低氧习服过程中肺组织一氧化氮水平及钠-钾-ATP酶活性的变化

目的：探讨低氧习服过程肺组织一氧化氮水平和Na^+-K^+-ATP酶活性的变化及其对模拟高原低氧性肺水肿的影响。方法：将32只3月龄Wistar大鼠随机分成常氧对照组、急性低氧组、3000m低氧习服组、5000m低氧习服组，习服完成后．置于模拟海拔6000m急性低氧24h，检测动物肺组织一氧化氮水平及Na^+-K^+-ATP酶活性的变化及肺超微结构的变化。结果：急性低氧组肺组织超微结构出现明显的间质性肺水肿，而经过低氧习服后间质性肺水肿则明显减轻；急性低氧组大鼠肺组织一氧化氮水平[(17.09&;#177;3．62)μmol／L]显著低于常氧对照组[(60．55&;#177;4．27)μmol／L](q=31．642，P&;lt;0．01]，经过3000m和5000m低氧习服后肺组织一氧化氮水平逐渐接近于常氧对照组，明显高于急性低氧组(q=25．540，43．625，P&;lt;0．01)；急性低氧组肺组织Na^+-K^+-ATP酶活性明显低于常氧对照组(q=15．347，P&;lt;0．01)，经过3000m和5000m低氧习服后Na^+-K^+-ATP酶活性显著高于常氧对照组(q=8．290，28．563，P&;lt;0．01)。结论：低氧习服后肺组织一氧化氮水平及Na^+-K^+-ATP酶活性的提高有利于减轻大鼠低氧性肺水肿。     

硫酸镁对脊髓损伤后钠离子-钾离子-三磷酸腺苷酶活性和丙二醛浓度与含水量的影响

目的：硫酸镁用于脑损伤的治疗已取得了较满意的疗效，探讨硫酸镁对脊髓损伤后Na^ -K^ -ATP酶活性、丙二醛浓度与含水量的影响。方法：改良Allen’s法建立SD大鼠急性脊髓损伤模型，随机分损伤组和硫酸镁治疗组(脊髓损伤后30min-次性腹腔注射300mg／b硫酸镁)，在伤后6，12和24h检测伤段脊髓Na^ -K^ -ATP酶活力、脊髓组织含水量及丙二醛浓度，与正常对照组(n=8)比较。结果：损伤组与对照组比较，Na^ -K^ -ATP酶活力降低，丙二醛浓度与脊髓含水量升高，差异有非常显性意义(P＜0．01)；治疗组与损伤组     

家兔角膜内皮细胞体外原代培养的实验研究

目的研究培养家兔角膜内皮细胞 ,为实验研究提供基础。方法体外培养家兔角膜内皮细胞并做电镜鉴定。结果细胞 3d后开始从组织块边缘生出 ,1周后组织块周围长出细胞晕 ,3周后开始融合 ,传代。结论经相差倒置显微镜和电镜证实为角膜内皮细胞。     

传统方剂五苓散加减后2种复方制剂对细胞毒性脑水肿的作用

目的：观察在传统方剂五苓散的基础上加用田七、丹参等组成制剂健神利水Ⅰ号与加用石菖蒲、夏枯草等组成的制剂醒脑消肿胶囊治疗脑出血细胞毒性脑水肿的效果差异，并分析引起差异的原因。 方法：①实验于2001-05／06在广西中医学院第一附属医院中心实验室完成。选用出生6个月的新西兰大耳白兔32只，雌雄不拘。②先用区组随机法将动物分为4组：空白对照组（未造模，只灌胃温水），模型组，健神利水Ⅰ号组和醒脑消肿胶囊组，每组8只；再将每组分为造模后12和24h2个时间点进行观察，每时间点4只动物。健神利水Ⅰ号水煎剂由三七15g，丹参15g，茯苓10g，猪苓10g，泽泻10g，白术10g，桂枝10g组成。由广西中医学院第一附属医院药房提供，用韩国产煎药机煎成200mL药液，真空密封袋4℃保存。醒脑消肿胶囊：批准文号南药（96）05079，由夏枯草15g，石菖蒲15g，茯苓10g，猪苓10g，泽泻10g，白术10g，桂枝10g组成，含生药13．33s／粒；由广西中医学院第一附属医院制剂室提供；用温水制成混悬液。2种中药给药量均为l1．5mL／kg，于实验前30min经胃管注入，其余各组以温水11．5mL／kg，于实验前30min经胃管注入，每组干预12及24h后以空气栓塞法处死动物。③采用全脑重／体质量&;#215;100％的公式计算脑系数；（湿重-干重）／湿重&;#215;100％的公式计算脑含水量；ATP酶试剂盒定磷法测定A11P酶含量；火焰光度法测定K^＋，Na^＋含量；邻一甲酚酞络合酮比色法测定Ca^2＋含量。④正态性检验用矩法，组间比较用F检验，组间两两比较用q检验，时间段（同组）内比较用t检验，方差不齐用秩和检验。 结果：兔32只均进入结果分析。①两用药组兔脑系数与脑含水量均明显低于模型组（P〈0．01），其中健神利水Ⅰ号组兔脑系数与脑含水量明显低于醒脑消肿胶囊组（P〈0．05）。②模型组造模后12，24h兔左侧颢叶脑组织Na^2＋含量明显高于两用药组（P〈0、01），健神利水Ⅰ号组明显低于醒脑消肿胶囊组（P〈0．05）；模型组造模后24h兔左侧颢叶脑组织Na^＋ -K^＋ -ATP酶活力明显低于假手术组和两用药组（P〈0．01），健神利水Ⅰ号组明显高于醒脑消肿胶囊组（P〈0．05）。模型组造模后24h兔左侧颢叶脑组织K^＋含量明显低于假手术组（P〈0．01）。③各组兔左侧额叶脑组织Ca^2＋含量和Ca^2＋ -ATP）酶活力在造模后12，24h差异不明显（P〉0．05）。 结论：健神利水Ⅰ号对脑细胞的保护和脱水作用要强于醒脑消肿胶囊，可能与其提升Na^＋ -K^＋ -ATP酶含量有关。     

低氧习服过程中肺组织一氧化氮水平及钠-钾-ATP酶活性的变化

目的:探讨低氧习服过程肺组织一氧化氮水平和Na-K-ATP酶活性++的变化及其对模拟高原低氧性肺水肿的影响。方法:将32只3月龄Wistar大鼠随机分成常氧对照组、急性低氧组、3000m低氧习服组、5000m低氧习服组,习服完成后,置于模拟海拔6000m急性低氧24h,检测动物肺组织一氧化氮水平及Na-K-ATP++酶活性的变化及肺超微结构的变化。结果:急性低氧组肺组织超微结构出现明显的间质性肺水肿,而经过低氧习服后间质性肺水肿则明显减轻;急性低氧组大鼠肺组织一氧化氮水平犤(17.09±3.62)μmol/L犦显著低于常氧对照组犤(60.55±4.27)μmol/L犦(q=31.642,P<0.01),经过3000m和5000m低氧习服后肺组织一氧化氮水平逐渐接近于常氧对照组,明显高于急性低氧组(q=25.540,43.625,P<0.01);急性低氧组肺组织Na-K++-ATP酶活性明显低于常氧对照组q=15.347,P<0.01),经过3000m(和5000m低氧习服后Na-K-ATP酶活性显著高于常氧对照组(q++=8.290,28.563,P<0.01)。结论:低氧习服后肺组织一氧化氮水平及Na-K-ATP酶活性的提高有++利于减轻大鼠低氧性肺水肿。     

高渗盐水对大鼠缺血再灌注损伤肾组织Na+-K+-ATP酶活性的影响

目的 探讨高渗盐水对缺血再灌注损伤肾组织Na+-K+-ATP酶活性的影响.方法 56只SD大鼠随机分为假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)和高渗盐水处理组(H组).肾缺血再灌注损伤模型的建立:左侧肾蒂夹闭45 min后松开,分别于再灌注4 h、6 h、12 h,测定左肾系数、血清肌酐(Cr)、左肾组织Na+-K+-ATP酶(Na+-K+-ATPase)活性和丙二醛(MDA)含量.结果 H组左肾系数、血清肌酐和丙二醛明显低于IR组,而左肾组织Na+-K+-ATP酶活性明显高于IR组.结论 高渗盐水预处理对实验SD大鼠缺血再灌注肾损伤有保护作用.     

构建脑血管内皮细胞紧密连接模型对脑血管疾病发生发展机制研究的意义

目的:电镜下观察人脐静脉内皮细胞株ECV304细胞间紧密连接的形成,并建立脑血管内皮细胞紧密连接的模型,以期发现该模型的建立对发现脑血管病变早期发生及发展的意义。方法:培养ECV304细胞,在细胞生长接触到融合状态后,在透射电镜下观察细胞间紧密连接的形成情况。结果:透射电镜下可见到ECV304细胞间能够形成典型的紧密连接结构,以及内皮细胞所特有的W-P小体,吞饮小泡等结构。结论:ECV304细胞之间能够形成典型的紧密连接;可以利用ECV304细胞系建立研究脑血管内皮细胞间紧密连接的模型。     

三氧化二砷及其不同浓度对角膜基质细胞增殖和移行的影响

目的:观察不同浓度三氧化二砷对体外培养的兔角膜基质细胞增殖和移行的影响。方法:实验于2004-11/2005-04在哈尔滨医科大学肿瘤研究所完成。实验动物为健康日本大耳白兔2只,取其角膜用组织块培养法培养原代及传代得兔角膜基质细胞,将传至2～3代的兔角膜基质细胞用于实验。向实验细胞中分别加入含不同浓度(100,50,25,12.5,10,6.25,5,2.5,1.25,0.625μmol/L)的三氧化二砷培养液,同时以加入不含三氧化二砷的培养液作为阴性对照,以加入含0.0025%丝裂霉素的培养液作为阳性对照。用细胞计数法和四甲基偶氮唑盐法检测三氧化二砷对角膜基质细胞增殖的影响,用缺损闭合法观察三氧化二砷对角膜基质细胞移行的影响。结果:实验纳入大耳白兔2只,取其4只角膜培养传至二三代的角膜基质细胞均无污染,细胞数量足够实验所需。①细胞计数法观察不同浓度的三氧化二砷对角膜基质细胞增殖的影响:低浓度的三氧化二砷(<12.5μmol/L)对角膜基质细胞增殖无明显抑制作用,而高浓度的三氧化二砷(≥12.5μmol/L)对角膜基质细胞的增殖具有明显的抑制作用,抑制率均在50%以上,且抑制作用随浓度的增加而增强。台盼兰染色显示各组细胞存活率均在90%以上,未见细胞毒性。②四甲基偶氮唑盐法观察不同浓度的三氧化二砷对角膜基质细胞增殖的影响:四甲基偶氮唑盐法检测结果与细胞计数法基本一致,三氧化二砷对角膜基质细胞增殖的抑制率随浓度的增加逐渐增强。与阳性对照比较,给予25,50,100μmol/L三氧化二砷的角膜基质细胞在加药后6d其增殖抑制率明显降低(56.4%,45.4%,50.2%,55.4%,P<0.05)。③三氧化二砷对角膜基质细胞移行的影响:给予低浓度的三氧化二砷(<25μmol/L)及阴性对照药的角膜基质细胞在用药后48h已有较多的细胞长入,4d后完全闭合,而给予高浓度三氧化二砷的角膜基质细胞在用药后48h只有极少数细胞长入缺损区,8d后仍未见缺损闭合,缺损闭合的时间明显延长。结论:三氧化二砷对角膜基质细胞增殖的抑制率随浓度的增加逐渐增强,高浓度的三氧化二砷具有抑制兔角膜基质细胞增殖和移行的作用,而低浓度的三氧化二砷此种作用不明显。三氧化二砷的浓度在100μmol/L以下时,对角膜基质细胞无明显的毒性反应。     

心脏停跳复苏犬大脑组织内皮素-1含量和Na+-K+ ATP酶活性的变化

目的　研究犬心脏停跳及复苏后脑组织内皮素 - 1(Endothelin ,ET - 1)含量、Na -K ATP酶活性的变化 ,探讨ET - 1在复苏后脑损伤中的可能作用机制。方法　采用犬室颤心跳呼吸骤停模型 ,进行标准心肺复苏 ,分别观察室颤前、心脏停跳 10min及复苏后 30min、2h和 4h的脑组织ET - 1含量和Na -K ATP酶活性变化及两者之间的关系。结果　心脏停跳及复苏后脑组织ET - 1含量明显升高 ,Na -K ATP酶活性降低 ,两者呈显著负相关。结论　心脏停跳及复苏后脑组织ET - 1含量升高引起脑组织损伤 ,其可能的作用机制之一是抑制了Na -K ATP酶的活性。     

HBsAg阳性献血者红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性研究

目的：探讨HBsAg阳性献血者红细胞膜Na^ -K^ -ATP酶活性变化及意义。方法：应用比巴法检测55例HBsAg阳性并伴ALT不正常的献血者及50例健康献血者的红细胞膜Na^ -K^ -ATP酶活性，并将结果进行相关分析。结果：与健康对照组比较，HBsAg阳性献血者红细胞膜Na^ -K^ -ATP酶活性明显下降。结论：献血者红细胞膜Na^ -K^ -ATP酶活性下降与HBsAg阳性密切相关，ATP酶活性下降可能参与乙型肝炎病变的发生、发展过程。     

丹参多酚酸盐对电离辐射损伤血管内皮细胞影响的初步研究

目的：观察不同浓度的丹参多酚酸盐对电离辐射后人脐静脉内皮细胞（HUVEC）系ECV-304增殖抑制的影响，初步了解丹参多酚酸盐对血管内皮细胞的抗辐射保护作用。方法：ECV-304未干预组和不同浓度的丹参多酚酸盐干预组用4Gy的6MV-X射线进行照射，照前和照后24h分别用MTT法，观察药物对细胞增殖抑制的影响。结果：与照前对比，照后24h未干预组细胞增殖抑制率达到84%，而干预组随着药物浓度的增加，细胞的受抑制率逐渐降低。结论：丹参多酚酸盐对电离辐射损伤血管内皮细胞具有明显的保护作用，且具有药物浓度依赖性。     

常压氧对大鼠脑缺血再灌注损伤Na~+-K~+-2Cl~-共转运蛋白1型的影响

目的:研究常压氧(NBO)对大鼠脑缺血再灌注损伤Na+-K+-2Cl-共转运蛋白1型(NKCC1)的影响。方法:采用线栓法构建大鼠大脑中动脉缺血模型(MCAO),术后2h进行神经功能评分,将其评分与假手术组进行比较。MCAO模型构建成功者进行再灌注,随机分为NBO组和模型组,NBO组于再灌注后采用体积分数60%NBO进行治疗。各组大鼠分别在0、2、4、6、12和24h处死,取脑组织进行HE染色及Western Blot检测。结果:与假手术组相比,MCAO组神经功能评分显著增高,差异有显著性意义(P0.05)。HE染色结果显示模型组和NBO组大鼠缺血2h时脑组织均无明显病理结构改变,随着再灌注时间的延长,模型组大鼠脑组织病理改变逐渐增加,而与模型组相比,NBO组大鼠的脑组织病理改变明显减轻。Western Blot检测结果显示模型组和NBO组在起始2h内,脑组织NKCC1蛋白和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白表达水平与正常脑组织相比没有明显变化(P0.05),随着再灌注时间的延长,模型组NKCC1蛋白和HIF-1α蛋白表达水平明显增加,NBO组NKCC1蛋白和HIF-1α蛋白表达水平虽有增加但其表达水平仍明显低于模型组(P0.05)。结论:NBO疗法可以下调脑缺血再灌注后脑组织NKCC1蛋白和HIF-1α蛋白的表达,减轻大鼠脑缺血再灌注损伤,促进大鼠神经功能恢复,具有脑损伤保护作用。     

一氧化氮在血管内皮生长因子效应中作用的研究

目的　观察血管内皮生长因子 (VEGF)对兔离体主动脉内细胞增殖的影响 ,了解一氧化氮 (NO)在其中所起的作用 ,明确 VEGF的作用机制。方法　先进行兔主动脉内皮细胞的培养和鉴定 ,然后行传代培养。在第 3～ 5代主动脉内皮细胞培养液中加入不同浓度的 VEGF培养 4 8h,测定主动脉内皮细胞的吸收光密度 (OD)值来观察其增殖程度。并应用一氧化氮合成酶 (NOS)抑制剂 N-硝基 - L -精氨酸甲酯 (L - NAME)后观察内皮细胞 OD值的变化情况。结果　VEGF可使血管内皮细胞 (VEC)的 OD值的升高 ,并呈剂量依赖性 (r=0 .972 7;P<0 .0 1) ,L - NAME可剂量依赖性地抑制其效应 (P<0 .0 1)。结论　 NO在 VEGF促 VEC增殖中起中介作用。