宫颈癌及其前期病变HPV感染与基因型分布

目的了解宫颈癌及宫颈上皮内瘤变CIN患者的HPV的感染和其基因分型及主要感染型别情况。方法应用型特异PCR检测宫颈癌及其前病变的患者的HPV感染及其主要基因分型情况的分析。结果在本研究宫颈癌及宫颈上皮内瘤变患者中,宫颈癌的HPV感染率为91．0％,CINⅠ／Ⅱ／Ⅲ的HPV感染率为73．3％,主要高危型HPV基因型别依次为HPV16、HPV18、HPV58、HPV33。结论在宫颈上皮内瘤变患者中感染主要高危型HPV基因型别依次为HPV16、HPV18、HPV58、HPV33、HPV16在宫颈癌和CIN中的构成比随着宫颈病变的增加而明显增加。     

宫颈瘤变程度与其相对应的HPV基因型分布规律的研究

目的研究不同级别宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia,CIN）与人乳头瘤病毒（Human papil-lomavirus,HPV）基因型分布之间的关系。方法收集321例经组织病理学诊断确定为CIN2及以上（CIN2＋）病人的宫颈分泌物标本,其中CIN2 67例,CIN3/ACIS 247例,浸润性宫颈癌7例。采用深圳亚能生物技术有限公司的人乳头瘤病毒（HPV）基因分型检测试剂盒对所选标本进行HPV检测及基因分型。结果在所有321例标本中,HPV阳性300例,阳性率93.5%,两型及两型以上感染138例,占比43.0%。HPV16最常见,检出率为41.1%（132/321）,其次为HPV31,33,52,18和51。HPV16和33的单型感染在CIN3＋中比CIN2更常见,具有统计学差异（P〈0.05）。在包含有HPV16或HPV33的多型感染中,含有HPV16或HPV33的多型感染在CIN3＋中比CIN2更常见,具有统计学意义（P〈0.05）。结论 HPV16和HPV33比其他型别HPV具有更强的潜在致癌性。     

解脲脲原体／HPV共感染与宫颈癌变的相关性探讨

目的 了解宫颈上皮内瘤变（CIN）宫颈癌患者下生殖道解脲脲原体感染情况,初步探讨解脲脲原体（UU）、HPV与CIN/宫颈癌的相关性.方法 选取2005年9月至2009年2月中山大学附属第六医院及第二医院因宫颈上皮内瘤变或宫颈鳞癌住院的患者124例为病例组.随即抽取同期医院体检中心健康体检女性300例为对照组.采用荧光定量PCR方法进行宫颈分泌物解脲脲原体DNA检测.用杂交捕获Ⅱ代和导流杂交基因芯片技术检测HPV感染情况.结果 病例组解脲脲原体阳性率68.5%,对照组解脲脲原体阳性率38.7%.病例组和对照组之间UU阳性率比较,差异有统计学意义.124例行HPV检测病例中,UU和HPV均阳性者占58.9%.结论 女性下生殖道解脲脲原体感染与宫颈上皮内瘤变/宫颈癌有一定的相关性.解脲脲原体感染与宫颈病变程度相关,尤其与高度宫颈上皮内病变和宫颈癌相关.UU对HPV感染导致的CIN/宫颈癌可能存在协同作用.     

应用基因芯片诊断宫颈石蜡组织样本中人乳头状瘤病毒感染及其临床意义

目的探讨应用基因芯片检测宫颈石蜡组织标本中人乳头状瘤病毒（HPV）感染的可能性及其临床意义。方法收集解放军总医院诊断为宫颈鳞状上皮病变的石蜡组织标本40例,其中宫颈浸润性鳞癌18例,宫颈上皮内瘤变（CIN）Ⅲ12例,CINⅠ4例,CINⅡ6例。从组织中提取DNA后采用基因芯片检测23种常见HPV基因亚型,即PCR扩增后产物在基因芯片上进行杂交。同时选用10例经基因芯片检测16型和18型基因阳性的宫颈鳞癌的石蜡组织切片做原位杂交。基因芯片检测结果与部分原位杂交结果进行比较并分析。结果基因芯片检测的18例宫颈鳞癌HPV高危亚型均为阳性（100％）,其中1例为混合阳性;12例CINⅢ中11例为高危亚型阳性（91．7％）,1例阴性;6例CINⅡ的宫颈病变中高危型5例阳性,低危型1例阳性;4例CINⅠ中有2例低危型阳性、2例阴性;宫颈鳞癌和CINⅢ组与CINⅠ和Ⅱ组比较,差异有统计学意义（U=80．0,P〈0．01）。10例宫颈鳞癌基因芯片HPV16型和18型阳性组织中,原位杂交同型探针6例检测显示阳性。结论HPV基因芯片技术可用于检测多种亚型,特异性强,敏感性高,对HPV感染亚型的鉴别及宫颈癌的预防和治疗具有重要意义。     

宫颈上皮内瘤样病变135例三年随访分析

目的 探讨宫颈薄层细胞学检查（TCT）和HPV检测联合筛查在宫颈上皮内瘤样病变（CIN）诊治和随访中的作用.方法 对2006年进行细胞学检查异常,且组织病理学诊断为宫颈上皮内瘤样病变的患者共135人进行病例回顾性总结,并在2006年至2009年进行连续随访,对其进行TCT和HPV检测.结果 （1）73例高危型HPV阳性的患者中,15例为ASCUS,3例为ASCUS-H,28例为LSIL,27例为HSIL;17例为CINⅠ,24例为CINⅡ,30例为CINⅢ,2例为CINⅢ可疑早侵.（2）3次随访中未出现CIN复发或病理升级情况.结论 HPV检测联合宫颈细胞学检查法在宫颈上皮内瘤样病变的诊治和随访中具有重要的意义.     

高危HPV感染与宫颈病变的相关性分析

目的研究高危型人乳头瘤病毒(high-risk human papilloma virus,HR-HPV)感染与宫颈病变的相关性,为患者早期防治以及临床及时诊断提供有效依据。方法从2018年4月-2019年3月本院就诊患者中共检出946例高危型HPV感染患者,回顾性分析其中121例患者 HR-HPV与宫颈病变的关系。结果 121例研究对象中,分别有高危HPV16、高危HPV18、其他13种高危型HPV单一感染或多重感染,其中感染所占比例依次为:19.01%、8.26%和72.73%;宫颈CIN病变的发生与感染HPV的基因型有关,其中HPV16型、HPV18型感染导致宫颈CIN病变的发生率与其他13种HPV型别比较,差异有统计学意义(P0.05);宫颈活检结果中慢性宫颈炎所占比例为75.21%(91/121),鳞状上皮乳头瘤样增生占15.70%(19/121),CIN Ⅰ占4.96%(6/121),CIN Ⅱ 0.83%(1/121),CIN Ⅲ占3.31%(4/121)。结论 HR-HPV感染与宫颈病变关系密切,应加强对女性 HPV 感染的检测和筛查。     

宫颈上皮内瘤样病变患者高危型HPV感染基因分型分析

目的了解宫颈上皮内瘤变患者的高危型HPV的感染及其分型和不同程度宫颈病变的主要感染型别情况。方法应用型特异PCR检测宫颈癌前病变的患者的主要高危型HPV-16、18、33、58的感染及其分型情况的相关性研究。结果在本研究宫颈上皮内瘤变患者98例中,4种高危型HPV的总阳性例数为73例,HPV总的感染率为74.5%,存在多重感染。其中HPV-16、18、33、58的总感染率分别为53.1%、38.7%、17.3%和30.6%。CIN的Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ3组患者的4种高危型HPV的感染率分别为42.9%、61.1%和93.2%。结论主要高危型HPV在宫颈上皮内瘤变患者中感染的主要型别依次为HPV16、HPV18、HPV58、HPV33,主要为HPV16和HPV18型;不同程度CIN的高危型HPV的总感染率不同,随病变程度的加重而增加。     

人乳头状瘤病毒阴性的宫颈癌及其癌前病变中p16INK4A蛋白表达和DNA倍体分析

目的探讨人乳头状瘤病毒（HPV）感染阴性的宫颈癌及其癌前病变中p16^INK4A蛋白表达和DNA倍体分析的临床病理学意义。方法应用PCR方法筛查出HPV感染阴性的20例慢性宫颈炎、20例宫颈上皮内瘤变（CIN）、3例宫颈腺上皮内瘤变（CGIN）、38例浸润性鳞状细胞癌（鳞癌）和15例浸润性腺癌作为研究对象。应用免疫组织化学（LSAB）染色方法检测p16^INK4A蛋白在这些病变组织中的表达,并结合流式细胞仪DNA倍体分析探讨HPV阴性的宫颈癌的早期诊断和预后判定。结果p16^INK4A蛋白特异性地表达在CIN和CGIN病变、鳞癌以及腺癌细胞的胞核和胞质中,而在正常鳞状上皮和腺上皮中没有任何阳性表达信号。另外,DNA异倍体在浸润性鳞癌和腺癌中的表达率明显高于CIN病变组（P〈0．01）。在有淋巴结转移的浸润癌中DNA异倍体存在的百分率高于无淋巴结转移组,但尚未发现差异有统计学意义。在8例p16^INK4A表达阴性的浸润性鳞癌中有2例表现为DNA异倍体。结论p16^INK4A蛋白检测可以作为HPV感染阴性的宫颈鳞癌及腺癌的早期诊断指标,结合DNA倍体分析将对宫颈恶性肿瘤的诊断有重要的辅助意义。     

HPV高危型别检测联合细胞学检查对宫颈病变筛查的研究

目的 研究人乳头瘤病毒HPV高危型别检测联合液基薄层细胞学检查（TCT）及阴道镜检查对宫颈癌及癌前病变筛查的诊断价值。方法 对1375例宫颈组织细胞样本进行HPV高危型别检测,对其中阳性样本进行TCT检查,有宫颈上皮内瘤变者（CIN）行阴道镜下活检病理组织学确诊。HPV高危型别检测采用双色荧光定量PCR方法进行8种高危型HPV DNA（主要高危型：HPV16,18,45,31）和次要高危型（HPV33,52,58,67）分型及病毒载量检测。结果 1375例样本高危型HPV DNA检测结果为阳性256例,阳性率为18.62％;TCT结果为WNL的样本高危型HPV的感染率为16.41％ （42/256）;TCT结果为ASCUS以上的样本高危型HPV的感染率为83.59％（ 214/256）。HPV各型别的病毒载量在TCT结果为WNL、ASCUS及LSIL/HSIL/SCC之间差异无统计学意义（P＞0.5）。TCT与阴道镜的阳性符合率分别为WNL-正常或炎症92.86％（ 39/42）,LISL-CIN I 81.36％（48/59）,HSIL-CIN Ⅱ＆Ⅲ 85.19％ （23/27）,SCC-宫颈癌9/10。结论 HPV高危型别检测联合TCT技术及阴道镜检查能显著提高宫颈病变的阳性检出率,可作为宫颈癌及宫颈上皮内瘤变（ CIN）筛查的可靠早期诊断方法,具有重要临床应用价值。     

实时荧光定量PCR法检测人乳头状瘤病毒的实验研究

目的 通过研究病变宫颈中人乳头状瘤病毒(HPV)16/18型的表达,探讨HPV16/18型病毒感染与宫颈病变发生发展之间的关系.方法 结合病理切片诊断,以免疫组化作对照.运用实时荧光定量PCR技术检测病变宫颈中HPV16/18型DNA拷贝数,以及HPV16/18型E7基因mRNA表达量.结果 慢性宫颈炎患者中HPV16/18型感染率低(7.4%).宫颈管上皮内瘤样变(CIN)组HPV16型感染率较高为69.6%,宫颈癌患者巾为72.7%.HPV16型DNA的拷贝数在宫颈上皮内瘤样变患者中与病理分级没有明显的相关性.但在宫颈癌患者中,病毒DNA的拷贝数明显升高,二者差异明显.CIN轻度(I)、中度(Ⅱ)、高度(Ⅲ)组和宫颈癌患者中,HPV16 E7基冈的表达率分别为0、37.5%、42.9%、63.6%.统计学分析表明,HPV16 E7 mRNA的拷贝数与病情呈明显的正相关性.结论 感染者中主要以HPV16型为主,HPV18型较少.宫颈癌患者中HPV16 DNA拷贝数明显高于CIN Ⅱ、Ⅲ组,HPV16型E7 mRNA在宫颈癌中表达率及表达量明显增加并与宫颈癌变呈正相关.实时荧光定量PCR适合临床宫颈病变病毒的筛查与检测.     

宫颈癌组织APOBEC3A蛋白的表达与高危型HPV感染的相关性研究

 目的： 探讨宫颈癌组织中载脂蛋白 B mRNA 编辑酶催化多肽样蛋白3A（APOBEC3A）表达与高危型人乳头瘤病毒（HPV）感染的关系。方法： 采用免疫组化法检测26例宫颈癌、27例宫颈上皮内瘤变（CIN）I～III和22例正常宫颈组织APOBEC3A蛋白的表达,同时使用凯普分型检测试剂盒对3组样品分别进行高危HPV16/HPV18分型检测。以脂质体法转染APOBEC3A质粒进入HeLa细胞,RT-qPCR与Western blotting验证APOBEC3A对高危型HPV18 E6 mRNA以及蛋白表达的影响。结果：宫颈癌组织、CIN组织以及正常宫颈组织中APOBEC3A蛋白表达的阳性率分别为46.2%、92.6%和86.4%,宫颈癌组织中APOBEC3A蛋白表达较正常宫颈组织明显下降（P<0.01）。宫颈癌组织、CIN及正常宫颈组织中HPV16感染阳性率分别为92.3%、77.8%和54.5%; HPV18感染阳性率分别为80.8%、51.8%和68.2%;APOBEC3A蛋白表达与HPV18感染阳性率呈负相关(P<0.05)。增加HeLa细胞中APOBEC3A的表达明显降低了HPV18 E6 mRNA以及蛋白的表达。结论：在宫颈癌组织中APOBEC3A高表达可以对抗HPV18感染,并抑制HPV18 E6的转录和表达。     

300例妇科宫颈病变患者石蜡切片HPV基因分型结果分析

探讨女性生殖道感染人乳头瘤病毒(HPV)和不同宫颈病变的关系及HPV检测在宫颈癌防治方面的应用价值.对阴道镜活检病理诊断的300例不同的宫颈病变患者进行HPV-DNA检测(同时检测5种低危型和18种高危型HPV亚型).结果显示,慢性宫颈炎组HPV阳性87例,阴性48例,阳性率64.5%;子宫颈上皮内瘤变(CIN)组(C...     

维吾尔族妇女宫颈癌人乳头状瘤病毒感染与人类白细胞抗原Ⅰ类基因表达缺失的关系及其意义

目的 研究维吾尔族妇女宫颈癌中人乳头状瘤病毒(HPV)感染和人类白细胞抗原Ⅰ类(HLA-Ⅰ)家族基因HLA-A、B和C表达的关系,探讨HPV感染和HLA-Ⅰ类家族基因表达缺失在宫颈癌演进过程中的作用.方法 收集维吾尔族妇女宫颈炎、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ和宫颈鳞癌患者的新鲜组织标本共78例,提取总RNA,采用半定量RT-PCR方法鉴定HLA-A、B和C基因的mRNA表达水平.提取组织DNA,采用HPV通用引物和HPV分型芯片确定HPV亚型.结果 HLA-A、B和C基因的总体mRNA表达缺失率随着宫颈病变的加重而增加,在宫颈炎组织内为1/12,在CIN及宫颈鳞癌分别占70.0%(14/20)和84.8%(39/46),在恶性程度高的低分化癌组织中高达90.6%(29/32),并与高危型HPV16感染呈正相关(r=0.803,P＜0.01).结论 HLA-Ⅰ类基因的表达缺失是维吾尔族妇女宫颈癌发生的重要标志,而HPV16感染可能是HLA-Ⅰ分子表达缺失的前提条件.     

人类乳头状瘤病毒分型检测在宫颈癌筛查中的临床研究

目的 探讨人类乳头状瘤病毒（human papillomavirus,HPV）基因分型检测在宫颈病变诊断中的临床应用价值.方法 选取2010年1月至2012年12月在北京大学第一医院妇产科就诊的1715例患者作为研究对象,所有患者均行宫颈脱落细胞学检查、HPV分型检测及阴道镜检查下行多点活检,并最终经组织病理学检查诊断为宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia,CIN）.分析HPV分型检查在宫颈癌筛查诊断中临床应用价值.结果 1715例CIN患者HPV检出率排名前五位的依次是HPV16、58、52、33、31;CIN2＋（包括CIN2/CIN3/原位腺癌/宫颈癌,以下简称CIN2＋）患者中前五位依次是HPVI6、58、33、52、31;其中CIN2＋中细胞学未见上皮内病变细胞和恶性细胞（negative for intraepithelial lesion or malignancy,NILM）患者中,Logistic回归分析结果显示HPV16、33和18型阳性致CIN2＋风险性较大,回归系数OR分别为5.031（P=0.000）、2.375 （P=0.000）和1.598（P =0.027）.宫颈脱落细胞学为非典型鳞状上皮细胞（atypical squamous cells of undetermined significance,ASCUS）,伴随HPV16、58型阳性,发生CIN2＋风险性较大,回归系数OR分别为5.139（P=0.000）和2.096（P=0.025）.宫颈脱落细胞学为低度鳞状上皮内病变（low squamous intraepithelial lesion,LSIL）,伴随HPV16、33、52型CIN2＋风险性较大,回归系数OR分别为5.774（P =0.000）、3.368（P =0.000）和1.747（P=0.034）.结论 HPV分型检测在宫颈癌筛查中具有重要作用,是指导细胞学阴性、ASCUS和LSIL患者临床处理时的重要参考指标,尤其是当HPV16型阳性时.     

γH2AX在HPV16阳性宫颈鳞癌组织中的表达及意义

目的 探讨γH2AX在HPV16阳性宫颈鳞癌组织中的表达及意义.方法 对74例宫颈鳞癌组织通过DNA提取,PCR检测,分析HPV的感染情况并筛选HPV16阳性宫颈癌组织;进而对HPV16阳性的宫颈癌石蜡组织连续切片HE染色明确组织型别,进行HPV16 DNA原位杂交检测HPV定位、免疫组化检测γH2 AX和p16蛋白的表达;最后选取30例典型的包括从正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变到宫颈原位癌渐变的组织切片,对比HPV DNA定位与γH2 AX和p16蛋白的表达,分析γH2 AX作为HPV感染导致宫颈癌发生过程中生物标记物的可行性.结果 经PCR扩增证明HPV感染率为98.65％,HPV16是最常见的型别占74.32％;原位杂交结果显示正常宫颈组织和CIN Ⅰ检测不到HPV16 DNA的存在,CINⅡ中HPV主要为游离型存在,随着宫颈病变的加重,HPV16 DNA逐渐出现整合形式;p16和γH2AX的表达均随着宫颈上皮病变级别的增加其阳性表达率增高,HPVDNA和γH2AX的表达均以颗粒细胞层和棘细胞层为主,定位具有一致性,HPV DNA和p16的表达定位不具有一致性.结论 γH2AX作为DNA损伤激活的重要蛋白,可作为HPV16感染致宫颈癌发生过程中的生物标记物.     

宫颈HPV感染治疗现状

人乳头瘤病毒感染与宫颈癌及宫颈上皮内瘤样病变的关系密切,高危型人乳头瘤病毒持续感染是引发CIN及子宫颈癌进展和复发的重要病原学因素。本文从药物、物理、手术及综合治疗等方面对宫颈HPV感染的治疗进展进行讨论,为临床治疗提供参考。     

子宫颈癌中Hedgehog信号通路蛋白表达与人乳头状瘤病毒16型感染的关系

目的 探讨Hedgehog(Hh)信号通路蛋白在宫颈癌及其癌前病变中的临床病理学意义,并分析其与人乳头状瘤病毒(HPV)16型感染的关系.方法 32例正常宫颈上皮、71例宫颈上皮内瘤变(CIN;CIN Ⅰ 28例,CIN Ⅱ 18例,CIN Ⅲ25例)和80例宫颈鳞状细胞癌共183例选自延边大学医院、延边妇幼保健院和延边肿瘤医院病理科存档蜡块.应用PCR技术检测上述组织中HPV16型的感染情况,并应用Shh、Ihh、Ptch和Smo 4种Hh信号通路蛋白抗体、组织芯片和免疫组织化学EnVision法检测Hh信号通路蛋白在上述病变组织中的表达情况.结果 Shh、Ihh、Ptch和Smo在正常宫颈黏膜上皮中为弱阳性,而在宫颈癌和CIN Ⅲ中呈强阳性,其表达率均显著高于正常宫颈黏膜上皮(P均<0.05).80例官颈癌标本中HPV16阳性率是77.5%(62/80),而且Shh蛋白的强阳性率在HPV16型阳性的宫颈癌组织中显著高于HPV16阴性组(P<0.05).结论 Hh信号通路蛋白过表达可以作为宫颈癌及其癌前病变的早期辅助诊断指标并有望成为宫颈癌靶向治疗的新靶点,而且Shh蛋白的过表达与HPV16型感染密切相关.     

地方株HPV16 L1基因免疫保护性研究

人乳头状瘤病毒（human papillomavims，HPV）至今已鉴定的HPV型超过200个，约40个型能感染生殖道，以性接触方式传播。分子流行病学证据显示HPV是引起浸润性宫颈癌和宫颈上皮内癌的主要原因，其中HPV16型在宫颈癌中检出率最高，约50％的宫颈癌患者肿瘤组织能被检测到，HPV16也是我国妇女宫颈癌的主要型别。因为HPV感染性疾病的难治性、复发性和潜在致癌性，研制开发安全、有效的HPV疫苗有一定的实用意义。     

人乳头瘤病毒分型与宫颈病变关系的研究

目的探讨不同砸别人乳头瘤病毒（Human papilloma virus,HPV）感染与宫颈疾病发生发展的关系。方法应用核酸分子快速杂交基因分型技术,对375例宫颈病变患者（宫颈炎182例、CINI81例、CINⅡ68例、CINⅢ69例、宫颈癌15例）进行HPV感染基因型分型测定,同时进行宫颈细胞学检查。结果375例标本中HPV阳性检出率为35．2％,HPV在各类宫颈病变组的阳性枪出率分别为宫颈炎18．6％,CINI32．1％,CINⅡ57．3％,CINⅢ68．9％,宫颈癌86．7％,宫颈炎组和宫颈癌病变组HPV之间结果差异有统计学意义（x^2=105．0,P〈0．05）。HPV多重感染率为32．6％,其中最常见HPV感染亚型为HPV16。结论宫颈病变严重程度与感染HPV亚型的致病能力密切相关。HPV核酸分型检测对宫颈疾病诊断和治疗具有重要意义。     

宫颈高危型HPV感染对宿主细胞因子IL-18影响的实验研究

目的 检测高危型HPV感染宫颈上皮瘤样病变及宫颈癌患者外周血IL-18的水平变化，分析Th1细胞的细胞因子免疫活动，为肿瘤的免疫治疗提供实验依据。方法 在细胞因子中加入荧光标记的特异性抗细胞因子单克隆抗体，特异性抗原抗体结合，以流式细胞仪分析特异性细胞因子IL-18表达水平。结果 高危型HPV感染宫颈上皮瘤样病变及宫颈癌患者IL—18表达水平较正常对照组降低，差异有统计学意义。结论 高危型HPV感染宫颈上皮瘤样病变及宫颈癌宫颈癌患者IL-18表达降低，这可能是肿瘤细胞发生免疫逃逸，从而导致肿瘤的发生或者转移的原因之一。