RNA干扰Dub3表达对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨小干扰RNA（siRNA）靶向抑制去泛素化酶3（Dub3）基因表达对人鼻咽癌CNE-2细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法 优化siRNA转染条件,将2条靶向抑制Dub3基因的siRNA载体片段（siRNA-1、siRNA-2）分别高效转染人鼻咽癌CNE-2细胞,同时设转染无义序列的空转染组及无任何处理的对照组。分别于转染24、48、72、96 h后采用实时定量PCR（qPCR）检测Dub3表达水平以筛选抑制率高的感染载体用于后续试验。噻唑蓝法检测各组转染24、48、72、96 h后的增殖抑制率,流式细胞术检测各组转染48、96 h后的细胞凋亡和细胞周期情况,采用Western blotting检测各组转染96 h后细胞分裂周期蛋白25A（Cdc25A）的表达情况。结果 转染组的Dub3 mRNA水平均低于空转染组和对照组（P＜0.05）,且选择干扰效率高的siRNA-1载体进行功能学研究;与其余两组相比,抑制组转染后的增殖抑制率、凋亡率及caspase-3活化率均升高,且G0/G1期细胞比例升高,但S期和G2/M期细胞比例均降低,以上差异均有统计学意义（P＜0.05）;抑制组转染后的Cdc25A 水平降低,与空载体组和对照组的差异有统计学意义（P＜0.05）。空载体组和对照组以上指标的差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论 通过siRNA抑制Dub3基因表达可抑制鼻咽癌细胞的增殖并诱导凋亡和细胞周期阻滞,对鼻咽癌的防治有一定价值。     

siRNA靶向抑制CDCA5基因表达对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨小干扰RNA（siRNA）靶向抑制细胞分裂周期相关蛋白5（CDCA5）基因表达对人肝癌HepG2细胞株增殖及凋亡的影响。方法 优化siRNA转染条件,将3条靶向抑制CDCA5基因的siRNA载体片段（序列1、2和3）分别高效转染人肝癌HepG2细胞（A、B和C组）,并设阴性对照组（NC组）及空白组。免疫印迹法检测转染72h各组CDCA5蛋白的表达水平。CCK-8法检测转染24、48、72、96、120h各组细胞的增殖能力,Annexin V-FITC／PI 双标记流式细胞术检测各组转染48h的凋亡情况。结果 A、B和C组的CDCA5蛋白水平均低于NC组和空白组（P＜0.05）,其中B组的表达率最低,抑制率最高,达89.3％,故选择序列2进行后续实验。自转染48h起,B组的相对增殖率均低于NC组和空白组（P＜0.05）;B组转染72h的相对增殖率为（66.58±2.58）％,均低于其他观察时间点（P＜0.05）。B组转染48h的早期和晚期凋亡率分别为（17.43±2.31）％和（22.37±2.21）％,均高于NC组和空白组（P＜0.05）。 结论 通过siRNA能够降低HepG2细胞的CDCA5表达水平,有效抑制HepG2细胞的增殖并促进其凋亡。     

微小RNA-96对宫颈癌细胞HeLa增殖凋亡及Spindlin1表达的影响

目的 探讨微小RNA-96（miR-96）对宫颈癌细胞HeLa增殖凋亡及Spindlin1（SPIN1）表达的影响。方法采用脂质体法将miR-96 模拟物（mimics）及阴性对照分别转染至宫颈癌HeLa细胞（miR-96转染组和miR-96对照组）,以未行转染的HeLa细胞为未转染组,实时定量PCR（QPCR）检测各组转染48 h后细胞中miR-96的表达情况,MTT及流式细胞仪分别检测各组转染48 h后的增殖及凋亡情况,分别采用QPCR和Western blotting检测转染48 h后各组细胞的SPIN1 mRNA和蛋白水平,通过双荧光素酶靶标实验验证miR-96与SPIN1之间的关系。结果 转染48 h后未转染组、miR-96对照组和miR-96转染组的miR-96水平依次为1.068±0.053、1.175±0.084和2.434±0.088,miR-96转染组的miR-96水平高于其余两组,差异有统计学意义（P<0.05）;未转染组、miR-96对照组和miR-96转染组的增殖率依次为（99.633±5.059）%、（97.727±3.079）%和（62.023±5.425）%,凋亡率依次为（7.515±0.924）%、（8.123±1.247）%和（26.845±4.126）%,与其余两组相比,miR-96转染组的增殖率降低而凋亡率升高,差异有统计学意义（P<0.05）;未转染组、miR-96对照组和miR-96转染组的SPIN1 mRNA水平依次为0.965±0.046、0.917±0.044和0.549±0.039,SPIN1 蛋白水平依次为0.667±0.042、0.715±0.045和0.384±0.038,miR-96转染组的SPIN1 mRNA和蛋白水平均低于其余两组,差异有统计学意义（P<0.05）。miR-96抑制含有野生型SPIN1-3’UTR质粒细胞的荧光素酶活性,却对含有突变型质粒细胞的荧光素酶活性无影响。结论 过表达miR-96可抑制宫颈癌细胞的增殖凋亡并降低SPIN1表达水平,miR-96对SPIN1有靶向调控作用,可作为治疗宫颈癌的有效靶点。     

shRNA靶向沉默P2X7R表达对鼻咽癌细胞增殖、凋亡及PI3K／Akt和Wnt／β-catenin通路的影响

目的 探讨靶向P2X7受体（P2X7R）的小发夹RNA（shRNA）对人鼻咽癌HONE1细胞增殖、凋亡及信号通路的影响。方法 根据预实验结果优化shRNA转染条件,将2条靶向抑制P2X7R基因的shRNA载体片段（shRNA-1、shRNA-2）分别高效转染HONE1细胞,同时设转染无义序列（Blank）的空转染组及不进行任何处理的对照组。分别于转染24、48、72、96 h后采用实时荧光定量PCR（QPCR）检测P2X7R表达水平以筛选抑制率高的转染载体用于后续试验。四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测各组转染24、48、72、96 h后的增殖抑制率,流式细胞术检测各组转染48、96 h后的细胞凋亡率,QPCR法检测各组凋亡相关基因的mRNA水平,Western blotting检测各组转染96 h后磷脂酰肌醇3-激酶／蛋白激酶B（PI3K／Akt）通路和Wnt／β-连接素（β-catenin）通路中的蛋白变化。结果 转染组的P2X7R mRNA水平均低于空转染组和对照组（P＜0.05）,且选择干扰效率高的shRNA-1载体进行功能学研究;与空转染组和对照组比较,shRNA-1转染组的HONE1细胞增殖抑制率、凋亡率及促凋亡基因Bid、Bax的mRNA水平均升高,而抗凋亡基因Bcl-2、Mcl-1的mRNA水平均降低,差异有统计学意义（P＜0.05）;与对照组比较,shRNA-1转染组处理后PI3K／Akt通路中PTEN蛋白水平均升高,而p-Akt水平均降低（P＜0.05）,Wnt／β-catenin通路中p-β-catenin、Cyclin D1和C-myc水平均降低（P＜0.05）。结论 通过shRNA抑制P2X7R基因表达可抑制鼻咽癌细胞增殖并诱导凋亡,可能与抑制PI3K／Akt、Wnt／β-catenin通路有关,对鼻咽癌的防治有一定价值。     

EGFR在RNAi-hTERT抑制HeLa细胞增殖过程中的作用研究

目的探讨EGFR在靶向hTERT的RNA干扰抑制HeLa细胞增殖过程中的作用。方法以HeLa细胞为实验细胞,将实验分为6组:A组未处理;B组转染试剂;C组转染空载体;D组转染阴性siRNA;E组转染siRNA-hTERT;F组同时转染pcDNA3.1-EGFR和siRNA-hTERT。转染48 h后,应用Western Blot法检测各组HeLa细胞的hTERT与EG-FR蛋白表达水平,MTT法分析各组转染24、48、72和96 h后4个时间点的细胞增殖抑制率。结果转染48 h后的3个时间点,E组细胞增殖抑制率显著高于C、D和F组(P<0.01、0.01、0.01),同时伴有EGFR蛋白表达水平显著降低;而F组EGFR蛋白表达水平恢复,细胞增殖抑制率未见升高。结论靶向hTERT的RNA干扰抑制HeLa细胞增殖,可能依赖于EGFR蛋白水平的下调。     

VEGF特异siRNA对骨肉瘤细胞凋亡和仿血管发生的影响

目的：探讨VEGF特异siRNA在骨肉瘤细胞株（MG63）增殖、凋亡以及仿血管发生中的作用。方法：以pSilienc-er载体构建VEGF特异siRNA质粒pSilencer-VEGF siRNA,并转染骨肉瘤细胞MG63;将细胞分为pSilencer-VEGF siRNA质粒组（试验组）和空siRNA质粒组（对照组）,Western blotting在蛋白水平检测转染重组质粒后MG63细胞VEGF表达情况;MTT比色法、光镜、流式细胞仪结合Annexin V-FITC/PI染色和H-E染色观察质粒转染后骨肉瘤细胞增殖、凋亡和仿血管发生情况。结果：测序证实成功构建了针对VEGF的siRNA重组质粒。转染pSilencer-VEGF siRNA重组质粒后的试验组培养液中及骨肉瘤细胞内VEGF蛋白表达下降;转染后48、72、96h骨肉瘤细胞的增殖抑制率分别为41.67%、43.92%、35.32%,并发生了早期凋亡,凋亡率为28.27%。转染pSilencer-VEGF siRNA重组质粒的骨肉瘤细胞未见仿血管发生,转染空质粒的对照组骨肉瘤细胞则有仿血管发生。结论：RNA干扰VEGF基因能抑制骨肉瘤细胞增殖,促进骨肉瘤细胞早期凋亡,干扰骨肉瘤细胞仿血管发生,为临床基因治疗骨肉瘤提供了新的思路。     

婆罗双树样基因2干扰对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响

目的：研究婆罗双树样基因2（sal-like gene 2,SALL2）干扰对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响。方法：设计针对SALL2基因的3条小干扰RNA（siRNA-1、2、3）,并设载体组及未转染对照组,使用脂质体转染HeLa细胞。采用逆转录RT-PCR和Western blot检测转染后HeLa细胞中SALL2 mRNA和蛋白的表达以筛选沉默效果最好的siRNA片段。将最适siRNA片段转染HeLa细胞后,采用CCK-8检测细胞增殖率;流式细胞术检测细胞周期和凋亡率。结果：对照组HeLa细胞高表达SALL2。载体组和转染siRNA-3组SALL2的mRNA和蛋白表达与对照组相比,差异均无统计学意义（P均>0.05）,而siRNA-1和siRNA-2转染48 h后,HeLa细胞SALL2的mRNA和蛋白表达均降低,差异均有统计学意义（P均<0.05）,其中siRNA-1的沉默效率更好,故后续选择siRNA-1作为干扰组。与对照组相比,转染siRNA-1 48和72 h后细胞的增殖率均升高,差异均有统计学意义（P<0.05）;转染48 h后siRNA-1组处于G0/G1期的细胞比例减少,凋亡率明显降低（P均<0.05）。结论：SALL2基因干扰可明显提高HeLa细胞的增殖率,并降低其凋亡率。提示SALL2基因对宫颈癌HeLa细胞的增殖有抑制作用。     

S6K2沉默对宫颈癌细胞增殖凋亡及PI3K／Akt／NF-κB通路的影响

目的 探讨RNA干扰核糖体蛋白S6激酶2（S6K2）基因表达对宫颈癌细胞增殖、凋亡及磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）／蛋白激酶B（Akt）／核因子κB（NF-κB）信号通路的影响。方法 通过生物信息学方法—Oncomine（肿瘤微阵列数据库）分析宫颈癌组织中S6K2的表达情况,向人宫颈癌细胞系HeLa和Caski分别转染靶向S6K2的siRNA片段（siRNA S6K2）和对照随机序列（siRNA-Ctrl）,采用实时荧光定量PCR（QPCR）检测各组转染48 h后的S6K2 mRNA水平,CCK-8法检测增殖情况,Annexin Ⅴ-FITC／PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blotting检测PI3K／Akt通路相关蛋白（p-Akt、Akt、p-mTOR和mTOR）水平,免疫荧光法评估NF-κB p65的核转位情况。结果 生物信息学分析3个与宫颈癌相关的数据集Biewenga、Scotto和Zhai中的数据,发现宫颈癌组织中S6K2相对表达量均高于正常宫颈组织（P＜0.05）。QPCR和Western blotting结果均显示转染siRNA-S6K2后的S6K2 mRNA和蛋白水平均较对照组显著降低（P＜0.05）。转染siRNA-S6K2的HeLa和Caski细胞的增殖活力、p-Akt和p-mTOR水平降低而凋亡率升高,与转染siRNA-Ctrl的细胞比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。免疫荧光法检测结果显示,转染siRNA-S6K2的宫颈癌细胞的核内荧光量降低,与转染siRNA-Ctrl的细胞比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论S6K2在宫颈癌组织中高表达,且参与了宫颈癌细胞的增殖和凋亡,在宫颈癌防治中有一定潜能。     

CXCL12对宫颈癌细胞放射敏感性影响的实验研究

目的 探讨趋化因子12（CXCL12）在调控宫颈癌放疗敏感性中的作用。方法 采用阳离子脂质体法将CXCL12 siRNA转染至宫颈癌HeLa细胞（siRNA转染组）,另设置空白对照组和阴性对照组。采用不同剂量（4、8 Gy）照射上述各组HeLa细胞, CCK-8法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,ELISA法和实时荧光定量PCR（QPCR）检测CXCL12表达变化,流式细胞仪检测CD44表达。结果 接受4 、8 Gy照射后siRNA转染组的细胞存活率分别为62.0％和44.0％,低于阴性对照组的79.0％和59.0％,差异有统计学意义（P＜0.05）;接受4 、8 Gy照射后siRNA转染组的细胞凋亡率分别为28.0％和51.0％,高于阴性对照组的21.0％和39.0％,差异有统计学意义（P＜0.05）。接受4 、8 Gy照射后siRNA转染组的CD44蛋白表达量为1.33±0.02和1.40±0.01,低于阴性对照组的1.55±0.02和1.85±0.02,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 沉默CXCL12可通过抑制细胞增殖、促进细胞凋亡来增加宫颈癌细胞的放射敏感性,CXCL12可能为宫颈癌放疗提供新的增敏靶点。     

shRNA靶向PAX6对乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡及上皮间质转化的影响

目的 探讨短发夹RNA（shRNA）靶向沉默人类配对盒基因（PAX6）对乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡及上皮间质转化（EMT）的影响。方法 根据GenBank数据库中PAX6序列,设计、合成互补并特异性编码其 shRNA序列的寡核苷酸,克隆至线性化pSUPER. puro质粒载体中,将pSuper. puro PAX6 shRNA质粒（转染组）和阴性对照质粒pSuper. puro luciferase shRNA（阴性对照组）分别转染人MCF-7细胞,建立稳定低表达PAX6的MCF-7细胞株,同时设未行转染的MCF-7细胞为空白对照组。经实时定量PCR验证后,噻唑蓝（MTT）法检测各组转染24、48、72、96 h后的增殖抑制率,流式细胞术检测各组转染后的细胞凋亡和细胞周期情况,采用Western blotting检测各组转染96 h后的EMT相关标记分子（E-钙粘蛋白、纤连蛋白和波形蛋白）水平。结果 转染组的PAX6水平均低于阴性对照组和空白对照组（P＜0.05）;与其余两组相比,转染组的增殖抑制率、凋亡率及促凋亡基因Bax、Bad mRNA水平均升高,而抑制凋亡基因Bcl-2 mRNA水平降低,且细胞周期的G0/G1期细胞比例升高,但S期和G2/M期细胞比例均降低,以上差异均有统计学意义（P＜0.05）;转染组的钙粘蛋白水平升高,而纤连蛋白和波形蛋白水平均降低,与其余两组的差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 通过shRNA抑制PAX6基因表达可抑制乳腺癌细胞增殖并诱导凋亡和细胞周期阻滞,对EMT过程有一定抑制效果,为乳腺癌的基因沉默靶向治疗提供了依据。     

蛋白激酶Cδ失活对骨肉瘤干细胞增殖、凋亡及相关信号通路的影响

目的 探讨短发夹RNA（shRNA）靶向沉默人蛋白激酶Cδ（PKCδ）对骨肉瘤干细胞增殖、凋亡及相关信号通路的影响。方法 根据Genbank数据库中PKCδ序列,设计、合成互补并特异性编码其 shRNA序列（PKCδ-shRNA-1和PKCδ-shRNA-2）,克隆至pRNA6-1-Neo质粒载体后采用Western blotting检测PKCδ蛋白水平,筛选抑制效果最好的shRNA片段转染骨肉瘤干细胞（转染组）,设阴性对照组（转染shRNA无意义随机阴性对照序列）和空白对照组（不行转染处理）。采用噻唑蓝（MTT）法检测各组转染24、48、72、96 h后的增殖抑制率,流式细胞术检测各组转染后的细胞凋亡和细胞周期情况,实时荧光定量PCR检测凋亡相关基因的表达,采用Western blotting检测各组转染96 h后PI3K／Akt及Wnt／β-catenin信号通路中相关蛋白的水平。结果 转染PKCδ-shRNA-1和PKCδ-shRNA-2后PKCδ蛋白水平均降低（P＜0.05）,且PKCδ-shRNA-1的抑制效果优于PKCδ-shRNA-2,故后续实验选择PKCδ-shRNA-1;与其余两组相比,转染组的增殖抑制率、凋亡率及促凋亡基因Bax、Bad的mRNA水平均升高,而Bcl-2水平降低,且在细胞周期上,G0／G1期细胞比例升高,但S期和G2／M期细胞比例均降低,以上差异均有统计学意义（P＜0.05）;转染组PI3K／Akt通路中的PTEN水平升高、Akt水平降低,Wnt／β-catenin通路中β-catenin、C-myc和Cyclin D1水平均降低（P＜0.05）。结论 通过shRNA抑制PKCδ基因表达可抑制骨肉瘤干细胞增殖并诱导凋亡和细胞周期阻滞,对PI3K／Akt和Wnt／β-catenin信号通路激活有一定抑制作用,可能对骨肉瘤的防治有一定价值。     

下调miR-23a对EGFR突变非小细胞肺癌细胞吉非替尼耐药的影响研究

目的 探讨抑制miR-23a对EGFR T790M突变非小细胞肺癌H1975细胞吉非替尼耐药性的影响及其可能机制。方法 选取吉非替尼耐药的对数生长期H1975细胞为研究样本,合成miR-23a抑制物（miR-23a inhibitor）,应用脂质体转染H1975细胞以抑制其miR-23a表达（抑制组）,同时设未经转染处理的非转染组和转染无关序列的阴性对照组,实时荧光定量PCR（qRT-PCR）验证转染效果;采用CCK-8法检测转染24、48、72及96 h后各组的增殖情况,同时于转染48 h后用吉非替尼（0.03～300 μmol／L）处理各组细胞以评价对吉非替尼的药物敏感性变化情况;分别用流式细胞术检测各组的凋亡率（FITC-Annexin V／PI双染）和细胞周期（PI单染）情况,免疫印迹法检测各组多药耐药相关蛋白1（MRP1）、肺耐药相关蛋白（LRP）及谷胱甘肽转移酶π（GST-π）的表达变化。结果 抑制组在转染24～96 h出现miR-23a水平的持续下降,其miR-23a水平均低于其余两组,转染 96 h后的miR-23a水平分别为非转染组的（32.06±4.68）％和阴性对照组的（31.77±3.18）％,且吉非替尼对抑制组的半数抑制浓度（IC₅₀）为（2.82±0.46）μmol／L,均低于其余两组,以上差异均有统计学意义（P＜0.05）;与其余两组相比,抑制组转染后增殖抑制率、凋亡率及G0／G1期比例均升高,S期、G2／M期比例均下降且耐药蛋白MRP1、LRP及GST-π蛋白水平亦下调,以上差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 下调miR-23a可逆转H1975细胞的吉非替尼耐药性,同时可抑制细胞增殖、诱导凋亡及细胞周期阻滞,可能与降低耐药蛋白表达有关。     

mTOR通路抑制剂依维莫司对宫颈癌SiHa细胞恶性行为的影响

目的 探讨依维莫司（EVE）对人宫颈癌SiHa细胞增殖、凋亡及上皮间质转化（EMT）的影响。方法 常规培养SiHa细胞达对数生长期后,采用终浓度为1、10、100 μmol／L EVE处理SiHa细胞,采用四甲基偶氮唑盐比色法测定对照组及不同浓度EVE处理24、48、72和96 h后的细胞增殖情况,分别采用Annexin V-FITC／PI双染联合流式细胞术和实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测不同浓度EVE处理96 h的早期和晚期凋亡率及凋亡相关基因（Bax、Bad和Bcl-2）的表达情况,Western blotting和免疫荧光法检测各组处理96 h后的EMT相关标记分子包括上皮型钙粘附素（E-cad）、纤维连接蛋白（FN）和波形蛋白（Vim）的水平。结果 EVE在1～100 μmol／L范围内对SiHa细胞有增殖抑制作用,且增殖抑制率呈剂量和时间依赖性,除1 μmol／L作用24 h外,其余浓度及作用时间的增殖抑制率均高于对照组（P＜0.05）;与对照组相比,EVE处理96 h后的早期、晚期凋亡率及Bax、Bad的mRNA水平均升高,而Bcl-2 mRNA水平降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）,且呈剂量依赖性;EVE处理后的E-cad水平均高于对照组,而FN和Vim水平均低于对照组（P0.05）。结论 采用EVE阻断mTOR通路对宫颈癌SiHa细胞有毒性作用,不仅抑制其增殖且诱导凋亡,可能与抑制其EMT过程有关。     

miR-155对乳腺癌细胞增殖、凋亡及耐药蛋白表达的调控作用研究

目的 探讨microRNA-155（miR-155）对乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡及乳腺癌耐药相关蛋白表达的调控作用。方法 采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测MCF-7细胞和人乳腺正常上皮细胞中miR-155的表达水平。将MCF-7细胞分为4组：对照组、空转染组、抑制（转染miR-155 inhibitor）组和过表达（转染miR-155 mimics）组,采用qRT-PCR检测转染24、48、72及96 h后各组的转染效果,噻唑蓝（MTT）法检测各组转染24、48、72及96 h的增殖能力,采用流式细胞仪PI／Annexin V双染色法检测各组转染24、48 h后的凋亡率,Western blotting法检测各组转染48 h后乳腺癌耐药蛋白（BCRP）、P-糖蛋白（P-gp）及多药耐药相关蛋白1（MRP1）的表达水平。结果 乳腺癌MCF-7细胞中的miR 155水平高于人乳腺正常上皮细胞（P＜0.05）,且转染miR-155 inhibitor或mimics可呈时间依赖的方式降低或升高MCF-7细胞的miR-155水平（P＜0.05）。与对照组相比,抑制组转染后的细胞增殖率及BCRP、P-gp和MRP1的表达水平均降低,凋亡率升高（P＜0.05）;而过表达组的细胞增殖率及BCRP、P gp和MRP1的表达水平均升高,凋亡率降低（P＜0.05）。结论 MCF-7细胞中miR-155呈高表达,下调miR-155表达可抑制其增殖及耐药相关蛋白的表达,同时诱导凋亡。     

BRD4抑制剂对鼻咽癌CNE-2细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

目的 探讨溴结构域蛋白4（BRD4）抑制剂GSK525762A对鼻咽癌CNE-2细胞增殖、凋亡及侵袭的影响。方法 0、0.1、1、10、100 μmol／L GSK525762A 处理鼻咽癌CNE-2细胞 24、48、72和96 h后,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测细胞增殖抑制率变化,同时采用流式细胞术Annexin V-FITC／PI双染法检测不同浓度GSK525762A处理48、96 h后的CNE-2细胞凋亡情况,Transwell法检测不同浓度GSK525762A处理48、96 h后的CNE-2细胞侵袭能力,实时定量PCR检测不同浓度GSK525762A 处理48、96 h后凋亡相关基因的表达情况。结果 GSK525762A对CNE-2细胞增殖有抑制作用,增殖抑制率呈时间和浓度依赖性,差异有统计学意义（P＜0.05）;GSK525762A处理后的细胞早期、晚期及总凋亡率升高,均高于0 μmol／L,凋亡率随浓度升高而增加;穿膜细胞数均少于0 μmol／L,且随浓度升高而降低,以上差异均有统计学意义（P＜0.05）;与0 μmol／L比较,其余各浓度的Bcl-2 mRNA水平降低,Bax mRNA、Bak mRNA水平均升高,且各浓度间差异均有统计学意义（P＜0.05）;GSK525762A各浓度处理96 h的凋亡率、穿膜细胞数及凋亡相关基因mRNA均优于48 h（P＜0.05）。结论 BRD4抑制剂GSK525762A对鼻咽癌CNE-2细胞增殖有毒性作用,可诱导CNE-2细胞凋亡,恢复凋亡相关基因的表达,并降低细胞的侵袭能力。