补肾生血法对慢性再障患者表达整合素αLβ2/CD 11a水平影响的研究

目的:探讨补肾生血法对慢性再生障碍性贫血(简称慢性再障,CAA)患者粘附分子αLβ2/CD 11a表达水平的影响.方法:将60例慢性再障患者随机分为实验组和对照组,分别给予补髓生血颗粒和康力龙,采用RT-PCR方法检测αLβ2/CD 11a和的mRNA表达,流式细胞术(FCM)检测骨髓造血干祖细胞αLβ2/CD 11a的表达水平.结果:CAA患者造血细胞αLβ2/CD 11a表达异常,补髓生血颗粒剂对造血细胞αLβ2/CD 11a的表达水平有调节作用,与康力龙组比较无显著差异.结论:CAA可能存在造血干祖细胞与骨髓微环境功能缺陷,骨髓造血干祖细胞粘附分子水平异常导致其与骨髓基质细胞间的粘附功能降低,从而影响造血,所以调节骨髓造血千祖细胞粘附分子的表达,改善骨髓造血干祖细胞与骨髓基质细胞/细胞外基质间的粘附功能从而促进骨髓造血功能恢复可能是补髓生血颗粒治疗CAA的作用机理之一.     

补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血患者骨髓CD+34及CD+34C-myc细胞表达水平的影响

目的:探讨补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血(CAA)患者CD34 细胞及CD34 C-myc细胞表达影响及疗效机理。方法:应用免疫组化技术和双染法标记,检测36例CAA患者治疗前后骨髓CD3 4细胞及CD3 4C-myc细胞表达水平。结果:CAA患者CD3 4细胞表达疗前和疗后均低于正常组(P<0.05),疗后与疗前相比差异显著(P<0.05);CD3 4C-myc细胞表达疗前和疗后均高于正常组(P<0.05),疗后与疗前相比差异显著(P<0.05);且实验组疗效优于对照组(P<0.05)。结论:补髓生血颗粒作用机制之一可能是通过降低C-myc蛋白表达,从而提高CAA患者骨髓造血干细胞水平的。     

补髓生血颗粒对慢性再障患者细胞凋亡及Bax基因的影响

目的:探讨补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血患者骨髓造血细胞过度凋亡和Bax基因表达水平的影响及其与中医辨证分型的关系.方法:应用原位末端标记法及原位杂交法检测慢性再障患者应用补髓生血颗粒治疗前后骨髓造血细胞凋亡阳性指数及Bax基因表达阳性指数.结果显示:治疗后慢性再障患者骨髓造血细胞凋亡阳性指数及Bax基因表达水平均下降,且阳虚型细胞凋亡阳性指数接近于正常,阴虚型与正常组比仍有较显著差异;而治疗后两型Bax水平与正常对照组比仍有较大差异.结论:补髓生血颗粒对慢性再障患者骨髓造血细胞过度凋亡有抑制作用,下调Bax基因表达水平仅是其抑制细胞凋亡的机制之一.     

补髓生血颗粒对慢性再障患者骨髓影响的实验研究

目的:探讨补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血(CAA)患者CD34 细胞及CD34 C-myc细胞表达影响及疗效机理.方法:应用免疫组化技术和双染法标记,检测36例CAA患者治疗前后骨髓CD34 细胞及CD34 C-myc细胞表达水平.结果:CAA患者CD34 细胞表达疗前和疗后均低于正常组(P＜0.05),疗后与疗前相比差异显著(P＜0.05);CD34 C-myc细胞表达疗前和疗后均高于正常组(P＜0.05),疗后与疗前相比差异显著(P＜0.05);且实验组疗效优于对照组(P＜0.05).结论:补髓生血颗粒作用机制之一可能是通过降低C-myc蛋白表达,从而提高CAA患者骨髓造血干细胞水平的.     

补髓生血颗粒对慢性再障患者骨髓单个核细胞蛋白激酶B表达的影响

目的:探讨补髓生血颗粒对慢性再障患者(CAA)骨髓单个核细胞中蛋白激酶B表达的影响及其作用机制。方法:采用蛋白质印迹(Western-blot)方法检测CAA患者、正常人骨髓基质细胞PKB表达水平。结果:CAA患者骨髓单个核细胞的PKB表达水平均低于正常组(均P0.05),经补髓生血颗粒治疗后,PKB表达水平有所上升,与治疗前相比具有显著性差异(P0.05)。结论:CAA患者骨髓基质细胞PKB呈低水平表达,它可能参与了CAA的发病机制过程;中药补髓生血颗粒通过调节PKB的表达水平而抑制PKB促凋亡作用,有可能调节骨髓造血信号转导调控,促进骨髓造血功能。     

补髓生血颗粒对慢性再障患者骨髓单个核细胞MEK表达的影响

目的：探讨补髓生血颗粒对慢性再障患者（CAA）骨髓单个核细胞中丝裂原活化蛋白激酶（MEK）表达的影响及其作用机制。方法：采用蛋白质印迹（Western-blot）方法检测CAA患者、正常人骨髓基质细胞MEK表达水平。结果：CAA患者骨髓单个核细胞的MEK表达水平均低于正常组（P〈0.05）,经补髓生血颗粒治疗后,MEK表达水平有所上升,与治疗前相比具有显著性差异（P〈0.05）。结论：CAA患者骨髓基质细胞MEK呈低水平表达,它有可能参与了CAA的发病机制过程;中药补髓生血颗粒可能是通过调节MEK的表达水平而促进MEK抗凋亡作用,从而影响骨髓造血信号转导调控,促进骨髓造血功能。     

补髓生血冲剂对慢性再障内分泌有关指标的影响

补髓生血冲剂对慢性再障内分泌有关指标的影响黑龙江中医学院附属第一医院曲佳丽，孙伟正，姚洪义最近几年来，应用中医中药治疗慢性再生障碍性贫血（ＣｈｒｏｎｉｃＡｐｌａｃｔｉｃＡｎｅｍｉａ，简称ＣＡＡ）的机理研究，已经取得一些进展，其中以骨髓造血祖（干）细胞...     

补髓生血颗粒对慢性再障患者骨髓

目的 :探讨补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血 (CAA)患者CD34 +细胞及CD34 +C -myc细胞表达影响及疗效机理。方法 :应用免疫组化技术和双染法标记 ,检测 36例CAA患者治疗前后骨髓CD34 +细胞及CD34 +C -myc细胞表达水平。结果 :CAA患者CD34 +细胞表达疗前和疗后均低于正常组 (P <0 .0 5 ) ,疗后与疗前相比差异显著 (P <0 .0 5 ) ;CD34 +C -myc细胞表达疗前和疗后均高于正常组 (P <0 .0 5 ) ,疗后与疗前相比差异显著 (P <0 .0 5 ) ;且实验组疗效优于对照组 (P <0 .0 5 )。结论 :补髓生血颗粒作用机制之一可能是通过降低C -myc蛋白表达 ,从而提高CAA患者骨髓造血干细胞水平的。     

补髓生血冲剂对慢性再生障碍性贫血患者造血调控因子表达水平的影响

目的 :探讨补髓生血冲剂对慢性再生障碍性贫血 (CAA)患者造血调控因子IL - 1β、IFN -γ、TNF -α表达水平的影响。方法 :采用现代医学梅联免疫 (ELISA)测定方法和放射免疫 (RIA)方法 ,分别对使用该冲剂治疗前后的CAA患者血清学IL - 1β、IFN -γ、TNF -α水平进行检测 ,并与对照组及正常组作比较。结果 :疗前CAA患者血清IL - 1β、IFN -γ、TNF -α表达水平与正常组相比有显著性差异 (P <0 0 1) ;经补髓生血冲剂治疗后 ,其血清学水平有所恢复 ,且实验组与对照组相比差异显著 (P <0 0 5 )。结论 :补髓生血冲剂可使CAA患者血清中IL - 1β水平提高 ,IFN -γ、TNF -α水平降低 ,从而改善紊乱的免疫状态 ,使造血细胞增殖、分化功能在一定程度上得以恢复。     

补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血患者骨髓NF-KB/p65表达的影响

目的 观察补髓生血颗粒对CAA患者骨髓单个核细胞中NF-kB磷酸化表达水平的影响,探讨补髓生血颗粒治疗CAA的作用机制.方法 40例CAA患者给予补髓生血颗粒治疗6个月,采用蛋白质印迹方法( Western-blot)观察CAA患者骨髓单个核细胞中NF-KB/p65的表达水平.结果 治疗前CAA患者骨髓单个核细胞NF-kB/P65表达水平低于正常对照组(P＜0.05),经补髓生血颗粒治疗后,NF-kB/P65表达有所上升,与治疗前相比具有显著性差异(P＜0.05).结论 CAA患者骨髓单个核细胞中的NF-kB/p65呈低水平表达,NF-kB/p65的异常表达可能参与CAA的发病机制过程,从而引起骨髓造血信号转导的异常.补髓生血颗粒可能通过调节NF-kB/p65的表达来改善CAA骨髓造血微环境.     

补肾生髓法治疗慢性再生障碍性贫血体会

再生障碍性贫血(简称再障)是由化学、物理、生物因素及不明原因所致的骨髓造血干细胞及造血微环境损伤，致使红髓被脂肪髓所替代，造血功能部分或全部衰竭的一组综合征。主要表现为进行性贫血，出血，反复感染及全血细胞减少。本病以青壮年居多，男性多于女性。按其临床表现，多属祖国医学的“虚劳”“虚损”及“血证”范畴。     

补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血患者血清TGF-β1、IL-1β表达的影响

为探讨慢性再生障碍性贫血(Chronic Ap1astic Anemia,C从)的粘附机制及补髓生血颗粒的疗效机理,分析了60例CAA患者血清TGF-β1、IL-1β水平在用药前后的变化规律,并用再障生血片进行对照研究.结果:患者疗前血清TGF-β1表达明显高于正常组(P＜0.01),而IL-1β低于正常组(P＜0.05):疗后TGF-β1水平接近正常(P＞0.05),而IL-1β水平仍低于正常(P＜0.05).表明:CAA患者血清存在着粘附相关因子的表达异常;补髓生血颗粒可通过调节TGF-β1、IL-1β水平来调控CAA患者造血细胞与基质的粘附,并提高造血细胞对HGSF的反应性.     

补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血患者骨髓NF-κΒ/p65表达的影响

目的：观察补髓生血颗粒对CAA患者骨髓单个核细胞中NF-κΒ磷酸化表达水平的影响,探讨补髓生血颗粒治疗CAA的作用机制。方法：40例CAA患者给予补髓生血颗粒治疗6个月,采用蛋白质印迹方法（Western-blot）观察CAA患者骨髓单个核细胞中NF-κΒ/p65的表达水平。结果：治疗前CAA患者骨髓单个核细胞NF-κΒ/P65表达水平低于正常对照组（P〈0.05）,经补髓生血颗粒治疗后,NF-κΒ/P65表达有所上升,与治疗前相比具有显著性差异（P〈0.05）。结论：CAA患者骨髓单个核细胞中的NF-κΒ/p65呈低水平表达,NF-κΒ/p65的异常表达可能参与CAA的发病机制过程,从而引起骨髓造血信号转导的异常。补髓生血颗粒可能通过调节NF-κΒ/p65的表达来改善CAA骨髓造血微环境。     

补髓生血颗粒对慢性再障患者整合素VLA亚家族相关粘附分子的影响

目的：探讨补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血（简称慢性再障,Chronic Aplastic Anemia CAA）患者的整合素VLA亚家族粘附分子VLA-2/CD49b、VLA-4/CD49d、VLA-5/CD49e及VLA-6/CD49f表达水平的影响。方法：将45例慢性再障患者随机分为补髓生血颗粒组（治疗组）和再障生血片组（对照组）,采用流式细胞术（FCM）检测治疗组和对照组慢性再障患者治疗前后骨髓单个核细胞整合素VLA亚家族粘附分子VLA-2/CD49b、VLA-4/CD49d、VLA-5/CD49e及VLA-6/CD49f的抗原表达水平并进行比较分析,并与10例正常人进行比较。结果：CAA患者骨髓单个核细胞粘附分子除VLA-2/CD49b处于正常表达状态外,VLA-4/CD49d、VLA-5/CD49e及VLA-6/CD49f均处于低表达状态;疗后VLA-4/CD49d、VLA-5/CD49e及VLA-6/CD49f表达水平均有不同程度升高,且补髓生血颗粒对VLA-4/CD49d、VLA-5/CD49e及VLA-6/CD49f表达的调整程度优于再障生血片组。结论：慢性再障患者粘附分子VLA-4/CD49d、VLA-5/CD49e及VLA-6/CD49f表达水平均异常,补髓生血颗粒可以通过调节骨髓细胞粘附分子表达水平来改善CAA的骨髓造血功能,是防CAA的有效药物。     

补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血患者骨髓FAK表达及FAK磷酸化水平的影响

目的:观察补髓生血颗粒对CAA患者骨髓单个核细胞中FAK表达及FAK磷酸化水平变化,探讨补髓生血颗粒治疗CAA的作用机制。方法:将60例CAA患者予以补髓生血颗粒治疗6个月,另取20例健康志愿者作为正常对照组。采用蛋白质印迹方法(Western-blot)观察CAA患者治疗前后骨髓单个核细胞中FAK及FAK pY397的表达水平。结果:CAA患者治疗前骨髓单个核细胞FAK及FAKpY397的表达均低于正常对照组(P均0.05),经补髓生血颗粒治疗后,FAK及FAK pY397的表达均所上升,与治疗前比较均具有显著性差异(P均0.05)。结论:CAA患者骨髓单个核细胞FAK及FAKpY397的水平均呈低水平表达,提示FAK与CAA发病密切相关,补髓生血颗粒可能通过调节FAK及FAK pY397的表达来改善CAA骨髓造血微环境。     

补肾生血法对慢性再生障碍性贫血患者信号转导MAPK通路的影响

目的:观察补肾生血法对慢性再生障碍性贫血(CAA)的临床疗效,探索补髓生血颗粒对CAA患者骨髓基质细胞黏附信号转导MAPK通路的影响。方法:将CAA患者121例随机分为试验组60例、对照组61例进行临床试验研究,将患者治疗前后的骨髓基质细胞提取,分析黏附信号转导MAPK通路的相关酶类JNK、P38、ERK磷酸化的变化情况。结果:CAA患者骨髓基质细胞P-ERK1/2蛋白表达水平低于正常组(P<0.05),P-JNK与P-P38蛋白表达水平高于正常组(P<0.05);通过采用补肾生血法补髓生血颗粒治疗可以调整三种蛋白的异常表达,与治疗前比较(P均<0.05)。结论:CAA患者骨髓基质细胞造血粘附信号转导MAPK通路中酶类表达异常,这些可能是骨髓造血微环境粘附功能异常的原因之一,为CAA发病机制研究提供了分子生物学依据,本研究证明采用补肾生血法治疗CAA具有较好的疗效。     

补肾生血法对慢性再生障碍性贫血患者骨髓ERK信号通路相关蛋白表达的影响

目的:探讨补肾生血法对CAA患者骨髓细胞外调节信号通路相关蛋白的表达变化及其意义。方法:将60例CAA患者按照中医辨证分为肾阴虚型33例,肾阳虚型27例,均予以补肾生血之中药补髓生血颗粒治疗,另取20例健康志愿者作为正常对照组。采用蛋白质印迹方法(Western-blot)观察CAA患者治疗前后骨髓单个核细胞ERK1、ERK2的蛋白水平表达。结果:CAA患者治疗前骨髓单个核细胞ERK1、ERK2均低于正常对照组(P均0.05),经补肾中药治疗后,ERK1、ERK2表达均有所上升(P均0.05);治疗后肾阳虚型的ERK1、ERK2上升程度均较肾阴虚型明显(P均0.05)。结论:CAA患者骨髓单个核细胞ERK1、ERK2均表达异常,提示ERK信号通路异常与CAA发病相关,补肾中药可能通过调节ERK信号通路相关蛋白ERK1、ERK2的表达来改善CAA骨髓造血功能,且存在中医证型的疗效差异。     

补髓生血冲剂对慢性再生障碍性贫血患者骨髓CD

目的探讨补髓生血冲剂对慢性再生障碍性贫血(慢性再障)患者骨髓CD34+、Fas+及CD34+mP53表达细胞的影响及意义.方法应用免疫组化技术,检测治疗前后慢性再障患者36例,正常对照12例.用单染法标记骨髓CD34+和Fas+细胞,用双染法标记骨髓CD34+mP53表达细胞.结果慢性再障患者CD34+和CD34+mP53表达细胞治疗前后均低于正常对照(P《0.05),疗后高于疗前(P《0.05);Fas+细胞治疗前后均高于正常对照(P《0.05),疗后低于疗前(P《0.05).结论补髓生血冲剂可能通过降低Fas抗原表达,提高mP53蛋白表达抑制慢性再障造血干细胞过度凋亡.     

补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血患者Th17细胞的影响

目的:探讨补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血(CAA)患者外周血中RBC、WBC、PLT数量及Th17细胞表达的影响。方法:将63例CAA患者随机分为试验组(33例)、对照组(30例),同时选取健康人10例作为正常对照组,其中试验组给予口服补髓生血颗粒,对照组给予口服再造生血片,观察周期为半年;采用血细胞分析仪检测RBC、WBC、PLT数量,采用流式细胞仪检测法分别对试验组、对照组CAA患者治疗前后外周血中Th17细胞表达水平进行对比,两组治疗后细胞表达水平分别与正常对照组进行对比。结果:试验组与对照组治疗前后比较,使外周血中血红蛋白数量、白细胞数量及血小板得到显著提升,显著降低了Th17细胞的表达水平(均为P0.01);治疗后试验组在升高白细胞总数及血小板数量与对照组相当(P0.05);治疗后试验组在升高血红蛋白数量上优于对照组(P0.05);治疗后试验组在降低Th17细胞的表达水平上优于对照组(P0.05)。结论:1补髓生血颗粒在升高外周血血红蛋白数量上优于再造生血片。2补髓生血颗粒在降低外周血Th17细胞的表达水平上优于再造生血片,Th17细胞可能参与了CAA的发病。     

补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血患者骨髓AKT磷酸化水平的影响

目的：观察补髓生血颗粒对CAA患者骨髓单个核细胞中AKT磷酸化水平变化,探讨补髓生血颗粒治疗CAA的作用机制。方法：将30例CAA患者予以补髓生血颗粒治疗6个月,另取28例健康志愿者作为正常对照组。采用蛋白质印迹方法（Western-blot）观察CAA患者治疗前后骨髓单个核细胞中pAKT-Ty308的表达水平。结果：CAA患者治疗前骨髓单个核细胞pAKT-Ty308的表达低于正常对照组（P〈0.05）,经补髓生血颗粒治疗后,pAKT-Ty308的表达有所上升,与治疗前比较有显著性差异（P〈0.05）。结论：CAA患者骨髓单个核细胞PAKT-Ty308的水平均呈低水平表达,提示pAKT与CAA发病密切相关,补髓生血颗粒可能通过调节PAKT-Ty308的表达来改善CAA骨髓造血微环境。