miR-219在新生SD大鼠炎症模型中通过ERK 1/2信号通路促进少突胶质细胞成熟

［］ 目的：建立新生SD大鼠炎症模型,模拟临床中新生儿合并炎症而导致的脑损伤,初步探究miR-219促进大脑少突胶质细胞成熟的机制,为进一步探讨新生儿合并炎症而导致的脑损伤发生机制提供参考。方法：采用Western-blot法检测少突胶质细胞成熟标记物MBP和ERK 1/2通路的mRNA转录和蛋白质表达水平,免疫荧光检测大鼠胼胝体少突胶质细胞的数量,并进一步观察ERK 1/2通路特异性抑制剂U0126对miR-219促少突胶质细胞成熟的影响。结果：与对照组相比,在使用miR-219 atagomir降低大鼠脑内miR-219的表达量后,MBP和ERK 1/2蛋白表达明显减少(P〈0.05),荧光结果显示胼胝体出少突胶质细胞数量明显减少。与炎症组相比,在使用miR-219 agomir增加大鼠脑内miR-219的表达量后,MBP和ERK 1/2蛋白表达明显增加(P〈0.05),荧光结果显示胼胝体出少突胶质细胞数量明显增加;使用ERK 1/2抑制剂U0126预处理后,MBP的表达明显减少(P〈0.05)。结论：在大鼠脑内miR-219对少突胶质细胞的促成熟作用是部分通过调控ERK 1/2通路活性发生的。     

ERK1/2信号转导通路对骨髓基质细胞条件培养液诱导大鼠中脑神经干细胞分化作用的影响

目的：探讨ERKl／2信号转导通路在骨髓基质细胞条件培养液（BMSCs-CM）诱导大鼠中脑神经干细胞（NSCs）分化中的作用。方法：将神经干细胞球种植于预先包被多聚赖氨酸的35mm的培养皿中,神经干细胞球约30min后贴壁,自然分化组将培养液换为含2％B27的neurobasal培养液,对照组换为BMSCs-CM,抑制剂组将培养液换为含有信号转导通路抑制剂PD98059（5μmol／L）的BMSCs-CM,7d后采用免疫荧光染色方法观察NSCs后代细胞中神经元和星形胶质细胞的数量比例与形态差别。结果：用成年大鼠BMSCs-CM体外培养新生大鼠中脑NSCs,自然分化组NSCs分化的神经元为（15．7±10．3）％[低于对照组的（51．17±10．30）％,P〈0.05],星形胶质细胞为（66．9±14.8）％[明显高于对照组的（23．26±5．60）％,P〈O．05]。而抑制剂组神经元所占比例为（39．48±7．29）％[明显低于对照组,P％0．01],星形胶质细胞的比例为（31．01±8．96）％[明显高于对照组,P％0．01]。结论：BMSCs-CM可以提高神经干细胞分化为神经元的比例,并且同时降低了其分化为星形胶质细胞的比例,这两种作用很可能是通过ERKl／2信号转导通路实现的。     

TNF-α对离体培养的少突胶质细胞和髓鞘生长的影响

目的探讨肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)对离体培养的少突胶质细胞及髓鞘的病理作用及己酮可可碱(Trental)抗TNF-α的作用靶点.方法采用体外器官型组织培养Wistar 大鼠小脑组织及免疫细胞化学方法, 观察髓鞘生长及表达2′3′- 环核苷酸3′- 磷酸二酯酶(2′3′-cyclic nucleotide,3′-phosphodiesterase,CNPase)阳性的少突胶质细胞数.结果 TNF-α及TNF-α Trental 组髓鞘形成率明显低于正常对照组(P<0.05),TNF-α和TNF-α Trental组CNPase 阳性细胞数明显较对照组少(P<0.01).结论 TNF-α在体外能抑制少突胶质细胞及髓鞘的生长,Trental在体外没有促髓鞘再生作用.     

基于PGC-1α/Irisin/Ucp1通路的静力性训练改善骨骼肌减少症研究进展

基于线粒体功能紊乱与骨骼肌减少症、PGC-lα表达与线粒体功能紊乱之间的密切关系,从PGC-1α/Irisin/Ucp1通路角度阐述静力性训练改善骨骼肌减少症的作用机制研究进展。静力性训练可以诱导肌肉PGC-1α蛋白表达、促进FNDC5分解,将鸢尾素(Irisin)释放到血液中,改善线粒体功能、提高线粒体中ATP含量,辅助Ucp1在棕色脂肪和肌肉中的表达,从而降低白色脂肪含量、增加肌肉组织含量,达到抑制骨骼肌萎缩的效果。     

白藜芦醇通过Mst1/Sirt3信号通路介导的细胞自噬改善糖尿病心肌损伤的机制研究

目的:观察白藜芦醇(Resveratrol)对2型糖尿病模型小鼠心肌细胞损伤及其对Mst1/Sirt3信号通路介导的细胞自噬的影响.方法:C57BL/KSJ db/db小鼠随机分为小鼠模型组、Resveratrol组及西药组,C57BL/KSJ db/m为空白对照组,每组10只.Resveratrol组和西药组分别给予...     

尼克酰胺通过SIRT1/PGC-1α/HIF2α信号途径介导白血病细胞HL-60糖酵解代谢的作用及机制

目的:探讨尼克酰胺对人慢性髓系白血病细胞HL-60糖酵解代谢途径的影响,以及SIRT1/PGC-1α/HIF2α信号通路在上述过程中的作用。方法:HL-60细胞培养,葡萄糖消耗实验检测白血病细胞糖酵解活性;流式细胞术检测细胞凋亡,RT-PCR和Western Blot方法检测SIRT1、PGC-1α、HIF2α基因的表达。结果:尼克酰胺能明显抑制白血病细胞HL-60的糖酵解活性和诱导细胞凋亡,此作用呈时间依赖性和浓度依赖性。SIRT1、PGC-1α和HIF2α基因在白血病细胞HL-60均有基础表达,10μmol/L尼克酰胺对HL-60细胞干预24 h后,3个基因的mRNA和蛋白表达水平均明显下调(P<0.05)。结论:尼克酰胺能抑制白血病细胞HL-60的糖酵解活性,诱导细胞凋亡,其机制可能与尼克酰胺调节的SIRT1/PGC-1α/HIF2α信号通路有关。     

微RNA-219通过ERK 1/2通路改善炎症所致新生SD大鼠脑内少突胶质细胞成熟障碍

目的 建立新生SD大鼠炎症模型,初步探究微RNA-219(miR-219)促进少突胶质细胞成熟的机制。方法 将60只SD大鼠随机分为对照组、脂多糖（LPS）组（LPS 0.15 mg/kg腹腔注射）、LPS+miR-219 agomir组（LPS 0.15 mg/kg腹腔注射,miR-219 agomir 3μL侧脑室注射）、miR-219 antagomir组（miR-219 antagomir 3μL侧脑室注射）和LPS+miR-219 agomir+U0126组（LPS 0.15 mg/kg腹腔注射,miR-219 agomir 3μL侧脑室注射,U012630 mg/kg腹腔注射）。于大鼠出生第7天和第14天处死后取脑组织,采用qPCR检测脑组织中miR-219及炎症因子IL-1β、TNF-α的mRNA表达水平,蛋白质印迹法检测少突胶质细胞成熟标志物髓鞘碱性磷脂蛋白（MBP）和ERK1/2表达水平,免疫荧光检测大鼠胼胝体少突胶质细胞的数量。结果 与对照组相比,大鼠腹腔注射LPS后脑组织内IL-1β、TNF-α mRNA表达均升高（P<0.01）,miR-219表达减少（P...     

激活PI3K/Akt信号通路抗少突胶质细胞凋亡的研究

目的探讨在脑室周围白质软化的早产大鼠中,脑组织PI3K/Akt通路的磷酸化激活情况,以及神经生长因子是否有抗少突胶质细胞凋亡的作用。方法本实验研究在早产大鼠脑室周围白质软化后,脑组织中少突胶质细胞的凋亡情况。给予神经生长因子,比较脑组织中Akt磷酸化激活情况及相应少突胶质细胞凋亡改变。结果早产大鼠脑损伤后,脑组织中少突胶质细胞凋亡急剧增加,给予神经生长因子后,脑组织中Akt磷酸化激活明显增加,相应少突胶质细胞凋亡明显减少。结论神经生长因子对脑损伤的保护机制与其增强PI3K/Akt信号转导通路的激活有关,激活PI3K/Akt信号转导通路可防治脑损伤刺激后的少突胶质细胞的凋亡。     

髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体相关疾病和抗N-甲基-D-天冬氨酸受体脑炎重叠综合征1例

本文报道1例髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体相关疾病(MOGAD)和抗N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)脑炎重叠综合征(MNOS)患者, 女, 39岁, 以单侧顶枕颞叶皮质受累为主, 主要表现为头痛、癫痫、认知功能异常、偏侧肢体麻木无力, 头颅MRI 可见右侧顶枕颞叶皮质T2WI及FLAIR序列信号增高, 脑脊液、血清抗髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)抗体阳性, 脑脊液抗NMDAR抗体阳性。急性期予以糖皮质激素、吗替麦考酚酯、丙戊酸钠治疗后该患者症状好转, 同时出院后予以免疫维持治疗, 随访8个月未复发, 提示对于怀疑自身免疫性脑炎(AE)或MOGAD患者, 若合并脱髓鞘病变或癫痫症状, 应考虑存在其叠加综合征可能, 明确应采用免疫治疗并长期维持。     

半枝莲总黄酮通过Smad4/PKM2/HIF-1α改善高糖诱导的足细胞损伤的机制研究

目的：观察半枝莲总黄酮（TF-SB）对高糖诱导的足细胞（MPC-5）损伤及Smad4/PKM2/HIF-1α信号通路的影响。方法：首先采用CCK8法分析TF-SB对MPC-5细胞的安全性及药效浓度。随后MPC-5分为空白组、模型组和TF-SB组,除空白组外,模型组和TF-SB组采用高糖诱导建立MPC-5细胞损伤模型,分别检测TF-SB对MPC-5细胞ATP、凋亡和ROS水平的影响,并采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定细胞因子（IL-1β、TNF-α、MCP-1）含量,反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测糖酵解基因（GLU1、PFK1和HK1）表达丰度,蛋白质印迹法（Western blot）检测各组细胞Smad4/PKM2/HIF-1α信号通路中相关蛋白的表达水平;结果：与空白组相比,模型组MPC-5细胞ATP含量、GLU1、PKF1和HK1表达丰度显著下降,凋亡和ROS水平、IL-1β、TNF-α与MCP-1的含量均显著增加（P<0.01）;与模型组相比,TF-SB组ATP含量、GLU1、PKF1和HK1表达丰度显著升高,凋亡和ROS水平、IL-1β、TNF-α与MCP-...     

片仔癀通过抑制TLR4/MAPK信号通路减轻LPS诱导的BV2小胶质细胞神经炎症损伤研究

目的:研究片仔癀(PZH)对脂多糖(LPS)诱导的BV2 小胶质细胞神经炎症损伤的保护作用及机制.方法:将BV2 小胶质细胞培养于含有10％胎牛血清和1％青霉素-链霉素的RPMI-1640 完全培养基中,并置于5％CO2,37℃培养箱中常规培养.将BV2 小胶质细胞以5×104 个/m L 的密度接种于96 孔板,LP...     

白藜芦醇通过调节海马中小胶质细胞的极化状态改善APP/PS1小鼠的认知功能

目的 探讨白藜芦醇(RSV)对阿尔茨海默病(AD)小鼠认知功能的影响及其机制.方法 共纳入45只9月龄雄性小鼠,其中包括15只野生型(W T)小鼠和30只A PP/PS1转基因AD模型小鼠.实验分为野生型对照组(WT组,n=15),AD模型组(AD组,n=15)和AD RSV治疗组(AD+RSV组,n=15).采用Mo...     

乔松素通过调节HIF-1α/BNIP3信号通路介导细胞自噬减轻缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤

目的：探究乔松素通过调节缺氧诱导因子1α(HIF-1α)/bcl2/腺病毒E1B相互作用蛋白3(BNIP3)信号通路介导细胞自噬减轻缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤的机制。方法：体外培养大鼠心肌细胞H9c2,建立H/R模型后以0、25、50、100、200、300μg/mL乔松素处理24h,采用MTT法检测各处理组细胞活力,筛选出合适的药物作用浓度。将体外培养的H9c2细胞随机分为对照组、模型组、乔松素低剂量组、乔松素高剂量组、HIF-1α siRNA阴性对照组、乔松素高剂量+HIF-1α siRNA组,除对照组外其余各组建立H/R模型,然后以乔松素、HIF-1α siRNA及其阴性对照分组处理后,采用MTT法、流式细胞实验分别检测各组细胞增殖及凋亡;采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）测量各组H9c2细胞炎性因子白细胞介素（IL）-17、IL-1β、IL-18水平;采用试剂盒测量各组H9c2细胞氧化应激因子过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）水平;采用单丹磺酰戊二胺（MDC）荧光染色法检测各组H9c2细胞自噬体的形成;采用免疫印迹法...     

6-姜酚通过调节Wnt/β-catenin信号通路对Aβ诱导的AD大鼠细胞凋亡、氧化应激和神经炎症的影响

目的 探究6-姜酚通过调节Wnt/β-catenin信号通路对β-淀粉样蛋白(Aβ)诱导的阿尔茨海默病(AD)大鼠细胞凋亡、氧化应激和神经炎症的影响.方法 通过在大鼠双侧大脑的海马体注射Aβ构建AD大鼠模型.大鼠被随机分为6组:对照组、模型组、低剂量6-姜酚组(50 mg/kg)、中剂量6-姜酚组(75 mg/kg)、...     

三焦针法通过激活SDF-1α/CXCR4通路对快速老化模型小鼠学习和记忆能力的改善作用

探讨三焦针法对快速老化模型（SAMP8）小鼠神经功能和基质细胞衍生因子1α/趋化因子受体4（SDF-1α/CXCR4）通路的改善作用,探讨三焦针法在SAMP8小鼠中的作用机制。     

柚皮素通过激活mTOR/p70S6K信号通路减轻胰岛素抵抗 并改善H2O2诱导的SH-SY5Y细胞氧化应激损伤

目的：观察柚皮素（naringenin,NAR）对H2O2诱导的SH-SY5Y细胞氧化应激损伤的影响,并探索其机制。方法：通过CCK-8检测细胞存活率,筛选出H2O2的半数致死浓度,用该浓度H2O2同时加入20、40、80 μmol/L柚皮素处理SH-SY5Y细胞4 h,通过CCK-8检测细胞存活率,选择适宜柚皮素浓度。按所选H2O2和柚皮素浓度进行后续实验。将实验分为3组。control组：细胞不进行任何干预处理;H2O2组：只加入600 μmol/L H2O2;H2O2+NAR组：同时加入600 μmol/L H2O2与40 μmol/L柚皮素。4 h后,通过ANNEXIN V-FITC/PI凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡率,DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧（reactive oxy－gen species,ROS）,Western blot检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）、核糖体蛋白S6激酶（p70 ribosomal S6 kinase,p70S6K）,以及各自磷酸化形式蛋白[p-mTOR（Ser2448）、p-p70S6K（Thr389）],用胰岛素受体底物-1（insulin receptor substrate 1,IRS1）及其丝氨酸636+639位点磷酸化[p-IRS1（Ser636+Ser639）]蛋白的表达来观察胰岛素抵抗（insulin re－sistance,IR）。结果：H2O2降低SH-SY5Y细胞的存活率,呈剂量依赖性,600 μmol/L浓度为半数致死剂量。柚皮素明显降低了H2O2诱导的SH-SY5Y细胞死亡,最适剂量为40 μmol/L。与control组比,H2O2明显增加了细胞凋亡率、胞内ROS的产生,降低了p-mTOR（Ser2448）、p-p70S6K（Thr389）的表达,增加了p-IRS1（Ser636+Ser639）蛋白的表达（P<0.05）;加入柚皮素后,相对于H2O2组,上述作用明显减弱（P<0.05）。结论：在体外氧化应激模型中,柚皮素能明显降低细胞内ROS的积累,提高细胞的存活率。其机制可能与激活mTOR/p70S6K信号通路、改善IR有关。