western blotting技术检测细胞周期相关基因cyclin E和cdk2以及浸润转移相关因子MMP-9 mRNA和蛋白表达的变化.结果 NF-κB/p65 siRNA能有效下调舌鳞状细胞癌Tca8113细胞中NF-κB/p65 mRNA和蛋白的表达(P<0.05),明显抑制Tca8113的细胞增殖(P<0.05),诱导细胞静止在G0/G1期,并降低Tca8113细胞的迁移能力.NF-κB/p65转染Tca8113后的48h,cyclin E、cdk2及MMP-9的表达均显著降低(P<0.05).结论 NF-κB/p65在舌鳞状细胞癌细胞周期及浸润转移中起重要作用,这可能与相关基因表达的改变有关.     

非小细胞肺癌中survivin的表达及定位研究

目的 探讨survivin在非小细胞肺癌细胞中的表达和定位及其与p53、CD44表达和淋巴结转移的关系.方法 以免疫组化方法测定2002年1月～2004年5月手术获得的28例非小细胞肺癌标本的survivin、p53、CD44的表达情况,用SPSS软件分析survivin在细胞中的表达和定位情况及其与p53、CD44表达和淋巴结转移的关系.结果 28例非小细胞肺癌中survivin总阳性率为60.7%(17/28),其中单纯胞质阳性占25.0%(7/28),单纯胞核阳性占10.7%(3/28),胞质和胞核共同阳性者占25.0%(7/28),总的胞核表达阳性率为35.7%(10/28).survivin的积分值为2.00±2.92,与正常肺组织(积分值为0.10±0.32)差异显著(P＜0.005).survivin表达阳性组与阴性组中p53、CD44的表达以及淋巴结转移情况均无显著性差异(P＞0.05);但在survivin阳性组中,胞核survivin表达阳性者p53的阳性率明显高于胞核survivin表达阴性者(P＜0.005).结论 survivin在非小细胞肺癌中表达上调,且在非小细胞肺癌的发生发展过程中其胞核表达可能与p53具有一定的协同作用.     

非小细胞肺癌的分期及手术治疗

联合应用无创性和有创性方法可确定非小细胞肺癌术前的临床分期。低期别肺癌术后5a生存率较高，但仍需结合病人的具体情况兼顾根治和微创两个原则。高期别肺癌的手术治疗更要注意选择病人并结合放、化疗等辅助方法。     

洛伐他汀对兔血管平滑肌细胞转录因子活性的影响

目的 观察洛伐他汀对兔血管平滑肌细胞转录因子AP-1和NF-κB结合活性及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法 用[γ—^32P]—ATF标记寡聚核苷酸，采用电泳迁移率变动分析(EMSA)法测AP-1和NF—κB结合活性，用酶谱分析法检测MMP-9表达水平。结果 洛伐他汀抑制血管平滑肌细胞MMP-9的生成且呈剂量—效应依赖关系，该抑制作用可被甲羟戊酸和焦磷酸二香叶酯而非角鲨烯所逆转；洛伐他汀减低AP-1和NF—κB的结合活性。结论 洛伐他汀可抑制血管平滑肌细胞AP-1和NF—κB结合活性，减少MMP-9的生成。     

老年人晚期非小细胞肺癌三维立体适形放射治疗

目的 探讨老年人非小细胞肺癌(NSCLC)三维立体适形放射治疗(3D-CRT)的临床特点和疗效.方法 对108例由于内科禁忌证或其他情况不能手术的老年人晚期NSCLC施行3D-CRT,单次剂量5～8Gy,隔日1次,总剂量68～82Gy.结果 108例全部完成放射治疗计划,1、2、3年的平均生存率分别为65%、33%、28%.结论 对于有内科禁忌证或由于其他情况不能手术的老年人晚期NSCLC施行3D-CRT是一种比较有效的治疗手段,有助于提高生存率,改善生存质量,减少并发症的发生.     

miR-182调控RECK信号通路在非小细胞肺癌进展中的作用

目的探讨miR-182在非小细胞肺癌(NSCLC)发展中的作用及其相关机制。方法采用实时定量PCR检测NSCLC细胞系以及30组配对的NSCLC患者癌组织和癌旁组织样本中miR-182的表达水平。在NSCLC细胞株A549和H1299中过表达miR-182后,测定细胞增殖活性及侵袭转移能力。利用荧光素酶活性实验鉴定miR-182的预测靶基因(RECK)。采用qRT-PCR和Western blotting分别检测转染miR-182类似物和miR-182抑制物后RECK mRNA和蛋白的表达水平。结果miR-182在NSCLC细胞系和癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织,在伴淋巴结转移的肺癌患者癌组织中的表达水平明显高于不伴淋巴结转移者,差异有统计学意义(P<0.01)。过表达miR-182可增强NSCLC细胞株A549和H1299的增殖、侵袭和迁移能力。双荧光素酶实验结果表明,RECK的翻译水平受miR-182直接调控。qRT-PCR和Western blotting 检测结果表明,转染miR-182类似物后,RECK表达水平降低,转染miR-182抑制物后,RECK表达水平升高。结论miR-182可调控RECK的表达,促进NSCLC的进展。     

呼吸门控放疗非小细胞肺癌

目的 观察非小细胞肺癌呼吸门控放疗的近期疗效以及急性放射性肺炎发生率.方法 16例病理明确的非小细胞肺癌患者采用呼吸门控放射治疗,总剂量60 Gy,分30次照射,观察放疗后肿瘤退缩情况及放射性肺损伤.结果 近期总有效率为68.75％,5例患者发生Ⅱ级放射性肺炎,其他患者均为0～1级放射性肺炎.结论呼吸门控放疗有较好的近...     

99Tcm-His10-Annexin Ⅴ探测非小细胞肺癌细胞凋亡的实验研究

目的 探讨99Tcm标记带有10个连续组氨酸的膜联蛋白Ⅴ(His10-Annexin Ⅴ)探测荷非小细胞肺癌(NSCLC)裸小鼠模型化疗后肿瘤细胞凋亡的可行性.方法 用99Tcm直接标记His10-Annexin Ⅴ.荷H460 NSCLC肿瘤裸小鼠模型20只,按体表面积以100 mg/m2剂量紫杉醇化疗诱导,分成未治疗(对照)、化疗诱导后24,48,72 h共4组.99Tcm-His10-Annexin Ⅴ显像探测化疗前后肿瘤组织细胞凋亡,计算肿瘤/对侧正常肌肉组织放射性比值(T/NT),测定每克组织百分注射剂量率(%ID/g).以99Tcm-IgG显像为对照,确定肿瘤的非特异性摄取.用流式细胞术(FCM)测定肿瘤组织活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase-3),光学显微镜HE及原位末端标记法(TUNEL)染色测定凋亡指数.采用SPSS 12.0软件进行统计学处理,运用单因素方差分析和直线相关分析(Pearson).结果 99Tcm-His10-Annexin V放化纯为(98.01±1.67)%.注射99Tcm-His10-Annexin V后2 h即可得到清晰图像,化疗诱导组肿瘤部位可见明显的放射性浓聚,化疗后24,48,72 h组的T/NT值分别为2.63±0.76,3.41±0.90,3.85±0.62;对照组T/NT值为1.42±0.19,F值分别为12.064,23.322,70.177,P均<0.01.未治疗组肿瘤仅有少量放射性摄取,为(1.09±0.18)%ID/g,化疗后肿瘤摄取明显增加,24,48,72 h肿瘤摄取分别为(2.55±0.73)、(3.60±1.09)、(3.73±0.97)%ID/g,明显高于未治疗组(F值分别为18.733,20.624,35.626,P均<0.01).99Tcm-IgG显像化疗组及对照组肿瘤均未见明显放射性浓聚.未治疗组活化Caspase-3为(3.70±0.74)%,化疗后24,48,72 h分别为(23.46±2.23)%、(62.85±6.13)%、(70.44±6.09)%,3个化疗诱导组和未治疗组相比差异均有统计学意义(F值分别为354.610,459.438,591.052,P均<0.01).光学显微镜HE及TUNEL染色法发现,未治疗组细胞凋亡指数为(3.31±0.61)%,化疗后24,48,72 h细胞凋亡指数分别为(32.90±6.64)%、<70.42±7.54)%、(83.23±9.71)%,化疗诱导组与对照组细胞凋亡指数差异均有统计学意义(F值分别为98.627,393.215,337.386,P均<0.01).T/NT值、肿瘤组织放射性摄取与活化Caspase-3及细胞凋亡指数均有很好的相关性(r=0.847,0.833,0.774,0.850,P均<0.01).结论 99Tcm-His10-Annexin V显像可早期探测NSCLC化疗后细胞凋亡,进而早期预测和评价肿瘤治疗疗效.     

塞来昔布对非小细胞肺癌细胞增殖的抑制作用

目的研究塞来昔布对非小细胞肺癌（NSCLC）的抑制作用及机制. 方法应用MTT法检测塞来昔布对NSCLC细胞株的体外抑制作用,应用流式细胞学、透射电镜研究塞来昔布对NSCLC细胞株的细胞周期阻滞和诱导凋亡的作用,应用RT-PCR检测P27^KIP1、XIAP的表达,以研究细胞周期阻滞和诱导凋亡的机制. 结果 MTT比色试验表明,塞来昔布对NSCLC有明显的抑制作用,且表现为剂量依赖性和时间依赖性;而且,在相同条件下塞来昔布对NCI-H520的抑制率明显高于对A549的抑制率.流式细胞学试验证明,塞来昔布作用后G0/G1细胞比例上升,细胞阻滞于G0/G1期.流式细胞学、透射电镜证实了凋亡的存在,而且凋亡率随剂量的增加而增加.RT-PCR证实塞来昔布作用后P27^KIP1 mRNA表达增加,XIAP mRNA表达减少.结论塞来昔布在体外对NSCLC有明显的抑制增殖作用,其机制涉及细胞周期阻滞、诱导细胞凋亡两个方面.     

放射性粒子永久植入治疗非小细胞肺癌的研究

放射治疗是肺癌治疗的重要手段之一,放射性粒子永久植入内照射疗法对大部分中晚期肺癌患者提供了一种新的、有效的姑息性治疗方法,并在非小细胞肺癌治疗中显示出可喜的前景,为此探讨放射性粒子在非小细胞肺癌治疗中的研究进展及应用前景.     

影像组学评估非小细胞肺癌疗效进展

【摘要】近年来,随着非小细胞肺癌的发病率及死亡率逐年攀升,针对其的治疗方式进展迅速,包括手术切除、放化疗、免疫治疗及靶向治疗,其中放化疗仍作为治疗NSCLC的一线治疗方式。然而针对肿瘤的预后评估还停留在传统的影像学征象及实验室检查中,但从肿瘤表面得到的信息毕竟局限,准度及精度也相对较差。而影像组学可以直接观察到肿瘤内部的隐藏信息,提取到肉眼识别不到的潜在特征,填补了传统检查方式的不足。因此影像组学检测方法的出现为NSCLC的影像诊断和定性检测及疗效评价提供了新的技术手段,在其检测与定性、疗效评估等方面均具有优势。现就影像组学在非小细胞肺癌疗效评估中做一综述。     

CRIM1对非小细胞肺癌辐射敏感性和转移的影响

目的 探讨富含半胱氨酸型运动神经元蛋白1（CRIM1）对非小细胞肺癌（NSCLC）辐射敏感性和转移的影响及可能的机制。 方法 采用短发夹RNA（shRNA）敲降NSCLC H460、H358细胞中CRIM1的表达,并将H460、H358细胞分别分为3组：H460细胞、H460-shCRIM1细胞、H460-shNC细胞和H358细胞、H358-shCRIM1细胞、H358-shNC细胞,其中shCRIM1表示用shRNA敲降CRIM1的表达,shNC表示阴性对照。采用小干扰RNA（siRNA）敲降H358细胞中CRIM1的表达,并将细胞分为2组：H358-siNC细胞和H358-siCRIM1细胞。采用细胞克隆形成实验（照射剂量为0、1、2、4 Gy）、慧星实验（照射剂量为8 Gy）和细胞免疫荧光实验（照射剂量为6、8、12 Gy）观察CRIM1对H460细胞辐射敏感性的影响。采用Transwell实验、细胞黏附实验观察CRIM1对H460、H358细胞转移的影响。构建小鼠H460原位肿瘤模型,采用组织病理学检查评估裸鼠肺内原位接种肿瘤转移情况。采用转录组学分析法探讨CRIM1影响NSCLC细胞转移的可能机制。组间比较采用两独立样本t检验。 结果 克隆形成实验结果显示,与H460-shNC细胞相比,1、2 Gy照射后H460-shCRIM1细胞的克隆形成率明显降低 [1 Gy：（87.04±8.04）%对（58.01±4.39）%;2 Gy：（48.23±1.22）%对（31.43±0.08）%],且差异均有统计学意义（t=4.48、19.50,均P<0.05）。慧星实验结果显示,8 Gy照射后H460-shCRIM1细胞的olive尾距长于H460-shNC细胞,且差异有统计学意义（1.27±0.54对1.05±0.42,t=2.14,P<0.05）。细胞免疫荧光实验结果显示,H460-shCRIM1细胞受照后磷酸化组蛋白H2AX foci数多于H460-shNC细胞（6 Gy：14.33±2.81对11.00±3.92;8 Gy：34.00±11.14对21.17±6.15;12 Gy：25.80±3.96对20.17±3.31）,且差异均有统计学意义（t=2.45、5.52、2.47,均P<0.05）。Transwell实验结果显示,H460-shCRIM1、H358-shCRIM1细胞的迁移率分别较H460-shNC、H358-shNC细胞明显升高,且差异均有统计学意义（t=4.73、10.19,均P<0.05）。细胞黏附实验结果显示,H460-shCRIM1、H358-shCRIM1细胞的黏附能力分别较H460-shNC、H358-shNC细胞下降,且差异均有统计学意义（t=2.86、3.66,均P<0.05）。组织病理学检查结果显示,原位接种H460-shCRIM1细胞的裸鼠肺内转移灶明显多于H460-shNC细胞。转录组学分析结果显示,筛选出的细胞黏附相关基因连接黏附分子2（JAM2）、连接蛋白3（NECTIN3）和紧密连接蛋白4（CLDN4）在H460-shCRIM1、H358-siCRIM1细胞中的表达均下降;并在体外实验中得到验证,其中,H460-shCRIM1细胞相较于H460-shNC细胞分别下降了86.66%、49.35%、30.27%（t=47.52、7.47、18.98,均P<0.05）,H358-siCRIM1细胞相较于H358-siNC细胞分别下降了36.60%、31.70%、50.00%（t=7.40、7.10、16.56,均P<0.05）。 结论 抑制CRIM1可增强NSCLC细胞H460的辐射敏感性,CRIM1可能通过影响肿瘤细胞连接的方式影响NSCLC的转移。     

MSCT联合肿瘤标志物检查对中央型小细胞肺癌及非小细胞肺癌的鉴别诊断价值

目的 分析中央型小细胞肺癌和非小细胞肺癌的MSCT表现,并联合肿瘤标志物,探讨二者之间的鉴别诊断价值.方法 搜集2014年2月至2015年2月间经本院病理证实72例中央型肺癌患者(其中小细胞肺癌25例、非小细胞肺癌47例)的临床资料,分析两组患者的MSCT表现及与肿瘤标志物的相关性.用SPSS 17.0统计软件行单因素x2检验、成组t检验.结果 (1)胸膜腔积液、淋巴结融合征象以及支气管截断征在两组中差异有统计学意义(P＜0.05),中央型小细胞肺癌在前二者的出现率高于非小细胞肺癌,支气管截断征的出现率低于非小细胞肺癌;心包腔积液、胸膜转移、远处转移、血管受侵、肿瘤坏死,纵隔肺门及远处淋巴结肿大在两组间差异无统计学意义(P＞0.05).(2)血清肿瘤标志物CA125、CYFRA21-1、NSE、ProGRP、SCC在小细胞肺癌与非小细胞肺癌中的阳性率,组间比较具有统计学意义(P＜0.05),其中小细胞肺癌组的NSE、ProGRP阳性表达率高于非小细胞肺癌组;非小细胞肺癌组的CA125、CYFRA21-1、SCC阳性表达率高于小细胞肺癌组.(3)中央型小细胞肺癌组中有无心包积液的CYFRA21-1的阳性表达率差异具有统计学意义(P＜0.05);有无胸膜转移、有无肿瘤坏死、有无纵隔肺门及远处淋巴结肿大的CEA的阳性表达率差异具有统计学意义(P＜0.05);有无纵隔肺门淋巴结肿大的SCC阳性表达率差异有统计学意义(P＜0.05).(4)中央型非小细胞肺癌组中有无胸膜转移的CA125的阳性表达率差异具有统计学意义(P＜0.05);有无胸腔积液的NSE的阳性表达率差异具有统计学意义(P＜0.05);有无肿瘤坏死的SCC阳性表达率差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 中央型小细胞肺癌与非小细胞肺癌有不同的MSCT表现,结合肿瘤标志物分析,有助于二者的鉴别诊断.     

不同化疗方案对晚期非小细胞肺癌的疗效分析

目的探讨不同化疗方案对晚期非小细胞肺癌的疗效。方法161例晚期非小细胞肺癌患者分别用四组不同的方案化疗,MVP40例,NP36例,GP45例,TP40例,四组患者基线资料具有可比性。结果MVP有效率44.2%,肿瘤控制率73%;NP有效率49.7%,肿瘤控制率86.4%;GP有效率55%,肿瘤控制率92.3%;TP有效率60.5%,肿瘤控制率93.7%。四种方案有效率比较无统计学差异(P>0.05),肿瘤控制率比较有统计学差异(P<0.05)。结论四种化疗方案对晚期非小细胞肺癌均有效,但TP方案肿瘤控制率高,化疗副反应轻,可作为晚期NSCLC患者首选方案。     

CPNE5对NF-κB转录调控活性的影响

目的:研究CPNE5对TNF-α诱导的NF-κB转录激活活性的影响,并探讨其作用机制.方法:用10 ng/mlTNF-α处理转染了pcDNA3.1或pcDNA3.1-CPNE5的HEK293细胞,用双荧光素酶报告基因实验检测不同转染组NF-κB的转录激活活性;Western印迹和细胞免疫荧光技术检测CPNE5表达上调对NF-κB入核的影响;凝胶阻滞实验研究CPNE5表达上调对NF-κB DNA结合能力的影响.结果:CPNE5可以显著抑制TNF-α对NF-κB的转录激活活性(P<0.0001);CPNE5不影响TNF-α诱导的NF-κB(P65)入核;CPEN5过表达降低了TNF-α诱导的NF-κB与DNA结合的能力.结论:CPNE5通过抑制NF-κB的DNA结合活性抑制TNF-α诱导的NF-κB转录激活活性.     

侵犯隆凸的非小细胞肺癌52例的外科治疗

侵犯隆凸的非小细胞肺癌是肿瘤晚期的表现,过去因为手术复杂、难度大、术后并发症高而使治疗效果欠理想,但随着外科技术的发展,麻醉配合及围术期管理的进步,近年来其手术治疗正普遍应用于临床。本文回顾性总结了我院胸外科1993-2004年开展隆凸切除及重建手术治疗中央型非小细胞肺癌52例的经验,就手术方法、麻醉配合、围术期管理、生存期等方面进行探讨。     

36例老年非小细胞肺癌患者三维适形放疗的疗效观察

目的 观察三维放射治疗(3D-CRT)治疗老年非小细胞肺癌患者的疗效和副反应.方法 2001年8月～2006年10月,应用3D-CRT技术治疗70岁以上非小细胞肺癌患者36例.以Leibinger三维放疗计划系统制订放疗计划,处方剂量为40～80Gy(中位剂量60Gy).其中采用低分割照射者24例,单次分割剂量5～8Gy,隔日照射,共8～12次照射;常规分割者12例,共30～40次照射.观察所有患者的肿瘤反应率,1、2年的生存率及治疗毒副作用.结果 33例患者治疗后临床症状获得改善,3例无变化.肿瘤获得完全缓解8例,部分缓解22例,肿瘤总反应率83.33%(30/36).全组生存时间为2～53个月,中位生存时间8个月,1年生存率66.67%,2年生存率36.11%.无严重并发症.结论 对于老年非小细胞肺癌患者,3D-CRT技术是一种安全有效的治疗手段,能够改善生存质量,提高生存率.     

加速超分割放疗治疗非小细胞肺癌的临床观察

肺癌是我国常见的恶性肿瘤之一,发病率呈逐年上升趋势.其中非小细胞肺癌(NSCLC)占肺癌总数的70%～80%,而局部晚期NSCLC占确诊肺癌病例的40%左右.对于不适合手术的NSCLC患者,放疗是并发症最少也是最有效的非外科治疗方法.我们对1992-2004年998例Ⅲ期非小细胞肺癌患者进行了加速超分割放疗(HART)和常规放疗的前瞻性比较研究,现将结果报道如下.     

非小细胞肺癌N2淋巴结转移的危险因素分析

目的研究多种影响因素与NSCLCN2淋巴结转移之间的关系。方法回顾性分析接受18F．FDGPET／CT检查和手术治疗的NSCLC患者,将其分为无N2淋巴结转移（非N2＋）和有N：淋巴结转移（N2＋）2组,采用x2检验或两样本t检验比较2组问性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、SUVmax、病理学类型及分化程度等影响因素的差异,然后将组间有统计学意义的影响因素及分组进行量化赋值,先后用单因素回归和多因素logistic回归分析确定对N：淋巴结转移有意义的危险因素。结果共纳入177例患者,其中男109例,女68例,年龄（60．1±10．6）岁。非N2＋（142例）和N;（35例）2组间的肿瘤大小[（36．1±19．7）mm和（49．3±24．4）mm]、SUV-（8．81±6．23和11．21±4．43）和分化程度（高分化：3和0例;中分化：74和11例;低分化：65和24例）差异均有统计学意义（t=-2．969和-2．633,疋。6．143,均P〈0．05）,而性别、年龄、肿瘤部位和组织学类型差异均无统计学意义（X2=0．374—4．999,t=0．836,均P〉0．05）。单因素分析显示,肿瘤大小、sUVmax及分化程度与N2淋巴结转移相关（r=0．201、0．245和0．185,均P〈0．05）;而多因素分析示,只有SUVmax与N2淋巴结转移之间的相关性具有统计学意义（P=0．546,P〈0．01）。NSCLCN：淋巴结的转移概率随着原发病灶SUVmax的增加而增加;当原发灶SUVmax≤2．5时,发生N：淋巴结转移的概率为0,而SUVmax〉7．5时概率为O．29。结论SUVmax是NSCLC发生N2淋巴结转移的危险因素。