纤支镜活检组织检测Survivin mRNA的临床意义

目的 探讨纤维支气管镜活检组织survivin表达对肺癌诊断及评估疾病进展的价值.方法 采用实时荧光定量PCR技术,对临床疑诊肺癌患者进行纤支镜活检,分为肺癌组及肺良性疾病组,检测活检组织survivin mRNA的表达.结果 32例肺癌Survivin的相对拷贝数明显高于9例肺良性疾病（P〈0.05）;32例肺癌不同性别、年龄、组织分化程度、组织类型之间无显著性差异（P〉0.05）,10例有远处转移者survivin mRNA表达高于22例无远处转移者（P〈0.05）.结论 纤支镜活检组织survivin检测联合病理学能更好地评估肺癌进展,survivin可能成为预测肺癌转移的指标.     

纤支镜刷检与病理活检在肺癌诊断中的临床价值

目的探讨纤维支气管镜刷检物涂片细胞学检查与病理活检在肺癌诊断中的临床价值。方法对比分析182例经纤支镜刷检物涂片细胞学检查与病理确诊为肺癌患者的病理诊断情况。结果 182例患者中经纤支镜刷检物涂片细胞学确诊为肺癌阳性126例,占69.2%,经病理活检确诊为肺癌阳性134例,占73.6%,两者共同检测可检出肺癌阳性175例,占96.2%。与其他单一方法比较,阳性检出率明显提高(P<0.05)。结论纤支镜刷检物涂片细胞学检查联合病理活检可明显提高肺癌诊断的阳性率。     

survivin基因在非小细胞肺癌中的表达及与P53、c-myc、k-ras蛋白表达的关系

目的：探讨survivin基因在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达,及与P53、c-myc、k-ras蛋白表达的相互关系。方法：逆转录PCR法检测了76例NSCLC肿瘤组织,20例良性瘤样病变和21例病灶旁正常肺组织survivin mRNA表达,免疫组织化学法检测P53,c-myc,k-ras蛋白表达,并将结果进行了相关分析。结果：61％NSCLC癌组织表达survivin mRNA基因,而良性瘤样病变和正常组织则分别为30％和19％（P＜0．001）。survivin基因表达与肺癌组织细胞类型,分化程度,TNM分期及淋巴结转移无明显相关关系。P53蛋白,c-myc与survivin基因表达显著相关,k-ras蛋白表达与survivin基因表达未见明显相关。结论：（1）survivin基因在肺癌组织中表达上调,提示该基因对NSCLC发生发展起重要作用。Survivin基因有望成为肺癌基因治疗的新靶点。（2）抑癌基因P53的失活和癌基因c-myc的上调与survivin基因的表达可能在NSCLC癌变中起协同作用。survivin和k-ras基因则可能通过各自不同的机制参与NSCLC的发病机制。     

尿Cox-2蛋白、Survivin mRNA和脱落细胞学检查对膀胱移行细胞癌的诊断价值

对60例膀胱移行细胞癌和30例非膀胱肿瘤患者尿液进行尿环氧化酶-2(Cox-2)蛋白、Survivin mRNA和脱落细胞学检测.发现尿Cox-2蛋白检测的敏感性和Youden指数均高于尿Survivin mRNA,而尿Survivin mRNA检测的敏感性和Youden指数明显高于尿脱落细胞学.认为尿Cox-2蛋白和尿Survivin mRNA检测提高了膀胱移行细胞癌的早期诊断率.     

SYBRGreen实时荧光RT-PCR检测痰脱落细胞中MAGE mRNA的表达

目的 探讨肺癌患者痰液中黑色素瘤抗原基因MAGE mRNA的表达及其对肺癌早期诊断的意义.方法 建立以MAGE基因A1-A6亚型通用引物进行SYBRGreen实时荧光RT-PCR的检测方法,并应用其检测14例肺癌病人和11例肺良性疾病病人痰液中MAGE基因mRNA的表达.结果 14例肺癌病人中6例检测到痰液脱落细胞中有MAGE基因mRNA表达,检出率42.9%(6/.14);在对照组肺良性病变者中未检测到MAGE基因mRNA的表达,两组差异有统计学意义(P＜0.05).另外,该法检出率大于痰液脱落细胞的细胞学检查检出率21.4%(3/14),但无统计学差异(P＞0.05).结论 MAGE A1-A6亚型基因的mRNA可作为检测肺癌患者痰液的肿瘤标记物,SYBRGreen实时荧光RT-PCR检测痰脱落细胞中MAGE mRNA可能有助于提高肺癌的检出率.     

纤维支气管镜活检病变组织标本和痰标本Survivin基因的检测对肺癌的诊断价值

目的明确纤维支气管镜(以下简称纤支镜)活检病变组织和痰标本中SurvivinmRNA的检测在肺癌诊断中的意义。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)法检测41例肺癌手术标本癌组织、癌旁组织和9例良性肺疾病病变组织手术标本,80例肺癌和30例良性肺疾病纤支镜活检病变组织标本及所有(160例)患者痰标本SurvivinmRNA表达情况,并与病理组织学、刷检细胞学和痰细胞学检查结果比较。结果肺癌手术切除标本癌组织SurvivinmRNA的阳性率为70.7%(29/41),高于癌旁组织[17.1%(7/41)]和良性肺疾病组织(1/9),差异有统计学意义(χ2值分别为23.97和10.93,P均<0.05),而癌旁组织与肺良性疾病组织相比,差异无统计学意义(χ2=0.20,P>0.05);纤支镜活检肺癌组织标本SurvivinmRNA的阳性率为63.8%(51/80),高于良性肺疾病的13.3%(4/30,χ2值为22.18,P<0.05);肺癌患者癌组织SurvivinmRNA表达与否及表达水平与患者年龄、性别及肿瘤的病理分型、分级、部位及转移情况均无明显相关性(P均>0.05)。肺癌患者痰标本SurvivinmRNA的阳性率是59.5%(72/121),癌细胞的检出率是47.1%(57/121);痰Survivin mRNA检测联合痰细胞学检查诊断肺癌的敏感性为80.2%(97/121),高于单独痰细胞学及单独痰SurvivinmRNA检测的敏感性(P均<0.05)。手术标本、纤支镜活检标     

以MAGE A1-A6亚型基因mRNA为特异标记检测肺癌细胞

目的 探讨肺癌患者痰液及外周血中黑色素瘤抗原基因(MAGE)A1-A6亚型 mRNA的表达及其对早期肺癌的诊断意义.方法应用巢式RT-PCR技术,对23例肺癌病人、8例肺良性病变者和10例健康人的痰液及外周血中MAGE A1-A6亚型基因的 mRNA表达进行检测.结果 23例肺癌病人中7例检测到痰液脱落细胞中有MAGE A1-A6亚型基因mRNA表达,检出率30.4%(7/23);9例检测到外周血有表达,检出率39.1%(9/23);痰液和外周血肺癌细胞联合检出率为47.8%(11/23),大于痰液细胞学检查检出率17.4%(4/23)(P＜0.05).而肺良性病变者和健康人中均未检测到MAGE A1-A6亚型基因mRNA的表达.结论 MAGE A1-A6亚型基因的 mRNA可作为检测肺癌患者痰液和外周血癌细胞的标记物,两者联合检测有助于提高肺癌的检出率.     

Survivin在非小细胞肺癌中的表达及其与p53、细胞凋亡的关系

目的探讨Survivin基因在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及其与p53、细胞凋亡的关系。方法采用免疫组化方法检测60例NSCLC和16例肺良性组织中Survivin和p53的表达，用TUNEL技术检测NSCLC的凋亡情况。结果肺癌组织中Survivin蛋白表达的阳性率为63.3％（38／60），而在良性肺疾病肺组织均无表达；Survivin蛋白的表达与肺癌TNM分期、淋巴结转移和细胞分化程度有密切关系，但与肿瘤组织学类型、患者年龄及性别无关。p53蛋白表达阳性的NSCLC中，Survivin蛋白表达阳性率（80．5%）明显高于p53蛋白表达阴性者（26．3％）．P〈0．01。Survivin蛋白在NSCLC中的表达水平与癌细胞的凋亡指数（AI）星负相关（r=-0．231，P〈0．05）。结论Survivin基因异常表达引起的细胞凋亡抑制在NSCLC的发生中起一定作用，抑癌基因p53失活和Survivin基因过度表达可能在NSCLC癌变中起协同作用。     

Survivin在个旧矿粉诱导的肺癌细胞中的表达及意义

目的探讨生存素(Survivin)在个旧矿粉诱导永生化人支气管上皮细胞(BEAS-2B)转化为肺癌细胞过程中的作用。方法采用免疫荧光细胞化学染色技术和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测Survivin蛋白及其mRNA在BEAS-2B及其转化为恶性肺癌细胞过程中的表达。结果Survivin蛋白在BEAS-2B中表达阴性,在肺癌细胞中表达阳性;Survivin mRNA在BEAS-2B中的表达显著低于肺癌细胞(P<0.01)。结论Sur-vivin在个旧矿粉诱导BEAS-2B转化为恶性肺癌细胞中发挥重要作用,其机制可能为抑制肺癌细胞凋亡;Sur-vivin有望成为个旧矿工肺癌诊断和治疗的新靶点。     

经纤支镜刷检新柏氏薄层细胞学技术在肺癌诊断中的应用

目的探讨经纤维支气管镜（以下简称纤支镜）刷检新柏氏薄层细胞学技术在肺癌诊断及分型中的应用价值。方法对比分析397例经纤支镜检查活检或刷检或活检加刷检细胞学与病理确诊为肺癌患者的病理诊断情况。结果397例患者中，经活检确诊肺癌300例，占75．6％，经刷检单独确诊肺癌97例，占24．4％，活检与刷检细胞学及组织学均确诊并完全符合284例（71．5％）；二者不符合113例（28．5％）。经活检确诊肺癌300例中有16例（占4％）与刷检不符合。结论经纤支镜刷检新柏氏薄层细胞学技术对肺癌的诊断及分型有极大的价值，经纤支镜活检联合刷检新柏氏薄层细胞学技术明显提高了肺癌诊断的阳性率。     

非小细胞肺癌中TFPI-2与Survivin表达关系的研究

目的 探讨非小细胞肺癌中组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)的表达与Survivin的关系,从而评价其在肺癌细胞凋亡中的作用.方法 采用免疫组化法检测TFPI-2、Survivin蛋白在75例非小细胞肺癌和20例正常肺组织中的表达水平.结果 TFPI-2在非小细胞肺癌中的表达指数为55％,低于正常的肺组织85％.Survivin在非小细胞肺癌中的阳性表达水平为71％,在正常肺组织中大表达水平为5％.TFPI-2和Survivin在非小细胞肺癌中的阳性表达水平呈现负相关(r=9.62,P＜0.05).结论 TFPI-2在正常肺组织中的表达水平明显高于非小细胞肺癌组织,其可能通过调控Survivin蛋白的表达来抑制肿瘤细胞的浸润转移.     

老年非小细胞肺癌生存素基因表达与微血管密度

目的探讨老年非小细胞肺癌中生存素(Survivin)基因表达及其与微血管密度(MVD)的关系。方法应用免疫组织化学方法(SP法)检测36例非小细胞肺癌(NSCLC)中生存素基因表达水平及其与临床病理特征的关系,分析生存素基因表达与MVD的相互关系。结果肺癌患者生存素蛋白表达水平639%(23/36)明显高于癌旁组织(P<005),随着生存素表达强度的增加MVD逐渐增高,生存素表达与MVD明显相关(F=9691,P<0005)。结论肺癌组织中生存素蛋白表达显著增高,可以作为肺癌临床诊断的可靠指标,生存素基因的过度表达与肺癌组织的微血管密度有关,生存素基因参与了肿瘤的血管生成。     

Expression and clinical significance of lung-specific X protein mRNA in bronchial brushing specimens from patients with or without lung cancer

BACKGROUND AND OBJECTIVE: The aim of this study was to evaluate the diagnostic utility of lung-specific X protein (LUNX) mRNA expression in bronchial brushing specimens from patients with lung cancer. METHODS: LUNX mRNA levels were assessed by performing RT-PCR on liquid-based cytology bronchial brushing specimens from patients with lung cancer (n=104) or benign lung disease (n=91). Results: LUNX mRNA expression was significantly more frequent in patients with all carcinomas, squamous cell carcinomas, adenocarcinomas, as well as patients with central, peripheral and diffuse carcinomas (P<0.01), and non-small cell lung carcinomas (P<0.05) compared with patients with benign disease. The diagnostic performance of RT-PCR analysis of LUNX mRNA was significantly better than that of cytology in terms of sensitivity (93.3±4.8% vs 64.4±9.2%), negative predictive value (91.6±6.0% vs 71.1±7.9%) and accuracy (88.7±4.4% vs 81.0±5.5%), whereas specificity (83.5±7.6%) and positive predictive value (86.6±6.3%) were lower than those of cytology (100%). Conclusions: Liquid-based cytology and RT-PCR can be performed to detect LUNX mRNA expression in bronchial brushing specimens, and this technique may be a useful adjunct to cytological diagnosis of lung cancer. The sensitivity of the technique was greater than that of cytology but its lower specificity should be taken into account.     

肺癌患者血清Survivin和VEGF的表达及其临床意义

目的 通过检测Survivin和VEGF在非小细胞肺癌患者血清中的含量,探讨非小细胞肺癌诊断、分级的临床意义.方法 采用酶联免疫吸附法(ELISA)对51例非小细胞肺癌患者血清中Survivin和VEGF的表达水平及30例正常健康人血清Survivin和VEGF水平进行检测.结果 非小细胞肺癌患者血清Survivin和VEGF水平明显高于健康对照组(P＜0.01);Survivin 和VEGF的表达呈正相关(P＜0.01);Survivin和VEGF的表达与患者性别、年龄、肿瘤分期、病理分型、淋巴结转移等无关(P＞0.05).结论 检测非小细胞肺癌患者血清Survivin和VEGF的水平,对病情的发生和发展、具有重要的临床意义.     

Survivin的表达与非小细胞肺癌生物学特征及预后的关系

目的探讨凋亡抑制基因Survivin的表达与非小细胞肺癌(NSCLC)生物学特征及临床预后的关系。方法应用免疫组化检测了70例NSCLC中Survivin的表达,并选取30例癌旁组织作为对照,比较Survivin的表达与NSCLC患者生物学特征及预后的关系。结果Survivin在NSCLC中的阳性表达率为74.3%,而癌旁组织无1例表达,Survivin的表达与肺癌患者年龄、性别、病理类型、分化程度无关(P0.05),与临床分期有关(P=0.008);Survivin表达阳性者生存时间明显低于阴性表达者(P=0.000),COX回归显示Survivin与NSCLC患者预后有关(P=0.001)。结论Survivin与NSCLC的发生发展有关,过度表达提示预后不良,Survivin有望成为肺癌诊断和基因治疗的新靶点。     

ERCC-1和RRM-1在非小细胞肺癌组织中的表达及病理的临床分析

目的研究切除修复交叉互补基因ERCC1、核苷酸还原酶调节因子RRM1在非小细胞肺癌中的表达及其临床价值。方法选择非小细胞肺癌患者作为观察组,肺部良性病变患者作为良性对照组、体检者作为健康对照组,采用SurPlexTM液相芯片技术检测肺癌组织中ERCC1、RRM1的mRNA相对含量。结果观察组患者肺癌组织中ERCC1、RRM1的mRNA含量明显高于良性病变对照组和健康对照组,且呈现出TNMⅠ相似文献   

Down-regulation of survivin expression by small interfering RNA induces pancreatic cancer cell apoptosis and enhances its radiosensitivity

AIM: To investigate the inhibitory effect of small interfering RNA (siRNA) on the expression of survivin in pancreatic cancer cell line PC-2 and the role of siRNA in inducing PC-2 cell apoptosis and enhancing its radiosensitivity. METHODS: A siRNA plasmid expression vector against survivin was constructed and transfected into PC-2 cells with LipofectamineTM 2000. The down regulation of survivin expression was detected by semi-quantitive RT-PCR and immunohistochemical SP method and the role of siRNA in inducing PC-2 cell apoptosis and enhancing its radiosensitivity was detected by flow cytometry. RESULTS: The sequence-specific siRNA efficiently and specifically down-regulated the expression of survivin at both mRNA and protein levels. The expression inhibition ratio was 81.25% at mRNA level detected by semi-quantitive RT-PCR and 74.24% at protein level detected by immunohistochemical method. Forty-eight hours after transfection,apoptosis was induced in 7.03% cells by siRNA and in 14.58% cells by siRNA combined with radiation. CONCLUSION: The siRNA plasmid expression vector against survivin can inhibit the expression of survivin in PC-2 cells efficiently and specifically. Inhibiting the expression of survivin can induce ipoptosis of PC-2 cells and enhance its radiosensitivity significantly. RNAi against survivin is of potential value in gene t(?)erapy of pancreatic cancer.     

Expression of inhibitors of apoptosis (IAP) proteins in non-small cell human lung cancer

PURPOSE: Apoptotic cell death contributes to the regulation of tumour regression but can be prevented by proteins of the IAP family. Although survivin can be identified as tumour-specific gene product, the role of other members of the IAP family is mainly unclear in non-small cell lung cancer (NSCLC). Therefore, we hypothesise that hIAP-1, hIAP-2, and XIAP are associated with lung carcinogenesis, too. METHODS: To define IAP expression levels, lung tumour samples from 34 NSCLC patients with adenocarcinoma (16) and squamous cell carcinoma (18) were included. Analyses were performed by standardised RT-PCR and immunoblotting. Paired non-tumour lung tissues served as controls. All tumour samples showed a strong survivin mRNA up-regulation compared with non-tumour controls. RESULTS: Investigations of the XIAP mRNA expression revealed an overall increase in lung carcinoma (median: 1,083 vs 605 rel. U; P =0.02). In contrast, hIAP-2 mRNA was nearly identical in all tumour and control samples. Furthermore, we identified an elevated hIAP-1 mRNA expression especially in patients with adenocarcinoma (median: 8.58 vs 3.44 rel. U; P <0.01). Using the median increase of 50% determined in all tumours as a cut-off point, 11/16 patients with adenocarcinoma but only 6/18 with squamous cell carcinoma showed an elevation in hIAP-1 mRNA. This hIAP-1 up-regulation could be mainly observed in low TMN adenocarcinomas (7/9 in TMN I, median increase: +289% vs 2/5 in TMN III-IV, +44.6%). An enhanced mRNA expression of hIAP-1 and XIAP in respective tumours could be confirmed on protein level by immunoblot analyses. CONCLUSIONS: Our results indicate an involvement of the anti-apoptotic XIAP in pathogenesis of NSCLC, while hIAP-1 preferentially seems to play an important role in low-stage adenocarcinoma.     

survivin基因表达对肺鳞状细胞癌细胞侵袭的影响

目的探讨survivin基因对肺鳞状细胞癌细胞侵袭能力的影响及作用机制。方法应用survivin基因小干扰RNA（siRNA）转染处理人肺鳞状细胞癌细胞后,用荧光实时定量PCR和Western blot检测survivin mRNA和survivin蛋白表达,用软琼脂集落培养试验和Boyden小室模型试验检测癌细胞的锚着不依赖性增殖和侵袭能力,用琼脂糖凝胶电泳和细胞凋亡原位检测试剂盒检测癌细胞失巢凋亡情况。结果转染组癌细胞survivin mRNA和survivin蛋白表达明显受抑制,且与时间和浓度相关。与对照组比较,转染组细胞形成的软琼脂集落数和穿膜细胞数明显减少,细胞出现明显凋亡现象,并出现明显DNA条带。结论survivin基因siRNA转染可明显抑制肺鳞状细胞癌细胞的锚着不依赖性增殖和恶性侵袭,其机制可能与诱导失巢凋亡有关。