干细胞构建组织工程皮肤的研究进展

组织工程学是近年来细胞生物学、工程材料学和临床医学交叉发展起来的一门新兴学科。组织工程学最基本的思路是在体外将分离的种子细胞接种到具有一定空间结构的载体支架上,通过细胞与细胞之间的相互作用形成具有一定结构功能的组织或器官。从组织工程学的观点来看,人工皮肤主要有三类：①表皮替代物,即培养表皮片;②真皮替代物,即胶原凝胶、胶原海绵合成膜、     

皮肤组织工程研究进展

组织工程学是近年来发展起来的一门新兴学科 ,现就皮肤组织工程的研究作一简要概述 :早在 195 1年 ,就有学者建议用实验室生长的皮肤来治疗烧伤病人[1] ,但由于表皮细胞培养困难 ,此方法未能实施。直到 1975年Ｒｈｅｉｎｗａｌｄ和Ｇｒｅｅｎ[2 ] 攻克了体外大规模培养表皮细胞的难题 ,皮肤替代物的研究和制作才日渐广泛。皮肤替代物可分为 :表皮替代物、真皮替代物和复合皮肤替代物。一、表皮替代物1.表皮细胞悬液 :Ｂｉｌｌｉｎｇｈａｍ等[3 ] 首先用培养的表皮细胞悬液治疗大面积全厚皮肤缺损 ,但该方法存在两大难题 :一是无法确定转移到…     

组织工程化皮肤研究新进展

组织工程化皮肤是指运用工程及生命科学的原理和方法构建出的用于修复、维持和改善损伤皮肤组织功能的替代物 ;其核心是建立由细胞和生物材料构成的三维空间复合体。理论上 ,组织工程化皮肤应具有如下功能 :①作为损伤皮肤的替代物 ;②作为基质植入宿主体内并生长 ;③或作为含药理成分的化学刺激物 ,促进创面愈合[1] 。但现阶段 ,还不能作为永久性的皮肤替代物。本文对以胶原为细胞外基质材料所形成的组织工程化皮肤的研究进展作一简要综述。一、胶原作为细胞外基质材料及特点胶原蛋白是真皮结缔组织的主要成分 ,占皮肤干重的70 % ,具有天然…     

组织工程皮肤种子细胞的研究进展

组织工程即应用细胞生物学与工程学的原理和技术,在正确认识哺乳动物正常及病理条件下组织结构和功能的基础上,研究和开发用于修复、维护和改善人体各种组织或器官损伤后功能和形态的生物替代物的学科。组织工程包括3个基本的要素：种子细胞（seed cell）、可降解的支架材料及讯息因子。组织工程皮肤作为组织工程研究中较为活跃的领域,是在无细胞的生物材料中引入特定的种子细胞,通过一定的组织构建,形成更加接近于人体组织结构的生物活性替代物。种子细胞作为组织工程的基本要素,其黏附、增殖能力、分化程度及免疫特性是生物活性皮肤构建过程中需重点考虑的问题。目前用于皮肤组织工程构建的种子细胞主要包括：表皮细胞、成纤维细胞、干细胞等。     

组织工程皮肤的应用研究

目前，人们对人工活性皮肤替代物（细胞工程或组织工程人工皮肤）的研究已进行了约半个世纪。将表皮细胞培养于经辐照的鼠成纤维细胞（Fb）滋养层，是组织工程皮肤治疗大面积烧伤的里程碑。由于培养基的改良与商品化，促使角质形成细胞的无血清层和无滋养层培养成功，结合早期切痂和应用临时皮肤覆盖物，     

皮肤组织工程

目的 综述近阶段皮肤组织工程研究领域中的进展。方法 广泛查阅国内外近期在皮肤组织工程研究的文献,着重阐述表皮替代物,真皮替代物,培养的表皮真皮复合皮片的研究进展和重要问题。结果 多数学者认为理想的皮肤替代物应及时重建已人的表皮和真皮结构。目前的研究主要集中在如何尽早移植表皮细胞,并保护移植后细胞的活性和功能,以及研制能更有效地促进细胞功能,诱导创床血植入,移植后可降解,无毒性,无病原携带风险的细胞     

利用胶原构建皮肤组织工程支架的研究

目的利用胶原构建皮肤组织工程支架。方法用Na2S、弹性蛋白酶预处理胎牛皮得到胶原纤维；经蛋白酶M降解胶原纤维后，0．5mol／L醋酸溶液溶解得到酸溶性胶原；再用蛋白酶N处理上述酸溶性胶原，最终得到生物相容性良好的胶原溶液；将胶原溶液构建皮肤组织工程支架。通过SDS-PAGE试验，分析酸溶性胶原分子量及基本结构；用皮肤组织工程支架材料包覆大鼠创面，观察创面愈合情况，研究支架材料对大鼠创伤愈合的影响；在支架材料上种植成纤维细胞，观察细胞扩增情况，以及支架材料对细胞移植影响。结果通过特异性蛋白酶M处理得到的酸溶性胶原，显示典型的1型胶原SDS-PAGE图谱；构建的皮肤组织工程支架呈多孔海绵状，孔径为50～200μm；在支架材料上种植成纤维细胞扩增情况良好；用于修复大鼠创面，具有促进创面愈合作用。结论酸溶性胶原经蛋白酶N处理后，生物相容性良好，适合于皮肤组织工程支架的构建，并具有良好生物活性。     

组织工程皮肤构建的研究进展

组织工程学是生物工程领域的一门新兴学科,是目前学术界的研究热点。利用组织工程的原理构建人工皮肤替代物,用于皮肤移植,可以有效解决临床上皮肤缺损修复,供皮不足的难题。文中从表皮、真皮、复合皮三个方面就近年来组织工程皮肤构建的研究进展及干细胞在这一领域的应用作一综述,并分析组织工程皮肤目前存在的问题,展望未来发展方向。     

骨组织工程支架材料研究进展

组织工程学（tissue engineering，TE）是生物医学工程学的分支。它是应用细胞生物学和工程学的原理，研究开发能修复和改善损伤组织结构与功能的生物替代物的一门科学，是一个综合细胞生物学、材料科学、生物化学、化学工程、生物医学工程学和移植学等多学科的交叉领域；其研究内容主要集中于3个方面：（1）种子细胞；（2）细胞外基质替代物支架材料；（3）组织工程化组织对各种病损组织替代。     

组织工程的研究现状

组织工程的研究现状张晨＊张东＊高景恒＊十九世纪和二十世纪中叶，生物学的两大发现是细胞和ＤＮＡ的双螺旋结构，标志着细胞生物学和分子生物学的形成，它们是现代医学发展的两个重要里程碑。近二十年来，在国际上兴起了一门由生物医学和工程学技术相结合的边缘学科，即...     

复合型组织工程皮肤的体外快速构建

目的寻找一种体外快速构建复合型组织工程皮肤的方法,为大面积烧伤、创伤创面的覆盖提供足够的自体皮源。方法取人的包皮,进行表皮细胞及成纤维细胞的分离鉴定及体外培养扩增,对表皮细胞群行广谱角蛋白抗体-异硫氰酸荧光素（fluorescein isothiocyanate,FITC）、角蛋白19（cytokeratin19,K19）-FITC免疫荧光染色及K19流式细胞仪鉴定;对成纤维细胞行波形蛋白-FITC免疫荧光鉴定。将表皮细胞接种于异体脱细胞真皮（acellular dermalmatrix,ADM）乳头面,于气-液平面培养构建表皮层,实验分两组进行,实验组培养基中添加25ng/ml角化细胞生长因子（keratinocyte growth factor,KGF）,对照组不添加。6d后,接种成纤维细胞于两组ADM的另一面,继续培养24h。收集构建的组织工程皮肤,切片行苏木素-伊红染色,观察所构建皮肤的镜下结构,并对比添加KGF对其影响。结果免疫荧光染色培养扩增的表皮细胞群广谱角蛋白抗体-FITC染色均为阳性、K19-FITC染色部分阳性,流式细胞仪鉴定其中K19阳性表达的细胞接近17%。成纤维细胞体外培养7d可扩增超过100倍,波形蛋白-FITC免疫荧光染色呈阳性。经过7d的体外培养构建,可以得到复合型皮肤,经苏木素-伊红染色镜下观察显示,实验组表皮层连续,形成细胞层数2-3层的复层结构,真皮中含有成纤维细胞;对照组表皮层不连续,细胞层数少,两组比较差异有统计学意义（P〈0.01）。结论利用胶原酶结合胰蛋白酶消化法进行种子细胞的分离,应用添加KGF的条件培养基,采用分步接种构建的方法,可在7d内构建出复合型组织工程皮肤。     

肌腱组织工程研究新进展

组织工程化肌腱原理是将分离的高浓度有活力的肌腱种子细胞种植于生物相容性好，可生物降解的细胞载体中，体外培养后植到缺损部位，形成新的、自身的，具有功能的肌腱组织，最终达到生物学意义上的完全修复。现就肌腱组织工程中肌腱细胞的特征、种子细胞来源、支架材料的制备、临床应用和面临的问题和展望等做一综述。     

毛乳头细胞和表皮细胞构建带附属器的组织工程皮肤

目的根据毛囊形成原理,以人毛乳头细胞和表皮细胞为种子细胞,构建带附属器的组织工程皮肤替代物。方法分实验组和对照组,实验组皮肤替代物真皮层接种人毛乳头细胞和表皮细胞;对照组真皮层不接种任何细胞。在裸鼠背部作一圆形全层皮肤缺损,将两组皮肤替代物气-液界面培养5 d后移植到裸鼠背部。观察创面愈合情况,并在移植后第4、6、8周取材,进行组织学观察。结果皮肤替代物移植后2周,实验组创面已完全愈合,移植后4周对照组创面才完全愈合,并且对照组创面收缩比实验组明显。移植后6周,实验组真皮层内见到毛囊样结构和皮脂腺结构,对照组未见毛囊样结构和皮脂腺样结构。结论将人的毛乳头细胞和表皮细胞共同种植在皮肤替代物的真皮层,可以构建出带附属器的组织工程皮肤替代物,这种替代物对创面的修复能力更强。     

组织工程皮肤修复皮肤缺损的初步实验研究

目的:探讨组织工程皮肤移植的手术方法、注意事项及临床效果。方法:2.5～3月龄约克猪6只,制备全厚皮肤缺损创面48个,随机分为三组,每组16例。A组:组织工程全层皮肤移植组;B组:组织工程真皮和自体表皮复合移植组;C组(对照组):自体全厚皮片移植组。观察实验组与对照组间的治愈率。结果:A组治愈率75.00%,B组治愈率87.50%,C组治愈率93.75%,三组比较无显著性差异(χ2=2.34,P>0.05)。结论:组织工程皮肤修复皮肤缺损是可行的。     

组织工程皮肤研究进展

皮肤起着保护机体内环境并维持其稳定的作用。大面积烧伤或创伤的患者 ,常由于缺乏可供移植的自体皮肤创面修复困难 ,严重影响肢体功能和形态 ;甚至导致死亡 ,而成为医学界的难题。组织工程学的发展使得创面修复领域成为最先的受益者之一〔1 ,2〕。组织工程学是由美国国家科学基金会于 1987年正式提出和确定的 ,它是指运用生物工程学及生命科学原理 ,研制和开发生物替代物 ,以恢复、改善受损器官功能及形态的一门学科。其核心是构建由细胞和生物材料构成的三维空间复合物。近年来 ,组织工程皮肤的研制一直是创面修复领域的热点 ,已有成功应…     

皮肤替代物研究及应用进展

构建一种理想的皮肤替代物在烧伤和整形外科的治疗方面很有必要。随着现代细胞分子生物学和组织工程学的发展，在体外构建的人造皮肤不仅用于烧伤和急慢性创面的治疗，而且延伸到其他领域，如肿瘤切除后遗留皮肤创面的治疗。皮肤替代物的研究及应用正在逐渐减少自体皮肤移植造成的继发性损伤。笔者现就皮肤替代物的最新研究及应用进展综述如下。     

皮肤组织工程学在我国

Great progress has been made in the basic research and clinical application of skin tissue engineering in China over the past 20 years. It includes culture of epithelial cells and their preliminary clinicaluse , research and development of various dermal substitutes such as acellular dermal matrix, spongi form collagen membrane and high molecular weight polymer membrane , and modification of physical properties of dermal substitutes for the sake of raising their bioaffinity and vascular ization , based on which composite skin containing epithelial cell layers has been constructed and used successfully in the repair of full-thickness skin defects. More recently , greater efforts have been made in the study of new epithelial seeding cells such as epithelial stem cell and hair follicle stem cell. With the work going into the center, it is hopeful into constructing an artificial skin that mimics the normal human skin in terms of structure and function with better viability of the transplant, so that it can eventually be used in clinical practice as a skin source for large area deep burn patients to improve the wound healing quality.     

组织工程化皮肤的研制与临床应用

覆盖于人体表面的皮肤是人体与外界环境接触的屏障，不仅起保护、分泌、代谢和感觉等作用，而且．参与免疫反应和维持机体内环境的稳定。但严重创伤和大面积烧伤患者的皮源缺乏一直是临床亟待解决的难题．用组织工程学的原理与方法构建或预制皮肤可望成为解决皮源缺乏的理想方法：组织工程化皮肤通常可分为表皮替代物、真皮替代物和复合皮肤替代物三种类型，目前虽有近二十种组织工程化皮肤产品应用于临床并取得了一定疗效，     

角质干细胞及其在皮肤组织工程中的应用前景

表皮是一种持续更新的组织，其更新过程始于基底层的角质干细胞的增殖与定向分化。在向上迁移的过程中，经历程序化的终末分化，最后成为死亡的角化扁平细胞从皮肤表面脱落。在正常稳定状态下，干细胞的增殖与表层细胞的丢失保持着精确的平衡^[1]。角质干细胞有两个重要特征：一是在体内属于静止的或慢细胞周期的细胞；二是具有无限的增