粉防己碱治疗大鼠移植心脏慢性排斥的实验研究

目的应用大鼠异位心脏移植模型研究粉防己碱(TET)对慢性排斥反应(CR)的抑制作用.方法异品系颈部心脏移植(SD大鼠移植于Wistar大鼠)受体鼠每日给予环孢霉素A(CsA)灌胃(1.5 mg/kg)以诱导CR;异品系大鼠分两组:25 mg/kgTET组大鼠同时每日给予25 mg/kgTET灌胃,50 mg/kg TET组同时给予50 rog/kg TET灌胃;Wistar大鼠间的心脏移植(同系对照组)不用任何药物治疗.12周后取移植心脏做组织学检查,以HPIAS-1000图像分析仪测量动脉管壁与血管直径的比值.结果对照组移植心脏可见明显的纤维化,大量单核细胞浸润,动脉硬化明显,动脉管壁与血管直径的平均比值明显高于同系对照(0.64±0.20vs0.23±0.07,P＜0.01)和TET 50mg/kg组(0.64±0.20vs0.33±0.11,P＜0.05),TET 25 mg/kg组的动脉管壁与血管直径的平均比值为0.40±0.13,高于同系对照组(P＜0.05),但与异系对照组及TET 50mg治疗组比较无统计学意义.结论TET具有明显的抗移植物CR作用,其主要作用机制有待进一步研究.     

丹参对肾移植大鼠慢性排斥移植肾病理变化及其TGF-β1表达的影响

目的观察丹参对肾移植大鼠慢性排斥移植肾组织病理变化和转化生长因子-β1（TGF-β1）表达的影响。方法制作SD-W istar大鼠肾移植慢性排斥模型,完整保留受体右肾作为每个移植肾的内对照。选取移植成功受体15只,随机分成治疗组8只与对照组7只。治疗组受体大鼠自术后10 d起每日腹腔注射丹参注射液80 mg/kg至术后12周;对照组给予相同容量的生理盐水腹腔注射。术后12周取受体大鼠移植肾组织行组织病理学检查,并用免疫组化染色法检测移植肾中的TGF-β1。结果移植后12周,两组受体移植肾均存活,体积较正常右肾略小,色泽较苍白,出现不同程度的单个核细胞浸润、肾小球硬化、肾小管萎缩、间质纤维化和小动脉内膜纤维性增厚等慢性排斥组织病理学改变。治疗组大鼠移植肾组织的病理改变Banff评分（6.40±1.04）分,明显低于对照组的（7.87±0.55）分,P〈0.01。TGF-β1主要表达于肾小管和间质细胞。治疗组肾组织的TGF-β1表达强度为6.55±0.95,明显低于对照组的7.74±0.97,P〈0.05。结论丹参能够减轻大鼠肾移植慢性排斥移植肾组织病理学损害,下调移植肾组织TGF-β1的表达。     

黄葵对慢性肾功能不全大鼠保护机制的研究

目的 观察黄葵对慢性肾功能不全大鼠肾功能及肾组织转化生长因子(TGF)-β1和smad7表达的影响.方法 采用腺嘌呤法建立大鼠慢性肾功能不全模型,随机分为正常组、非治疗组和治疗组,治疗组予以黄葵(2 g/kg)每日1次灌胃.治疗4 w后,检测各组大鼠的24 h尿蛋白定量、血尿素氮、血肌酐及肾小球硬化指数,通过免疫组化及蛋白印迹观察肾组织TGF-β1和smad7的表达. 结果 非治疗组大鼠的24 h尿蛋白定量、血尿素氮、血肌酐较正常组明显增加(P＜0.01),而治疗组大鼠24 h尿蛋白定量、血尿素氮、血肌酐较非治疗组减少(P＜0.05).非治疗组大鼠肾组织TGF-β1、smad7表达较正常组明显增加(P＜0.01),治疗组肾组织TGF-β1、smad7表达较非治疗组减弱(P＜0.05).结论 黄葵胶囊可降低慢性肾功能不全大鼠24 h尿蛋白、血尿素氮、肌酐水平,抑制肾组织TGF-β1和smad7表达.黄葵胶囊对慢性肾功能不全的保护机制可能与降低肾脏TGF-β1和smad7表达有关.     

α-生育酚对慢性胰腺炎大鼠胰腺纤维化的影响

目的 观察抗氧化剂α-生育酚对慢性胰腺炎(CP)大鼠胰腺纤维化的作用,探讨其机制.方法 雄性Wistar大鼠按完全随机法分为对照组、ANP组、α-生育酚组.采用尾静脉单次注射8 mg/kg体重二丁基二氯化锡( dibutyltindich loride,DBTC)造模.造模24h后,α-生育酚组大鼠给予800 mg/kg体重的α-生育酚灌胃,每日1次,持续4周.ANP组和对照组给予0.6 ml色拉油灌胃.4周后处死大鼠,取胰腺组织行病理评分及胶原染色,检测胰腺组织丙二醛( MDA)和羟脯氨酸水平,实时定量PCR法检测胰腺组织TGF-β1 mRNA表达.结果 灌胃4周后,α-生育酚组大鼠胰腺组织炎症、纤维沉积、异常结构等损伤均较ANP组明显减轻;胰腺组织MDA和羟脯氨酸水平较ANP组显著降低[(0.40±0.20)nmol/100mg蛋白比(1.07±0.41) nmol/100mg蛋白;(402.49±27.62) μg/g蛋白比(664.92±29.04) μg/g蛋白,P值均＜0.05];胰腺TGF-β1 mRNA表达较ANP组显著降低(2.24±0.89比3.35±0.66,P＜0.05).结论α-生育酚通过降低CP大鼠的体内氧化应激水平,降低TGF-β1 mRNA表达,从而减轻胰腺组织的炎症反应和纤维化程度.     

大鼠肾移植急性排斥模型中移植肾水通道蛋白-2 mRNA表达的变化

目的 研究水通道蛋白-2(AQP2)mRNA在大鼠肾移植急性排斥模型中移植肾表达的变化及意义.方法 正常大鼠肾脏为正常对照组;Wistar大鼠作为供、受者建立同系基因对照组;SD大鼠为供者、Wistar大鼠为受者建立同种异体移植急性排斥组;SD大鼠为供者、Wistar大鼠为受者,术后给予免疫抑制剂环孢素(CsA)建立同种异体移植免疫抑制组;均为雄性大鼠.RT-PCR半定量检测移植肾AQP2 mRNA在各组中表达的变化.结果 同种异体移植急性排斥组移植肾AQP2 mRNA表达下调,与正常对照组比较有统计学差异(P＜0.05),与同系基因对照组和同种异体移植免疫抑制组比较有统计学差异(P＜0.05).同系基因对照组和同种异体移植免疫抑制组中移植肾AQP2 mRNA表达的变化与正常对照组比较无统计学差异(P＞0.05).结论 AQP2 mRNA的表达在急性排斥时表达下调,可以减少对水的重吸收,同时可以减少集合系统能量消耗,有利于移植肾功能的恢复.     

雷帕霉素对大鼠移植心脏血管平滑肌细胞表型及内膜增生的影响

目的 探讨雷帕霉素对大鼠移植心脏血管平滑肌细胞表型及内膜增生的影响.方法 建立大鼠腹腔内心脏移植模型.实验分为4组,每组8只,正常心脏组:取未经任何处理的Wistar大鼠心脏作为空白对照;同系移植组:供体、受体均为Wistar大鼠,以标准鼠食喂养.异系移植取Wistar大鼠作供体,SD大鼠作受体,分为以下两组,环孢霉素组:术后给予环孢霉素A 10 mg/(kg·d),皮下注射;雷帕霉素组:术后用雷帕霉素1.25 mg/(kg·d)灌胃.移植60天后取移植心脏进行电镜观察、形态学观察和用免疫组织化学法分析移植心脏冠状血管平滑肌激动蛋白α的表达情况.结果 正常心脏组和同系移植组移植心脏未见明显冠状血管狭窄.环孢霉素组管腔狭窄程度最明显,雷帕霉素组血管狭窄程度最轻.正常心脏组和同系移植组血管内膜、心肌细胞及心肌间质均未见血管平滑肌激动蛋白α表达.心脏移植60天后,环孢霉素组移植心脏血管内膜大量血管平滑肌激动蛋白α表达,心肌细胞亦有血管平滑肌激动蛋白α表达.雷帕霉素组移植心脏血管内膜血管平滑肌激动蛋白α表达较少.很少有血管平滑肌激动蛋白α表达于心肌间质.各组之间移植心脏血管内膜组织中血管平滑肌激动蛋白α表达差异有显著性.正常心脏组及同系移植组电镜下血管平滑肌细胞呈收缩表型,环孢霉素组可见血管平滑肌细胞呈合成表型,雷帕霉素组见大部分血管平滑肌细胞呈收缩表型.结论 雷帕霉素可以抑制大鼠移植心脏血管病变过程中血管平滑肌细胞表型的变化,减轻新生内膜的增生程度.     

CXCR3阻断剂Genistein对大鼠胰腺移植后排斥反应的影响

目的 探讨Genistein对大鼠移植胰腺急性排斥反应的影响以及作用机制.方法 以Wistar和SD大鼠为供体,SD大鼠为受体,建立胰腺移植模型.分成同种系移植组、异种系移植组和Genistein治疗组(在异种系移植后每天腹腔注射Genistein 10 mg/kg体重,共7 d),每组lO只.术后7 d切除移植物行病理学观察及CXCR3免疫组化染色,抽血检测血清IFN-γ、IL-2浓度.结果 同种系移植组移植物无急性排斥反应,无CXCR3表达.血清IFN-γ、IL-2浓度分别为(2.76±0.66)pg/ml和(11.83±1.86)pg/ml;异种系移植组的移植胰腺发生强烈的镜下排斥反应,CXCR3强阳性表达,血清IFN-γ、IL-2浓度分别为(32.64±2.52)PS/ml和(29.59±1.71)PS/ml,较同种系移植组显著升高(P<0.05);Genistein治疗组的移植胰腺排斥反应减轻,CXCR3弱阳性表达,血清IFN-γ、IL-2浓度分别为(15.94±1.95)Pg/ml和(22.62±1.76)ps/ml,较异种系移植组显著降低(P<0.05),但高于同种系移植组(P<0.05).结论 Genistein通过阻断CXCR3的表达,可有效减轻胰腺移植后急性排斥反应.     

漏芦对慢性肾功能不全大鼠保护机制的研究

目的 观察漏芦对慢性肾功能不全大鼠肾功能及肾组织TGF-β1和CTGF表达的影响.方法 采用改良肾脏5/6切除术建立大鼠慢性肾功能不全模型,随机分为正常对照组(C组),非治疗组(NT组)和漏芦治疗组(RR组).RR组每天予以漏芦(15 g/kg)灌胃.治疗4 w后,检测各组大鼠的24 h尿蛋白定量、血尿素氮、血肌酐及肾硬化指数,通过免疫组化及蛋白印迹观察肾组织TGF-β1和CTGF的表达.结果 NT组大鼠的24 h尿蛋白定量、血尿素氮、血肌酐及肾脏硬化指数较C组明显增加(P＜0.01),而RR组大鼠24 h尿蛋白定量、血尿素氮、血肌酐及肾脏硬化指数较NT组减少(P＜0.05).NT组大鼠肾组织TGF-β1、CTGF表达较C组明显增加(P＜0.01),RR组肾组织TGF-β1、CTGF表达较NT组减弱(P＜0.05).结论 漏芦可降低慢性肾功能不全大鼠24 h尿蛋白、血尿素氮、肌酐水平,减轻肾组织硬化,抑制肾组织TGF-β1和CTGF表达.漏芦对慢性肾功能不全的保护机制可能与降低肾脏TGF-β1和CTGF表达有关.     

抗纤灵对慢性肾衰竭小鼠心脏TGF-β_1/Smad通路的影响

目的观察抗纤灵对5/6肾切除小鼠诱导的慢性肾衰竭心脏转化生长因子-β1(TGF-β_1)、Smad3、Smad7 mRNA表达的影响,从心脏TGF-β_1/Smad信号通路的角度探讨抗纤灵治疗慢性肾衰竭心脏病变的作用机制。方法按Platt法建立慢性肾衰竭小鼠模型,造模成功后,随机将手术组小鼠分为模型组、缬沙坦组、抗纤灵组,每组9只。抗纤灵组予抗纤灵方煎剂0.5mL灌胃,药物浓度为20g/kg,每日1次;缬沙坦组予缬沙坦0.5mL灌胃,药物浓度为20mg/kg,每日1次;模型组和假手术组均予等量蒸馏水灌胃,连续灌胃22周。22周后计算各组小鼠心脏胶原面积,用real-time PCR法检测TGF-β_1、Smad3、Smad7 mRNA的表达。结果与假手术组比较,模型组的心脏胶原面积、TGF-β_1及Smad3 mRNA显著增高(P<0.01),Smad7 mRNA显著降低(P<0.01)。与模型组比较,抗纤灵组的Smad3 mRNA有改善(P<0.05),心脏胶原面积、TGF-β_1mRNA、Smad7 mRNA有显著改善(P<0.01);缬沙坦组的心脏胶原面积、TGF-β_1 mRNA、Smad7 mRNA明显改善(P<0.01),Smad3 mRNA有改善(P<0.05)。抗纤灵组与缬沙坦组组间比较,在改善心脏胶原面积、降低TGF-β_1 mRNA、Smad3 mRNA的表达及升高Smad7 mRNA的表达方面差异无统计学意义。结论抗纤灵能通过调节TGF-β_1/Smad信号通路改善慢性肾衰竭引起的心脏病变。     

阿托伐他汀延缓肾脏衰老机制的探讨

目的 我们的前期研究证明长期应用阿托伐他汀可以显著改善老年大鼠肾脏衰老的病理改变,本研究进一步探讨长期应用不同剂量的阿托伐他汀减轻老年大鼠肾脏衰老病理表现的机制.方法 正常20月龄Wistar雌性大鼠分为3组(每组n=9):大剂量阿托伐他汀10mg/(kg·d)灌胃;小剂量阿托伐他汀1mg/(kg·d)灌胃;等容积生理盐水灌胃,3组均连续灌胃4个月后处死大鼠(24月龄),同时以3月龄大鼠(n=9)为对照.RT-PCR方法检测大鼠肾组织内基质金属蛋白酶及其抑制剂(MMPs/TIMPs)、转化生长因子(TGF-β1)及过氧化物酶体增殖物活化型受体(PPARs)三个亚型的表达.Western印迹法检测肾组织内TIMP-1、MMP-9、TGF-β1、PPARs三个亚型的蛋白质表达.结果 老年大鼠(24月龄)较青年大鼠(3月龄)肾组织内MMP-9和TGF-β1的表达显著升高(分别为P＜0.05和P＜ 0.01),TIMPs和PPARs无显著变化.服用阿托伐他汀后显著降低MMP-9和TGF-β1的表达,升高TIMP-1、PPARα、PPARβ和PPARγ(分别为P＜ 0.01,P＜ 0.01和P＜0.05)的表达.结论 老年大鼠肾组织内MMPs/TIMPs显著失衡,TGF-β1显著高表达,老年大鼠长期应用阿托伐他汀可能通过降低MMP-9表达和增高TIMP-1表达而纠正MMPs/TIMPs的失衡状态,同时显著减低TGF-β1的表达而起到明显改善老年大鼠肾脏衰老的作用.该作用是否通过阿托伐他汀对PPARs三个亚型的激活而产生,尚需进一步的实验研究.     

苦参碱抗大鼠胰腺纤维化作用及机制研究

目的 探讨苦参碱对胰腺纤维化的干预作用,为其临床应用提供实验依据.方法 48只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组和治疗组,每组16只.以腹腔注射DDC(750 mg/kg体重)每周2次,共6周建立胰腺纤维化动物模型,治疗组于DDC注射后2周起每日腹腔注射苦参碱(100 mg/kg体重),6周后处死动物.采用放射免疫法检测血清透明质酸.胰腺常规病理检查、评分,Masson染色判断胶原纤维量.免疫组化和RT-PCR法检测胰腺组织生长因子β1(TGF-β1)及Smad3、Smad7的蛋白和mRNA表达.结果 治疗组血清透明质酸浓度、病理积分及胶原纤维的表达量分别为(105.85 ± 25.69)ng/ml、3.16 ± 1.15及(19.16 ± 4.27)%,TGF-β1和Smad3蛋白表达分别为(23.16 ± 7.68)%和(18.65 ± 9.82)%,TGF-β1 mRNA和Smad3 mRNA表达分别为0.33 ± 0.10和0.23 ± 0.03,均较模型组明显降低(P ＜ 0.01).而Smad7的表达与模型组无显著差异.结论 大鼠腹腔注射DDC可建立胰腺纤维化动物模型.苦参碱具有显著的抗胰腺纤维化的作用,其机制可能与抑制TGF-β1的产生、抑制TGF-β/Smads信号转导通路活性有关.     

贝那普利下调TGF-β1及Bax表达对糖尿病大鼠心肌的保护作用

目的 探讨贝那普利(BZ)对糖尿病(DM)大鼠心肌转化生长因子β1(TGF-β1)和Bax的表达及心肌肥厚指标的影响.方法 SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备DM模型.实验分为正常对照组(CON)、DM组和BZ治疗组(BZ).治疗组每日灌胃给予贝那普利(10 mg·kg-1·d-1).8 w后测定心脏质量指数(HMI)、左心室质量指数(LVMI),并取左心室心肌免疫组化法检测TGF-β1和 Bax在心肌组织中的表达,透射电镜观察心肌组织超微结构变化.结果 与CON组相比,DM组大鼠HMI、LVMI明显升高;心肌TGF-β1和 Bax蛋白表达显著增强(P＜0.05,P＜0.01);电镜发现DM心肌细胞肿胀、肌丝稀疏,线粒体变性肿胀,间质胶原增生及微血管基底膜增厚.与DM组相比,BZ干预后,HMI、LVMI明显降低(P＜0.01);心肌TGF-β1和 Bax蛋白表达减弱(P＜0.01);心肌超微结构改变减轻.结论 TGF-β1 可能通过刺激促凋亡因子Bax表达诱导心肌细胞凋亡,促进DM心肌肥厚.BZ能在一定程度上抑制TGF-β1和Bax的表达从而延缓DM心肌病理进程.     

霉酚酸酯对IgA肾病大鼠肾组织中TGF-β1及Smad2/3表达的影响

目的 观察霉酚酸酯(MMF)对IgA肾病(IgAN)大鼠肾组织中转化生长因子-β1(TGF-β1),Smad2/3表达的影响,探讨MMF治疗IgAN的可能作用机制.方法 将24只雄性Wistar大鼠随机分为模型组、MMF组、对照组各8只,前两组均采用灌服牛血清白蛋白(BSA)和尾静脉注射脂多糖(LPS)的方法建立IgAN模型,其后MMF组予MMF 10 mg/(kg·d)每日灌胃1次,对照组和模型组予等量蒸馏水灌胃,持续至12周末.三组均每4周测定一次尿红细胞计数、24 h尿蛋白定量,制模成功后检测血生化指标;第12周末观察肾脏组织学改变和免疫复合物沉积情况,免疫组织化学方法检测肾组织中TGF-β1、Smad2/3的表达.结果 第6～8周末,模型组与MMF组尿红细胞计数及24 h尿蛋白定量均明显升高,与对照组相比差异有显著性(P均＜0.05);第10 ～ 12周末,MMF组尿红细胞计数及24 h尿蛋白定量均较模型组明显减少,差异有显著性(P均＜0.05);三组血生化指标无统计学差异(P均＞0.05).与对照组相比,模型组肾小球系膜细胞增生、系膜基质增多、伴弥漫性IgA沉积,TGF-β1及Smad2/3蛋白表达均明显增高(P均＜0.05);MMF组上述病理变化均明显轻于模型组、TGF-β1及Smad2/3蛋白表达均明显低于模型组(P均＜0.05).结论MMF治疗IgAN的病理机制可能是通过下调Smad2/3、TGF-β1表达发挥肾脏保护作用.     

骨髓间充质干细胞对肺气肿大鼠转化生长因子β1和肿瘤坏死因子α表达的影响

目的 通过研究骨髓间充质干细胞(BMSCs)对肺气肿大鼠肺组织和血清中转化生长因子β1(TGF-β1)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的影响,探讨BMSCs移植对肺气肿大鼠气道炎症和重塑的影响.方法 健康雄性SD大鼠36只,随机分为对照组、单纯肺气肿组和BMSCs移植组.后两组参照许三林慢性烟雾暴露装置建立肺气肿大鼠模型,慢性烟雾暴露6个月后,给予BMSCs移植组大鼠尾静脉注射BMSCs,单纯肺气肿组大鼠尾静脉注射等量的PBS缓冲液,观察BMSCs移植后各组大鼠肺组织病理学变化,并定量测定肺组织平均内衬间隔(MLI)、单位面积平均肺泡数(MAN)和管壁总面积(WAt)/管壁内周长(Pi);采用ELISA方法测定肺组织匀浆和血清TGF-β1和TNF-α的水平,免疫组织化学半定量法测定气道上皮细胞TGF-β1的表达水平.结果 ①镜下形态学改变:单纯肺气肿组和BMSCs移植组都存在不同程度的肺气肿病理改变,后者肺气肿严重程度较前者为轻;②单纯肺气肿组MLI(177±22.14) μm和WAt/Pi(193.05±53.91) μm、肺组织及血清TNF-α[(14.47±5.85)及(92.07±23.73) ng/L]、TGF-β1[(66.77±9.91)和(72.92±4.96)μg/L]和气道上皮细胞TGF-β1阳性颗粒的平均光密度值(6.44±2.40)×10-2明显高于对照组[(95±44.28)μm和(78.39±26.51) μm、(5.17±2.57)和(53.49±15.47) μg/L、(49.02±9.91)和(59.36±6.89) μg/L和(3.83±1.81)×10-2,P值均＜0.05],MAN(92.73±28.93)/mm2明显低于对照组[(190.84±57.49)/mm2,P＜0.05)],差异均有统计学意义;BMSCs移植组MLI(131±37.55) μm和WAt/Pi (121.62±34.94) μm、肺组织及血清TNF-α[(9.60±5.06)和(70.92±15.16)] ng/L、TGF-β1[(57.44±4.78)和(66.43±6.70) μg/L]、气道上皮细胞TGF-β1阳性颗粒的平均光密度值(4.28±1.23)×10-2均明显高于对照组(P＜0.05),MAN (146.73±49.12)]/mm2明显低于对照组(P＜0.05),差异均有统计学意义;而BMSCs移植组MLI、WAt/Pi、TNF-α及TGF-β1水平均明显低于单纯肺气肿组(P值均＜0.05),MAN明显高于单纯肺气肿组(P＜0.05),3组比较差异均有统计学意义(F值为3.845～27.506,P＜0.05或P＜0.01);③各组间大鼠TGF-β1与TNF-α水平(r=0.556,P=0.001)及WAt(r =0.702,P＜0.01)均呈正相关;TNF-α水平与MLI(r =0.578,P=0.001)及WAt(r=0.440,P=0.015)均呈正相关,与MAN(r=-0.439,P=0.015)呈负相关;WAt与MLI(r=0.398,P=0.029)呈正相关,与MAN(r=-0.475,P=0.008)呈负相关.结论 BMSCs移植可降低肺气肿大鼠肺组织和血清TGF-β1和TNF-α的表达水平,减轻气道炎症和气道重塑,进而改善其肺气肿严重程度.     

丝胶对糖尿病大鼠肾脏转化生长因子-β_1表达的影响

目的观察丝胶对糖尿病大鼠肾脏转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法 48只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组、丝胶治疗组和阳性对照组,每组12只。链脲佐菌素腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型,丝胶治疗组大鼠给予丝胶(2.4 g/kg)灌胃、阳性对照组大鼠给予二甲双胍(55.33 mg/kg)灌胃。分别检测各组大鼠的血肌酐和尿素氮,SP免疫组织化学染色法观察大鼠肾脏TGF-β1的表达。结果糖尿病模型组大鼠的血尿素氮和肌酐明显高于正常对照组大鼠(P<0.01),丝胶治疗组、阳性对照组大鼠的血尿素氮和肌酐明显低于糖尿病模型组大鼠(P<0.01,P<0.05)。TGF-β1蛋白免疫阳性产物呈棕黄色细腻颗粒状,位于肾小囊壁层上皮细胞、足细胞和球内系膜细胞的胞浆。糖尿病模型组大鼠肾脏TGF-β1蛋白的表达明显高于正常对照组大鼠(P<0.01);丝胶治疗组、阳性对照组大鼠肾脏TGF-β1蛋白的表达明显低于糖尿病模型组大鼠(P<0.01)。结论丝胶可通过下调糖尿病大鼠肾脏TGF-β1的表达减轻肾脏肥大和细胞外基质积聚,对糖尿病时肾脏损伤具有一定的保护作用。     

雷公藤甲素对2型糖尿病大鼠肾组织足细胞Nephrin、Podocin蛋白表达的影响及机制

目的 观察雷公藤甲素对2型糖尿病(T2DM)大鼠肾组织足细胞Nephrin、Podocin蛋白表达的影响及其机制探讨.方法 SPF级雄性8周龄Wistar大鼠50只,体重(200±20)g,按随机数字表法分为2组:对照组10只、模型组40只.模型组高脂高糖喂养8周联合小剂量链脲佐菌素(STZ)30mg/kg建立T2DM模型鼠,正常组大鼠喂养常规饲料.将造模成功的T2DM大鼠(28只)随机分成2组:糖尿病组(14只)和雷公藤甲素治疗组(14只),雷公藤甲素治疗8周后,检测大鼠生化指标、肾重/体重和尿白蛋白.利用光镜、电镜观察肾脏病理改变.采用实时定量PCR、免疫组化及Western blot法检测肾组织Nephrin及Podocin蛋白、骨桥蛋白、转化生长因子-β1(TGF-β1)及单核/巨噬细胞表面特异性标志抗原(ED-1)的mRNA和蛋白表达分布.采用单因素方差分析法进行统计学分析.结果 糖尿病大鼠尿白蛋白明显高于对照组(F=181.51,P＜0.01),治疗组尿白蛋白明显低于DM组(F=181.51,P＜0.01).与对照组比较,糖尿病大鼠肾组织Nephrin(F=36.82,P＜0.05)和Podocin(F=32.57,P＜0.05)蛋白表达下调,Nephrin(F=88.45,P＜0.01)、Podocin(F=55.43,P＜0.01)mRNA表达下调;雷公藤甲素组干预8周后Nephrin[(1.82±0.06)和(1.63±0.06),P＜0.05]和Podocin[(1.80±0.06)和(1.60±0.06),P＜0.05]蛋白质表达上调,肾脏组织Nephrin[(0.73±0.12)和(0.19±0.08),P＜0.01]和Podocin[(0.60±0.12)和(0.26±0.07),P＜0.01]mRNA表达上调.与对照组比较,T2DM大鼠肾组织骨桥蛋白(F=40.06,P＜0.05)和TGF-β1的(F=28.84,P＜0.05)蛋白质表达上调,肾组织骨桥蛋白(F=177.46,P＜0.01)和TGF-β1(F=161.27,P＜0.01)mRNA表达上调,雷公藤甲素治疗后肾组织骨桥蛋白[(1.27±0.03)和(1.39±0.05),P＜0.05]和TGF-β1[(1.23±0.03)和(1.44±0.02),P＜0.05]的蛋白表达下调,肾组织骨桥蛋白[(2.05±0.16)和(3.26±0.26),P＜0.01]和TGF-β1[(4.0±0.70)和(6.5±0.71),P＜0.01]mRNA表达下调.结论 雷公藤甲素对T2DM大鼠足细胞有保护作用,其机制可能与其?     

阿托伐他汀对系膜增殖性肾炎大鼠平滑肌肌动蛋白和转化生长因子β1表达的影响

目的观察阿托伐他汀对系膜增殖性肾炎大鼠24 h尿蛋白、肾组织平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响,探讨其肾脏保护作用的机制.方法采用抗胸腺细胞血清诱发的系膜增殖性肾炎大鼠模型,将SD大鼠随机分为正常对照组、肾炎模型组、小剂量阿托伐他汀治疗组(8 mg/kg·d)和大剂量阿托伐他汀治疗组(16 mg/kg·d, n=8),每组块大鼠治疗12 d后,检测各组大鼠血总胆固醇、甘油三酯、血肌酐(Scr)和24 h尿蛋白, 以及肾组织α-SMA和TGF-β1的表达.结果阿托伐他治疗组大鼠24 h尿蛋白、肾小球α-SMA及肾组织TGF-β1mRNA的表达明显下降,肾组织病理改变明显改善,与模型组相比有显著性差异(P<0.05),且呈剂量依赖关系.其中肾炎模型组尿蛋白(30.34±0.62)mg/d,阿托伐他汀小剂量治疗组(21.17±0.79)mg/d,大剂量治疗组(9.77±0.54)mg/d.同时,各组血脂水平无明显差异(P>0.05).结论阿托伐他汀可显著改善系膜增殖性肾炎大鼠肾脏病变,抑制系膜细胞的增生,减少系膜基质的蓄积,其机制可能与抑制TGF-β1的表达有关.     

培哚普利对肾性高血压大鼠心肌纤维化及转化生长因子β1的影响

目的探讨培哚普利对肾性高血压大鼠心肌纤维化作用及对转化生长因子-β1表达影响。方法建立双肾一夹肾血管性高血压(2K1C)大鼠模型,将24只实验大鼠随机分为假手术组、高血压组、培哚普利组,术后4周末开始灌胃培哚普利片2mg/(kg.d),共8周。测量大鼠尾动脉收缩压、心脏重量/体重、心肌胶原容积分数(CVF)、血管周围胶原容积分数(PVCA)及转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达。结果和假手术组相比,高血压组的收缩压、心脏重量/体重、CVF及PVCA显著增加(P<0.01),TGF-β1表达上调(P<0.01)。和高血压组相比,培哚普利组心脏重量/体重、CVF、PVCA及TGF-β1的表达降低(P<0.05)。结论培哚普利可以减轻肾性高血压大鼠心肌纤维化,其机制可能与下调TGF-β1有关。     

转化生长因子-β1对心脏移植排斥反应中心肌细胞凋亡的影响

目的:探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)对心脏移植排斥反应中心肌细胞凋亡的影响。方法:采用大鼠颈部心脏移植模型,随机分为3组:对照组、移植组、TGF-β1组,分别于术后第1、3、5、7天各取4只移植心脏,原位末端标记(TUNEL)法染色检测心肌细胞凋亡,以心肌细胞凋亡阳性细胞数占总心肌细胞数的百分比作为心肌细胞凋亡指数(AI)。用免疫组化方法观察Bcl-2、Bax的表达情况。结果:移植组心肌细胞于术后第1天即出现凋亡,第3天明显增加,第7天达高峰。TGF-β1组各时间点心肌细胞AI明显小于对应的移植组(均P<0.01)。与移植组相比,TGF-β1组心肌细胞Bax表达明显降低(P<0.01)。结论:TGF-β1对心脏移植排斥反应中心肌细胞凋亡有显著抑制作用,可能与其下调Bax表达,提高Bcl-2/Bax比值有关。     

姜黄素对大鼠慢性酒精性胰腺炎的作用和机制研究

目的 观察姜黄素对大鼠实验性慢性胰腺炎的干预作用.方法 18只1月龄雄性SD大鼠按数字表法随机分为对照组、ANP组和姜黄素组,每组6只.以25％乙醇代水饮12周后每周1次腹腔注射脂多糖(2 mg/kg体重)、共4次的方法建立慢性胰腺炎模型.姜黄素组制模同时饲以姜黄素.17周后处死动物.测血糖浓度,常规胰腺病理检查及胶原纤维染色,检测胰腺组织淀粉酶和脂肪酶水平.采用RT-PCR法检测胰腺组织转化生长因子β1(TGF-β1) mRNA表达.结果 对照组、ANP组和姜黄素组胰腺病理评分分别为1.17±0.41、7.33±2.58和3.50±1.05,姜黄素组较ANP组降低(P＜0.01),但仍高于对照组(P＜0.05).各组血糖值无统计学差异.姜黄素组胰腺组织匀浆淀粉酶和脂肪酶含量分别为(7348±102)、(14135±1272)U/g,均高于ANP组的(5428±547)和(9123±1250) U/g(P值均＜0.05).对照组、ANP组和姜黄素组胰腺TGF-β1 mRNA表达量分别为0.618±0.019、0.818±0.012、0.745±0.088,ANP组显著高于对照组和姜黄素组(P值均＜0.01).结论 在长期摄入乙醇的基础上反复腹腔注射脂多糖可诱导慢性胰腺炎;姜黄素可能通过抑制TGF-β1表达而产生抗胰腺纤维化的作用.