适度缺血再灌注诱导大鼠骨骼肌碱性成纤维细胞生长因子受体的表达

已有研究证实[1,2 ] 严重创伤将导致骨骼肌内源性碱性成纤维细胞生长因子 (ｂＦＧＦ)蛋白含量减少和基因表达下调 ,但对其相应受体却缺乏了解。为此 ,作者利用同一模型 ,观察了不同致伤条件和不同致伤时间对骨骼肌ｂＦＧＦ受体定位表达与含量的影响 ,为进一步研究ｂＦＧＦ对骨骼肌的自分泌作用提供理论根据。一、材料和方法1.致伤模型与标本采集 :健康成年雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠 16只 ,体重 2 0 0～ 2 5 0ｇ。分为正常对照、缺血 4ｈ即刻、缺血 4ｈ加再灌注 6ｈ和 2 4ｈ 4个组。详见文献 [1,2 ]。2 .ｂＦＧＦ受体与ｂＦＧＦ蛋白在正常和受创…     

bFGF mRNA在穿孔鼓膜的表达及意义

目的 研究鼓膜穿孔后成纤维细胞生长因子表达的可能变化特征与规律,探讨成纤维细胞生长因子在鼓膜穿孔修复过程中的作用。方法①选择１２０只健康Ｗｉｓｔａｒ大鼠,随机分为６个序列组,分别为正常对照组,损伤后１、４、６、８、１０ ｄ组,每组动物２０只。③ＲＴ－ＰＣＲ和原位杂交方法检测 ｂＦＧＦ ｍＲＮＡ在鼓膜的表达。结果①原位杂交方法检测 ｂＦＧＦ ｍＲＮＡ的表达,定位于上皮下结缔组织层,且急性穿孔组有时效性。②ＲＴ－ＰＣＲ方法检测鼓膜穿孔后 ｂＦＧＦ ｍＲＮＡ的表达规律,同样具有明显时效性。③ｂＦＧＦｍＲＮＡ的积分光密度值急性穿孔组与正常对照组ｂＦＧＦ ｍＲＮＡ的表达量差异有显著性（Ｐ＜０．００１）。结论①ｂＦＧＦ ｍＲＮＡ在急性穿孔后的鼓膜上有明显表达,表明其在急性穿孔鼓膜的愈合过程中可能意义重大。②ｂＦＧＦ ｍＲＮＡ在急性穿孔后鼓膜上的表达具有时序性,为医疗干预时机的选择提供了时间上的可能依据。     

脑缺血再灌流后大鼠海马脑源性神经营养因子和睫状神经营养因子mRNA的表达

目的：观察大鼠脑缺血再灌流损伤后脑源性神经营养因子（ＢＤＮＦ）和睫状神经营养因子（ＣＮＴＦ）ｍＲＮＡ在海马中的分布及其表达。方法：大鼠颈总动脉夹闭造成脑缺血３０ｍｉｎ，于６，１２，２４，７２ｈ进行点杂交和原位杂交，７２ｈ时进行神经元尼氏小体染色。结果：脑缺血后，海马ＣＡ１区神经元大量死亡，ＢＤＮＦｍＲＮＡ表达于６ｈ开始增加，７２ｈ恢复正常。２４ｈ时齿状回ＢＤＮＦｍＲＮＡ表达高于ＣＡ１区。ＣＮＴＦｍＲＮＡ表达于１２ｈ开始持续增加。结论：脑缺血再灌流损伤后，海马ＢＤＮＦｍＲ－ＮＡ和ＣＮＴＦｍＲＮＡ的表达均增加。ＢＤＮＦ可能有利于齿状回神经元耐受缺血，ＣＮＴＦ可能在局部发挥神经营养作用     

表皮生长因子对肾缺血再灌流修复的影响

探讨肾缺血再灌流损伤修复过程中颌下腺、胰腺、肾脏产生的表皮生长因子（ＥＧＦ）的作用及作用机制。方法选用大鼠右肾切除、左肾缺血６０ｍｉｎ继之再灌流不同时间模型,观察颌下腺切除后对肾功能和形态恢复的影响。用免疫组化和ＷｅｓｔｅｒｍＢｌｏｔ方法观察肾缺血再灌流损伤修复过程中肾组织增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）,胰腺、颌下腺、肾脏和血清ＥＧＦ以及肾组织ＥＧＦ受体（ＥＧＦＲ）表达的变化。结果颌下腺切除后,损伤后的肾功能和肾组织形态结构恢复到正常的时间明显延长。ＰＣＮＡ免疫组化显示,６０ｍｉｎ肾缺血再灌流２４ｈ出现再生,再灌流３ｄ再生修复达到高峰,再灌流７ｄ基本消失。与此相对应,颌下腺、胰腺在再灌流１、３ｄ时ＥＧＦ表达明显增强,血清ＥＧＦ含量增多,肾组织ＥＧＦＲ表达明显增强;再灌流７ｄ时,颌下腺、胰腺ＥＧＦ表达、血清ＥＧＦ含量及肾组织ＥＧＦＲ表达均基本恢复正常。结论颌下腺、胰腺所产生的ＥＧＦ在损伤后肾小管上皮的修复中可能起重要作用,ＥＧＦ可能通过ＥＧＦＲ介导机制促进损伤肾小管上皮的修复     

胚胎脊髓移植对脊髓内源性NGF影响的实验观察

目的：观察胚胎脊髓移植后，脊髓内源性神经生长因子（ＮＧＦ）ｍＲＮＡ的表达及ＮＧＦ多肽的合成。方法：采用分子生物学和免疫组化方法。结果：胚胎脊髓移植可以促进和在一定时间内增加损伤脊髓内ＮＧＦ ｍＲＮＡ的表达和ＮＧＦ多肽的合成；胚胎脊髓植入后早期能在宿主脊髓内表达和合成ＮＧＦ；损伤和移植条件下，ＮＧＦｍＲＮＡ的表达与合成主要在脊髓前角神经元。结论：内源性ＮＧＦ在移植后的损伤脊髓中可能对再生轴突起重要地     

五种生长因子mRNA在兔角膜中的表达

目的 了解ＥＧＦ、ＴＧＦ－α、ｂＦＧＦ、ＴＧＦ－β１和ＰＤＧＦ在兔角膜上皮和基质中的表达情况,探讨其在角膜伤口愈合中的作用。方法 应用原位核酸分子杂交方法检测兔角膜上皮和基质中ＥＧＦ、ＴＧＦ－α、ｂＦＧＦ、ＴＧＦ－β１和ＰＤＧＦ ｍＲＮＡＲ的表达。结果 ＥＧＦ、ＴＧＦ－α和ＰＤＧＦ ｍＲＮＡ仅在正常角膜上此细胞层表达,基质中未见表达;ｂＦＧＦ和ＴＧＦ－β１ ｍＲＮＡ在正常角膜伤口和基质中均有表达。     

三种骨骼肌纤维中碱性成纤维细胞生长因子基因表达的特征

目的 研究碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）基因，ｂＦＧＦ蛋白及其受体在大鼠骨骼肌纤维的表达与分布规律，方法 采用肌纤维特殊染色，免疫组织化学，原位杂交以及受体检测等方法。研究ｂＦＧＦ基因ｂＦＧＦ蛋白及其受体大鼠后肢腓肠肌的分布。结果 根据特殊染色，大鼠后肢腓肠肌纤维可以分成Ｉ，Ⅱａ和Ⅱｂ三种类型，ｂＦＧＦ基因的阳性驻见于Ｉ型与Ⅱａ型纤维胞浆，ｂＦＧＦ蛋白及其受 的分布也仅见于Ｉ型与Ⅱａ型纤维细胞     

肠缺血——再灌流大鼠肠源性细胞因子TNFα和IL—6表达的变化及其机制

目的：观察肠缺血－－再灌流过程中肠源性ＩＮＦα和ＩＬ－６表达的规律并探讨介导肠源性细胞因子表达的因素。方法：采用ＲＴ－ＰＣＲ和ＲＩＡ的方法检测了肠缺血－－再灌流过程中小肠组织ＴＮＦα和ＩＬ６ｍＲＮＡ表达及其蛋白含量的变化,并测定组织丙二醛（ＤＭＡ）含量及肠静脉血浆ＬＰＳ浓度。结果：正常情况下小肠ＴＮＦα和ＩＬ－６ｍＲＮＡ令有少量表达,肠缺血１ｈ￣１．５ｈ,表达已开始增加,再灌流０．５￣１ｈ,表达至     

脑缺血再灌流后大鼠海马脑源性神经营养因子和睫状神经营养因子 mRNA的表达

目的：观察大鼠脑缺血再灌流损伤后脑源性神经营养因子（ＢＤＮＦ）和睫状神经营养因子（ＣＮＴＦ）ｍＲＮＡ在海马中的分布及其表达。方法：大鼠颈总动脉夹闭造成脑缺血３０ｍｉｎ，于６，１２，２４，７２ｈ进行点杂交和原位杂交，７２ｈ时进行神经元尼氏小体染色。结果：脑缺血后，海马ＣＡＩ区神经元大量死亡，ＢＤＮＦｍＲＮＡ表达于６ｈ开始增加，７２ｈ恢复正常。２４ｈ时齿状回ＢＤＮＦｍＲＮＡ和ＣＮＴＦｍＲＮＡ的表达均增     

表皮生长因子对肾缺血再灌流修复的影响

目的 探讨肾缺血再灌流损伤修复过程中颌下腺、胰腺、肾脏产生的表皮生长因子（ＥＧＦ）的作用及作用机制。方法 选用大鼠右肾切除、左肾缺血６０ｍｉｎ继之再灌流不同时间模型，观察颌下腺切除后对肾功能和形态恢复的影响。用免疫组化和Ｗｅｓｔｅｒｍ Ｂｌｏｔ方法观察肾缺血再灌流损伤修复过程中肾组织增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ），胰腺、颌下腺、肾脏和血清ＥＧＦ以及肾组织ＥＧＦ受体（ＥＧＦＲ）表达的变化。结果 颌下腺切     

碱性成纤维细胞生长因子在糖尿病大鼠视网膜病变中的表达

目的 :探讨碱性成纤维细胞生长因子 ( b FGF)在糖尿病大鼠视网膜中的表达情况。方法 :建立糖尿病大鼠动物模型后 1、3、5个月进行视网膜石蜡切片的原位杂交及免疫组化实验。结果 :b FGFm RNA从 3个月开始有表达 ( 78% ) ,5个月时增加至 89% ,b FGF蛋白质也从 3个月开始有表达 ( 5 6% ) ,5个月时增至 89%。结论 :b FGF在糖尿病大鼠背景期的视网膜病变中有表达     

补阳还五汤对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织ET-1基因表达的影响

目的 :观察补阳还五汤对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织 ET- 1基因表达的影响 ,探讨其对脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法 :采用线栓法制成大鼠 MCAO再灌注模型 ,并用地高辛精标记 ET- 1基因进行原位杂交。结果 :补阳还五汤治疗组缺血再灌注侧皮层及尾状核 ET- 1基因表达显著低于生理盐水对照组 (P<0 .0 5 ) ,两组大鼠缺血再灌注侧皮层和尾状核 ET- 1基因表达均显著高于健侧相应脑区 (P<0 .0 5 ,P<0 .0 1)。结论 :脑缺血再灌注可以诱导脑组织 ET- 1基因的异常表达 ,从而进一步加重脑损伤 ,补阳还五汤可在一定程度上下调脑缺血诱导的ET- 1基因的表达 ,可能是其防治缺血性脑血管病的主要作用机制之一。     

bFGF预处理对Iso致大鼠心肌损伤及Fas/FasL系统的影响

目的：研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对异丙基肾上腺素(Isoprenaline，Iso)致大鼠心肌损伤心肌细胞凋亡及Fas／FasL系统的影响。方法：将Wistar雄性大白鼠随机分成三组：对照组、Iso损伤纽、bFGF预处理组，光镜观察心肌组织的病理变化，TUNEL法检测心肌细胞凋亡，免疫组化和原位杂交方法检测Fas、FasL、Caspase-3蛋白及mRNA的表达水平。结果：Iso损伤组心肌坏死较重，有显著心肌细胞凋亡，且Fas、FasL、Caspase-3基因mRNA及蛋白表达水平明显上调，bFGF预处理组心肌坏死明显减轻，凋亡细胞数减少，Fas、FasL、Caspase-3基因mRNA及蛋白表达水平明显下调。结论：bFGF可通过抑制Fas、FasL、Caspase-3的蛋白及mRNA表达，减少心肌细胞凋亡而减轻保护大鼠的心肌损伤。     

成纤维细胞生长因子10 mRNA在寻常型银屑病皮损中的表达

目的:研究成纤维细胞生长因子10 mRNA在寻常型银屑病皮损中的表达,探讨其在银屑病发病中的作用机制.方法:应用原位杂交法检测FGF10 mRNA在22例正常皮肤组织、银屑病皮损和未受累皮肤中的表达和分布.结果:原位杂交法检测发现,在22例正常皮肤组织、银屑病皮损和未受累皮肤表皮的全层或表皮中下层可见FGF10 mRNA表达(95%);在正常皮肤表皮的基底层或少量细胞内可见FGF10 mRNA的表达(5%);在寻常型银屑病非皮损表皮的中下层或个别细胞内可见FGF10 mRNA的表达(82%).寻常型银屑病皮损表皮中FGF10 mRNA的表达明显高于正常对照组(P＜0.05).结论:FGF10 mRNA在银屑病发病早期阶段的表达增高可能与银屑病的早期发病有关.     

显微外科技术在腹主动脉瘤动物模型制作中的应用

目的:研究提高腹主动脉瘤(AAA)动物模型制作成功率的方法.方法:Wistar大鼠40只,分成2组,分别按传统方法和改进后的方法制成腹主动脉瘤模型,并通过弹力纤维和胶原纤维的特殊染色、CD68免疫组织化学染色观察动脉壁的损伤、炎性细胞浸润程度;通过基质金属蛋白酶(MMP-2)原位分子杂交,观察内生性弹力酶的mRNA表达,并比较两种方法的优劣.结果:方法改进组的动物模型成功率为90%;CD68的免疫组化染色阳性细胞明显多于对照组,MMP-2的mRNA阳性表达水平亦较高.结论:充分运用显微外科技术对腹主动脉瘤动物模型的制作方法加以改进,可提高成功率;保证灌注液具有一定的浓度对模型制作成功亦具有重要作用.     

The expression of TRPA1 mRNA in the rat brain

Objective： To investigate the distribution of TRPA1 （one kind of the TRP-like ion channel family） channel in the hippocampus and cerebral cortex of rat. Methods： RT-PCR was used to amplify the fragment of TRPA1 in the DRG （dorsal root ganglion）, hippocampus and cerebral cortex of adult SD rat. In situ hybridization staining was used to show the distribution of TRPA1 mRNA in the hippocampus and cerebral cortex of adult rat brain. Results： Both RT-PCR and in situ hybridization staining showed that TRPA1 mRNA was expressed in hippocampus and cerebral cortex of the adult rat brain. Conclusion： Our results suggest that there is expression of TRPA1 mRNA both in the hippocampus and cerebral cortex of the adult rat brain.     

bFGF mRNA的转录与喉粘膜良性及恶性病变的关系

目的：探讨碱性成纤维细胞生长因子(ｂＦＧ）与喉癌生长、浸润、转移的关系及其可能的作用机制．方法：用原位杂交的方法观察ｂＦＧＦｍＲＮＡ在正常喉粘膜上皮（Ｎ）、慢性非特异性炎症（ＩＦ）、不典型增生（ＤＹＳ）及鳞癌（ＳＣＣ）中的表达．结果：在Ｎ,ＩＦ．ＤＹＳ及ＳＣＣ的间质中均检测到ｂＦＧＦｍＲＮＡ的表达．上皮细胞未见阳性表达．在Ｎ及ＩＦ,阳性反应部位位于血管内皮细胞、成纤维细胞;ＩＦ的阳性反应略有提高,此外部分炎细胞也见阳性反应;ＤＹＳ及ＳＣＣ中的阳性反应程度较Ｎ及ＩＦ有所增强,尤其是新生血管内皮细胞的阳性率及反应程度明显提高．在ＳＣＣ中,分化差的ｂＦＧＦ表达较分化好的ＳＣＣ阳性反应程度强．结论：ｂＦＧＦ不仅可以促进喉癌新生血管及间质的形成．而且可能参与肿瘤细胞生长．在喉癌中,ｂＦＧＦ以旁分泌生长方式影响肿瘤的生长．     

年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中hTERT的活性表达

目的：探讨hTERT在年龄相关性白内障晶状体上皮细胞（lens epithelial cells,LEC）中的活性表达及在白内障形成中的作用。方法：对40例年龄相关性白内障患者和10例正常LEC中的hTERT进行原位杂交技术检测,并进行比较。结果：年龄相关性白内障LEC中hTERT的阳性表达率明显增高,与正常晶状体组相比,有显著性差异（P〈0.01）。结论：LEC中hTERT活性的变化与年龄相关性白内障的形成密切相关,随着年龄的增长,hTERT的表达活性升高,使LEC发生衰老,从而形成白内障。     

胃腺癌组织中肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体-4的表达

目的:探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体-4(TRAIL-R4)在诱导胃癌细胞凋亡过程中的作用.方法:应用Western blot、RT-PCR、原位杂交和免疫组织化学技术,检测31例正常胃黏膜和胃腺癌组织中TRAIL-附蛋白和mRNA的表达.结果:Western blot结果显示,正常胃黏膜组织中TRAIL-R4蛋白的阳性表达率80.65%,高于其在胃腺癌组织中的阳性表达率6.45%(P＜0.05);免疫组织化学结果显示,正常胃黏膜组织中TRAIL-R4蛋白均有强染色,在胃腺癌组织中染色均为阴性(P＜0.05);RT-PCR结果显示,正常胃黏膜组织中TRAIL-R4 mRNA表达高于胃腺癌组织中的表达(P＜0.05);原位杂交结果显示,正常胃黏膜组织中TRAIL-R4 mRNA染色均为阳性,而在胃腺癌组织中阳性表达率为3.23%(P＜0.05).结论:TRAIL-R4在胃癌组织中的表达缺失是TRAIL特异性诱导肿瘤细胞凋亡的原因之一.