大鼠胰岛α细胞及其分泌物对β细胞功能的影响

目的：探讨大鼠胰岛α细胞和胰高血糖素样肽1（GLP-1）对β细胞（INS-1细胞,即胰岛素瘤细胞）功能的影响,阐明α细胞与INS-1细胞混合移植对降糖效果影响的可能机制。方法：采用MTT法分析10%、20%和30%胰岛α细胞条件培养基和0.03、0.30、3.00和30.0 mg·L^-1 GLP-1作用下INS-1细胞的增殖能力;采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测10%、20%和30%胰岛α细胞、胰岛α细胞条件培养基和不同浓度GLP-1作用下INS-1细胞胰岛素释放水平;采用激光共聚焦显微镜分析高糖和GLP-1作用下INS-1细胞内Ca²⁺浓度;采用Western blotting法分析不同浓度的胰岛α细胞条件培养基和不同浓度GLP-1作用下胰岛素蛋白表达水平;将INS-1细胞、INS-1细胞与α细胞的混合物移植至糖尿病裸鼠左肾包膜下,监测血糖,观察肾脏形态,采用免疫组织化学法检测移植部位细胞中胰岛素和胰高血糖素水平。结果：与对照组比较,胰岛α细胞条件培养基和GLP-1均可促进INS-1细胞增殖和胰岛素释放（P < 0.05）。激光共聚焦显微镜分析,GLP-1可刺激INS-1细胞内Ca²⁺浓度升高（P < 0.05）。Western blotting法检测,与对照组比较,胰岛α细胞条件培养基和GLP-1作用下INS-1细胞中胰岛素蛋白表达水平差异无统计学意义（P > 0.05）。与移植前比较,糖尿病裸鼠肾包膜下移植INS-1细胞35d时血糖明显下降（P < 0.05）,甚至出现低血糖,移植部位明显肿胀;移植INS-1和α细胞混合物的糖尿病裸鼠血糖无明显变化（P > 0.05）,移植部位未见明显肿胀。免疫组织化学染色,移植INS-1细胞部位的组织既表达胰岛素又表达胰高血糖素。结论：胰岛α细胞及其分泌物可促进INS-1细胞增殖和胰岛素释放,但α细胞与INS-1细胞混合移植给糖尿病裸鼠可降低INS-1细胞移植的降糖效果,其机制可能与INS-1细胞既表达胰岛素基因又表达胰高血糖素基因有关。     

胰岛素泵治疗对初诊2型糖尿病患者胰岛细胞功能的影响

目的探讨胰岛素泵强化治疗对初诊2型糖尿病患者胰岛细胞功能的影响。方法观察2型糖尿病患者进行胰岛素泵皮下注射强化治疗2周前后行口服葡萄糖糖耐量实验(OGTT),观察空腹、餐后2 h血糖、糖化血红蛋白的变化,对α细胞,β细胞分泌的胰高糖素、胰岛素的水平进行研究,观察Homa-IR,Homa-β及高血糖素/胰岛素的变化。结果①达标组与未达标组相比,治疗前空腹血糖及餐后2 h胰高血糖素/胰岛素水平差异均有显著性(P<0.05),治疗后空腹血糖及餐后2 h血糖及餐后2 h胰高血糖素/胰岛素水平差异均有显著性(P<0.05或P<0.01)。②总组治疗前后相比空腹血糖及餐后2 h血糖差异均有显著性(P<0.01);空腹及餐后2 h胰高血糖素/胰岛素水平差异均有显著性(P<0.05),Homa-β指数明显升高(P<0.01);Homa-IR指数下降(P<0.05)。结论严重高血糖,胰岛β细胞功能低下,α细胞功能紊乱可能是短期胰岛素泵强化治疗血糖不能达到良好控制的主要原因之一。胰岛素泵治疗不但可以改善胰岛β细胞功能,同时还可以改善α细胞的功能。     

胰岛细胞移植的现况

全球糖尿病患者约 1 3 2亿 ,预计 2 0 10年可达 2 4亿 ,2 0 2 5年可能达到 2 99亿 ,增加的糖尿病病人约 2 / 3或 3 / 4在发展中国家。 3 0ａ后发达国家患病人数可能增加 3 0 % ,而发展中国家可能增加 2 0 0 %。在死亡原因中 ,糖尿病将是威胁人类健康与生命安全和发病率及死亡率最高的五大疾病之一[1] 。目前我国糖尿病患者约 2 0 0 0万～ 3 0 0 0万 ,每年新增近 10 0万糖尿病病人。预计中国糖尿病人数由 1995年的 16 0 /百万到2 0 2 5年 3 7 6/百万。随着糖尿病病人寿命延长 ,由于糖尿病性微血管病变所致的肾功能衰竭、失明及心血管、神经…     

新鲜与短期培养胰岛细胞移植对移植胰岛存活的影响

目的 观察新鲜和短期培养后的小鼠胰岛细胞对移植后胰岛的再血管化及功能的影响.方法 C57小鼠作为胰腺供体,胆总管灌注胶原酶P溶液消化胰腺,Ficoll 400不连续梯度纯化获得胰岛细胞.接受不同胰岛细胞肾被膜下移植的受体糖尿病C57小鼠随机分成三组(n=10):A组接受新鲜胰岛细胞移植,B、C组分别接受培养1、3d的胰岛细胞移植.术后观察血糖变化并于移植后第14天取移植胰岛,分别进行HE染色和胰岛素、CD31免疫组织化学染色,并计算微血管密度.结果 胰岛细胞移植后3d内,三组小鼠的随机血糖浓度均＜11.0 mmol/L.A组小鼠在移植后第14天时的血糖浓度仍＜11.0 mmol/L,而B、C组小鼠血糖浓度在移植3d后呈现持续上升,此后各时间点的血糖浓度均显著高于A组,差异有统计学意义(P＜0.05).免疫组织化学胰岛素染色结果显示:A组小鼠肾被膜下成团的细胞被染成棕褐色,B、C组类似细胞团仅有少量着色.免疫组织化学CD31染色发现,A组小鼠肾被膜下移植细胞团内部有大量细胞胞质被染成棕黄色,而B组和C组仅有少量细胞着色;A组肾被膜下胰岛内微血管密度显著高于B、C组(P＜0.05).结论 小鼠新鲜胰岛细胞移植较短期培养后胰岛细胞移植更有利于移植胰岛的再血管化及存活.     

胰岛细胞移植治疗糖尿病

胰岛细胞移植包括从供体器官内提取Langerhans细胞的复杂的纯化过程。患有1型糖尿病的病人移植后,血中葡萄糖显示刚好控制在接近完美的水平上,远比注射胰岛素更有效。严格控制血糖有望避免发生糖尿病的长期并发症。移植细胞是在放射成像的指引下经皮通过门静脉被注入肝脏的,因此可避免大的移植手术,90％以上的病人可在移植当日回家。胰岛细胞移植能提供与全胰腺移植同样的益处,但手术的危险性较小。     

人胎胰岛细胞移植对Ⅰ型糖尿病的远期治疗效果

对１０７例Ⅰ型糖尿病病人予以人胎胰岛细胞移植治疗，并对其中９８例进行４￣１０年的随访观察。结果多数病人在移植后前６年，血糖控制较稳定，Ｃ肽水平上升，每日胰钫 用量减少，其 病酮症酸中毒及肾病和视网膜病变的发生率降低，少数病人效果扫续到７￣８年，个另病人效果可维持１０年。认为人胎胰岛细胞移植对治疗Ｉ型糖尿病有一定疗效     

供体凋亡细胞输注对大鼠胰岛移植物功能的影响

目的 研究供体凋亡细胞预输注对大鼠胰岛移植后胰岛移植物功能的影响.方法 应用STZ制备SD大鼠糖尿病模型,以直线加速器照射诱导供体Wistar大鼠脾细胞凋亡.经阴茎背静脉输注供体凋亡脾细胞,7d后于糖尿病SD大鼠双侧肾包囊进行同种异体胰岛移植,通过测定血糖变化、血清胰岛素水平以及胰岛移植物存活时间来观察胰岛移植物的功能状态.结果 预输注供体凋亡脾细胞能显著延长同种异体胰岛移植物存活时间(中位生存时间达31 d),并较长时间地维持受体鼠血清胰岛素处于较高水平.结论供体凋亡细胞预输注能够显著延长同种异体胰岛移植物的存活时间,能够较长时间维持胰岛移植物的正常功能状态.     

人胰岛的分离纯化和功能评价

目的 应用Ricordi人胰岛分离技术分离和纯化人的胰岛,并进行功能和安全性的评价.方法 获得6例成人尸体胰腺组织供体,采用胶原酶消化法及密度梯度离心法分离和纯化胰岛,并分析胰岛的数量、纯度和活力.采用免疫荧光法分析胰岛内分泌细胞的组成和分布;检测葡萄糖刺激的胰岛素分泌和胰岛移植后的动物血糖水平.并对分离胰岛的安全性指标进行评价.结果 分离纯化后的胰岛数量为(22.9±3.1)万IEQ,纯度为(59.0 ±8.9)%,活力为(89.0±3.0)%.免疫荧光显示,胰岛由4种内分泌细胞组成并呈正常分布.葡萄糖刺激胰岛素释放的刺激指数为8.1 ±4.0.胰岛移植于糖尿病裸鼠后,血糖在3 d后降至正常水平并维持超过30 d.分离胰岛样本的各项安全性指标在规定范围之内.结论 采用Ricordi人胰岛分离技术分离和纯化的胰岛在形态、结构、数量、纯度、活力、体内外功能以及安全性方面都达到临床胰岛移植的标准,为开展临床胰岛移植奠定了基础.     

1型糖尿病患儿早期胰岛素强化治疗对β细胞功能的影响

目的：观察1型糖尿病（T1DM）患儿行早期胰岛素（INS）持续静脉输注加三餐前皮下注射短效INS强化治疗对胰岛D细胞功能的影响。方法：T1DM并酮症酸中毒（DKA）患儿12例（强化组），采用早期INS持续输注加三餐前皮下注射短效INS强化治疗。连续观察治疗开始及治疗3个月时空腹血糖（FBG）、餐后2h血糖（2hPBG）、糖化血红蛋白（HbA1c）、空腹C肽／FBG（C-P／FBG）及INS用量。比较治疗前后上述指标的差异，TlDM并DKA患儿10例（非强化组），行非持续静脉强化治疗，对比两组治疗开始及治疗3个月时上述指标的差异；观察急性期患儿进入蜜月期的百分率。结果：①治疗3个月时，强化组FBG、2hPBG及HbAlc均较治疗开始时显著改善，且均达到强化治疗目标；C-P／FBG显著升高，达正常范围；3个月时INS用量显著低于急性期；②非强化组FBG、2hPBG、HbA1c均较开始治疗时明显改善，但未达到强化治疗目标；C-P／FBG升高，但未达正常范围；INS用量无明显减少；③两组治疗开始FBG、2hPBG、HbAlc、C-P／FBG比较差异均无统计学意义，但INS用量强化组显著高于非强化组：治疗3个月时强化组2hPBG、HbA1c、INS用量均显著低于非强化组，C-P／FBG显著高于非强化组（约是后者的8．6倍），两者FBG比较差异无统计学意义；④强化组12例中11例进入蜜月期，非强化组仅3例进入蜜月期。两组比较）χ^2=6．50，P〈0．05。站论：早期INS持续输注加三餐前皮下注射短效INS强化治疗儿童T1DM可促进B细胞的修复及再生，使基础C-P／FBG恢复正常。     

初诊2型糖尿病患者采用短期胰岛素泵强化治疗对其胰岛功能及其氧化应激的影响

目的:探讨短期胰岛素泵强化治疗对初诊2型糖尿病患者胰岛功能及其氧化应激的影响。方法:将63例初诊2型糖尿病患者分为观察组和对照组,观察组患者应用胰岛素泵强化治疗,对照组患者选择常规皮下注射法。检查并比较两组患者治疗前后一般血清指标,胰岛细胞功能及氧化应激指标。结果:治疗后,观察组患者FPG、2hPPG、HbA1c及FCP水平改善明显优于对照组(P<0.05)。观察组患者AUG、HomaB及I30/G30水平显著升高,HomaIR水平显著降低,其改善明显优于对照组(P<0.05)。观察组患者MDA水平均显著降低,SOD水平均显著升高,其改善明显优于对照组(P<0.05)。结论:短期胰岛素泵强化治疗可以明显改善患者各项指标,改善胰岛功能,降低氧化应激水平。     

新诊断的中老年2型糖尿病患者胰岛素抵抗及胰岛β细胞功能的比较

目的:比较新诊断的老年2型糖尿病(T2DM)患者与中年2型糖尿病患者胰岛素抵抗(IR)及胰岛β细胞功能。方法:将73名40岁以上新诊断的T2DM患者分为两组,其中40～59岁(中年组)39例,60岁以上(老年组)34例。分别测量体质指数(BMI)、检测口服葡萄糖耐量试验(OGTT)、胰岛素分泌曲线、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC),观察指标为OGTT各点血糖和胰岛素,根据血糖和胰岛素计算HOMA-IR、△Ins30/△Glu30、HOMA-IS、AUC-Ins、AUC-Glu等。结果:新诊断的老年T2DM患者与中年T2DM患者相比HOMA-IR、△Ins30/△Glu30、HOMA-IS、AUC-INS、AUC-GLU均无明显差异。老年组OGTT2～3h血糖高于中年组同点血糖(P<0.05)。结论:新诊断的中老年2型糖尿病患者在胰岛素抵抗指数及胰岛素早期分泌缺陷方面无明显的差异。     

预混胰岛素联合不同口服降糖药对2型糖尿病患者胰岛细胞功能及胰岛素敏感性的影响

目的探讨预混胰岛素联合不同口服降糖药对2型糖尿病患者胰岛β细胞功能、胰岛素敏感性的影响。方法将87例2型糖尿病患者采用随机数字表法分为4组：门冬胰岛素30组21例,二甲双胍组23例,阿卡波糖组22例,西格列汀组21例,分别接受门冬胰岛素30单用、门冬胰岛素30+二甲双胍、门冬胰岛素30+阿卡波糖、门冬胰岛素30+西格列汀治疗至达标,持续治疗12周,比较胰岛β细胞功能、胰岛素敏感性、降糖疗效及胰岛素用量。结果治疗后各组胰岛β细胞功能均明显好转,但组间比较均无统计学差异。联合治疗组治疗后胰岛素敏感指标稳态模型胰岛素敏感指数（HOMA-S）和总体胰岛素敏感指数（Matsuda指数）较治疗前均有改善,HOMA-S好转率二甲双胍组和阿卡波糖组大于门冬胰岛素30组（P＜0.05）。联合治疗组空腹血糖、糖化血红蛋白较门冬胰岛素30组低,其中糖化血红蛋白二甲双胍组和阿卡波糖组与门冬胰岛素30组差异有统计学意义（P＜0.05）。二甲双胍组和阿卡波糖组日胰岛素剂量低于其他两组。结论预混胰岛素基础上联合口服降糖药能改善2型糖尿病患者胰岛素敏感性,其中以联合二甲双胍和阿卡波糖最佳,且降糖疗效更佳,胰岛素用量更少,未发现预混胰岛素基础上联合口服降糖药对β细胞功能有进一步改善。     

经门静脉肝内胰岛细胞移植

为了探讨胰岛细胞移植的最适宜部位，利用四氧嘧啶诱发的糖尿病鼠，以经门静脉肝内移植为实验组，腹腔内和肌肉内移植为对照组，移植用胶原酶消化提取的乳鼠胰岛细胞．结果，实验组治愈率为６０％，与对照组相比有有显著性差异．移植后第８周，未形成肝门静脉高压症，肝脏苏木素 伊红染色切片上，未见病理变化，再经胰岛素抗体过氧化物酶 抗过氧化物酶法证实肝脏内有散在的胰岛细胞分泌的胰岛素颗粒．实验结果认为，肝脏是特殊免疫器官，排斥反应小，肝内移植易于诱发免疫耐受或免疫无反应性，其特殊的血运和生理功能是胰岛细胞移植的最佳部位．     

赖脯胰岛素的临床应用研究

目的：评价赖脯胰岛素（Lispm）对糖尿病患者的疗效与安全性。方法：2007年1-11月对我院的57例糖尿病患者用赖脯胰岛素治疗前后测定血糖、糖化血红蛋白，并记录赖脯胰岛素用量、低血糖发生率。结果：治疗3个月后，患者的空腹血糖、餐后2h血糖、HbA1c均明显下降；赖脯胰岛素日总量与治疗前重组人胰岛素相同或略减少，低血糖发生率明显减少。结论：赖脯胰岛素在改善糖尿病患者的血糖控制的同时低血糖发生率低，安全而且患者依从性好。     

艾塞那肽对2 型糖尿病大鼠糖脂代谢和胰岛超微结构的影响

目的 研究胰高糖素样肽-1 受体激动剂艾塞那肽对2型糖尿病大鼠糖脂代谢和胰岛细胞的影响及其作用机制。方法 健康雄性SD 大鼠随机分为正常对照组（C 组6只）、正常对照+ 艾塞那肽处理组（C+E 组6 只）、糖尿病组（D 组5 只）以及糖尿病+ 艾塞那肽处理组（D+E 组5 只）,由高脂饮食加小剂量STZ 诱导成2型糖尿病后,D+E 组以及C+E 组大鼠予艾塞那肽,5μg,腹部皮下注射,1 次/d 干预;8 周后,分别测定各组大鼠体重、FBG、空腹胰岛素（FINS）、稳态模型胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、胰岛素敏感指数（ISI）以及血脂谱。同时行透射电子显微镜观察大鼠胰岛组织超微结构改变。结果 D+E 组大鼠FBG、FINS、TG、TC、LDL、HOMA-IR水平均明显低于未予干预的D 组大鼠（均P＜0.05）,ISI 则显著高于D 组大鼠（P＜0.05）。超微结构研究,与D 组大鼠比较,D+E 组大鼠胰岛β 细胞数量增加,形态较规则,胞质分泌颗粒增加,颗粒密度较正常;仅见少量线粒体肿胀,结构模糊。内质网结构无明显破坏。结论 艾塞那肽能显著改善2型糖尿病大鼠糖脂代谢紊乱,对其残存的胰岛细胞具有明确的保护作用。     

短期胰岛素泵强化治疗对初诊2型糖尿病患者糖脂代谢及胰岛β细胞功能的影响

目的:探讨短期胰岛素泵强化治疗对初诊2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者糖脂代谢及胰岛β细胞功能的影响。方法:将74例初诊T2DM患者随机分为对照组与研究组,每组各37例。对照组给予常规治疗,研究组给予胰岛素泵短期强化治疗,观察两组治疗前后血糖、血脂指标及胰岛β细胞功能的变化。结果:治疗后,两组空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(Hb Alc)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平较治疗前明显下降,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平明显升高,且研究组改善程度更明显(P<0.05)。治疗后,两组胰岛素曲线下面积(AUC)、稳态模型评价-胰岛β细胞功能(HOMA-β)及第0.5 h胰岛素浓度与血糖浓度的比值(I30/G30)较治疗前明显变大,稳态模型评价-胰岛素抵抗(HOMA-IR)明显变小,且研究组改善程度更明显(P<0.05)。结论:对于初诊T2DM患者,短期胰岛素泵强化治疗能改善血糖、血脂水平,同时有助于修复功能受损的胰岛β细胞。