脂多糖诱导小鼠腹腔巨噬细胞TNF—αmRNA、iNOSmRNA的表达

目的观察脂多糖对小鼠腹腔巨噬细胞肿瘤坏死因子-α以及诱导型一氧化氮合酶表达水平的影响。方法按常规方法获取小鼠腹腔巨噬细胞,随机分成两组：空白对照组及LPS组（分别含LPSO．01,0．1,1．0,10rag／L）。采用荧光定量PCR方法测定肿瘤坏死因子-α及诱导型一氧化氮合酶的基因表达情况。结果经0．01μg／mL LPS刺激后细胞TNF-αmRNA、iNOSmRNA表达水平均明显升高,与空白对照组比较有显著性差异（P〈0．01）,并且在一定范围内呈剂量一效应关系。结论LPS可诱导小鼠巨噬细胞TNF-α mRNA、iNOS mRNA的表达。     

三七皂甙对烫伤小鼠巨噬细胞产生NO和TNF的作用

目的　研究三七皂甙对烧伤小鼠巨噬细胞 (MΦ)的NO产生和TNF分泌的调理作用。方法　 4 50只昆明种小白鼠分成对照组 ( 1 8只 )、单烫组 ( 1 0 8只 )和治疗组 ( 32 4只 )。治疗组腹腔注射三七皂甙液 ,并分为大剂量组 (三七皂甙液 1 0 0mg/ 4h)、中剂量组 ( 50mg/ 4h)和小剂量组 ( 2 5mg/ 4h)。单烫组和治疗组分 6、1 4、2 6、50、74、98h观察时相点。用Griess反应法检测MΦ的NO产生量 ,以生物活性法测定MΦ的TNF分泌量。结果　三七皂甙能使烫伤小鼠MΦ的NO产生量从 ( 96 .2± 1 3.1 )nmol/ 1 0 6MΦ降至 ( 2 2 .1± 6 .2 )nmol/ 1 0 6MΦ、MΦ分泌TNF的量降低 55%。结论　三七皂甙对降低烧伤小鼠MΦ产生NO和MΦ分泌TNF均有显著的作用。     

肿瘤坏死因子α和一氧化氮合酶在脓毒症大鼠心功能中的作用初探

目的初步探讨肿瘤坏死因子α（TNF-α）和一氧化氮合酶（NOS）在脓毒症大鼠心功能中的作用。方法制作脓毒症大鼠模型,监测血流动力学,测定大鼠心肌组织中TNF-α和一氧化氮（NO）浓度,检测各型NOS的活性。结果大鼠心肌组织中TNF-α含量2h时达高峰,心肌组织NO 6h时达高峰,与心功能改变时间一致。给予脂多糖（LPS）6h后心脏中cNOS的表达减少;iNOS表达量明显增加。结论脓毒症时,TNF-α和NO发挥重要作用,并且心肌细胞上iNOS表达升高、cNOS表达减少可能在心功能降低中发挥作用。     

穿心莲内酯对肿瘤坏死因子-α和白介素-12表达的抑制作用

目的研究穿心莲内酯对细胞因子肿瘤坏死因子-α和白介素-12水平的影响。方法用巯基乙酸腹腔注射小鼠,取小鼠的腹腔巨噬细胞进行体外培养,以穿心莲内酯预先作用于巨噬细胞,随后添加脂多糖刺激巨噬细胞,以RT-PCR检测巨噬细胞肿瘤坏死因子-α、白介素-12a和白介素-12b mRNA水平,以ELISA检测巨噬细胞培养上清的肿瘤坏死因子-α和白介素-12蛋白水平。结果穿心莲内酯能抑制活化小鼠腹腔巨噬细胞的肿瘤坏死因子-αmRNA和蛋白水平,并能抑制白介素-12a mRNA、白介素-12b mRNA和白介素-12蛋白水平,且抑制作用随穿心莲内酯浓度增加而增强。12μg/ml穿心莲内酯能抑制肿瘤坏死因子-αmRNA(P<0.05),25μg/ml抑制肿瘤坏死因子-αmRNA水平(P<0.01),1μg/ml穿心莲内酯能抑制肿瘤坏死因子-α蛋白(P<0.05),12μg/ml抑制肿瘤坏死因子-α蛋白水平(P<0.01)。1μg/ml穿心莲内酯抑制白介素-12b mRNA水平(P<0.01),12μg/ml穿心莲内酯抑制白介素-12a mRNA水平(P<0.01),1μg/ml穿心莲内酯抑制白介素-12蛋白水平(P<0.01)。结论穿心莲内酯能抑制活化巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子-α和白介素-12。     

手足口病患儿治疗前后血清白介素-10、12和肿瘤坏死因子-α水平的变化简

目的 探讨手足口病患儿治疗前后血清白介素（IL）-10、12和肿瘤坏死因子（TNF）-α水平变化.方法 选择2012年1～12月浙江省三门人民医院收治的,手足口病患儿40例（病例组）,予以抗病毒、退热、营养支持及维持水电解质酸碱平衡等常规治疗,连用3d.观察患者治疗前和治疗3d后血清IL-10、12和TNF-α水平的变化.另选择同期体检中心的30例正常健康儿童作对照组.比较两组IL-10、12和TNF-α水平的差异.结果 病例组患者治疗前血清IL-10、12和TNF-α水平[（48.23±12.41）μg/L、（28.22±8.27） pg/mL、（2.91±0.47） pg/mL]明显高于对照组[（31.52±9.12）μg/L、（10.02±2.89） pg/mL、（1.04±0.27） pg/mL]（t=2.89、3.21、3.37,P＜ 0.01）.治疗3d后,患者血清IL-10、12和TNF-α水平[（39.15±8.62） μg/L、（17.72±3.14） pg/mL、（1.72±0.39） pg/mL]较治疗前[（48.23±12.41）μg/L、（28.22±8.27） pg/mL、（2.91±0.47） pg/mL]明显下降（t=2.39、2.89、3.02,P＜0.05或P＜0.01）.结论 手足口病患儿存在血清IL-10、12和TNF-α水平的异常升高.IL-10、12和TNF-α水平的变化可作为手足口病患儿疗效随访的指标.     

欧芹素乙和异欧芹素乙对小鼠腹腔巨噬细胞体外释放肿瘤坏死因子的抑制作用

研究了欧芹素乙（Ｉｍｐｅｒａｔｏｒｉｎ，Ｉｍｐ）和异欧芹素乙（Ｉｓｏ－ｉｍｐｅｒａｔｏｒｉｎ，Ｉｓｉ）及对照药物维拉帕米（Ｖｅｒａｐａｍｉｌ，Ｖｅｒ）对小鼠腹腔巨噬细胞体外释放肿瘤坏死因子（Ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ，ＴＮＦ）的影响。结果表明：Ｉｍｐ、Ｉｓｉ及Ｖｅｒ对小鼠腹腔巨噬细胞体外释放ＴＮＦ具有显著的抑制作用。药物浓度在１０－６～１０－４ｍｏｌ／Ｌ范围内，该抑制作用呈剂量依赖性：药物浓度达１０－４ｍｏｌ／Ｌ时，则可完全抑制ＴＮＦ的释放。     

胃黏膜组织中肿瘤坏死因子α及iNOS表达水平与胃炎发病的关系研究

目的研究胃炎发病与肿瘤坏死因子α(TNF-α)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达水平的相关性研究。方法选取我院114例慢性胃炎患者为研究对象,根据胃镜与组织学检查结果进行分析,得知幽门螺杆菌(Hp)阳性54例,Hp阴性60例,以放射免疫法检测TNF-α,免疫组织化学法检测iNOS表达水平,分析上述两项指标与胃炎发病的相关性,并研究胃黏膜炎症程度在两组中的分布。结果 Hp阳性组TNF-α为(1.41±0.33)ng/mg,Hp阴性组为(0.64±0.22)ng/mg,差异有统计学意义(P<0.001);Hp阳性组iNOS(69.34±6.10)%,Hp阴性组(21.94±3.87)%,差异有统计学意义(P<0.001)。Hp阳性组胃黏膜炎症轻、中、重度分布与Hp阴性组比较差异有统计学意义(P<0.001)。结论胃黏膜组织TNF-α及iNOS水平上升可作为胃炎发病的重要机制。     

TNFα对大鼠肺微血管内皮细胞NO的产生及NOS mRNA表达的影响

目的 阐明肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）对内皮细胞一氧化氮（ＮＯ）的产生及两型一氧化氮合酶（ＮＯＳ）ｍＲＮＡ表达的影响及其规律。方法 以大鼠微血管内皮细胞为材料,测定细胞培养上清液中ＮＯ２＾－水平并应用定量ＲＴ／ＰＣＲ技术检测内皮细胞ＮＯＳ ｍＲＮＡ表达水平。结果 应用ＴＮＦα（１００ｎｇ／ｍｌ）作用于内皮细胞６ｈ后,发现培养上清液ＮＯ２＾－水平较对照组显著升高（Ｐ〈０．０５）,而６ｈ以内两组无显著差     

淫羊藿甙对巨噬细胞iNOS和TNF-αmRNA的影响

目的淫羊藿甙(icariin,ICA)和脂多糖(LPS)共同作用于培养小鼠巨噬细胞(Mψ)后,观察其对Mψ中iNOS和TNF-αmRNA影响.方法培养小鼠腹腔Mψ分为5组,分别为正常对照组、LPS模型组(10mg/L)、ICA3种剂量作用组(ICA1.0;0.1;0.01μg/ml与LPS同时孵育).分别作用培养4h后留取细胞和培养上清,用RT-PGR法测定Mψ中TNF-α和iNOSmRNA的基因表达情况.放射免疫法测细胞培养上清中TNF-α的含量.硝酸还原酶法测定细胞培养上清中NO的含量.结果Mψ加LPS培养后吞噬中性红的能力减弱(P＜0.05);ICA作用组细胞吞噬能力增强,并呈剂量依赖关系.LPS模型组中TNF-α基因表达和iNOSmRNA均增加,NO含量升高(P＜0.05);加用ICA与LPS共同培养后TNF-α基因表达下降、iNOS表达和NO明显降低(P＜0.05),并呈剂量效依赖关系.结论ICA可增强培养Mψ的吞噬功能,并可降低TNF-α、iNOS的表达.     

重症肺炎患者血清肿瘤坏死因子α和白介素-10的变化及临床意义

目的：观察重症肺炎患者血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白介素-10（IL-10）的变化及临床意义。方法比较重症肺炎患者（重症肺炎组,65例）、普通肺炎患者（普通肺炎组,60例）及体检健康者（对照组,50例）血清TNF-α和IL-10水平;将重症肺炎患者根据临床结局分为生存组39例和死亡组26例,比较两组入院后1 d、3 d、5 d、7 d TNF-α/IL-10比值的变化。结果重症肺炎组TNF-α、IL-10水平及TNF-α/IL-10比值均明显高于普通肺炎组和对照组（P＜0．05）;生存组患者入院后7 d内的TNF-α/IL-10比值降低幅度明显高于死亡组（P＜0．05）。结论 TNF-α和IL-10参与了重症肺炎发生和发展,患者存在明显的促炎介质与抗炎介质表达失衡,在死亡组患者中表现尤为明显。     

胃癌、胃黏膜不典型增生、胃炎组织中iNOS和VEGF的表达及其相关性研究

目的研究诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和血管内皮生长因子(VEGF)在胃癌、胃黏膜不典型增生、胃炎组织的表达及其相关性。方法采用免疫组化S-P法检测39例胃癌组织,24例胃黏膜不典型增生组织和33例胃炎组织iNOS和VEGF的表达。结果iNOS和VEGF在慢性胃炎、胃黏膜不典型增生及胃癌组织中的表达呈平行性递增关系,每两组间比较差异均有统计学意义(P<0.05),iNOS和VEGF在慢性胃炎、胃黏膜不典型增生及胃癌组织中的表达均有显著相关性(P<0.05)。结论iNOS和VEGF在胃癌的发生发展过程中起促进作用,iNOS可能通过诱导VEGF表达促进胃癌血管形成,进而促进胃癌的生长。     

吲哚美辛对乙酸诱导大鼠胃溃疡形成和愈合的影响

目的利用乙酸诱导大鼠胃溃疡模型研究吲哚美辛对化学诱导胃溃疡形成和愈合的影响,探讨其可能机制。方法雄性SD大鼠,体重160～180g。分两组,即单纯乙酸诱导胃溃疡作为对照组和乙酸诱导胃溃疡加吲哚美辛处理组,各时间点每组均8只。乙酸诱导胃溃疡后1、3和7d用RT-PCR和Westernblotting分别检测胃黏膜中环氧合酶(COX)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达。用ELISA测定胃黏膜中PGE2量反映COX活性。同时研究吲哚美辛对iNOS表达、活性及胃黏膜损伤的影响,以溃疡面积来评估胃黏膜损伤程度。结果RT-PCR结果显示乙酸诱导大鼠胃溃疡后,COX2mRNA表达明显升高;以溃疡基底部为明显,3d最高,7d下降。胃黏膜PGE2合成也明显增高。吲哚美辛能抑制胃黏膜PGE2合成,处理组溃疡面积1d时为(52.6±6.1)mm2,小于对照组的(71.8±5.8)mm2(P＜0.05),且周围充血水肿较轻;3d时两组溃疡大小无差异,但吲哚美辛处理组溃疡基底部厚度为(11±0.5)mm,薄于对照组的(20±0.8)mm(P＜0.01);7d时吲哚美辛组溃疡而积为(35.4±3.5)mm2,大于对照组的(24.8±3.2)mm2(P＜0.05)。此外吲哚美辛能降低胃黏膜iNOS的表达及活性。结论吲哚美辛能减轻大鼠溃疡形成初期炎症反应,使组织免受进一步损伤,但使溃疡加深、延缓溃疡愈合。这一作用除和PGE2合成减少有关外,可能尚和抑制iNOS表达及活性有关。     

Ginsenoside Rg1-induced alterations in gene expression in TNF-α stimulated endothelial cells

Background In China the ginseng root began to be used in medicine over 2000 years ago. Ginsenosides are the most important component isolated from ginseng. The authors investigated the effect of ginsenoside Rg1 on the spectrum of gene expression in the endothelial cells stimulated by TNF-α and further explored the potential molecular mechanism of endothelial protection by ginsenoside Rg1.
Methods Nitric oxide (NO) production in the cultured human umbilical vein endothelial cells(HUVECs) was measured by using an NO assay kit. A home-made oligonucleotide microarray containing approximately 400 cardiovascular disease-related genes was constructed. The alteration of the spectrum of gene expression induced by ginsenoside Rg1 in HUVECs which were activated by TNF-α were detected by oligonucleotide microarray analysis.
Results NO production in HUVECs was decreased significantly after TNF-α treatment, while pretreatment with ginsenoside Rg1 enhanced NO production in TNF-αstimulated HUVECs. Ginsenoside Rg1 affected the expression levels of genes involved in vascular constriction, cell adherence, coagulation, cell growth and signal transduction in TNF-αstimulated HUVECs.
Conclusions Ginsenoside Rg1 could enhance NO production and the expression of eNOS mRNA in TNF-α stimulated HUVECs. Ginsenoside Rg1 regulated sets of genes in endothelial cells and protected endothelial cells from TNF-αactivation. Microarray analysis provided us with valuable insights into the atheroprotective mechanism by gingsenoside Rg1.
     

一氧化氮合酶在卵巢肿瘤中的检测及意义

目的：检测正常卵巢组织,卵巢良性肿瘤组织,卵巢恶性肿瘤组织中一氧化氮合酶（ＮＯＳ）的比活性,探讨ＮＯＳ与卵巢肿瘤间的关系。方法：ＮＯＳ活性用分光光度法检测。蛋白含量用酚试剂法检测。结果：卵巢恶性肿瘤组织中ＮＯＳ含量显著增高（Ｐ＜０．０１,卵巢良性肿瘤和正常卵巢组织中的ＮＯＳ含量无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。卵巢恶性肿瘤组织中高、中、低分化随恶性程度升高,ＮＯＳ含量增多（Ｐ＜０．０１）,与恶性程度呈正相关。结论：ＮＯ合成的增多,可能是卵巢恶性肿瘤发生及生长过程中的一个重要环节,卵巢恶性肿瘤组织中ＮＯＳ含量增高是ＮＯ合成增多的重要原因之一     

5 种肿瘤标志物在胃癌患者血清中的表达及其临床意义

 目的探讨胃癌患者术前血清CEA、CA199、CA724、CA125 和AFP水平及阳性率的临床应用价值。方法采用电化学
发光法测定184 例胃癌患者术前血清CEA、CA199、CA724、CA125 和AFP水平。结果血清CEA 水平及阳性率与肿瘤直径、
浸润范围及期别有关（ P<0.05）;CA199 水平随着肿瘤大小、浸润范围及期别增大而升高（ P<0.05）;CA724水平随着肿瘤直径
增大而升高（ P<0.05）;血清CA125 水平随着肿瘤直径增大、转移淋巴结及期别增高而升高（ P<0.05）;AFP 阳性率随着出现淋
巴结转移、远处转移及期别增高而增高（ P<0.05）。结论术前血清CEA、CA199、CA724、CA125 和AFP 可作为病情监测的指
标,帮助判断肿瘤进展情况。     

内毒素促进肝纤维化与肝硬化形成机制的探讨

目的：探讨肠源性内毒素（intestinal endotoxin,IET)促进肝纤维化发与肝硬化形成机制。方法：采用复合因素复制大鼠肝硬化模型，分别于4周及8周末测定其血浆ET、NO、TNF－α和IL－10水平。结果：实验组血浆ET、NO和TNF－α水平均明显高于正常对照组，血浆内毒素水平与TNF－α和NO均呈正相关（r=0.651，P＜0．025；r=0.912,P＜0．001）。实验组IL－10水平无明显高于正常对照组，但肝硬化8周组IL－10水平明显低于4周组（P＜0．05）。结论：ET诱导的NO、TNF－α和IL－10的释放在肝硬化发生发展中起一定作用。     

隔姜灸对胃癌大鼠VIP和IL-10水平的影响

目的 观察隔姜灸对胃癌大鼠组织血管活性肠肽(VIP)、白介素10(IL-10)的影响。方法 采用(N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍)MNNG建立胃癌模型,造模后随机分为VIP组、VIP受体拮抗剂组、模型组、隔姜灸4组,每组10只,另设空白组10只。VIP组和VIP受体拮抗剂组分别每日皮下注射VIP或VIP受体拮抗剂0.1 μg/mL,空白组给予生理盐水,隔姜灸组隔姜灸中脘、脾俞、胃俞、足三里、内关等穴位,3周后检测胃癌VIP、IL-10含量的变化,通过免疫组织化学和RT-PCR检测胃腺癌组织中VIP蛋白和mRNA表达情况。结果 模型组胃癌组织VIP、IL-10明显增高,隔姜灸组较模型组含量明显降低(P<0.01),与VIP治疗组比较差异也有显著性(P<0.01)。胃癌组织出现VIP免疫反应阳性细胞,相对正常的胃组织中均未见VIP阳性细胞。胃癌组织中均有VIP mRNA表达。VIP治疗组和隔姜灸均能下调VIP mRNA表达,但隔姜灸效果更佳（P<0.01）。结论 隔姜灸可能通过降低大鼠胃癌组织中VIP、IL-10含量及抑制VIP mRNA表达而达到治疗胃癌的目的。     

胃癌患者手术前后血清肿瘤型M2-丙酮酸激酶的测定及其临床意义

目的 研究胃癌患者手术前后血清肿瘤型M2-丙酮酸激酶（tumor M2-PK）的含量变化及其与临床病理学参数的关系。方法 运用ELISA法定量检测胃癌患者手术前后血清中的肿瘤型M2-PK含量的变化。结果 胃癌患者血清肿瘤型M2-PK增高，明显大于对照组（P〈0．05）。胃癌肿瘤切除患者手术后肿瘤型M2-PK的含量低于术前（P〈0．05）。而肿瘤未切除患者手术前后的差别不明显。肿瘤≥5cm者肿瘤型M2，PK明显高于〈5cm者（P〈0．05）；TNMⅢ，Ⅳ期者明显高于Ⅰ，Ⅱ期者（P〈0．01）；而淋巴结转移情况、肿瘤胃壁浸润深度及组织学分级对肿瘤型M2-PK水平的影响无明显差别。结论 胃癌患者血清肿瘤型M2-PK水平明显升高，且初步反应肿瘤大小和病期。肿瘤的存在与否，对肿瘤型M2-PK的水平有明显影响。肿瘤型M2-PK有可能用于监测胃癌肿瘤的发生和发展。     

慢性充血性心力衰竭患者血浆TNF-α、NOS活性和NO的变化及其意义

目的 探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、一氧化氮合酶(NOS)活性和一氧化氮(NO)在慢性充血性心力衰竭(CHF)患者血浆中的变化以及三者之间的相互关系。方法 80例CHF患者和20名健康对照组抽取静脉血检测TNF-α、NOS活性和NO；TNF-α含量测定采用放射免疫法，NOS活性、NO含量测定采用化学比色法。结果 CHF组的TNF-α、NOS活性、NO水平均明显高于对照组，且随着心衰程度的加重，各项指标的含量逐渐升高；在TNF-α、NOS活性、NO两两之间及它们与反映心功能的射血分数(EF)值之间存在着显著的直线相关关系。结论 TNF-α、NOS、NO可能参与了心衰的发生、发展，它们是反映心衰严重程度及预后的重要指标。