先锋霉素Ⅱ对培养的癌细胞DNA合成的影响

<正> 研究化学物质对癌细胞 DNA 或 RNA 作用形式来探讨癌发生的本质及治疗癌症的途径是十分有意义的。细胞的生物合成,如DNA 分子合成过程,可用放射性同位素标记的前体分子以放射自显影或液体闪烁计数技术示踪观察。胸腺嘧啶核苷(TdR)是DNA 分子的特殊前体,测定氘标记的胸腺嘧啶核苷(~3H—TdR)掺入到 DNA 分子中的放射性,能客观、灵敏地反映 DNA 合成的情况。本文通过测定掺入到小鼠腹水型肉瘤 S_(180)细胞的~3H—TdR 放射性,初步探讨先锋霉素Ⅱ对培养的癌细胞 DNA 合成的影响。     

~3H—TdR掺入法研究细胞内DNA代谢的动态过程

胸腺嘧啶核苷(Thymidine以下简称TdR)是DNA合成所需要的特异前身物,细胞的增殖速率与TdR掺入DNA的速率基本一致。~3H标记的化合物~3H—TdR可以取代正常底物TdR被细胞无选择地吸收,并掺入细胞的代谢产物DNA中。利用这一原理,本文取20±2g雄性昆明     

用氚化胸腺嘧啶核苷滤膜法测定淋巴细胞转化的研究

氚化胸腺嘧啶核苷(~3H—TdR)掺入法测定淋巴细胞转化是常用的试验方法。体外培养淋巴细胞经非特异性刺激原植物血凝素(PHA)作用,T淋巴细胞能转化为淋巴母细胞,这种转化细胞的蛋白质、RNA和DNA合成显著增加。因此,能大量摄取胸腺嘧啶核苷以复制DNA,所以测定血液中淋巴     

用~3H-TdR掺入法研究小鼠体外培养骨髓细胞DNA代谢过程

研究细胞内DNA、RNA和蛋白质的代谢过程,可利用~3H标记的化合物:~3H-TdR,~3H-Urd和~3H-leu作示踪物,它们与正常的胸腺嘧啶核苷(TdR),尿嘧啶核苷(Urd)和亮氨酸(Leu)有着相同的生物化学性质,在细胞内DNA、RNA和蛋白质合成的过程中可以无选择地被吸收,并能取代正常的前身物而掺入细胞的代谢产物。由于细胞中新合成的DNA、RNA和蛋白质被~3H标记,因此可以根据细胞的放射强度测出标记化合物的掺入率。细胞中DNA、RNA和蛋白质的合成速率与这些被标记的特异前身物的掺入率相一致。用这种方法来研究活细胞内DNA、RNA、蛋白质代谢的动态过程具有简便、迅速、直观、准确等优点,可以免除对DNA、RNA、蛋白质分离提纯及定量测定等复杂过程。这一方法在生物学、特别是药理学研究方面有很大应用价值。     

白细胞减少症及其它血液病患者骨髓掺入氚标记物放射自显影试验的比较观察

放射性同位素氚标记物自显影具有分辨力高、定位准确故为研究细胞功能代谢奠定了技术基础。氚～胸腺嘧啶核苷(~3H—TdR)、氚—尿嘧啶核苷(~3H—UR)和氚—亮氨酸(~3H—Leu),分别是DNA、RNA和蛋白质合成时的前身物质,用自显影法测定     

氯化甲基汞对小鼠器官氚标胸腺嘧啶核苷掺入的影响

本文通过测定小鼠各器官氚标胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)的掺入,研究氯化甲基汞对不同器官DNA合成的影响。实验结果表明,小鼠经腹腔注射2和12Pμg/g体重氯化甲基汞明显抑制睾丸、肝和小肠~3H-TdR的掺入,这有助于解释氯化甲基汞的诱变和致畸作用。氯化甲基汞对脾和胸腺~3H-TdR的掺入则具有促进作用,其机制尚不清楚。可能与氯化甲基汞损伤细胞膜、影响细胞整合和活化DNA前体物的转运有关。     

叶下珠对人肝癌细胞影响的研究

为研究叶下珠对人肝癌细胞SMMC7721的影响,采用噻唑蓝(MTT)还原法和氚标胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)掺入法观察叶下珠提取物对人肝癌细胞SMMC7721细胞活性及DNA合成的影响。结果发现,经叶下珠提取物处理后,SMMC7721活力明显减弱,~3H-TdR掺入率明显降低,DNA合成抑制率与药物剂量呈线性关系。结论:叶下珠具有杀伤人肝癌细胞SMMC7721和抑制其增殖作用。     

氚—胸腺嘧啶核苷掺入法测定T淋巴细胞转化试验

本文介绍了应用氚—胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)掺入法测定体外淋巴细胞培养在PHA刺激下DNA合成的条件。实验结果表明,细胞培养72小时后,加~3H-TdR掺入24小时和PPO、POPOP、萘、二氧六(?)配制的闪烁液测得放射性为最灵敏。加~3H-TdR剂量3.0微居是可取的。     

人食管癌ECa109球体生长的放射自显影观察

前言为解决实体瘤的治疗问题,目前国外对体外培养动物细胞球体研究较多。使用~3H-胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)标记放射自显影方法对其生长情况、治疗后变化的观察已见报道,有的用球体切片法,有的把球体消化成细胞悬液,涂于载片观察,但缺     

用放射性示踪技术研究血内两类淋巴细胞的增殖动态及放射敏感性

我们利用放射性同位素~6H-胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)作示踪剂,液闪测定~3H摻入淋巴细胞内DNA的放射性计数(cpm),以分别观察血内两种淋巴细胞的增殖动态,及比较其辐射敏感性的差异。     

小儿~3H—TdR参入法淋巴细胞转化试验的初步观察及临床应用

<正> 淋巴细胞转化试验是测定机体细胞免疫功能常用方法之一。人体外周血液中的淋巴细胞体外培养,在刺激原的作用下,能转化成淋巴母细胞。转化时细胞中的RNA与DNA合成显著增加,因而大量摄取胸腺嘧啶核苷(TdR)以复制DNA,所以测定外周血的淋巴细胞中~3H—TdR参入量,在一定程度上能反映机体的细胞免疫功能。为了了解小儿时期及肺炎患儿的细胞免疫状态,我们应用~3H—TdR参入淋巴细胞DNA观察淋巴细胞转化,对100例各年龄组健康人及125例肺炎患儿的淋巴细胞转化功能进行了初步观察。     

大黄素对肺癌A-549细胞合成DNA的影响

用浓度为10μg/ml的大黄素处理肺癌A-549细胞,测定了氚标记胸腺嘧啶核苷的DNA参入量。处理后第2天,~3H-TdR的参入量即明显减少,到第3、4天更为明显,参抑率由第2天的49.8％上升到第4天的72.2％。结果表明,大黄素对肺癌A-549细胞DNA的生物合成有明显的抑制作用,它可能是一种直接作用于肺癌细胞的抗肿瘤药物。     

摘除颌下腺对大鼠胃粘膜DNA和蛋白质合成速率的影响

摘除颌下腺后第3周,取胃粘膜组织进行~3H-胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)和~3H-亮氨酸(~3H-Leucine)参入实验。结果表明,~3H-TdR和~3H-Leucine的参入量均较对照组明显降低,而颌下腺摘除大鼠经口补充外源性表皮生长因子(EGF)后,~3H-TdR和~3H-Leucine的参入量均明显回升。提示,颌下腺对维持胃粘膜DNA和蛋白质合成速率具有重要作用,而这一作用的发挥可能与颌下腺所分泌的EGF有关。     

苦杏仁甙对小鼠肝、肾细胞增生的影响

本文以苦杏仁甙4mg/20g 体重及7mg/20g 体重经皮下给予小鼠,给药6次后参入(~3H)胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR),经放射自显影计数肝细胞、枯否细胞、肾小管上皮细胞之标记细胞以及分裂期细胞,算出标记指数(LI)及分裂指数(MI))与对照组比较,肝细胞、枯否细胞之两个用药组与对照组间差异均为非常显著(P<0.01)本实验显示苦杏仁甙对小鼠肝细胞及枯否细胞增生有明显促进作用。     

体外培养人癌细胞在细胞周期不同时相形态结构变化的研究

本文应用过量胸腺嘧啶核苷阻断法使细胞同步化,应用~3H-TdR标记放射自显影及液体闪烁计数法检测,分别获取G_1及S期细胞。利用扫描电子显微镜、荧光显微镜及细胞化学等技术系统地观察了在细胞周期不同时相两种体外培养人癌细胞的形态、表面结构及细胞化学的变化。     

~(60)Co-r射线对小鼠小肠粘膜DNA合成的影响

照射后辐射敏感组织DNA(脱氧核糖核酸)合成的变化是放射损伤的基本环节之一。Looney、Johanson和Nygarrd等报导了质子和γ射线照射对DNA前体物质掺入的抑制效应,但他们所用的照射剂量较小。本文采用~3H—TdR(胸腺嘧啶核苷)作掺入实验以反映DNA合成率,观察不同剂量~(60)Co-γ射线照射对DNA合成的抑制规律及超致死剂量照射后DNA合成抑制的动态变化。     

农吉利甲素(野百合碱)抗癌机理的研究——Ⅱ 农吉利甲素对~3H-胸腺嘧啶核苷掺入人体肝癌细胞DNA的影响

我们前段工作已证明,农吉利甲素(野百合碱,简称农甲)对人体和动物癌细胞RNA生物合成有明显的抑制作用。在小白鼠S_(180)试验中也证明长时间给予农甲后对癌组织DNA生物合成也有较明显的抑制作用。但农甲对癌细胞RNA和DNA生物合成的抑制作用有无差异,则未见实验证明。本文拟采用~3H-胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)掺入人体肝癌细胞DNA的方法来探讨农甲对癌细胞DNA生物合成的影响,并和农甲对癌细胞RNA生物合成的抑制作用相比较。     

体外培养骨巨细胞瘤的细胞DNA合成观察

<正> 骨巨细胞瘤(以下简称 GCT)是由梭形或圆形单核基质细胞及多核巨细胞(以下简称(MGC)构成的一种多细胞成份的半恶性肿瘤。因含有大量 MGC 而得名。我们在过去几年中,对此种肿瘤曾进行了病理学、超微结构、体外组织培养,组织化学、异种动物的接种以及体外培养细胞的定格显微摄影等方面的研究与观察。本文是上述研究工作的继续。采用 ~3H 胸腺嘧啶核苷(~3H—TdR)掺入,利用放射自显影技术,观察 GCT 在体外培养中各种细胞成份的 DNA 合成情况。     

老年糖尿病患者外周血淋巴细胞DNA修复功能的初步研究

我院于1988年5月至1990年7月对32例老年糖尿病患者用紫外线(UV)诱发~3H-胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)掺入外周血淋巴细胞非程序DNA合成(Unscheduled DNA Synthesis, UDS),并进行液体闪烁计数测定,旨在探索DNA修复功能与糖尿病的关系,现报告如下.一、对象老年糖尿病组:共32例,其中男性20例,女性12例;年龄60～77岁,平均65.8岁.     

乙双吗啉(AT-1727)对s_(180)细胞杀伤动力学的研究

一、放射自显影法乙双吗啉(AT—1727)是我国自行合成的抗肿瘤药。为了研究其抗肿瘤作用机制,采用~3H—胸腺嘧啶核苷(~3H—TdR)掺入的放射自显影法研究了 AT—1727对 S_(180)细胞动力学的影响。1、对 S 期的影响:给 S_(180)小鼠 ip~3H—TdR20Uei/只后0.5小时,ipAT—172750mg/kg,于用药后1、3、6、9、12