木醋杆菌纤维素对人成纤维细胞增殖活性的影响

目的：观察木醋杆菌纤维素对体外培养人成纤维细胞（Fbs）增殖活性的影响,探讨其促进创面愈合的可能机理。方法：采用消化分离法进行Fbs的原代培养,通过形态学和免疫组织化学法鉴定Fbs。将第6代纯化的Fbs随机分为与木醋杆菌纤维素敷料共同培养的敷料组织和空白对照组。培养24 h、48 h、72 h后,经MTT法检测每孔的光吸收值（OD值）。结果：木醋杆菌纤维素加入到Fbs中培养24 h、48 h、72 h后,经MTT法检测,木醋杆菌纤维素组与空白对照组OD值比较有显著性差异（P〈0.05）。结论：木醋杆菌纤维素对Fbs的生长有明显促进作用,提示木醋杆菌纤维素敷料能明显增加Fbs数量,这可能与其可促进创面愈合的机理有关。     

木黄酮对心肌成纤维细胞增殖的影响

观察木黄酮对心肌成纤维细胞 (CF)增殖的影响 .采用培养的新生大鼠CF ,以 [3 H]TdR参入率作为细胞增殖指标 ;流式细胞仪分析细胞周期 .结果显示木黄酮 (0 .5～ 50 μmol·L- 1)具有浓度依赖性地抑制 2 .5%胎牛血清刺激CF增殖的作用 ,并将CF细胞周期阻抑在G2 /M期 ;提示木黄酮有望成为防治心脏纤维化的物质     

一氧化氮对成纤维细胞增殖及胶原合成的影响

在参与肝纤维化形成的细胞中，成纤维细胞能大量合成和分泌胶原蛋白。其质和量决定了组织器官的纤维化过程。我们研究发现，一氧化氮(nitric oxide，NO)具有抗肝纤维化作用。本文在此基础上，观察NO对体外培养的成纤维细胞增殖及胶原合成的影响，进一步阐明NO的抗肝纤维化作用。     

氧化苦参碱对成纤维细胞增殖及Ⅰ型胶原合成的影响

目的：研究氧化苦参碱对成纤维细胞增殖及Ⅰ型胶原合成的影响,阐明其抗肝纤雏化的作用机制．方法：用甲基噻哇基四哇MTT(metyl thiazolyl tetronzolium)色法和免疫细胞化学染色技术分剐检潮小鼠皮肤成纤雏细胞(NIH3T3)增殖和Ⅰ型胶原的合成。结果：氧化苦参碱能明显抑制成纤雏细胞的增殖及Ⅰ型胶原的合成,并呈剂量依赖性．结论;氧化苦参碱可通过抑制成纤维细胞增殖及Ⅰ型肢原合成而起到抗肝纤雏化作用。     

维拉帕米、硝苯地平对人成纤维细胞增殖、胶原和透明质酸合成的抑制作用

研究维拉帕米（Ｖｅｒ）和硝苯地平（Ｎｉｆ）对人胚肺成纤维细胞（ＨＬＦ）增殖、胶原与透明质酸（ＨＡ）合成的作用，为应用钙通道阻滞剂防治器官纤维化提供实验依据。分别采用四氮唑蓝（ＭＴＴ）比色法、３Ｈ－脯氨酸参入和放射免疫法测定细胞增殖、胶原和ＨＡ合成。Ｖｅｒ和Ｎｉｆ在２０～４０μｍｏｌ·Ｌ－１浓度范围内均以浓度依赖方式抑制ＨＬＦ增殖及胶原和ＨＡ合成。Ｖｅｒ和Ｎｉｆ具有抗纤维化作用。     

西红花酸对心肌成纤维细胞增殖和胶原合成的影响

目的:探讨西红花酸(crocetin)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFB)增殖和胶原合成的影响及其作用机制。方法:体外培养新生SD大鼠CFB,建立AngⅡ诱导新生大鼠CFB纤维化模型;MTT法检测CFB的增殖;羟脯氨酸测定检测CFB胶原含量;流式细胞分析仪测定细胞周期;实时荧光定量PCR(Q-PCR)检测Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白、间质胶原酶(MMP-2)、组织金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)、转化生长因子β1(TGF-β1)的基因表达;蛋白免疫印迹(Western Blot)检测细胞P27^kip1(P27)蛋白的表达。结果:(1)在一定浓度范围里,crocetin能抑制AngⅡ引起的CFB增殖和胶原合成,并呈剂量依赖;(2)CFBG0/G1期百分率随crocetin浓度增加而增加,S期、G2/M期百分率和增殖指数随crocetin浓度增加而减少,与AngⅡ组相比差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);(3)Crocetin能明显降低Ⅰ型、Ⅲ型胶原、TIMP1、TGF-β1的表达,提高MMP-2的表达;(4)Crocetin能增加P27蛋白表达。结论:Crocetin通过抑制AngⅡ诱导的CFB增殖和胶原合成起到抗心肌纤维化作用,其机制可能与细胞因子分泌和对基质金属蛋白酶的调节有关。     

bFGF对成纤维细胞增殖和胶原及纤维连接蛋白的影响

目的：探讨碱性成纤维细胞因子（ bFGF）调节皮肤创伤修复的作用机制。方法采用组织块贴壁法培养来源于正常皮肤和增生性瘢痕的成纤维细胞（FB）,加入含有不同浓度bFGF（0,0.1,1,10,100,1000 ng·mL-1）的无血清培养液培养72 h,采用细胞计数法和锥虫蓝染色检测各组FB增殖和凋亡,酶联免疫吸附法（ ELISA）和逆转录PCR （ RT-PCR）分别检测Ⅰ型、Ⅲ型胶原和纤维连接蛋白浓度及基因表达情况。结果 bFGF促进FB增殖,当浓度过高时则抑制FB增殖,促进其凋亡,并且增生性瘢痕FB增殖较来源于正常皮肤的FB缓慢;bFGF明显抑制增生性瘢痕FB Ⅰ型胶原产生,对来源于正常皮肤FB无影响;bFGF上调来源于正常皮肤FB的纤维连接蛋白基因表达,对增生性瘢痕FB中的表达无影响;bFGF对两种来源的FBⅢ型胶原的分泌和表达均无显著作用。结论 bFGF对来源正常皮肤和增生性瘢痕的FB具有不同的影响和作用机制,可能对创伤修复早期和瘢痕形成过程发挥作用。     

醛固酮对体外新生大鼠心肌成纤维细胞增殖及胶原代谢的影响

目的:探讨醛固酮对体外新生大鼠心肌成纤维细胞(CFs)增殖及胶原代谢的影响并探讨其机制。方法:体外差速贴壁法分离纯化培养CFs,试验分为4组:对照组、醛固酮组、醛固酮+螺内酯组、醛固酮+洛沙坦组。各组作用24h后,MTT法检测CFs增殖;流式细胞分析仪分析细胞周期;分光光度法检测细胞上清中羟脯氨酸含量;免疫细胞化学荧光染色法检测纤维连接蛋白(FN)及增殖细胞核抗原(PCNA)的蛋白表达。结果:与对照组比较,醛固酮组可显著增强细胞活性,使S期细胞百分率增加,G0/G1期细胞百分率下降,羟脯氨酸含量增加,PCNA、FN的蛋白表达增强(P<0.01)。与醛固酮组比较,醛固酮+螺内酯组的CFs增殖及胶原合成被抑制,PCNA、FN的蛋白表达下降(P<0.05),醛固酮+洛沙坦组抑制CFs的增殖及胶原合成,FN的蛋白表达降低(P<0.01),而PCNA的蛋白表达无明显改变(P>0.05)。结论:醛固酮通过其受体及AT1受体途径促进CFs增殖及胶原合成,且醛固酮受体通路占主导地位;其作用机制可能与促进PCNA、FN的蛋白表达有关。     

苦参碱对大鼠皮肤成纤维细胞增殖及胶原蛋白合成的影响

本文研究了苦参碱（Ｍａｔ）对大鼠皮肤成纤维细胞增殖及胶原蛋白合成的影响。采用［＾３Ｈ］－胸腺嘧啶核苷和［＾３Ｈ］－脯氨酸掺入法分别测定成纤维细胞增殖和胶原蛋白合成。实验结果表明，Ｍａｔ能剂量依赖性地抑制成纤维细胞的增殖和胶原蛋白合成。     

羟基积雪草甙对体外培养人成纤维细胞增殖及胶原合成的影响

目的研究经基积雪草甙(madecassoside,Md)对人皮肤成纤维细胞(hunan skin fibrob-last，HSFb)的增殖及胶原蛋白合成的影响。方法XIT法研究MD对HSFb增殖的影响；放射免疫的方法测定实验组和空白对照组细胞上清液中I型和皿型前胶原氨基端肽原(procollagen I and Ⅲ of aminoteminal propeptide,PINP，PⅢNP)的含量。结果(1)Md在浓度高达2μg/ml时仍未见任何细胞毒性。(2)与空白对照组相比，Md对HSFb有明显促进增殖作用(p＜0．05)，有效刺激HSFbPINP和PⅢNP的分泌。(3)Md刺激靶细胞PINP和PⅢNP分泌的生物学作用呈现明显的量效关系。结论Md在刺激体外培养HSFb增殖及I、Ⅲ型胶原合成中均有明显的生物活性。     

内皮素对人肝癌细胞增殖作用的探讨

目的　探讨内皮素 2对人肝癌细胞增殖作用的影响。方法　该实验分为实验组及对照组 ,采用体外细胞培养法 ,以MTT法记录并反映人肝癌细胞的增殖效果。结果　实验组加入不同浓度的内皮素 2 ,培养 2 4小时及 48小时后 ,在浓度为 10 -9M时显示明显促进人肝癌细胞的增殖 (P<0 0 5 ,P <0 0 1)。结论　内皮素是一种促肿瘤生长因子 ,与人肝癌的发生发展有一定关系     

紫草素对人黑素瘤细胞增殖及黑素合成的影响

目的探讨紫草素对人黑素瘤细胞增殖及黑素合成的影响。方法采用MTT法测定紫草素对人A375黑素瘤细胞增殖的影响,NaOH裂解法测定黑素合成。并分成实验组（紫草素组）、对照组（空白组）和阳性对照组[甲氧沙林（8-MOP）组],对其结果进行比较分析。结果紫草素浓度在0.25～1μmol/L对人A375黑素瘤细胞增殖无影响（P〉0.05）,2μmol/L和4μmol/L的紫草素对于A375黑素瘤细胞的增殖有一定的抑制作用（P〈0.05或P〈0.01）。紫草素对于人A375黑素瘤细胞中酪氨酸酶活性呈剂量依赖性激活作用。实验组与对照组比较,0.25、0.5及1μmol/L紫草素对人A375黑素瘤细胞酪氨酸酶活性有激活作用,差异有统计学意义（P〈0.01）;且阳性对照组紫草素作用优于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）;实验组浓度为0.25、0.5及1μmol/L紫草素溶液和阳性对照组与对照组比较,对于人A375黑素瘤细胞中黑素合成有激活作用,差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。结论紫草素对于培养的人黑素瘤细胞酪氨酸酶活性及黑素生成有较强的剂量相关性激活作用。     

PDGF-BB和CTGF在体外对人皮肤成纤维细胞增殖的影响

目的探讨重组人血小板衍生生长因子（rhPDGF-BB）和重组人结缔组织生长因子（rhCTGF）单独或联合应用对体外培养的人皮肤成纤维细胞（human skin fibroblast,HSF）增殖的影响,为寻求快速扩增HSF的方法提供参考依据。方法取手术中切除的正常皮肤,以常规组织块法体外获得皮肤成纤维细胞。取生长良好的第4~7代细胞种入96孔板,分实验组和对照组,分别加入不同浓度的rhPDGF-BB、rhCTGF或rhPDGF-BB＋rhCTGF作用。于第1、3、6、9d采用四唑盐（MTT）法分别测定各组吸光度A值,观察上述两种生长因子对细胞的增殖作用。结果 rhPDGF-BB能明显促进体外培养的HSF增殖,在1~9d,0.1ng/ml~100ng/ml范围内呈浓度时间依赖关系。rhCTGF也能明显促进HSF增殖,除第1d最大效应浓度为50ng/ml,其余时间点在10ng/ml~100ng/ml范围内呈浓度时间依赖关系。而rhCTGF150ng/ml组的增殖效果相对100ng/ml组略成下降趋势。rhPDGF-BB与rhCTGF最大与最小效应联用组亦成浓度时间依赖关系。最大效应联用组的增殖效果与以上两种生长因子单独应用比较均具有统计学意义（P〈0.05）。最小效应联用组与rhCTGF10ng/ml组比较有统计学意义（P〈0.05）,而与rhPDGF-BB0.1ng/ml组比较无统计学意义（P〉0.05）。另外,最大效应浓度的两生长因子单独应用时,rhPDGF-BB促增殖效果优于rhCTGF（P〈0.05）。结论 rh-PDGF-BB和rhCTGF均可促进体外培养的HSF增殖,在一定范围内呈浓度时间依赖关系,而且前者优于后者。两者联合应用对HSF增殖具有协同效应。     

Effect of heavy metals on human rheumatoid synovial cell proliferation and collagen synthesis

The dose-dependent effects of heavy metals on cell proliferation, collagen synthesis, and non-collagen protein synthesis were studied in early passage cultures of human synovial cells exposed to 1-100 microM concentration of gold, silver, mercury, cadmium or lead for 5 days. The incorporation of [3H]thymidine into trichloroacetic acid insoluble material was inhibited 50% by each of the heavy metals at concentrations between 1 and 10 microM. Gold, lead and mercury (10 microM) decreased the DNA content of the cultures by less than 15%; silver (10 microM) and cadmium (10 microM) resulted in decreased DNA content, which was attributed to cytotoxicity. A dose-dependent inhibition of [3H]proline incorporation into bacterial collagenase resistant (non-collagen) protein was observed after incubation with 10 microM mercury, lead and silver. During incubations with 10 microM gold and cadmium, collagenase resistant protein accumulation increased. All the heavy metals except for gold inhibited collagen accumulation to a greater extent than non-collagen protein accumulation. Gold (10 microM) stimulated the amount of collagen produced per cell, and the percentage of collagen to total protein was increased 50%. The rate of collagen accumulation in medium decreased during incubation with 10 microM silver, mercury, cadmium and lead. The stimulation of collagen synthesis may be a unique property of gold related to the therapeutic indices of gold, compared to other heavy metals, in rheumatoid arthritis.     

碱性成纤维细胞生长因子对人牙龈成纤维细胞成骨分化与增殖的影响

目的 观察碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)对体外培养的人牙龈成纤维细胞(HGFs)成骨分化能力与细胞增殖的影响,探索b FGF在HGFs体外诱导成骨分化过程中的作用。方法 采用组织块贴壁法体外培养HGFs,取第3代细胞进行如下分组培养。1组为普通培养基组,2组为普通培养基+10μg/L b FGF组,3组为成骨诱导组,4组为成骨诱导+10μg/L b FGF组。应用四甲基偶氮唑蓝比色法检测HGFs增殖状况;用碱性磷酸酶染色法及茜素红染色法检测HGFs的成骨分化能力。结果 在普通培养基和成骨诱导培养基中,10μg/L的b FGF均能促进HGFs的增殖(P<0.01);在成骨诱导培养基中HGFs具有骨向分化能力,形成钙结节;而10μg/L的b FGF对HGFs的碱性磷酸酶活性与矿化结节形成能力均无明显影响。结论 10μg/L的b FGF能促进HGFs的增殖能力,而对其骨向分化无明显影响。     

Practolol inhibits human skin fibroblast cell mat hydroxyproline accumulation

Despite being poorly absorbed practolol (N-4-2-hydroxy-3-(1-methyl-ethyl)-amino propoxy phenyl acetamine) inhibited the accumulation of cell mat hydroxyproline, a measure of collagen synthesis, by human skin fibroblasts (DT2PH) in vitro, (ID50 0.8 X 10(-3) M). The degree of inhibition was dependent on the concentration of practolol used and the incubation time. Neither preinitiation of collagen synthesis nor omitting ascorbic acid from the incubation medium modified this inhibitory action. In contrast, in vitro generated metabolites of practol, using normal and aroclor induced hamster liver preparation, and structural analogues of practolol had no effect on cell mat hydroxyproline levels. Related compounds, propranolol, (1-(isopropylamino)-3(1-naphthyl-oxy)2-propranolol), and paracetamol, (N-(4-hydroxyphenyl)acetamide), both inhibited hydroxyproline levels. Fibroblasts derived from uninvolved skin of a psoriasis patient (PS1) were several fold more sensitive to practolol and propranolol than cells derived from normal skin but showed little change in sensitivity towards paracetamol.     

洛铂对体外培养人卵巢癌细胞增殖的抑制作用

目的观察洛铂(LBP)对体外培养人卵巢癌细胞增殖的抑制作用。方法选用7种人卵巢癌细胞株SK-OV-3、ES-2、OVCAR-8、3AO、SW626、A2780、OVCAR-3,以顺铂(DDP)、卡铂(CBP)为对照,评价LBP单药或联合紫杉醇(PTX)、多西他赛(TXT)对体外培养人卵巢癌细胞增殖的抑制作用及其联合用药效应。结果 LBP、DDP、CBP单药均可明显抑制体外培养人卵巢癌细胞增殖,IC50分别为1.5~13.8、0.9~8.1和14.6~145.7μmol·L-1。LBP、DDP、CBP联合PTX、TXT的效应具有细胞特异性,其中,LBP联合TXT在SK-OV-3、OVCAR-8细胞中显示相加效应。结论 LBP单药具有明确的体外抗人卵巢癌细胞增殖活性,其活性与DDP相当,强于CBP;LBP联合TXT对卵巢癌细胞有可能产生相加的抗肿瘤作用,但有细胞特异性。     

纳米二氧化钛对人皮肤基底细胞癌和胚胎皮肤成纤维细胞的生物学效应

目的探讨纳米粒子二氧化钛(TiO2)对体外培养的人皮肤基底细胞癌A431和人胚胎皮肤成纤维细胞的生物学效应。方法TiO2处理体外培养的人皮肤基底细胞癌A431(human skin Basal cell carcinoma,A431)和人胚胎皮肤成纤维细胞(human embryo skin Fibroblast,ESF),MTT法测定细胞生长活性,计数集落形成和荧光染色检测细胞凋亡情况。结果纳米TiO2显著抑制体外培养的人皮肤基底细胞癌A431的集落形成,对其生长活性具有显著负相关性(P<0.05);能够抑制人胚胎皮肤成纤维细胞(ESF)的集落形成,但对其生长活性的抑制无相关性(P>0.05)。结论纳米TiO2可影响体外培养的人皮肤基底细胞癌A431的生长、集落形成,并可导致细胞凋亡。