白藜芦醇抑制缺氧复氧诱导心肌微血管内皮细胞凋亡的研究

目的探讨白藜芦醇对缺氧复氧诱导心肌微血管内皮细胞(CMEC)凋亡的抑制作用及其可能的分子机制。方法体外培养大鼠CMEC,建立缺氧复氧损伤模型,随机分为对照1组、缺氧复氧1组、缺氧复氧+白藜芦醇组(白藜芦醇1组),白藜芦醇分别选择5、10、20、30及40μmol/L浓度,MTT法检测CMEC增殖能力。20μmol/L白藜芦醇为最适浓度,使用磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)特异性抑制剂LY294002,后续实验又分为对照2组、缺氧复氧2组、缺氧复氧+白藜芦醇2组(白藜芦醇2组)、缺氧复氧+白藜芦醇+LY294002组(LY294002组)。PI-AnnexinⅤ检测CMEC的凋亡;Western blot法检测细胞蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)蛋白表达或磷酸化水平。结果与缺氧复氧1组比较,不同浓度白藜芦醇1组均可增加CMEC增殖能力,呈剂量依赖性,以白藜芦醇1组20μmol/L保护作用最显著(P<0.05)。与白藜芦醇2组比较,LY294002组CMEC凋亡率明显升高,磷酸化Akt和Akt蛋白、HIF-1α蛋白表达明显下降(P<0.05)。结论白藜芦醇可显著抑制缺氧复氧诱导的CMEC凋亡,其机制可能与PI3K/Akt介导的HIF-1α上调相关。     

白藜芦醇对高糖诱导的大鼠胸主动脉平滑肌细胞基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9表达的影响及其作用机制的研究

目的探讨白黎芦醇(Res)对高糖诱导的大鼠胸主动脉平滑肌细胞基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响是否与PI3K/Akt信号通路有关。方法高糖体外培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞,并应用Res和PI3K通路特异性抑制剂LY294002进行干预,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性,免疫组织化学法检测MMP-2、MMP-9表达,明胶酶谱法检测MMP-2、MMP-9活性,Western blot检测p-Akt、Akt蛋白表达。结果不同浓度Res(25、50、100μmol/L)和LY294002(10、20、30μmol/L)均可抑制高糖诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖(P0.05),且均呈剂量依赖性,还可抑制高糖诱导的MMP-2、MMP-9表达和活性(P0.05)。NC、HG、HG+LY294002(10、20、30μmol/L)组总Akt表达无明显改变,HG+Res(25、50、100μmol/L)组总Akt表达较HG组下降,但无剂量依赖性;而不同浓度的Res和LY294002可抑制高糖诱导的p-Akt表达(P0.05),且均呈剂量依赖性。结论 (1)高糖上调VSMCs MMP-2、MMP-9表达,加重VSMCs增殖;(2)Res可能通过抑制高糖激活的PI3K/Akt信号通路,下调VSMCs MMP-2、MMP-9表达并降低其活性,减轻高糖引起的VSMCs增殖。     

PI3K阻断剂LY294002对TNF-α诱导心肌肥大的

目的　研究PI3K是否通过Ca²⁺-CaMKⅡ和CaN信号途径参与肿瘤坏死因子-α诱导的心肌肥大。方法　应用激光共聚焦显微镜检测单个心肌细胞内Ca²⁺浓度变化。Lowry法测心肌细胞蛋白含量。计算机图象分析测心肌细胞体积。应用Western　blot法测定心肌细胞CaMKⅡδB和CaN蛋白表达。结果　①PI3K阻断剂LY294002（50　μmol/L）明显抑制TNF-α（100　μg/L）诱导的心肌细胞内钙离子浓度增高（P<0.01）,对正常心肌细胞内Ca²⁺浓度无明显影响。其抑制程度与LY294002+2-APB　（30　μmol/L）组相近（P>0.05）,小于LY294002+ryanodine（50　μmol/L）组（P<0.05）。②LY294002明显抑制TNF-α诱导的心肌细胞蛋白含量的增加及细胞体积的增大;其程度与LY294002+2-APB无统计学差异,但大于单用2-APB组,小于LY294002+ryanodine组（P<0.05）。PI3K阻断剂LY294002明显抑制TNF-α诱导的心肌细胞CaMKⅡδB和CaN表达增加（P<0.01）,其抑制程度与LY294002+2-APB　组相近　（P>0.05）。结论　PI3K通过作用IP3R使心肌细胞内Ca²⁺浓度增加,进而调节心肌细胞内CaMKⅡδB和CaN的表达,从而参与TNF-α诱导的心肌肥大。     

LY294002在外源性H2S预处理肝纤维化大鼠肝星状细胞增殖、凋亡中的作用

目的探讨硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)通过PI3K/Akt信号通路对大鼠肝星状细胞增殖、凋亡的调节作用。方法 MTT法分别检测NaHS(H2S的供体)和PI3K/Akt信号通路的特异性抑制剂LY294002对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)的增殖、增殖抑制率的影响;采用流式细胞技术检测药物的有效浓度对HSC-T6凋亡的调节。结果低浓度(50μmol/L)的NaHS能够明显促进HSC-T6的增殖(F=955.949,P=0.000),LY294002可抑制HSC-T6的增殖,伴随药物浓度的升高细胞存活率降低(P<0.05),并诱导HSC-T6的凋亡,而二者联合应用诱导HSC-T6凋亡作用增强。结论 H2S可能通过PI3K/Akt信号通路促进HSC-T6的增殖,但对肝星状细胞的凋亡抑制作用并不显著,H2S可协同LY294002共同诱导HSC-T6细胞的凋亡。     

达沙替尼对人脐静脉内皮细胞的损伤与PI3K/Akt途径抑制有关

目的探索达沙替尼对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖、迁移和凋亡等生物学特性的影响,为完善其临床应用提供资料。方法实验分组:达沙替尼组(达沙替尼处理浓度为50 nmol/L)、LY294002组(PI3K抑制剂,处理浓度为20μmol/L)、联合处理组(达沙替尼处理浓度为50 nmol/L、LY294002处理浓度为20μmol/L)及溶媒对照组(DMSO浓度为0.1%)。CCK8法检测细胞活性,划痕法检测细胞迁移,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,Western blot检测Akt和p-Akt蛋白水平。结果达沙替尼(1~400 nmol/L)不仅抑制HUVEC增殖,而且诱导其凋亡、抑制其迁移、阻滞细胞周期G1-S期转化。随浓度的升高与处理时间的延长(50 nmol/L,24 h~96 h)达沙替尼对细胞增殖抑制作用和诱导凋亡作用明显,同时HUVEC的迁移能力随达沙替尼浓度(50~100 nmol/L)的升高而降低。达沙替尼和PI3K抑制剂LY294002两者单独处理时均具有细胞增殖抑制作用,两者均明显抑制Akt蛋白磷酸化水平;两者联合处理时虽然细胞增殖抑制作用增强,但对Akt蛋白磷酸化水平的影响与单独处理相比差异不明显。结论达沙替尼可通过PI3K/Akt通路促进HUVEC损伤,抑制HUVEC增殖和迁移,改变细胞形态,阻滞HUVEC G1-S期转化,诱导细胞凋亡。     

内脂素在人脐静脉内皮细胞增殖凋亡中的作用及机制

目的研究内脂素在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖凋亡中的作用及机制。方法选取产科提供的健康剖腹产的孕妇脐带进行原代培养HUVEC。使用MTT法检测内皮细胞增殖,流式细胞仪法检测细胞凋亡情况,通过Western blot检测内皮细胞中磷酸化热休克蛋白27(p-HSP27)的蛋白表达量。内脂素(10nmol/L)分别加入10μmol/L的丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK),磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)或细胞外信号调节激酶(ERK)1/2选择性抑制剂(分别为SB202190,LY294002和U0126)预处理的内皮细胞后,检测内皮细胞增殖、凋亡及蛋白表达情况改变。结果 10nmol/L的内脂素能促进HUVEC的增殖、抑制高糖诱导的凋亡(均P0.05)。预先给予LY294002或U0126能够有效地减少内脂素诱导的HSP27磷酸化的表达,分别使磷酸化峰值减少77.8%和51.7%(均P0.01),并且LY294002或U0126可以阻断内脂素诱导的HUVEC的增殖促进及凋亡保护作用。结论内脂素通过ERK1/2和PI3K/蛋白激酶B(Akt)信号通路激活HSP27磷酸化,从而促进HUVEC增殖并抑制高糖诱导凋亡的重要过程。     

LY294002对人肺腺癌A549细胞p-Akt、VEGF表达的影响

目的 探讨PI3K抑制剂LY294002对肺腺癌A549细胞p-Akt及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法 不同浓度LY294002(5μmol/L、10 μmol/L、20μmol/L、40 μnol/L)处理肺腺癌A549细胞24h后,分别用免疫细胞化学法和Western印迹法检测p-Akt、VEGF蛋白表达.结果 P13K抑制剂LY294002可抑制肺腺癌A549细胞株细胞中p-Akt蛋白的表达,而且其表达呈浓度依赖型降低(r=-0.913,P＜0.05).LY294002也可抑制该细胞株中VEGF蛋白的表达,其表达也呈浓度依赖型降低(r=-0.969,P＜0.01).结论 LY294002可抑制p-Akt活性及下调VEGF蛋白的表达,该作用可能是PI3K抑制剂LY294002发挥抗癌作用及抗血管生成的机制之一.     

PI3K阻断剂LY294002对TNF-α诱导心肌肥大的Ca~(2+)-CaMKⅡ和CaN通路的影响

目的研究PI3K是否通过Ca2+-Ca MKⅡ和Ca N信号途径参与肿瘤坏死因子-α诱导的心肌肥大。方法应用激光共聚焦显微镜检测单个心肌细胞内Ca2+浓度变化。Lowry法测心肌细胞蛋白含量。计算机图象分析测心肌细胞体积。应用Western blot法测定心肌细胞Ca MKⅡδB和Ca N蛋白表达。结果 1PI3K阻断剂LY294002(50μmol/L)明显抑制TNF-α(100μg/L)诱导的心肌细胞内钙离子浓度增高(P0.01),对正常心肌细胞内Ca2+浓度无明显影响。其抑制程度与LY294002+2-APB(30μmol/L)组相近(P0.05),小于LY294002+ryanodine(50μmol/L)组(P0.05)。2LY294002明显抑制TNF-α诱导的心肌细胞蛋白含量的增加及细胞体积的增大;其程度与LY294002+2-APB无统计学差异,但大于单用2-APB组,小于LY294002+ryanodine组(P0.05)。PI3K阻断剂LY294002明显抑制TNF-α诱导的心肌细胞Ca MKⅡδB和Ca N表达增加(P0.01),其抑制程度与LY294002+2-APB组相近(P0.05)。结论 PI3K通过作用IP3R使心肌细胞内Ca2+浓度增加,进而调节心肌细胞内Ca MKⅡδB和Ca N的表达,从而参与TNF-α诱导的心肌肥大。     

PI3K抑制剂LY294002对人晶状体上皮细胞E2F-1、cyclinE蛋白表达的影响

目的探讨PI3K抑制剂LY294002对人晶状体上皮细胞（LECs）增殖及E2F-1、细胞周期素E（cyclinE）蛋白表达的影响。方法人LECs常规培养,分为实验组和对照组,实验组加入PI3K抑制剂LY294002（25μmol/L）,对照组加入同体积DMSO,两组分别培养36 h后,MTT比色法测定细胞增殖状况,Western blot法检测细胞中E2F-1及cyclinE蛋白表达。结果实验组细胞增殖受到明显抑制,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）,人LECs中E2F-1及cyclinE蛋白表达降低（P〈0.05）。结论 PI3K抑制剂LY294002可抑制人LECs的增殖,可能与下调E2F-1及cyclinE蛋白的表达水平相关。     

抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路对兔原代巨噬细胞自体吞噬的影响及机制

目的 探讨抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路对兔原代巨噬细胞自体吞噬中的影响。方法 分离培养纯种新西兰兔腹腔原代巨噬细胞并分为4组,加入磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）抑制剂LY294002（10 μmol/L）组、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）抑制剂雷帕霉素（10 nmol/L）组、蛋白激酶B（Akt）抑制剂曲西立滨组（20 μmol/L）以及空白对照组。共培养4 h、12 h后分别收集细胞,运用透射电镜观察巨噬细胞自噬体的变化,细胞免疫荧光法检测微管相关蛋白轻链3Ⅱ（LC3Ⅱ）分子的表达,Western blot检测 Akt、mTOR、磷酸化Akt（p-Akt）、磷酸化mTOR（p-mTOR）及自噬相关蛋白Beclin-1和自噬蛋白Atg5-Atg12连接体的表达,单丹酰尸胺（MDC）染色法观察自噬溶酶体的变化。结果 与空白对照组相比,透射电镜下LY294002组自噬体、自噬空泡、髓磷脂图像等自噬标记物明显减少,雷帕霉素组、曲西立滨组明显增多;激光共聚焦显微镜下LY294002组LC3Ⅱ表达显著减少,雷帕霉素组、曲西立滨组表达显著增多;Western blot结果显示LY294002组Beclin-1及Atg5-Atg12蛋白表达水平显著下降,p-mTOR、p-Akt蛋白表达显著减少;雷帕霉素组、曲西立滨组Beclin-1及Atg5-Atg12蛋白表达水平明显上调,共培养4 h后p-Akt表达增多,雷帕霉素组p-mTOR表达增多,曲西立滨组减少;共培养12 h后雷帕霉素组、曲西立滨组p-mTOR表达显著减少,雷帕霉素组p-Akt表达显著增多,曲西立滨组显著减少;MDC染色显示LY294002组自噬溶酶体明显减少,雷帕霉素组、曲西立滨组明显增多。结论 抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路能促进兔原代巨噬细胞自体吞噬,抑制PI3K能减少兔原代巨噬细胞自体吞噬,可能是不同类型的PI3K分子通过其他通路起作用。     

巨噬细胞游走抑制因子通过PI3K／Akt信号通路调控人结肠癌细胞株HT-29增殖和血管生成因子表达

背景：巨噬细胞游走抑制因子（MIF）是-种多功能细胞因子,其在结直肠癌发生、发展中的作用机制尚不明确。目的：探讨MIF是否通过P13K／Akt信号通路调控人结肠癌细胞增殖和血管生成因子表达。方法：人结肠癌细胞株HT-29分为对照组（RPMI-1640）、重组人MIF（rhMIF）组、PI3K抑制剂LY294002组和LY294002预处理联合rhMIF组,并予相应干预。以甲基噻唑基四唑（MTT）法检测HT-29细胞增殖状态,分别以逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和酶联免疫吸附测定（ELISA）检测血管内皮生长因子（VEGF）、白细胞介素-8（IL-8）mRNA表达和蛋白分泌,蛋白质印迹法检测Akt和磷酸化Akt（p—Akt）蛋白表达。结果：rhMIF对HT-29细胞具有促增殖作用,能增加细胞VEGF、IL-8 mRNA表达和蛋白分泌,并促进Akt蛋白磷酸化（P＜0．05）;而先予LY294002预处理可显著抑制rhMIF的上述作用．HT-29细胞增殖显著受抑（P＜0．05）,VEGF、IL-8mRNA表达、蛋白分泌以及p-Akt蛋白水平与对照组相比无明显差异。各组总Akt蛋白水平均无明显差异。结论：MIF诱导人结肠癌细胞增殖和血管生成因子表达可能是通过活化PI3K／Akt信号通路实现的。     

LY294002对人胃腺癌细胞株BGC-823糖酵解水平的影响及其机制探讨

背景:有氧糖酵解是肿瘤细胞的特征性表型之一,靶向糖酵解有望成为一种有效的肿瘤治疗策略。M2型丙酮酸激酶(PKM2)在肿瘤组织中呈高表达,参与肿瘤细胞的有氧糖酵解。缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)是调控肿瘤细胞糖酵解相关基因表达的重要转录因子,而PI3K信号在肿瘤细胞中可上调HIF-1α表达。目的:探讨PI3K特异性抑制剂LY294002对人胃腺癌细胞增殖和糖酵解水平的影响及其可能机制。方法:以不同浓度LY294002(10～100μmol/L)在不同条件下(常氧或缺氧)处理人胃腺癌细胞株BGC-823,CCK-8实验和流式细胞分析检测细胞增殖和细胞凋亡,蛋白质印迹法检测p-Akt、p-mTOR、HIF-1α、PKM2表达,比色法检测反映糖酵解水平的胞内乳酸脱氢酶活性和胞外乳酸浓度。结果:LY294002可呈浓度和时间依赖性地抑制BGC-823细胞增殖,在较高浓度时可诱导细胞早期凋亡。LY294002可呈浓度依赖性地抑制p-Akt、p-mTOR、HIF-1α表达,在较高浓度时可抑制PKM2表达,同时降低糖酵解水平。缺氧诱导可消除LY294002对HIF-1α、PKM2表达和糖酵解水平的抑制作用。结论:LY294002可通过阻断PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制人胃腺癌细胞增殖及其糖酵解水平,而HIF-1α介导了糖酵解的抑制过程。     

间充质干细胞分泌的血管内皮生长因子对心肌细胞的保护作用

目的:探索间充质干细胞通过其分泌的血管内皮生长因子对H9C2细胞的保护作用及机制。方法: 收集骨髓源间充质干细胞的条件培养基,分别处理培养,将其置于缺氧小室缺氧处理21 h,复氧处理6 h。阻断实验利用VEGFR阻断剂SU5416与间充质干细胞的条件培养基共处理。随后,利用流式细胞术ANNEXIN/PI双标法分析其凋亡变化。Western blotting分析H9C2细胞pAkt的表达。结果: RT PCR结果显示间充质干细胞表达血管内皮生长因子,Western blotting结果显示间充质干细胞条件培养基增加了H9C2细胞pAkt的水平。AnnexinV/PI分析发现间充质干细胞条件培养基明显降低了H9C2细胞缺氧复氧的凋亡,且这种抗凋亡作用能被VEGFR阻断剂SU5416或PI3 K/Akt途径阻断剂LY294002所阻断。结论: 间充质干细胞通过其分泌的血管内皮生长因子通过激活PI3 K/Akt途径保护H9C2细胞。     

甲状旁腺素对骨髓间充质干细胞增殖、分化和旁分泌功能的影响

目的观察甲状旁腺素(PTH)对体外培养人骨髓间充质干细胞(hMSCs)增殖、分化、干性(stemness)和旁分泌功能的作用。方法采用标准培养基体外培养人骨髓间充质干细胞,并将其分为对照组和PTH干预组,用细胞计数测试和BrdU增殖检测细胞增殖变化。用碱性磷酸酶染色、油红染色、阿利新蓝染色检测细胞分化情况。用Real-time PCR检测hMSCs OCT-4、Nanog、SOX-2、CCND1、C-MYC等基因表达情况。用ELISA方法检测hMSCs培养上清液基质细胞衍生因子-1(SDF-1)、胰岛素样生长因子(IGF-1)、血管内皮生长因子(VEGF)、骨形态发生蛋白2(BMP2)和Angiopoietin1蛋白水平。结果使用10-8mol/L~10-9mol/L的PTH干预6 d可明显促进hMSCs增殖(P0.05),PTH 10-8mol/L促进成骨、软骨分化,抑制脂肪分化。PTH 10-8mol/L可明显诱导CCND1和C-MYC基因表达(均P0.01),抑制OCT-4表达(P0.01),抑制Nanog和SOX-2等表达(均P0.05)),升高培养液中SDF-1、IGF-1、VEGF、BMP2和血管生成素1(Angiopoietin 1)蛋白水平(均P0.05)。结论 PTH能促进hMSCs增殖,调节其分化,但不能维持hMSCs的干性。调节hMSCs的旁分泌功能对局部微环境合成代谢、细胞迁移和血管发生产生影响。     

AKT/PI3K信号通路介导的干细胞动员在抗心梗后心律失常中的作用

目的 探讨心肌梗死（MI）后丝氨酸/苏氨酸/磷脂酰肌醇-3激酶（AKT/PI3K）信号通路介导的心脏干细胞（CSCs）动员对抗心梗后心律失常的影响.方法 将大鼠随机分为5组,每组20只：对照组（CON组）、结扎组（LI组）、结扎＋注射组（LI＋LY组）、缺血预处理＋结扎组（IP＋LI组）、缺血预处理＋结扎＋注射组（IP＋LI＋LY组）.采用结扎LAD的方法建立心梗模型,采用流式细胞分析、ELISA法等检测各组AKT/PI3K信号通路相关指标的表达情况及心律失常的发生情况.结果 LI＋LY组炎症反应显著高于其他各组,IP＋LI组显著低于IP＋LI＋LY组、LI＋LY组、LI组（P＜0.05）;IP＋LI组比LI组CD34＋、Oct4＋细胞的数量多（P＜0.05）;与CON组相比,IP＋LI组SDF-1表达显著增加,LI＋LY组及LI组表达明显减少（P＜0.05）;与LI组比较,IP＋LI组心律失常的发生率明显降低,QTc间期也明显缩短（P＜0.05）.结论 通过激活内源性Akt/PI3K信号通路,可有效促进内源性心脏干细胞动员及归巢,使心肌细胞再生,从而改善心脏功能,降低心肌缺血后室性心律失常的发生.     

血管钙化大鼠模型的肾脏损伤研究

目的观察血管钙化大鼠模型肾脏损伤及其病理变化。方法采用维生素D3（300000U／kg）和尼古丁（25mg／kg,溶于花生油）诱导大鼠血管钙化模型,以钙离子测试盒、碱性磷酸酶试剂盒测定钙含量和碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）活性,以Von Kossa染色检测血管钙化程度;以肌氨酸氧化酶法检测大鼠血清肌酐浓度;苏木素伊红染色观察肾脏结构,Masson染色观察肾组织胶原的增生情况。结果血管钙化大鼠Von Kossa染色可见主动脉有大量黑色颗粒沉淀,表明有大量钙盐沉积;血管钙含量[（0．410±0．0166）μmol·g^-1 vs.（0．270±0．019）μmol·g^-1,P〈0．05]、ALP活性[（186．900±10．960）U·g^-1 vs.（119．100±8．646）U·g^-1,P〈0．05]、血清肌酐浓度[（48．330±0．989）μmol／L憾（35．000±1．155）μmol／L,P〈0．05]较正常组升高,差异有统计学意义。苏木素伊红染色可见肾脏病理改变;Masson染色可见胶原增生。结论钙化大鼠肾功能和病理改变可能与肾脏纤维化、肾小球硬化及炎症因子等有关。     

Role of the phosphatidylinositol 3'-kinase-Akt signal pathway in the proliferation of human pancreatic ductal carcinoma cell lines

: Phosphatidylinositol 3'-kinase (PI3K) and Akt mediate survival signals and allow the cells to escape apoptosis in various human cancers. We postulated that LY294002, a PI3K inhibitor, might inactivate Akt, consequently inhibiting cell proliferation in 3 human pancreatic ductal carcinoma cell lines, PSN-1, PANC-1, and KP-4. LY294002 (50 micromol/L) caused a decrease in phosphorylated Akt and inhibition of cell proliferation in a time-dependent manner, but there was no obvious induction of apoptosis. Flow cytometric analysis revealed that pancreatic cancer cells treated with 50 micromol/L LY294002 underwent G1 arrest, which was associated with dephosphorylation of the ppRB protein, a decrease in the protein expression of cyclin D and E, and their activating partners Cdk2, 4, and 6 with simultaneous accumulation of P27/Kip1. Our data indicate that P27/Kip1 accumulation by Akt inactivation could induce cell cycle arrest in the G1 phase and suggest that the PI3K-Akt pathway plays an important role in cell proliferation in human pancreatic ductal carcinoma cells.     

配对使用陈皮半夏对颈动脉粥样硬化家兔磷脂酰肌醇3激酶和磷酸化蛋白激酶B表达的影响

目的探讨配对使用陈皮半夏对家兔磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)-蛋白激酶B(Akt)信号通路的调节而治疗颈动脉粥样硬化。方法取20只家兔,通过随机数字表法分为对照组、模型组、陈皮半夏治疗组和陈皮半夏+LY294002(PI3K/Akt通路特异性抑制剂)组,每组5只。给予对照组家兔基础饲料喂饲,其余各组予以高脂饲料并实施颈动脉内膜空气干燥术。术后对陈皮半夏治疗组和陈皮半夏+LY294002组家兔使用中药灌胃。通过HE染色,观察颈动脉粥样硬化的病理学改变;通过Western blot方法,观察陈皮半夏对颈动脉粥样硬化家兔血管PI3K和p-Akt表达的影响。结果 (1)颈动脉内PI3K与p-Akt蛋白表达相对量,模型组为107.0±2.6和113.0±1.7,陈皮半夏治疗组为174.7±14.5和186.3±18.3,两组比较差异有统计学意义(P0.01);使用PI3K/Akt通路特异性阻滞剂LY294002后,颈动脉血管内皮的PI3K和p-Akt表达(117.0±4.0、127.3±4.7)低于陈皮半夏治疗组,两组比较差异有统计学意义(P0.01)。(2)造模后4周,病理检查显示兔颈动脉内膜轻度增生程度陈皮半夏组轻于模型组。结论陈皮半夏有可能通过上调血管内皮细胞中PI3K和p-Akt的表达,发挥治疗颈动脉粥样硬化的作用。