双抑制剂扩散协同法检测两种超广谱β-内酰胺酶

目的 探讨氟氯西林、克拉维酸与超广谱头孢菌素协同法（双报制剂扩散协同法,DIDST）检测AmpCβ－内酰胺酶（AmpC-BLA)和超广谱β－内酰胺酶（ESBLs）的应用价值。方法 氟氯西林和克拉维酸分别作为AmpC-BLA和ESBLs的抑制剂。采用DIDST和双纸片增效试验、双纸片协同试验和头孢西丁三维试验同时检测56株革兰阴性杆菌的AmpCJ-BLA和ESBLs。结果 DIDST检出ESBLs20株（35．71％）、AmpC-BLA12株（21．43％）和ESBLs AmpC-BLA1株（1．78％）;双纸片协同试验中,纸片相距25mm仅检出15株（26．78％）,距离减至20mm,又检出5株,阳性检出率提高8．93％;双纸片增效试验检出ESBLs20株（35．70％）;三维试验检出AmpC-BLA 12株。DIDST与头孢西丁三维试验、双纸片协同试验和双纸片增效试验总符合率达100％。结论 DIDST在一个平板上可同时检测ESBLs和AmpC-BLA,方法准确、简易,适于各级医院推广应用。     

三维试验法检测鲍曼不动杆菌产超广谱β-内酰胺酶和AmpC酶

为了解我院鲍曼不动杆菌对β-内酰胺类抗生素耐药原因,我们采用三维试验法对临床分离的菌株进行超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和AmpC酶检测。     

下呼吸道感染细菌产AmpC酶和超广谱β内酰胺酶的检测

目的：了解临床下呼吸道感染标本常见革兰阴性杆菌分离株中AmpC酶和超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的检出情况。方法：通过酶提取物三维试验检测单产AmpC酶、同时产AmpC酶和ESBLs菌株；采用美国国家临床实验室标准委员会(NC—CLS)表型筛选和确认试验检测单产ESBLs菌株。结果：从临床下呼吸道标本分离对第一、二代及一种以上第三代头孢菌素耐药的226株常见革兰阴性杆菌，包括阴沟肠杆菌、弗劳地枸橼酸杆菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌中，分别检出单产AmpC酶、同时产AmpC酶和ESBLs及单产ESBLs细菌34株、15株、109株，总检出率分别为15．0％、6．6％、48．2％。AmpC酶检出率在阴沟肠杆菌中最高，为57．9％；ESBLs检出率以肺炎克雷伯菌最高，其次为大肠埃希菌，分别为78．5％、77．8％。结论：下呼吸道产AmpC酶和ESBLs细胞感染常见，前以阴沟肠杆菌为主，后多见于肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌。     

多药耐药阴沟肠杆菌超广谱β-内酰胺酶和AmpC酶的检测

目的调查川北医学院附属医院临床分离的多药耐药阴沟肠杆菌（E.cloacae）超广谱β-内酰胺酶（extended-spectrum β-lactamases,ESBLs）、AmpC酶的流行情况。方法随机收集2005～2008年经法国生物梅里埃VITEK-32系统GNI＋卡和GNS132卡鉴定为多药耐药阴沟肠杆菌的不重复菌株30株,同时用纸片扩散法（K-B法）补做氨曲南（AZT）、头孢西丁（FOX）、复方新诺明（SXT）、头孢匹美（FEP）等药敏试验,利用改良三维试验检测ESBLs和AmpC酶。结果 30株多药耐药阴沟肠杆菌产ESBLs的有21株,占70.0%;产AmpC酶的有3株,占10.0%;30株菌均对亚胺培南全敏感,对氨苄西林、头孢西丁100.0%耐药。结论本次试验检测出我院多药耐药阴沟肠杆菌以产ESBLs为主（70%）,产AmpC酶较少（10%）。     

三维试验法检测鲍曼不动杆菌产超广谱β内酰胺酶和AmpC酶

为了解我院鲍曼不动杆菌对β 内酰胺类抗生素耐药原因,我们采用三维试验法对临床分离的菌株进行超广谱β 内酰胺酶(ESBLs)和AmpC酶检测。一、材料和方法1.菌株来源及鉴定　 60株菌株均分离自我院 2000年 6月~2002年 12月住院患者临床标本,分别为痰液 33份、创伤伤口分泌物 13份、烧伤创面分泌物 10份、气管切开口分泌物 2份、中段尿和血液各 1份,采用法国生物梅里埃公司API20NE鉴定菌种。标准菌株为大肠埃希菌(ATCC25922)和铜绿假单胞菌 (ATCC27853);肺炎克雷伯菌(ATCC700603) (产SHV 18型ESBLs)和阴沟肠杆菌(029M) (去阻…     

纸片琼脂扩散法检测AmpC酶的探讨

目的建立一种简便、快速适用于普通临床微生物室的AmpC酶表型检测方法。方法分别采用纸片琼脂扩散法和三维实验检测244株试验菌中产AmpC酶的情况。结果三维实验检测244株试验菌中,产AmpC酶的有67株,产酶率为27.45%(67/244),其中阴沟肠杆菌46.67%(21/45),铜绿假单胞菌35.09%(20/57),嗜麦芽寡养假单胞菌33.33%(2/6),鲁民不动杆菌20.0%(1/5),鲍曼不动杆菌26.83%(11/41),产气肠杆菌28.6%(4/14),大肠埃希菌10.0%(5/50),肺炎克雷伯菌11.54%(3/26)。纸片琼脂扩散法检测产酶率24.59%(60/244),经统计学处理得出两者检测无显著性差异。结论纸片琼脂扩散法是一种简便快速的AmpC酶表型检测方法,易在普通实验室推广。     

产超广谱β内酰胺酶和高产AmpC酶革兰阴性杆菌耐药性检测

目的了解铜陵地区产ESBLs和高产AmpC酶革兰阴性杆菌的耐药性.方法2003年10月至2004年9月铜陵地区临床分离的革兰阴性杆菌270株,用Kirby-Bauer法进行药敏试验,根据NCCLS 2002年判断标准分析结果.结果270株革兰阴性杆菌中检出产ESBLs或（和）高产AmpC酶68株,检出率25.2%,其中单产ESBLs 49株,以肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌中检出率最高,分别为31.6%和31.0%：单产AmpC酶3株,均为阴沟肠杆菌,同时产AmpC酶和ESBLs16株,其中鲍曼不动杆菌8株.产酶株对头孢菌素耐药率明显高于非产酶株,产ESBLs菌株对替卡西林-克拉维酸、头孢哌酮-舒巴坦等含酶抑制剂的抗菌药物耐药率在50%以上,对亚胺培南敏感性好.结论ESBLs和高产AmpC酶是导致革兰阴性杆菌耐药的主要两类酶,产酶株对多种抗菌药物耐药,仅对亚胺培南敏感.     

改良三维试验同时检测阴沟肠杆菌中的AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶

目的研究瑞安市人民医院临床标本分离出的的阴沟肠杆菌产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）情况,以指导临床用药。方法收集瑞安市人民医院2006年1～12月临床标本分离到的96株阴沟肠杆菌,用纸片扩散法对14种抗菌药物进行了药敏试验,用改良三维试验进行持续高产AmpC酶和ESBLs的双重检测。结果96株阴沟肠杆菌中11株（11．5％）高产AmpC酶;2株（2．1％）既持续高产AmpC酶又产ESBLs;40株（41．6％）只产ESBLs;其余43株（44．8％）未发现持续高产AmpC酶或ESBLs。结论使用改良的酶提取物三维试验可同时检测高产AmpC酶和ESBLs菌株,应根据阴沟肠杆菌产生不同的ESBLs来选择性用药。     

双纸片协同法与GNS-506卡法检测超广谱β-内酰胺酶比较

目的比较双纸片协同法与法国生物梅里埃公司VITEK GNS-506药敏分析卡法对肠杆菌科细菌所产超广谱β-内酰酶(Extended-spectrum β-Lactamases,ESBLs)的实用性.方法以头孢他啶、头孢噻肟、氨曲南为指示底物的双纸片协同法和GNS-506卡法同时检测临床分离的125株肠杆菌科细菌的ESBLs产生情况.结果从125株肠杆菌科细菌中用双纸片协同法出49株ESBLs阳性;用GNS-506卡法只从95株大肠埃希菌和克雷伯菌属(肺炎克雷伯菌与产酸克雷伯菌)中检出38株ESBLs阳性.两种方法对大肠埃希菌和克雷伯菌属产ESBLs的检测结果x2检验,P＞0.05,结果无显著差异.结论双纸片协同法检测ESBLs操作方便,结果可靠,成本低,检测范围广,在已具备VITEK系统的实验室可作为GNS-506卡法的监测和补充.在一般的实验室适合常规应用.     

介绍一种同时存在AmpC酶和超广谱β内酰胺酶的检测方法

目的：研究自血培养分离的阴沟肠杆菌的耐药特点，以指导临床用药。方法：收集1997-2000年期间我院住院患血液中分离到的10株阴沟肠杆菌，用纸片扩散法对13种抗菌药物进行了检测，用改良的酶提取物三维试验方法进行持续高产AmpC酶和超广谱β内酰胺酶（ESBLs）的双重检测。结果：10株阴沟肠杆菌中1株持续高产AmpC酶，1株既有持续主产AmpC酶，又产ESBLs；3株只产ESBLs，其余5株未发现持续高产AmpC酶和ESBLs。2株持续高产AmpC酶和3株产ESBLs均对第三代头孢菌素和β内酰胺酶抑制剂的复方制剂等多种抗菌药显示高度耐药。结论：使用改良的酶提取物三维试验可同时检测高产AmpC酶（包括染色体型和质粒型）和ESBLs的菌株。根据阴沟杆菌产生不同的β内酰胺酶选择性用药，治疗高产AmpC酶多耐药菌，使用第三代头孢菌素和酶抑制复方制剂通常导致临床治疗失败，应选用第四代头孢菌素或碳青霉烯类，或两与氨基糖苷类或氟喹诺酮类联合治疗。碳青霉烯类抗生素是惟一对AmpC酶和ESBLs均稳定的β内酰胺类抗生素，可用于治疗产ESBLs菌引起的重症感染。     

改良琼脂纸片扩散法检测AmpC酶的可行性探讨

目的探讨改良琼脂纸片扩散（K—B）法检测AmpC酶的可行性,并分析其与三维确认试验的相关度。方法K—B法按美国国家临床实验室标准委员会（CLSI）规定检测,用头孢西丁敏感试验初筛AmpC酶,头孢西丁耐药再做三维确认试验,改良K—B法检测方法见正文。结果改良K—B法检测AmpC酶与三维确认试验结果基本一致。结论基层医院细菌室检测AmpC酶用改良K—B法可取代三维确认试验及其他确认试验。     

尿培养分离的大肠埃希菌AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的检测及耐药分析

目的对尿培养分离的大肠埃希菌进行AmpC酶和ESBLs检测并分析其耐药机理，以指导临床合理用药。方法采用双纸片抑制协同法分别进行AmpC酶和ESBLs检测。结果110株大肠埃希菌AmpC酶和ESBLs检测率分别为2．7％（3／110）、35．5％（39／110），同时产AmpC酶和ESBLs检测率为1．8％（2／110），产酶菌株对抗生素的耐药率高于不产酶菌株。结论大肠埃希菌对β-内酰胺类抗生素耐药的主要原因是产生AmpC酶和ESBLs，临床经验用药可选碳青酶烯类抗生素。     

肺炎克雷伯菌AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药分析

目的:探讨本地区肺炎克雷伯菌AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的产生情况及其耐药性。方法:收集80株临床分离无重复肺炎克雷伯菌,通过改良三维试验检测肺炎克雷伯菌AmpC酶和ESBLs的产生情况,运用K-B琼脂扩散法进行药物敏感性试验。结果:从80株临床送检标本中分离的肺炎克雷伯菌中检出单产ESBLs25株,单产AmpC酶8株,同时产AmpC酶和ESBLs共4株,检出率分别为31.3%、10.0%和5.0%。单产AmpC酶、ESBLs及同时产AmpC酶和ESBLs对抗生素的耐药率均高于不产酶菌株(除哌拉西林/他巴唑)。结论:产Ampc酶及ESBLs酶的细菌的耐药性不完全相同,产酶类型不同需选用不同类型的抗生素。     

肺炎克雷伯菌超广谱β内酰胺酶及AmpC酶分析研究

目的：研究目前我国肺炎克雷伯菌中超广谱β内酰胺酶(ESBLs)及质粒介导AmpC酶产生情况。方法：以美国国家临床实验室标准委员会(NCCLS)推荐纸片扩散法确证试验检测肺炎克雷伯菌产ESBLs情况。以三维试验检测其产质粒介导AmpC酶情况。等电聚焦电泳测定所产粗酶的等电点。聚合酶链反应(PCR)检测β内酰胺酶亚型。DNA序列测定判断质粒介导AmpC酶的种类。结果：检出产ESBLs肺炎克雷伯菌37株，检出率17．5％(37／212)。三维试验检测出产质粒介导AmpC酶肺炎克雷伯菌2株，检出率0．9％(2／212)，此2株菌均同时产ESBLs。在所产ESBLs中，CTX—M型占83．8％(31／37)，其中CTX-M-1组占54．1％(20／37)，Toho-2组占29．7％(11／37)，CTX-M-1组：Toho-2组为1．8：1；SHV型占24．3％(9／37)。DNA测序结果，1株肺炎克雷伯菌所产质粒介导AmpC酶为DHA-1。结论：①肺炎克雷伯菌中ESBLs以CTX-M型为主。②在肺炎克雷伯菌中发现1株质粒介导AmpC酶为DHA-1。     

大肠埃希菌AmpC酶、超广谱β-内酰胺酶检测及耐药性分析

目的检测大肠埃希菌AmpC酶和超广谱β内酰胺酶(ESBLs),并分析其耐药性,以指导临床合理用药。方法采用改良三维试验法,分别进行AmpC酶和ESBLs测定。结果300株大肠埃希菌AmpC酶、ESBLs检出率分别为3.7%(11/300)、24.7%(74/300),其中同时产AmpC酶和ESBLs菌株检出率为2.3%(7/300)。产酶菌株对17种抗生素(除亚胺培南全部敏感外)的耐药率均高于平均水平。结论大肠埃希菌对β内酰胺类抗生素耐药的主要原因是产生AmpC酶和ESBLs,对产酶菌株临床经验用药可选用碳青霉烯类抗生素。     

大肠埃希菌AmpC酶、超广谱β-内酰胺酶检测及耐药性分析

目的 检测大肠埃希菌AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),并分析其耐药性,以指导临床合理用药。方法 采用改良三维试验法,分别进行AmpC酶和ESBLs测定。结果 300株大肠埃希菌AmpC酶、ESBLs检出率分别为3．7％(11／300)、24．7％(74／300),其中同时产AmpC酶和ESBLs菌株检出率为2．3％(7／300)。产酶菌株对17种抗生素(除亚胺培南全部敏感外)的耐药率均高于平均水平。结论 大肠埃希菌对β-内酰胺类抗生素耐药的主要原因是产生AmpC酶和ESBLs,对产酶菌株临床经验用药可选用碳青霉烯类抗生素。     

多剂量协同法检测AmpCβ-内酰胺酶

目的　建立一种简便有效的检测AmpCβ 内酰胺酶的方法。 方法　以邻氯西林作为AmpCβ 内酰胺酶的抑制剂 ,采用多剂量协同法检测 14株肠杆菌科细菌中的AmpC并作分型 ,用双纸片确证法和纸片协同法检测超广谱 β 内酰胺酶 (ESBL)。同时用亚胺培南作诱导试验 ,用琼脂稀释法测定诱导前后细菌对 4种抗生素的MIC。结果　 14株菌中有 3株产持续高产型AmpCβ 内酰胺酶 ,7株产诱导高产型AmpCβ 内酰胺酶 ;6株产ESBL。产诱导高产型AmpCβ 内酰胺酶细菌诱导前后MIC变化较大 ,而产持续高产型AmpCβ 内酰胺酶细菌诱导前后MIC变化不大。结论　多剂量协同法方法简便 ,成本低廉 ,可作为临床微生物实验室对产AmpCβ 内酰胺酶的革兰阴性细菌的初步检测方法     

革兰阴性杆菌产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药性分析

目的:了解革兰阴性杆菌产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况及其耐药特征,为临床合理用药提供参考依据.方法:采用VITEK-32系统鉴定细菌;K-B法测定细菌对抗菌药物的敏感性;标准纸片扩散法检测ESBLs;三维试验法检测AmpC酶.结果:在650株革兰阴性杆菌中,检出单产AmpC酶、单产ESBLs及同时产AmpC酶和ESBLs细菌分别为101株、212株和26株,总检出率分别为15.5%、32.6%、4.0%,其中阴沟肠杆菌AmpC酶检出率最高,为54.5%,肺炎克雷伯菌ESBLs检出率最高,为56.7%.产酶菌株对前三代头孢菌素、磺胺类药物、单环类抗生素氨曲南及含酶抑制剂复合制剂均高度耐药,其耐药率均高于80%,但对亚胺培南和头孢吡肟仍保持高度敏感性,其耐药率分别为0%和20%左右,另外对环丙沙星和阿米卡星亦有一定的敏感性.产酶菌株耐药率明显比非产酶菌株高.结论:革兰阴性杆菌产ESBLs和AmpC酶的状况已十分突出,其多重耐药机制严重影响各类抗菌药物的治疗,给临床抗感染治疗带来很大困难.及时、准确的检测AmpC酶与ESBLs菌株,为临床提供细菌的耐药分析,指导临床合理应用抗生素,延缓耐药的产生,控制耐药株传播等具有十分重要的意义.     

双纸片协同法与GNS—506卡法检测超广谱β—内酰胺酶比较

目的：比较双纸片协同法与法国生物酶里埃公司VTEK GNS－506药敏分析卡法对肠杆菌科细菌所产超广谱β-内酰胺酶（Extended-spectrum β-Lactamases,ESBLs）的实用性。方法：以头孢他啶、头孢噻肟、氨曲南为指示底物的双纸片协同法和GNS－506卡法同时检测临床分离的125株肠杆菌科细菌的ESBLs的产生情况。结果：从125株肠杆菌科细菌中用双纸片协同法出49株ESBLs阳性;用GNS－506卡法只从95株大肠埃希菌和克雷伯菌属（肺炎克轩伯菌与产酸克雷伯菌）中检出38株ESBLs阳性,两种方法对大肠埃希菌和克雷伯菌属产ESBLs的检测结果X^2检验,P＞0．05,结果无显著差异,结论双纸片协同法检测ESBLs操作方便,结果可靠,成本低,检测范围广,在已具备VITEK系统的实验室可作为GNS－506卡法的监测和补充,在一般的实验室适合常规应用。     

济南地区革兰阴性杆菌产AmpC酶和超广谱β内酰胺酶的现状及药敏检测

目的：了解济南地区耐第三代头泡菌素的革兰阴性杆菌中AmpC酶和超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的状况，并对18种抗菌药物作药敏试验，比较产酶菌与非产酶菌对18种抗菌药物的耐药率。为临床治疗产酶菌引起的感染提供理论依据。方法：应用头泡西丁三维试验检测AnpC酶。应用美国国家临床实验室标准委员会(NCCLS)推荐的纸片扩散确证法检测ES-BLs。以K—B琼脂扩散法做药敏试验。对AmpC阳性进行质粒接合试验。结果：在受检的250株革兰阴性杆菌中，53株(21．2％)产AmpC酶，98株(39．2％)产ESBLs，6株(2．4％)同时高产AmpC ESBLs酶。53株AmpC酶阳性菌中，6株临床分离菌的耐药质粒接合转移成功。产酶菌对头孢吡肟、亚胺培南和阿米卡星耐药率低。在7种喹诺酮类抗菌药物中，左氧氟沙星及加替沙星的耐药率较其他喹诺酮类低。结论：济南地区革兰阴性杆菌耐药性的产生，是由于细菌产生AnpC酶和ES-BLs引起的，以ESBLs为主。AmpC酶既可以染色体介导也可以质粒介导，以染色体介导为主。治疗产2种β内酰胺酶的细菌引起的感染亚胺培南为首选，头孢吡肟、左氧氟沙星、加替沙星和阿米卡星可作为选用药物之一。