食管贲门癌中端粒酶活性表达及其临床意义

目的　探讨食管癌组织中端粒酶活性表达及其临床意义。方法　采用RNA原位杂交方法 ,对 110例食管、贲门癌及 2 0例正常食管、贲门组织及 30例癌旁组织端粒酶活性进行检测 ,并行统计分析。结果　 110例食管、贲门癌中 ,90例端粒酶表达呈阳性 ,阳性率达 81.8% ,癌旁组织中 5例呈阳性 ,阳性率 4 5 % ,正常食管、贲门组织中阴性 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。端粒酶表达与肿块大小、淋巴结转移、病理分级和预后显著相关 (P <0 .0 5 )。结论　端粒酶活性检测可作为食管、贲门癌诊断指标之一 ,与其生存预后有关。     

食管鳞状上皮不典型增生中端粒酶逆转录酶的表达

目的　探讨端粒酶逆转录酶 (hTRT)与食管黏膜鳞状上皮不典型增生恶性转化的关系及其作用。方法　应用端粒末端重复序列扩增技术 (telomericrepeatamplificationprotocol,TRAP)和原位杂交技术检测 47例食管黏膜鳞状上皮不典型增生患者组织、2 9例食管鳞癌患者组织及 11例正常组织标本中端粒酶活性及其hTRTmRMA的表达。结果　正常组织标本均未检测出端粒酶活性 ,食管黏膜鳞状上皮不典型增生组端粒酶活性检出率为 44.7% ( 2 1 47) ,显著高于正常组 ( χ2 =5.89,P <0 .0 5) ;食管鳞癌组端粒酶活性检出率为 86.2 % ( 2 5 2 9) ,显著高于不典型增生组 ( χ2 =11.3 5,P <0 .0 1)。正常组织hTRTmRMA无表达 ,不典型增生组阳性表达率为 48.9% ( 2 3 47) ,显著高于正常组( χ2 =6.99,P <0 .0 1) ;食管鳞癌组阳性表达率为 82 .8% ( 2 4 2 9) ,显著高于不典型增生组 ( χ2 =7.3 2 ,P <0 .0 1)。hTRTmRMA表达与端粒酶活性显著相关 ( χ2 =57.91,P <0 .0 0 1)。结论　hTRTmRNA表达与端粒酶活性呈高度一致性 ,提示hTRT在端粒酶活性调节中可能起关键性作用 ,并与食管黏膜鳞状上皮不典型增生细胞恶性转化密切相关 ,hTRT有望成为食管鳞癌的新的、有价值的生物标志物。     

端粒酶在宫颈癌中的表达及意义

目的:探讨端粒酶在宫颈癌发生、发展中的作用。方法:采用免疫组化两步法测定了91例宫颈活检标本中端粒酶活性,20例正常宫颈组织中端粒酶活性。结果:宫颈癌端粒酶阳性检出率为90.1%,正常宫颈组织中无阳性表达。端粒酶的表达与病理类型无关(P>0.05),腺癌中阳性表达占95.2%,鳞癌阳性表达占88.6%;差异无统计学意义(P>0.05);但与病理组织分化程度有关,随着病理组织级别的升高,端粒酶的阳性表达增强,Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级端粒酶阳性表达率分别为75.0%、88.9%、100.0%,差异显著,有统计学意义(P<0.001)。结论:端粒酶活性可能与宫颈癌发生有关,与宫颈病变级别呈正相关。     

胃癌组织人端粒酶催化亚基hTERT mRNA的原位杂交检测

目的：研究胃癌组织、癌旁及远端正常胃组织中的端粒酶活性,探讨其作为胃癌肿瘤标记物的可能性。方法：采用原住杂交法检测了68例胃癌组织、癌旁及远端正常胃组织的端粒酶活性表达。结果：68例胃癌组织中端粒酶阳性表达61例（89．7％）,癌旁组织为17例（33．3％）,远端正常胃组织未检测出端粒酶活性。结论：端粒酶是特异性较强的恶性肿瘤基因标志,有可能成为胃癌早期诊断和治疗的理想标记物。     

HSP27mRNA在食管鳞癌组织中表达的研究

目的探讨HSP27mRNA在食管鳞癌组织中的表达情况。方法采用组织原位杂交技术检测36例食管癌组织,癌旁组织和正常组织中HSP27mRNA的表达。结果Hsp27mRNA在食管鳞癌组织中的染色主要定位于胞浆,呈灶性或弥漫性分布,而在切缘正常粘膜中,呈点状或灶性分布;食管鳞癌组织和癌旁组织的HSP27mRNA表达差别无统计学意义(P>0.05),二者与正常食管粘膜相比,差别均具有统计学意义(P<0.005,P<0.005)。结论食管鳞癌组织和癌旁组织中HSP27mRNA的表达水平与正常食管粘膜相比均明显升高,提示HSP27mRNA在食管鳞癌中高表达。     

端粒酶和胃癌相关性研究进展

本文就端粒酶的结构和功能、端粒酶与胃癌的相关性、端粒酶抑制剂与胃癌的治疗等方面的研究进展做一综述。1端粒酶与胃癌的相关性端粒酶作为一种由RNA和蛋白质组成的复合体,目前已证实该复合体由六个亚单位组成。hTR(humantelomeraseRNA,人端粒酶RNA);hTEP1(humantelomeraseprotein1,人端粒酶蛋白质,又称TP1);hTEET(humantelomerasereversetran-sciptase,人端粒酶逆转录酶;又称hTRT、hTEST2或TP2);HSP90;p23和dyskerin。其中比较重要的亚单位有hTR、hTEP1、hTERT。端粒酶除表达于正常组织细胞,如胚胎细胞、成人男性生殖细胞、造血干细胞、子宫内膜细胞、活化的淋巴细胞等以     

卵巢上皮性癌中端粒酶定量检测的意义

目的探讨端粒酶定量检测在上皮性卵巢癌诊断中的临床意义。方法以20例上皮性卵巢癌患者为研究对象,行实时定量端粒重复扩增PCR法(RTQ-PCR)定量检测患者肿瘤组织中的端粒酶活性。结果20例卵巢上皮性癌组织中端粒酶活性较良性卵巢肿瘤组织及正常卵巢组织中端粒酶活性显著增高(P<0.001),上皮性卵巢癌患者临床~期的端粒酶值(197.10±28.20)与临床~期(347.14±60.10)相比,差异有显著意义(P<0.05)。结论端粒酶定量检测有助于卵巢癌的诊断及预后监测。     

端粒酶与p53、C—myc,K—ras在肺癌组织中的表达

目的研究端粒酶活性在肺癌及癌旁组织中的表达,并探讨端粒酶的表达与p53、C-myc、K-ras之间可能存在的关系.方法采用TRAP-SYBRGreen染色法检测36例肺癌和36例癌旁组织,20例肺部良性病变组织和20例正常肺组织及A549肺腺癌细胞株端粒酶活性的表达,并利用免疫组化技术检测肺癌组织p53、C-myc、K-ras表达水平.结果83.3%的肺癌组织25.0%的癌旁组织、15.0%肺部良性病变级织表达端粒酶活性,正常肺组织未检测到端粒酶活性.端粒酶活性的表达与肺癌组织的病理类型、肿瘤大小、临床分期无相关.在30例端粒酶活性阳性的肺癌组织中有24例(80%)表达p53蛋白,18例(60%)表达C-myc蛋白,22例(73%)表达K-ras蛋白.利用Spearman分析方法分析端粒酶活性与p53、C-myc、K-ras蛋白表达水平之间的相关关系,相关系数分别为r=0.60,P＜0.01r=0.335,P＜0.01;r=0.427,P＜0.01.结论端粒酶活性的定性检测可作为肺部恶性肿瘤诊断的辅助指标之一;肺癌组织的端粒酶活性与p53、C-myc、K-ras蛋白表达水平之间存在正相关关系.     

卵巢上皮性肿瘤端粒酶活性原位检测与bcl-2和p53蛋白表达的相关性研究

目的探讨卵巢上皮性肿瘤端粒酶活性与bcl-2和p53蛋白表达的相关性及其与卵巢肿瘤发生的关系.方法对88例卵巢上皮性肿瘤组织,采用端粒酶活性原位检测法(ISLT法)检测端粒酶活性,S-P法免疫组化技术检测bcl-2和p53蛋白.结果 1.卵巢囊腺癌,交界性囊腺瘤,囊腺瘤及癌旁组织端粒酶检出率分别为92.3%,42.8%,0,0.囊腺癌组端粒酶阳性率与交界性囊腺瘤,囊腺瘤,囊腺癌癌旁组织间存在显著性差异(P＜0.01).端粒酶活性强度与囊腺癌分化程度无明显相关性(P＞0.05).2.卵巢囊腺癌,交界性囊腺瘤,囊腺瘤,囊腺癌癌旁组织中bcl-2的阳性表达率分别为65.38%,52.38%,26.66%,0.卵巢囊腺癌、交界性囊腺瘤与囊腺瘤、囊腺癌癌旁组织间存在显著性差异(P＜0.05),端粒酶活性程度随bcl-2蛋白表达增强而升高(γ=0.91,P＜0.01).3.卵巢囊腺癌,交界性囊腺瘤,囊腺瘤,囊腺癌癌旁组织中p53的阳性表达率分别为57.69%,14.28%,0,0.卵巢囊腺癌与交界性囊腺瘤、囊腺瘤、囊腺癌癌旁组织间存在显著性差异(P＜0.01).囊腺癌端粒酶活性程度与p53蛋白表达强度无明显相关性(γ=0.12,P＞0.05).结论 bcl-2蛋白的过度表达可能与端粒酶激活有关,bcl-2可能通过激活端粒酶使卵巢上皮细胞恶性转化导致卵巢囊腺癌发生,而p53基因突变似对端粒酶的激活无直接影响.     

人子宫颈病变组织中P53表达及其与端粒酶hTR mRNA的关系

目的:探讨人子宫颈病变组织中P53的表达及其与端粒酶hTR mRNA表达的相关关系。方法:51例宫颈病变组织中,包括宫颈炎10例,LSIL10例,HSIL20例,SCC11例,分别利用免疫组化S-P法和原位杂交法检测病变组织中P53蛋白、端粒酶hTRmRNA的表达活性。结果:P53表达在宫颈炎组与LSIL组无差别,但显著低于HSIL和SCC组;hTR基因在HSIL/SCC中的阳性表达与CC/LSIL组以及在LSIL和HSIL/SCC之间差异有统计学意义(P<0.05);P53蛋白表达与端粒酶hTRmRNA基因表达之间具有显著相关性(P=0.042,P<0.05)。结论:端粒酶hTR和P53蛋白表达及相关性对于人子宫颈癌的早期病理诊断有较好地应用价值。同时,对该肿瘤的发生、发展规律提供一定的客观依据。     

端粒酶和妇科肿瘤的研究进展

端粒酶是一种RNA依赖的逆转录酶 ,能够延长染色体末端的端粒长度。它由三个主要部分组成———端粒酶RNA亚单位、端粒酶催化亚单位及连接二者的端粒酶相关蛋白。端粒酶激活是细胞永生化和肿瘤形成的关键步骤 ,其活性受到多种因素的调控。端粒酶催化亚单位hTERTmRNA可能是其激活的关键限速步骤。在妇科肿瘤的癌变过程中 ,端粒酶活性不同程度地升高 ,hTERT不断上调。端粒酶及其催化亚单位有可能成为妇科肿瘤筛查的一种重要的肿瘤标志物     

肝癌端粒酶逆转录酶表达与端粒酶活性相关性及临床意义

目的 探讨肝细胞肝癌（HCC）中端粒酶逆转录酶（hTERT）蛋白表达情况与端粒酶活性的相关性及其临床意义。方法 采用免疫组化S-P法检测52例HCC癌组织及相应癌旁组织中hTERT蛋白表达，并用TRAP-ELISA法检测上述组织中的端粒酶活性。结果 HCC癌组织中hTERT蛋白与端粒酶活性表达阳性率分别为86．5％（45／52）和80．8％（42／52），它们与相应癌旁组织比较差异均有显著性（P〈0．01）；且癌组织中hTERT蛋白阳性表达与端粒酶活性呈高度正相关（r=0．761，P〈0．001）。hTERT蛋白阳性表达与患者的性别、年龄、有无乙肝、肝硬化、肝功能、肿瘤包膜、病理分级及分期等临床指标无关，而与HCC肿瘤大小有关（P〈0.05）。结论 HCC癌组织中hTERT蛋白过度表达，可能参与肝癌端粒酶活性的调控，而在HCC发生、发展中起重要作用。hTERT蛋白表达与端粒酶活性均可作为HCC诊断的特异性指标。     

不同端粒酶抑制剂对肝癌细胞端粒酶活力的影响

目的通过多种端粒酶抑制剂同时作用于人肝癌SMMC-7721细胞,比较各种端粒酶抑制剂抑制癌细胞端粒酶活力的效果。方法利用针对端粒酶RNA的反义寡核苷酸(ASODN)和正义寡核苷酸(NODN),针对端粒酶催化亚基的反义寡核苷酸(HASODN)和正义寡核苷酸(HNODN),以及没食子酰表没食子儿茶素(EGCG),3’-叠氮3’-脱氧胸苷(AZT),全反式维甲酸(ATRA),盐酸阿酶素(ADM)作用于人肝癌SMMC-7721细胞株,实时荧光定量端粒重复序列扩增法(real-timefluorescentquantitativeTRAPassay,FQ-TRAP)检测端粒酶抑制剂作用后SMMC-7721细胞端粒酶活力变化。结果FQ-TRAP法可检测到102个细胞的端粒酶活力,ASODN、NODN、HASODN、HNODN、EGCG、AZT、ADM、ATRA作用于SMMC-7721细胞后,与对照组比较,癌细胞的端粒酶活力均受到抑制(P<0.05),其端粒酶活力的下调率分别为93.30%、43.44%、41.02%、39.26%、58.15%、48.93%、24.44%和53.49%。结论FQ-TRAP法可快速、简便及定量检测人端粒酶活力。ASODN,EGCG抑制SMMC-7721细胞端粒酶活力的效果较明显。     

端粒、端粒酶系统的调控与研究现状

端粒是指位于真核细胞线性染色体末端的特殊结构 ,由TTAGGG的DNA重复序列和端粒结合蛋白所构成的一种核蛋白复合体。端粒酶对端粒结构的稳定起着重要的作用 ,而端粒结构和端粒结合蛋白也影响端粒酶活性。在大多数组织端粒酶活性的抑制是在出生前由于hTERT转录水平的抑制 ,而在 90 %以上的癌细胞中通过hTERT表达上调被激活。端粒酶活性受多水平调控 ,本文从以下方面描述 :端粒酶活性和细胞分化、端粒酶活性的分子调节、端粒酶活性与细胞周期、端粒酶与肿瘤现状及端粒酶活性与其他因素 ,因此 ,可能在不同的细胞有不同的因素。     

hTERT基因反义核酸对A2780细胞端粒酶活性影响

目的:检测hTERT基因反义核酸对A2780细胞端粒酶活性的影响及其机制。方法:TRAP法检测端粒酶活性,流式细胞仪检测hTERT蛋白表达。结果:检测端粒酶活性,A2780细胞吸光度A值为(0.492±0.051),hTERT反义核酸作用48 h A值降为(0.351±0.051),hTERT反义核酸作用72 h A值降为(0.238±0.024)检测hTERT蛋白表达,A2780细胞hTERT蛋白阳性率(89.513±3.389)%,hTERT反义核酸作用48hhTERT蛋白阳性率低至77.237±2.872%,hTERT反义核酸作用72 h hTERT蛋白阳性率低至(47.767±1.226)%。而hTERT正义核酸无上述作用。hTERT反义核酸作用A2780细胞48 h、72h对hTERTmRNA表达无影响。结论:hTERT反义核酸降低A2780细胞端粒酶活性,机制可能是降低hTERT蛋白表达量。     

SYBR Green染色法检测肺癌及癌旁组织端粒酶活性

目的 研究TRAP－SYBR Green染色法定性检测端粒酶活性的方法及端粒酶活性在肺癌及癌旁组织中的表达，并探讨端粒酶的表达与P53之间可能的关系。方法 采用TRAP－SYBR Green染色法检测36例肺癌、36例癌旁组织、8例肺部良性病变组织和A549肺腺癌细胞株端粒酶活性的表达，并利用免疫组化技术检测肺癌组织P53蛋白表达水平。结果 TRAP－SYBR Green染色法可检测出5个A549肺腺癌细胞所表达端粒酶活性。83．3％（30／36）的肺癌组织，3／8肺部良性病变组织，19．4％（7／36）的癌旁组织表达端粒酶活性。端粒酶活性的表达与肺癌组织的病理类型、肿瘤大小、临床分期无相关性。在30例表达端粒酶活性的肺癌组织中P53呈现过度表达的占80％（24／30），端粒酶活性与P53蛋白表达水平之间具有相关关系。结论 TRAP－SYBR Green染色法是一种较为灵敏、快速、简便的定性检测端粒酶活性的方法；端粒酶活性的定性检测可作为肺部恶性肿瘤诊断的辅助指标之一；端粒酶P53之间的关系有待进一步阐明。     

姜黄素对人喉癌细胞株Hep-2增殖和端粒酶活性的影响

目的研究姜黄素（curcumin）对人喉癌细胞Hep-2增殖和端粒酶活性表达水平的影响。方法CCK-8法检测不同浓度姜黄素作用于Hep-2后24h、48h、72h的细胞增殖活性：集落形成试验检测不同浓度姜黄素作用于Hep-2后的细胞增殖抑制率;StretchPCR-银染法检测细胞端粒酶活性变化。RT—PCR分析端粒酶主要组分hTERT的mRNA表达情况。结果①姜黄素对Hep-2细胞的增殖抑制作用具有时间和剂量依赖性。五种浓度（20μmol／L、40μmol／L、60μol／L、80μmol／L、100μol／L）姜黄素作用12、24、48、72小时后,IC50分别为81．17μmol／L、40．90μmol／L、33．26μmol／L、31．63μmol／L;②四种浓度（20μmol／L、40μmol／L、60μmol／L、80μmol／L）姜黄素作用于Hep-2细胞48h,-周后各组Hep-2细胞集落形成数和细胞增殖抑制率均呈浓度依赖性．其细胞增殖抑制率与对照组相比,分别为36．25％、57．4％、98．48％、100％;③60μmol／L姜黄素作用于Hep-2细胞24、48、72小时后。与对照组相比,端粒酶活性总光密度值（IOD）分别下降23．19％、60．28％和70．15％,各时间组间有显著性差异（P〈0．01）;端粒酶逆转录酶（hTERT）mRNA表达水平IOD值分别下降2．90％、58．69％和88．35％,各时间组间有显著性差异（P〈o．01）。结论姜黄素可抑制体外培养的Hep-2细胞的增殖活性,下调hTERTmR．NA的转录水平并抑制细胞的端粒酶活性,有较好的临床应用前景。