血清新喋呤、生物喋呤检测及其在尿毒症患者中的应用

目的探讨尿毒症患者血清中新喋呤（NP）和生物喋呤（BP）的浓度变化及其临床意义。方法采用反相高效液相色谱-荧光检测（RP-HPLC-FD）的方法,分别测定正常对照组、尿毒症组透析前后血清中的NP、BP浓度,并进行比较。结果尿毒症组血清中的NP、BP浓度和NP／BP比值均显著高于正常组（P〈0．01）,透析后血清中的NP、BP浓度显著低于透析前血清中NP、BP浓度（P〈0．01,P〈0．05）,而NP／BP比值差异无显著性（P〉0．05）。结论在尿毒症患者中,血清中的NP、BP浓度可作为炎性介质激活的灵敏指标,同时可作为判断肾功能好坏的标志物。     

生物喋呤/新喋呤在脓毒性休克中的意义

临床资料表明 ,脓毒性休克是内、外科危重患者死亡的重要原因之一。尽管早期液体复苏、新型抗生素治疗、代谢支持及重要器官支持性治疗已取得显著进展 ,但是脓毒性休克的病死率仍居高不下 ,成为进一步提高危重症救治成功率的一大障碍。因此 ,脓毒性休克发病机制及其防治是目前临床亟待解决的重要课题。研究表明 ,一氧化氮 ( NO)的过度产生可能是诱发脓毒性休克的最后共同通路 ,而生物喋呤 ( biopterin) ,主要为四氢生物喋呤 ( BH4 )为一氧化氮合酶 ( NOS)重要的辅因子 ,调控着细胞内 NO的产生。尽管生物喋呤的确切生物学效应尚未明了 ,…     

老年人恶性肿瘤患者血清新喋呤变化

目的 :探讨血清新喋呤水平与恶性肿瘤的关系及临床意义。方法 :采用ELISA竞争法 ,检测 3 4例恶性肿瘤患者和 3 5例对照的血清新喋呤水平。结果 :恶性肿瘤患者血清新喋呤水平明显高于对照组 (P <0 0 1)。结论 :检测血清新喋呤水平可作为判断恶性肿瘤患者细胞免疫功能的一个客观指标。     

急性白血病患者血清新喋呤水平

新喋呤 (Ｎｅｏｐｔｅｒｉｎ ,Ｎｐｔ)是一种从三磷酸鸟苷衍生而来的喋啶化合物 ,由巨噬细胞在Ｔ细胞释放的γ干扰素刺激下产生[1 ] 。在肿瘤患者的体液中Ｎｐｔ水平明显增高 ,其水平与疾病的状态及不良反应有关 ,是一项有用的、可靠的早期预后标志 ,有助于对疾病的监视和预后判断[2 4] 。我们旨在探讨急性白血病 (ＡＬ)患者血清Ｎｐｔ水平和临床意义。对象和方法1　研究对象　①试验组 :5 8例ＡＬ患者均经形态学、免疫学、细胞遗传学 (ＭＩＣ)分类方法确诊。其中初发未治 35例 ,包括急性非淋巴细胞白血病 (ＡＮＬＬ) 2 5例 (Ｍ1 1例 ,Ｍ2 …     

血清新喋呤检测在重症急性胰腺炎患者中的价值

目的探讨血清新喋呤检测在重症急性胰腺炎(SAP)患者中的预警价值。方法急性胰腺炎患者77例,根据疾病的严重程度分为SAP 32例和轻症急性胰腺炎(MAP)45例。对照组40名。所有患者于发病入院后次日清晨空腹静脉采血,分离血清测定新喋呤含量。同时监测患者生命体征、血气分析、血常规及反映肝、肾、心等器官功能损害的生化指标的改变,并记录24 h APACHE II评分。结果MAP患者血清新喋呤水平与对照组比较差异无统计学意义,而SAP患者显著高于对照组(P<0.05)及MAP患者(P<0.01);重症组中死亡与存活者之间血清新喋呤水平差异有统计学意义(P<0.01),与病情危重程度有关。结论SAP患者血清新喋呤水平升高,并与疾病的严重程度呈正相关;检测SAP患者血清新喋呤水平有助于判断病情轻重及预后,对早期采取措施、改善预后有重要意义。     

血清新喋呤检测在重症急性胰腺炎患者中的价值

目的 探讨血清新喋呤检测在重症急性胰腺炎（SAP）患者中的预警价值。方法 急性胰腺炎患者77例,根据疾病的严重程度分为SAP32例和轻症急性胰腺炎（MAP）45例。对照组40名。所有患者于发病入院后次日清晨空腹静脉采血,分离血清测定新喋呤含量。同时监测患者生命体征、血气分析、血常规及反映肝、肾、心等器官功能损害的生化指标的改变,并记录24h APACHE Ⅱ评分。结果 MAP患者血清新喋呤水平与对照组比较差异无统计学意义,而SAP患者显著高于对照组（P〈0．05）及MAP患者（P〈0．01）;重症组中死亡与存活者之间血清新喋呤水平差异有统计学意义（P〈0．01）,与病情危重程度有关。结论 SAP患者血清新喋呤水平升高,并与疾病的严重程度呈正相关;检测SAP患者血清新喋呤水平有助于判断病情轻重及预后,对早期采取措施、改善预后有重要意义。     

血清新喋呤在骨移植中的动态研究

目的:观察血清新喋呤(neopterin)水平在不同预处理方式的大块异体骨骨移植中变化与愈合程度的相关性。方法:建立犬的骨移植动物模型,15只犬左右前肢随机分成辐照组和无辐照组,加有骨形态发生蛋白(BMP)组和无BMP组,冷冻干燥骨组和低温冷冻骨组。采用双侧尺骨中段切除2cm骨干和骨膜,再移植2cm长异体尺骨。术前、术后2、4、6、8、10周取血检测血清新喋呤。结果:血清新喋呤在同时间不同处理的骨移植中水平差异没有统计学意义(P>0.05),但各个时间段含量不同(P<0.05)。结论:检测血清新喋呤水平,可作为骨移植细胞免疫激活异常的标志。对骨移植的预后估测及治疗效果鉴定有一定的临床指导意义。     

脓毒症患者血清新喋呤改变及其意义

目的：研究脓毒症患者血清新喋呤的变化,并探讨其与感染严重程度及多脏器功能不全综合征（MODS）之间的关系。方法：测定60例收入ICU的危重患者（其中32例脓毒症）入住24h内、第3d、第4d及之后每周血清新喋呤水平,同时检测血常规、C反应蛋白（CRP）,评定MODS评分、SOFA评分（感染相关性器官功能衰竭评分）,并记录临床情况。结果60例危重患者中,脓毒症患者血清新喋呤水平显著高于非脓毒症者,且其水平与外周血中性粒细胞计数呈正相关。32例脓毒症中发生MODS者血清新喋呤水平高于未发生MODS者,且随病情加重更升高,与MODS评分呈正相关,以新喋呤大于40nmol/L诊断MODS有较高的敏感性和特异性。结论：脓毒症患者血清新喋呤水平升高,与感染严重度呈正相关;检测脓毒症患者血清新喋呤水平有助于协助诊断MODS,判断病情轻重及预后,对早期采取措施、改善预后有重要意义。     

血清新喋呤的酶联免疫吸附法测定

目的 建立血清新喋呤的酶免疫测定方法，并确定血清新喋呤的正常范围。方法 通过碳二亚胺将新喋呤分别与牛血清白蛋白、鸡白蛋白连接制成新喋呤－蛋白质交联物，用新喋呤－牛血清白蛋白交联物免疫Ｂａｌｂ／ｃ鼠，通过细胞融合筛选出产生抗新喋呤单克隆抗体，并采用该单克隆抗体建立了血清新喋呤的酶联免疫吸附竞争抑制法。结果 ４１２例献血员（正常组）血甭新喋呤为５．２±２．２μｇ／Ｌ（＾－ｘ±ｓ），４９例消化道恶性肿瘤     

反相高效液相色谱法同时测定血清中的新喋呤和生物喋呤

目的　建立同时测定血清中新喋呤 (NP)及生物喋呤 (BP)的反相高效液相色谱 (RP HPLC)方法。方法　血清标本经三氯乙酸去蛋白 ,低温、高速离心 ,用碱中和后直接进样 ,采用外标定量法 ,以甲醇 :水 =5∶95 (v/v)为流动相 ,经HypersilBDSC18反相色谱分离后用荧光检测 (Ex =36 0nm ,Em =4 4 0nm)。结果　线性范围 :BP为 0 .4 8～ 80 0 μg/L ,NP为 0 .12～ 80 0 μg/L。检测灵敏度 :BP为 0 .1μg/L ,NP为 0 .0 1μg/L。日内精密度 :BP为 3.96 % ,NP为 2 .87%。高、中、低浓度的平均回收率 :NP为 97.9%,BP为 94 .3%。NP和BP在血清中的线性回归方程分别为 :Y(NP) =1.0 2 5 5x - 0 .0 0 77(r2 =0 .9998) ;Y(BP) =0 .70 2 7x 0 .0 394 (r=0 .9995 )。正常人血清中的NP和BP的浓度分别为 :(5 .76± 2 .4 4 ) μg/L和 (1.81± 0 .5 7) μg/L ;急性心肌梗死患者血清中NP和BP的浓度分别为 :(12 .96± 6 .95 ) μg/L和 (3.36± 1.73) μg/L ,二者血清中的NP和BP浓度均有显著性差异 (P <0 .0 1)。 结论　该法简便、快速、精确 ,适于血清中生物喋呤及新喋呤的检测。     

Polarization fluoroimmunoassay of biopterin and neopterin in human urine

A polarization fluoroimmunoassay has been developed for the routine determination of biopterin and neopterin levels in human urine. The method employs fluorescein-labeled biopterin and neopterin. The assay is fast (incubation time: 2 min) and no separation step is required prior to measurement of fluorescence polarization. Linearity, recovery and precision were satisfactory. Estimations of biopterin and neopterin levels in human urine samples closely correlated with those obtained by radioimmunoassay.     

HPLC法在小儿尿液新蝶呤和生物蝶呤检测中的应用

目的 建立HPLC法测定小儿高苯丙氨酸血症(HPA)患者尿液中新蝶呤(N)和生物蝶呤(B)含量的方法,以帮助临床对经典型苯丙酮尿症(PKU)和四氢生物蝶呤(BH4)缺乏症的诊断和鉴别诊断.方法 选用Cosmosil 5C18-AR-Ⅱ色谱柱(4.6 I.D.×250 mm),甲醇-水(8∶92)为流动相,用三维荧光检测器检测.结果 新蝶呤线性范围为1.60～40.0 ng/μl,生物蝶呤线性范围为1.73～43.2 ng/μl;最小检测限为0.16 ng/μl和0.1728 ng/μl.样品测定的变异系数(CV)值分别为2.18%和1.70%;原尿样品前处理时氧化的最佳时间为30 min;原尿样品不便于保存,氧化后可于室温或4℃冰箱保存3 d.结论 本方法准确、可靠、简便易行,灵敏度高,方法学实验结果满意,适用于临床HPA患儿的鉴别诊断.     

血清新喋呤的酶联免疫吸附法测定

目的建立血清新喋呤的酶免疫测定方法，并确定血清新喋呤的正常范围。方法通过碳二亚胺将新喋呤分别与牛血清白蛋白、鸡白蛋白连接制成新喋呤蛋白质交联物，用新喋呤牛血清白蛋白交联物免疫Ｂａｌｂ／ｃ鼠，通过细胞融合筛选出产生抗新喋呤的单克隆抗体，并采用该单克隆抗体建立了血清新喋呤的酶联免疫吸附竞争抑制法。结果４１２例献血员（正常组）血清新喋呤为５２±２２μｇ／Ｌ（ｘ±ｓ），４９例消化道恶性肿瘤为１４８±１０５μｇ／Ｌ（ｘ±ｓ），２１例皮肌炎为１６３±１１４μｇ／Ｌ（ｘ±ｓ）。ｔ检验表明，采用酶联免疫吸附法测定，消化道恶性肿瘤组、皮肌炎组的血清新喋呤与正常组比较Ｐ值均＜０．００１。本方法检测的批内变异系数（ＣＶ）为００３６３，批间ＣＶ为００９１７。结论本法操作简便、方法敏感、正常值范围明确、重复性好，可用于临床研究     

Liquid-chromatographic measurement of biopterin and neopterin in serum and urine

We report an improved "high-performance" liquid-chromatographic (HPLC) method for measuring biopterin and neopterin in serum and urine. Specimens are acidified, treated with iodine in 0.2 mol/L trichloroacetic acid, party purified on Bio-Rad MP-50 cation-exchange columns, and analyzed by reversed-phase HPLC with fluorometric detection. The minimal concentration of biopterin detectable is 0.3 micrograms/L in a 50-microL injection. The total CV is less than or equal to 10%. Improvements over other reported methods include the use of a single, simplified sample-preparation step with a Baker-10 SPE System, and a guard column to increase analytical column stability and analyte recovery. The assay is semiautomated to reduce technician time and improve precision. Mean observed values for biopterin and neopterin in sera of normal human adults were 1.64 and 5.52 micrograms/L, respectively. The mean ratio of neopterin to biopterin in acidified adult urine samples was lower than that found in matched nonacidified samples (n = 10). Serum specimens from diagnosed phenylketonuric (PKU) and hyperphenylalaninemic patients were also analyzed for biopterin and neopterin; the findings agreed with reported values for similar patients. One patient, previously identified as an atypical PKU patient, showed serum values of neopterin and biopterin suggestive of a defect in biopterin synthesis.     

尿毒症患者血清瘦素水平的临床研究

目的研究慢性肾功能不全患者血液透析前、后的血清瘦素水平与健康人群血清瘦素的关系,并初步探讨血清瘦素水平与营养不良的关系.方法选择尿毒症患者(血液透析前、连续血液透析三次后)及正常对照组各30例,于空腹取血,应用放射免疫分析法测定血清中瘦素水平,同时检测肾功能、血浆白蛋白水平等.结果正常人的血清瘦素水平与尿毒症患者血液透析前的血清瘦素水平无显著性差异(P>0.05),两组血清瘦素水平与体重指数(BMI)呈明显正相关(P<0.05),且女性血清瘦素水平均分别高于男性(P<0.05);尿毒症患者血液透析后的血清瘦素水平与正常对照组差异有显著性(P<0.05),血液透析组的血清瘦素水平与血尿素氮、肌酐、白蛋白等无相关性,血液透析组的肌酐、尿素氮高于对照组(P<0.01);血液透析前与血液透析后的血清瘦素水平无显著性差异(P>0.05).结论尿毒症患者血液透析前的血清瘦素水平与对照组差异无显著性,而血液透析后的血清瘦素与对照组差异有显著性;尿毒症患者和正常对照组女性血清瘦素水平均明显高于男性;尿毒症患者血液透析后血清瘦素水平与患者营养不良无明显相关关系;血液透析无法对瘦素起到清除作用.     

多发伤病人血清新喋呤水平的动态变化及临床意义

目的　探讨血清新喋呤水平与多发伤严重程度及并发症之间的关系。方法　用ELISA法检测多发伤病人伤后 2 4h、第 3、7和 14天及对照组健康人血清新喋呤水平 ,明确新喋呤水平在伤后不同时段的动态变化 ,分析其与多发伤严重程度以及与预后的关系。结果　多发伤病人血清新喋呤水平在第 3天后开始升高 ,第 7天左右达到高峰 ,以后逐渐下降 ;ISS评分值与血清新喋呤水平呈显著正相关 (r =0 5 0 8,P <0 0 5 )。MODS积分与血清新喋呤水平呈显著正相关 (r =0 795 ,P<0 0 5 )。结论　多发伤病人血清新喋呤水平与ISS值呈显著正相关 ;合并MODS者血清新喋呤水平显著升高 ,动态监测其变化 ,对预警MODS的发生和预测预后具有一定的意义。