舌鳞状细胞癌组织中CD44和CD133的表达及临床意义

目的探讨舌鳞状细胞癌组织中肿瘤干细胞标志物CD44和CD133的表达与临床病理特征及预后的关系。方法应用免疫组化法观察67例舌鳞状细胞癌组织中CD44和CD133的表达状况。结果 CD44和CD133在舌鳞状细胞癌患者中的阳性表达率分别为58.21%(39/67)和65.67%(44/67);CD44,CD133的表达均与患者年龄、性别无关(P>0.05),但与组织分化程度、临床分期及淋巴结转移相关(P<0.05);单因素分析显示:CD44的阳性表达和CD133的阳性表达均与患者5年生存率存在相关性(P<0.05);Cox多因素分析显示:组织分化程度、CD44的阳性表达及CD133的阳性表达是患者生存的独立预后影响因素(P<0.05)。结论CD44,CD133在舌鳞状细胞癌中的表达与患者的恶性生物学行为有关,可作为预后评价的参考标准。     

CD133在食管鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的:研究食管鳞状细胞癌组织中CD133的表达与肿瘤细胞增殖及侵袭转移的关系。方法:取40例食管鳞状细胞癌患者的组织石蜡标本,用免疫组化方法检测CD133的表达,同时检测Ki67的表达,分析探讨CD133表达与食管鳞状细胞癌临床病理因素的相关性。结果:肿瘤组织中CD133及Ki67的表达率均较癌旁组织高,且CD133的表达与肿瘤的侵润深度、淋巴结转移情况及分化程度呈正相关,同时CD133的表达与患者术后远期生存率具有相关性。但CD133与Ki67的表达情况无显著相关性。结论:食管鳞状细胞癌组织中,CD133的表达与肿瘤细胞的增殖、侵袭及转移具有相关性,可以成为评价食管癌鳞状细胞癌肿瘤生物学特性及判断预后的的指标。     

CD4+、CD8+T淋巴细胞表达对术后辅助放疗的非小细胞肺癌患者的预后意义

目的探讨CD4+、CD8+T淋巴细胞在非小细胞肺癌（NSCLC）术后行辅助放疗患者中的表达情况及其对预后的预测价值。方法选择46例接受辅助放疗的Ⅱ~Ⅲ期NSCLC患者,收集患者的临床资料,应用免疫组化法,检测患者肿瘤组织、间质组织中CD4+、CD8+T淋巴细胞的表达情况。通过单因素与多因素分析,评估T淋巴细胞表达对NSCLC患者3年生存率的影响。结果NSCLC患者的年龄、组织学分化程度以及淋巴结分期与总生存时间相关（均P＜0.05）;肿瘤及间质组织中CD4及CD8表达与患者年龄、性别、病理类型、组织学分化程度及淋巴结分期等临床病理因素均无关（均P＞0.05）;肿瘤组织及间质组织高表达CD4者3年总生存率为52.94%、50.00%,间质组织高表达CD8者3年总生存率为61.11%,均明显高于低表达者（均P＜0.05）;多因素分析显示,肿瘤组织CD4高表达者的HR为0.048（P＜0.01）,是NSCLC患者3年总生存率的独立预测因子。结论高表达CD4+T淋巴细胞可作为NSCLC术后患者是否选择辅助放疗的免疫标志物,肿瘤高表达CD4可以获得更好的预后。     

CEACAM5和CEACAM6在结肠癌中的表达及临床意义

目的 分析癌胚抗原相关细胞粘附分子5(CEACAM5)和癌胚抗原相关细胞粘附分子6(CEACAM6)在结肠癌组织中的表达水平.方法 选取本院2012年2月至2016年5月收治的结肠癌患者106例作为研究对象,所有患者均行结肠癌根治术,术中取患者癌旁>5 cm正常组织及结肠癌组织,检测结肠癌组织及癌旁正常组织中CEACAM5和CEACAM6 mRNA表达水平及蛋白表达水平,分析其表达水平与结肠癌患者临床特征及预后的关系.结果 结肠癌组织中CEACAM5和CEACAM6 mRNA表达水平均显著高于癌旁正常组织(P<0.05);CEACAM5、CEACAM6蛋白在结肠癌组织中阳性表达率均明显高于癌旁正常组织(P<0.05);结肠癌组织中CEACAM5、CEACAM6表达与结肠癌患者肿瘤分期、肿瘤大小、淋巴结转移和浸润深度有关(P<0.05);CEACAM5阴性表达患者无进展生存率和总生存率均显著高于阳性表达患者(P<0.05);CEACAM6阴性表达患者无进展生存率和总生存率均显著高于阳性表达患者(P<0.05);COX分析显示,CEACAM5、CEACAM6表达水平及浸润深度是影响结肠癌患者预后的独立危险因素(P<0.05).结论 CEACAM5和CEACAM6在结肠癌组织中表达上调,影响患者术后3年的生存率,是影响结肠癌患者预后的独立危险因素,检测其表达水平可作为结肠癌患者疾病发生发展和预后的参考指标.     

结肠癌患者肿瘤微环境中T细胞亚群与肿瘤细胞转移的关系

 摘要：目的  探讨结肠癌患者肿瘤微环境中T细胞亚群与肿瘤细胞转移的关系。方法  前瞻性收集该院收治的结肠癌患者89例,所有患者行结肠癌切除术,收集术中肿瘤标本,检测肿瘤组织中CD4+ T细胞、CD8+ T细胞和调节性T细胞。分析CD4+ T细胞、CD8+ T细胞及调节性T细胞与患者临床特征关系。结果  随着TNM分期的增加,CD4+ T细胞和调节性T细胞增加,CD8+ T细胞降低（P <0.05）。高分化、中分化及低分化患者调节性T细胞分别为（6.59±1.87）%、（7.27±1.81）%和（8.12±1.92）%,差异有统计学意义（P <0.05）。合并淋巴结转移患者CD4+ T细胞增高,CD8+ T细胞降低,调节性T细胞升高（P <0.05）。腺癌、黏液癌期未分化癌调节性T细胞分别为（6.82±1.88）%、（7.28±1.82）%和（8.22±1.91）%,差异有统计学意义（P <0.05）。结论  肿瘤微环境中T细胞亚群失衡与肿瘤细胞的转移相关,调节微环境中T细胞水平或可改善患者临床预后。

     

乳腺癌T淋巴细胞癌巢浸润与TopoIIα及预后的相关性分析

目的 探讨I~III期乳腺癌CD4+、CD8+T淋巴细胞癌巢浸润与TopoIIα以及预后的关系. 方法 回顾性收集120例I~III期乳腺癌患者的临床资料及石蜡切片,通过免疫组织化学方法检测乳腺癌原发灶中CD4+和CD8+T淋巴细胞的癌巢浸润,并分析其与TopoIIα及预后的关系.结果 CD8+T淋巴细胞在癌巢的阳性浸润与TopoIIα的阳性表达存在明显相关(P<0.01);Cox单因素分析CD4+T淋巴细胞浸润与5年总生存率(OS)有关(P<0.05).结论 CD8+T淋巴细胞癌巢浸润与TopoIIα的高表达状态相关;乳腺癌原发灶CD4+ T淋巴细胞癌巢浸润与较好的预后相关.     

肿瘤干细胞标志物CD133在非小细胞肺癌中的 表达及临床意义

 【目的】 研究肿瘤干细胞标志物CD133在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中表达的临床意义?【方法】 用免疫组织化学方法检测77例手术切除的NSCLC组织中CD133的表达,分析CD133表达与患者吸烟指数?组织学类型?组织分化程度?淋巴结转移?肿瘤T分期?N分期和患者预后之间的关系?【结果】 77例NSCLC患者到随访结束时死亡率72.73%(56/77),术后生存时间1～84(s=19)月?3年生存率为32.47%(25/77);无淋巴结结转移组NSCLC的中位生存时间和3年生存率高于有淋巴结转移组(P < 0.05)?CD133阳性表达率51.9%(40/77);CD133的表达与淋巴结转移呈正相关(r=0.246,P < 0.05),与患者手术后生存期呈负相关(P < 0.05)?COX多因素分析仅癌肿病理类型和CD133蛋白表达为影响生存率的独立因素? 【结论】 NSCLC的淋巴结转移和病理类型与预后有密切关系;肿瘤干细胞标志物CD133蛋白的表达与NSCLC的淋巴结转移和预后密切相关?     

不同病理类型的左右半结肠癌预后分析

目的 探讨不同病理类型的左、右半结肠癌的预后.方法 将2005年1月至2010年12月东莞市人民医院收治的386例结肠癌患者按照肿瘤病理分型分为A组(低/未分化腺癌+黏液腺癌+印戒细胞癌)152例、B组(高/中分化腺癌)234例;同时按肿瘤部位分为右半结肠癌和左半结肠癌.分析肿瘤不同临床病理分型及部位与患者预后的关系.结果 A组患者肿瘤TNM分期、T分期、N分期及血清癌胚抗原水平均显著高于B组患者(P<0.05);右半结肠癌患者T分期及N分期均显著高于左半结肠癌患者(P<0.05);A组病理类型在右结肠癌中更常见(P<0.05).A组患者5年生存率52.43%低于B组55.77%(P<0.05);右半结肠癌患者的5年生存率53.66%也低于左半结肠癌患者55.24%(P<0.05).在A组患者中,右半结肠癌的5年生存率高于左半结肠癌(52.82% vs 50.71%,P<0.05);而在B组患者中,右半结肠癌与左半结肠癌的5年生存率差异无统计学意义(56.14% vs 54.27%,P>0.05).结论 在低分化腺癌/黏液癌/印戒细胞癌中,右半结肠癌患者的预后好于左半结肠癌;而在高/中分化的腺癌中,右半结肠癌患者的5年生存率较左半结肠癌呈降低趋势.     

乳腺癌T淋巴细胞癌巢浸润与TopoⅡα及预后的相关性分析

目的探讨I~III期乳腺癌CD4~+、CD8~+T淋巴细胞癌巢浸润与各临床病理特征以及预后的关系。方法回顾性收集2008年l月至2010年10月于滨州医学院附属医院手术的l20例I~III期乳腺癌患者的临床资料及石蜡切片,通过免疫组织化学方法检测乳腺癌原发灶中CD4~+和CD8~+T淋巴细胞的癌巢浸润,并分析其与乳腺癌临床病理特征及预后的关系。结果 CD4~+T淋巴细胞的癌巢浸润阳性率在癌栓组为77.78%(21/27),在无癌栓组为46.24%(43/93),差异有统计学意义(P0.01);CD4~+T淋巴细胞的癌巢浸润阳性率在病理分级为I/II级组为46.43%(39/84),在III级组为69.45%(25/36),差异有统计学意义(P0.05);CD8~+T淋巴细胞的癌巢浸润阳性率在Ki-67低表达组为66.07%(37/56),在Ki-67高表达组为87.5%(56/64),差异具有统计学意义(P0.01);乳腺癌组织Topo IIα的阳性表达与淋巴结转移状态(P0.01)、Her-2表达(P0.01)、Ki-67(P0.05)表达有关;CD8~+T淋巴细胞在癌巢的阳性浸润与Topo IIα的阳性表达存在明显相关(P0.01);Kaplan-Meier分析CD4~+T淋巴细胞浸润与5年总生存率(OS)有关(P0.05);Topo IIα表达与5年无病生存率(DFS)有关(P0.05)。结论脉管癌栓的存在以及严重的病理分级更容易导致CD4~+T淋巴细胞癌巢浸润,CD8~+T淋巴细胞癌巢浸润与Ki-67、Topo IIα的高表达状态相关,Topo IIα与淋巴结转移、Her-2及Ki-67的高表达明显相关;乳腺癌原发灶CD4~+T淋巴细胞癌巢浸润与较好的预后相关,而Topo IIα的高表达则与患者较差的预后相关。     

CD133在皮肤鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

目的:分析CD133在皮肤鳞状细胞癌中的表达及其临床意义。方法:回顾性分析2015年1月至2017年1月156例皮肤鳞状细胞癌患者的临床资料,同时取患者正常皮肤组织标本32例作为对照。采用免疫组化法检测CD133的表达水平,比较癌组织和正常组织的CD133表达水平;分析CD133表达水平与患者生存时间的影响因素。结果:皮肤鳞状细胞癌的CD133强阳性表达率明显高于正常皮肤组织;分化程度、肿瘤大小和临床分期与CD133表达水平有关;临床分期Ⅲ～Ⅳ和CD133高表达是皮肤鳞状细胞癌患者生存时间>80个月的独立危险因素(P<0.05)。结论:皮肤鳞状细胞癌组织的CD133表达水平较高,其高表达与组织分化程度、肿瘤大小和临床分期有关,且CD133是患者生存时间的独立危险因素。     

内皮细胞对结肠癌细胞系SW480中CD133~+细胞表达VEGF的影响

目的 从结肠癌细胞系SW480中分离结肠癌干细胞,并检测内皮细胞对这些细胞表达血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的影响.方法 分别利用免疫磁珠分选技术和尤血清培养法富集CD133+细胞,利用MTT法和平板克隆形成实验检测其生物学特性;采用细胞免疫荧光法检测SW480细胞和CD133+细胞中CD133及VEGF的表达;将SW480细胞或磁珠分选CD133+细胞分别在6种培养条件下进行培养:SW480细胞在含血清培养基(serum-supplied medium,SSM)中培养、SW480细胞在尤血清培养基(serum-free medium,SFM)中培养、磁珠分选CD133+细胞在SFM中培养、SW480细胞与内皮细胞在SSM中共培养、SW480细胞与内皮细胞在SFM共培养、磁珠分选CD133+细胞与内皮细胞在SFM共培养,利用免疫组织化学法检测不同培养条件下结肠癌细胞中CD133及VEGF的表达情况.结果 SW480细胞系中存在少量的CD133+细胞,这些细胞能够连续传代并且表现出更强的增殖潜力以及克隆形成能力.经细胞免疫荧光法检测发现SW480细胞高表达VEGF,低表达CD133,而免疫磁珠分选的CD133+细胞所形成的细胞球低表达VEGF,高表达CD133.无血清培养条件下的SW480细胞随着时间的延长CD133表达率逐渐增加,添加内皮细胞诱导后无血清培养的SW480细胞与前者相比CD133阳性率显著增加(P<0.05).经过1周的连续培养后,CD133+细胞表达VEGF的比例没有变化,添加内皮细胞诱导1周后,CD133+细胞表达VEGF的比例显著增加(P相似文献   

Chemoresistance of CD133+ cancer stem cells in laryngeal carcinoma

Background  Mounting evidence suggests that tumors are histologically heterogeneous and are maintained by a small population of tumor cells termed cancer stem cells. CD133 has been identified as a candidate marker of cancer stem cells in laryngeal carcinoma. This study aimed to analyze the chemoresistance of CD133⁺ cancer stem cells.

Methods  The response of Hep-2 cells to different chemotherapeutic agents was investigated and the expression of CD133 was studied. Fluorescence-activated cell sorting analysis was used to identify CD133, and the CD133⁺ subset of cells was separated and analyzed in colony formation assays, cell invasion assays, chemotherapy resistance studies, and analyzed for the expression of the drug resistance gene ABCG2.

Results  About 1%–2% of Hep-2 cells were CD133⁺ cells, and the CD133⁺ proportion was enriched by chemotherapy. CD133⁺ cancer stem cells exhibited higher potential for clonogenicity and invasion, and were more resistant to chemotherapy. This resistance was correlated with higher expression of ABCG2.

Conclusions  This study suggested that CD133⁺ cancer stem cells are more resistant to chemotherapy. The expression of ABCG2 could be partially responsible for this. Targeting this small population of CD133⁺ cancer stem cells could be a strategy to develop more effective treatments for laryngeal carcinoma.

     

外源性Muc1、Survivin和Nanog基因启动子在结肠癌干细胞中的表达活性

目的 探讨结肠癌干细胞中不同基因启动子的活性,寻找可能用于结肠癌干细胞靶向治疗的启动子.方法 应用流式细胞仪分选人结肠癌HCT116细胞系中CD133+ CD44+标记的肿瘤干细胞.采用PCR技术获取Nanog、Muc1和Survivin基因启动子并分别克隆入pGL3-basic质粒.将含有启动子的pGL3-basic质粒和pGL3-control质粒分别与pRL-sv40共转染结肠癌细胞(HCT116、SW620、HT29)、结肠癌干细胞(CD133+ CD44+ HCT116)及人正常肝细胞(QSG7701),通过检测双荧光素酶活性以测定启动子活性.结果 pGL3-basic-Nanog、pGL3-basic-Muc1、pGL3-basic-Survivin经测序鉴定正确.HCT116细胞系中CD133+ CD44+细胞比率约占42.2％.双荧光素酶活性检测显示:在HCT116、SW620、HT29和CD133+ CD44+ HCT116细胞中,Muc1与Survivin均表现出了较强的活性,而在正常细胞QSG7701中活性较低.结论 Muc1、Survivin启动子可能是用于靶向结肠癌干细胞治疗的有效候选启动子.     

Glioblastoma stem cells resistant to temozolomide-induced autophagy

Background Recent studies have demonstrated the existence of a small fraction of cells with features of primitive neural progenitor cells and tumor-initiating function in brain tumors. These cells might represent primary therapeutic target for complete eradication of the tumors. This study aimed to determine the resistant phenotype of glioblastoma stem cells （GSCs） to temozolomide （TMZ） and to explore the possible molecular mechanisms underlying TMZ resistance. Methods Freshly resected glioblastoma specimen was collected and magnetic isolation of GSCs was carried out using the Miltenyi Biotec CD133 Cell Isolation kit. The cytotoxic effect of TMZ on CD133^＋ and CD133^- glioblastoma cells was determined by using the 3-（4,5-dimethylthiazol-2-yl）-2,5-diphenyltetrazolium bromide （MTT） assay. Autophagy-related proteins （Beclin-1, LC3 and Atg5） and cleaved caspase-3 （p17） were analyzed by Western blotting. Immunofluorescent staining was used to detect Atg5, glial fibrillary acidic protein （GFAP） and CD133 expression in glioblastoma cells. Statistical analysis was carried out using SPSS 10.0 software. For all tests, the level of statistical significance was set at P 〈0.05. Results CD133^＋ glioblastoma ceils exhibited neurosphere-like growth in vitro and high expression of CD133 stem cell marker. The growth-inhibiting rate in CD133- glioblastoma cells treated with 5 or 50 pmol/L TMZ was significantly higher than that in CD133^＋ glioblastoma cells （（14.36±3.75）% vs （2.54±1.36）% or （25.95±5.25）% vs （2.72±1.84）%, respectively, P 〈0.05）. Atg5, LC3-11 and Beclin-1 levels were significantly lower in CD133^＋ glioblastoma cells than those in autologous CD133^- cells after TMZ treatment （P 〈0.05）. Caspase-3 was mildly activated only in CD133^- glioblastoma cells after exposure to TMZ （P 〈0.05）. Immunofluorescent staining revealed elevated expression of Atg5 in GFAP^＋ cells following TMZ treatment. Conclusions The GSCs display strong capability of tumor＇s resistance to TMZ. This resistance is probably contributed by the CD133^＋ cells with down-regulation of autophagy-related proteins. Future treatment should target this small population of cancer stem cells in tumors to improve survival of patients.     

大肠癌细胞中八聚体结合转录因子4与人类白细胞分化抗原133的表达及相关性

目的探讨大肠癌细胞中人类白细胞分化抗原133（CD133）与八聚体结合转录因子4（OCT4）的表达情况及其相关性。方法采用磁珠细胞分离技术分选出人结肠癌细胞系的CD133＋细胞和CD133-细胞,检测两种细胞中OCT4的表达。分别改变CD133＋和CD133-细胞中OCT4的表达,观察其对CD133的表达的影响。采用肿瘤球形成实验检验肿瘤细胞干性生物学行为的改变。结果 CD133＋细胞中OCT4呈现高表达,CD133-细胞中OCT4基本无表达。CD133＋细胞对5-氟尿嘧啶（5-FU）高度抵抗,并且更容易在无血清培养基中形成肿瘤球。干扰OCT4的表达可以降低CD133＋细胞中CD133的表达水平,增加对5-FU的敏感性,并且减少肿瘤球形成能力。过表达OCT4增加CD133-细胞CD133的表达水平,降低对5-FU的敏感性,并且减少肿瘤球形成能力。结论 OCT4与CD133在大肠癌细胞中均有表达,OCT4对CD133有直接调控作用。     

小细胞肺癌细胞系H446中肿瘤干细胞的分选与鉴定

 目的 明确能否以表面黏附分子CD133为干细胞标志物,使用免疫磁珠分选（magnetic cell separation,MACS）法分离小细胞肺癌细胞系H446细胞中的肿瘤干细胞。方法 以CD133为特异性分子标志物,使用MACS方法分选H446细胞,比较CD133阳性（CD133+）细胞与CD133阴性（CD133-）细胞在集落形成、自我更新、增殖分化、侵袭性、耐药性和成瘤性方面的不同。结果 CD133+细胞和CD133-细胞在集落形成能力、自我更新能力、增殖能力、分化能力、侵袭能力和耐药性方面基本相同。集落形成和成瘤性实验结果显示：CD133+或CD133-细胞中40%以上的细胞都能够形成含有100个细胞以上的大集落,增殖成为与未分选细胞相同的细胞群,并能在裸鼠身上成瘤。结论 表面黏附分子CD133不能作为分选小细胞肺癌H446细胞系中肿瘤干细胞的分子标志物,分选后的CD133+与CD133-细胞中含有相同的肿瘤干细胞。     

无血清培养CD133+Colo205大肠癌细胞可高表达ALDH1

目的通过观察含生长因子的无血清培养基（serum-free medium, SFM）培养的Colo205细胞,研究其对CD133与ALDH1
表达的影响。方法用含生长因子的无血清培养基对Colo205 细胞进行培养,以含血清培养基（serum-supplimented medium,
SSM）组作为对照,流式细胞术检测两组细胞表面标志物CD133表达的阳性率;流式分选SFM组CD133+细胞和CD133-细胞,倒
置显微镜观察CD133+细胞和CD133-细胞在无血清培养基中的生长特性;利用细胞免疫荧光检测CD133+细胞和CD133-细胞
CD133和ALDH1的表达;分别将CD133+细胞和CD133-细胞在NOD/SCID小鼠皮下进行成瘤实验,采用免疫组织化学方法对
肿瘤组织检测ALDH1表达。结果SFM组CD133+细胞比例明显高于SSM组（P<0.05）;CD133+细胞在SFM中可以形成肿瘤干
细胞球,而CD133-则不能形成;CD133+细胞高表达CD133和ALDH1,且两者共表达,而CD133-细胞则是阴性表达;CD133+细胞
和CD133-细胞成瘤后,CD133+细胞组肿瘤组织ALDH1阳性表达,而CD133-细胞组阴性表达。结论含生长因子的无血清培养
基培养CD133+Colo205大肠癌细胞能够形成肿瘤干细胞球及高表达ALDH1,ALDH1可能是大肠癌干细胞候选的标志物之一。
     

CD133~+A549肺癌细胞的分选及其肿瘤干细胞和间质化相关基因的表达

目的 分离CD133+A549细胞并对其肿瘤干细胞和上皮间质转变(EMT)特性进行初步研究.方法 采用免疫磁珠法分离并鉴定A549细胞,Real-Time PCR法和Western blotting法鉴定分离的细胞.Real-Time PCR法测定CD133+ A549和CD133-A549细胞中肿瘤干细胞标志物(CXCR4、Oct4、CD44、Bmi1、EpCam)和EMT标志物(E-Cadherin和Zeb1)mRNA的表达.分选后的CD133+A549和CD133-A549细胞经不同浓度(0、0.25、0.5、1.0μg/mL)阿霉素处理72 h,采用细胞增殖实验检测细胞的相对存活率.结果 经CD133微小磁珠分离后、成功获得CD133+ A549和CD133-A549细胞,CD133+ A549细胞的CD133表达明显高于CD133-A549细胞.Real-Time PCR检测结果显示,CD133+ A549细胞中Oct4、CD44、Bmi1、EpCam mRNA的相对表达量均显著高于CD133 - A549细胞[(1±0.16)vs(0.66±0.12)、(1±0.07)vs(0.48±0.04)、(1±0.03)vs(0.49±0.06)以及(1±0.14)vs(0.38 ±0.12)(P＜0.05)],但CXCR4 mRNA的相对表达量比较差异无统计学意义[(1±0.13)vs(0.73±0.14),P＞0.05]; CD133+A549细胞中Zeb1 mRNA的相对表达量显著高于CD133- A549细胞[(1 ±0.09)vs(0.39±0.05),P＜0.05],但E-Cadherin mRNA的相对表达量显著低于CD133-A549细胞[(1±0.02)vs(4.98±0.04),P＜0.05].细胞增殖实验结果显示,采用0.5和1.0μg/mL阿霉素处理后,CD133+ A549细胞的相对存活率均显著高于CD133-A549细胞,差异有统计学意义[(85±9.4)％vs(67±13.1)％,P＜0.05;(80±14.9)％vs(56±6.3)％,P＜0.01].结论 采用免疫磁珠分离法可成功分离CD133+A549和CD133-A549细胞;CD133+ A549细胞中有其他肿瘤干细胞标志物的表达,并表现出EMT特性.CD133可能是肺癌肿瘤于细胞和EMT特征的标志物.     

喉癌CD133+肿瘤干细胞与化疗抵抗

目的 筛选喉癌细胞中的CD133+细胞亚群,探讨其肿瘤干细胞特性及化疗抵抗性,并分析其原因。 方法 流式细胞仪检测Hep-2细胞经顺铂,氟尿嘧啶,紫杉醇作用后,CD133表达率的变化。采用流式细胞分选技术分离CD133+,CD133-细胞亚群,观察各亚群对上述药物的反应。采用软琼脂克隆形成实验检测各亚群的克隆形成能力,采用transwell小室体外侵袭实验,检测各亚群细胞的侵袭能力。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和western blot法,检测各亚群细胞中耐药基因ABCG2基因的表达。 结果：Hep-2细胞中CD133表达率为1-2%. 化疗药物作用后CD133+亚群被富集。CD133+细胞克隆形成率为(41.9±3.9%)显著高于CD133-细胞(11.7±1.6%), P<0.01。CDl33+细胞侵袭细胞数为(88±9.7)显著高于CD133-细胞（53±7.2）, P<0.01。CD133+细胞ABCG2的表达水平显著高于CD133-细胞。 结论： CDl33+喉癌细胞具有肿瘤干细胞的生物学特性, CD133+喉癌肿瘤干细胞存在化疗抵抗,ABCG2的高表达是其中的主要原因。针对CD133+细胞的治疗势必会促进对喉癌治疗的进展。     

免疫磁珠法分离纯化人肾癌CD133~+细胞实验研究

目的:本研究通过分析CD133+细胞在肾细胞癌患者肿瘤组织的表达情况,寻找肾癌中CD133+细胞分离纯化方法,探寻CD133+细胞与肾癌发生中的作用。方法:①应用胎盼蓝拒染试验检测细胞活性。②应用免疫磁珠法分离纯化肿瘤组织中CD133+细胞。③应用流式细胞仪检测肾透明细胞癌标本中CD133+细胞表达情况。结果:30例肾透明细胞癌中CD133+比为(13.08±1.39)%,与病理分级、临床分期无关。免疫磁珠法分离纯化CD133+纯度为(75±2.4)%,细胞活性不受影响。结论:免疫磁珠技术纯化肾癌CD133+细胞成熟有效,CD133+细胞可能是肾癌干细胞。