射频热毁损治疗肝癌前后血液中AFPmRNA变化及意义

目的探讨肝癌射频热毁损(RFA)治疗前后血液中AFP-mRNA变化及其意义。方法应用RT-PCR检测技术对术前术后48小时,72小时,1周及术后2周肝癌患者周围静脉血液中AFPmRNA,并观察变化。结果183例术前血液中AFPmRNA阴性的肝癌患者中有62例术后72小时转为阳性,但术后1周时复转阴性;而129例术前血液中AFPmRNA阳性的肝癌患者112例术后2w转为阴性;其中17例术后2周仍为阳性,术后证实有病灶残留。结论射频热毁损治疗肝癌可引起血液AFPmRNA一过性升高;血液AFPmRNA可成为判断RFA术后复发或残留的客观性指标之一。     

高强度聚焦超声治疗对肝癌患者外周血AFP mRNA的影响

目的　探讨高强度聚焦超声治疗对肝癌细胞血道播散的影响。方法　应用Nested RT PCR技术检测19例患者高强度聚焦超声治疗前、后外周血AFPmRNA的表达 ,观察其对肝癌细胞血道播散的影响。结果　①高强度聚焦超声治疗前 ,19例肝癌患者外周血检出AFPmRNA表达者 11例 ( 5 7.9% ) ,良性疾病对照组均未检出。治疗前AFPmRNA表达阳性率与血清AFP水平、肿瘤直径、门静脉癌栓、远处转移等临床参数明显相关 (P<0 .0 5 )。②余 8例治疗前AFPmRNA表达阴性者 ,有 2例于术后即刻转为阳性 ,其中 1例于 72h后又复转为阴性 ;19例患者于治疗后 1周时其AFPmRNA表达阳性率 ( 31.6 % )低于治疗前 ,但差异无统计学意义 (P>0 .0 5 )。③治疗后 1周时 ,肿瘤直径≤8cm者AFPmRNA表达阳性率低于直径>8cm者 (P<0 .0 5 )。结论　高强度聚焦超声治疗可能会降低肝癌的血道播散 ,特别是对于肿瘤直径 ≤8cm的肝癌患者 ,疗效较好。     

荧光定量检测肝癌、癌旁组织及外周血AFP mRNA

目的　探讨肝癌、癌旁组织及外周血AFPmRNA的表达意义。方法　应用荧光定量聚合酶链反应 (FQ -PCR)定量检测 30例原发性肝癌术前外周血、肝癌组织、癌旁组织AFPmRNA。结果　肝癌组织AFPmRNA的基因拷贝数与组织的分化程度、有无肝内浸润和 (或 )转移及血清AFP明显相关 ;而与外周血的AFPmRNA的表达相关无显著性 ;肝癌组织与癌旁组织AFPmRNA的表达量差异有显著性。结论　定量检测AFPmRNA表达情况可能判断肝癌组织的分化程度及早期诊断微小肝癌、肝癌的复发和转移 ,并指导治疗 ,判断预后。     

应用巢式RT-PCR联合检测原发性肝癌病人外周血AFPmRNA和MAGE-1mRNA的表达

目的 寻找一种敏感的方法以早期发现原发性肝癌的复发与转移。方法 应用逆转录聚合酶链反应分别在术前、术后1周和术后2个月检测37例行根治性切除的原发性肝癌病人外周血中MAGE-1 mRNA和AFPmRNA的表达，并随访所有病人1年。结果 外周血中MAGE-1 mRNA和AFPmRNA的阳性率和肿瘤的病理分期相关；肿瘤病期越晚，外周血中微转移灶的检出率越高。1年的随访中，有9例病人出现复发，MAGE-1和(或)AFPmRNA的阳性率为77．8％(7／9)，其中6例外周血中MAGE-1mRNA和(或)AFPmRNA持续阳性，2例由阴性转为阳性。另有10例病人MAGE-1mRNA和(或)AFPmRNA由术前阳性术后转为阴性，随访1年中无复发。结论 联合检测外周血MAGE-1和AFPmRNA的表达是早期发现肝癌术后复发、评估预后一项敏感可信的指标。     

乳腺癌患者CK19mRNA表达的意义及辅助化疗对骨髓微转移的影响

目的探讨乳腺癌患者外周血、淋巴结和骨髓的微转移情况,以及辅助化疗对骨髓微转移的影响。方法采用RT-PCR技术同时检测可手术的69例乳腺癌患者的外周血、淋巴结和骨髓中CK19 mRNA的表达,并观察辅助化疗对骨髓微转移的影响。结果骨髓微转移24例(34.8%),外周血CK19mRNA阳性11例(15.9%)。淋巴结微转移阳性40例(58.0%),其中淋巴结病理学检查阳性的35例中,32例(91.4%)淋巴结微转移阳性,在淋巴结病理学检查阴性的34例中,8例(23.5%)淋巴结微转移阳性。淋巴结微转移阳性的40例中,18例(45.0%)骨髓微转移阳性。24例骨髓微转移阳性的患者在接受6个周期的CAF方案辅助化疗后,有7例骨髓微转移转阴(29.2%)。结论CK19 mRNA的表达可作为评价乳腺癌微转移的指标。外周血微转移的检测,其敏感性和特异性较骨髓差;骨髓微转移的检测可作为评价辅助化疗敏感性的指标之一。     

外周血甲胎蛋白mRNA和黑色素瘤抗原-1 mRNA联合表达与肝细胞癌术后复发转移的关系

目的 探讨外周血甲胎蛋白（AFP）mRNA和黑色素瘤抗原-1（MAGE-1）mRNA联合表达在早期发现肝细胞癌患者术后复发或转移的意义。方法 应用巢式逆转录聚合酶链反应技术分别在术前、术后1周和2个月检测142例行根治性切除的肝细胞癌患者外周血中AFPmRNA和MAGE-1mRNA的表达，随访时间从术后至22个月，中位随访时间为15．5个月。结果 外周血中MAGE-1mRNA和／或AFPmRNA的阳性率和肿瘤的病理分期呈正相关：肿瘤病期越晚，外周血中肝癌细胞的检出率越高（χ^2=17．873，P〈0．01）。AFPmRNA和Mage-1mRNA阳性率均与癌结节数目、门静脉癌栓、肝内、外转移等临床参数显著相关（χ^2=11．510，χ^2=15、149，χ^2=11．653，χ^2=6．805，均P〈0.01），而与肝癌分化程度、肿瘤直径等无相关性（χ^2=1．513，χ^2=1．343，均P〉0．05）。术后55例患者出现复发或转移，其中38例患者外周血MAGE-1mRNA和／或AFPmRNA持续阳性，14例由术前阴性转为阳性。而62例由术前阳性转为术后阴性者，随访中未见复发或转移。术后外周血AFPmRNA和／或MAGE-1mRNA阳性组中，有88．1％（52／59）的患者出现复发或转移，而阴性组中复发或转移者仅占3．6％（3／83），两组比较，差异有统计学意义（χ^22=103．817，P=0．000）。结论 联合检测外周血MAGE-1和AFPmRNA的表达可能早期发现肝细胞癌术后复发或转移，可以作为评估预后的指标。     

前列腺特异膜抗原mRNA的临床应用研究

目的 :通过检测治疗前后的前列腺癌 (PC)病人外周血前列腺特异膜抗原信使核糖核酸 (PSMAmRNA)的表达 ,了解原发性前列腺癌的血行播散情况及为前列腺癌综合治疗提供依据。　方法 :采用巢式逆转录—聚合酶链反应 (RT PCR)检测技术 ,对 31例PC病人外周血PSMAmRNA的表达进行了研究。　结果 :31例样本中 ,17例PC病人 (5 4.8% )PSMAmRNA阳性 ,10例正常人和 2 1例良性前列腺肥大 (BPH)病人全阴性 ;10例伴远处转移的PC病人外周血PSMAmRNA全阳性 ,2 1例检测时尚无转移证据者 33.3% (7/ 2 1)阳性 ;外周血PSMAmRNA阳性率与血清PSA水平密切相关 ;根治术或姑息性治疗前、后外周血PSMAmRNA阳性率差异无显著性。　结论 :外周血PSMAmRNA检测可诊断前列腺癌血行播散及转移 ,可作为预测前列腺癌复发、转移的参考指标 ,对外周血PSMAmRNA阳性病人应在围手术期辅以激素、放疗或免疫等辅助治疗 ,以预防肿瘤复发、转移。     

肝切除、冷冻及射频治疗对肝细胞癌血源性播散影响的研究

目的评价肝切除术、冷冻及射频治疗对肝癌细胞的血源性播散的影响。方法分别于手术前后采取接受肝切除术、冷冻及射频治疗的36例、11例及13例原发性肝癌病人的外周血,提取有核细胞总RNA,采用逆转录后荧光定量聚合酶链式反应(fluorescent quantitative polym erase chainreaction,FQ-PCR)检测外周血甲胎球蛋白(α-fetoprote in,AFP)mRNA。结果肝切除组阳性例数由术前的11例增加到术后的13例,冷冻治疗组由4例增加到5例,射频治疗组无变化;各组的阳性率分别由术前的30.56%、36.36%、38.46%升至术后的36.11%、45.45%、38.46%。经统计学分析AFPmRNA的变化无显著性差异(P>0.05)。结论肝切除术、冷冻及射频治疗没有造成原发性肝癌的血源性扩散,是原发性肝癌可靠的外科治疗方法。     

巢式RT-PCR定量检测肝癌、癌旁组织及正常肝组织内AFPmRNA

目的:探讨肝癌、癌旁组织及正常肝组织内AFPmRNA的表达含量 。方法:应用巢式RT-PCR定量检测肝癌、癌旁组织及正常肝组织内AFPmRNA 。结果:17例AFP（+）癌旁组织内AFPmRNA表达强阳性（+++）,其癌旁组织内AFPmRNA表达呈中度阳性（++）。15例AFP（-）肝癌、癌旁组织及正常肝组织内AFPmRNA表达弱阳性（+） 。结论:AFP（+）肝癌组织过量表达AFPmRNA基因,正常肝组织仅微弱表达AFPmRNA。     

肝癌患者RFA治疗前后血清中TNF和AFP的变化

目的　探讨原发性肝癌 (PHC)患者经集束电极射频热毁损 (RFA)治疗后血清中肿瘤坏死因子 (TNF)及甲胎蛋白 (AFP)的变化及其与患者免疫功能变化的相关性,以监测RFA治疗PHC的疗效。方法　检测 1 1 2例PHC患者RFA治疗后血清中TNF和AFP的改变,并与健康对照组 2 0例比较,分析其与患者免疫功能变化的相关性。结果　PHC患者治疗前血清TNF和AFP水平明显高于健康对照组 (P< 0. 0 1 );治疗后 1周,血清TNF与治疗前比较无明显变化 (P> 0. 0 5 ),而AFP下降明显 (P< 0. 0 1 );治疗后 2周,血清TNF下降明显 (P< 0. 0 1 ),但仍高于对照组 (P < 0. 0 1 ),AFP降至正常,与对照组比较差异无显著性 (P> 0. 0 5 )。血清TNF与AFP水平变化无相关性 (r= 0. 1 9 5, P>0. 0 5 )。RFA治疗PHC近期效果明显。结论　原发性肝癌RFA治疗后血清中TNF及AFP水平下降,提示机体免疫功能增强,并有助于判断疗效及预后。     

原发性肝癌组织VEGF与外周血AFP mRNA检测的临床意义

目的：探讨肝癌组织中血管内皮生长因子（VEGF）蛋白表达与外周血液中甲胎蛋白（AFP） mRNA表达在原发性肝细胞癌转移中的意义。方法 ： 用巢式逆转录PCR法检测20例肝癌患者术前外周血液中的AFP mRNA，对其手术切除标本采用免疫组化方法检测VEGF蛋白表达，结合临床病理资料进行配对分析。结果：（1）20例原发性肝细胞癌中10例VEGF为阳性表达，其表达情况与临床病理参数无明显相关;（2）20例肝癌中13例AFP≥200μg/L ,15例外周血液中AFP mRNA阳性；（3） VEGF阳性的10例病例中有9例在外周血中可检测到AFP mRNA。结论：（1）肝癌组织VEGF和外周血中AFP mRNA检测都可作为判断原发性肝癌有无血行转移倾向的指标，前者较为简单，而后者较为客观准确。(2) 对肝癌高危人群的普查和肝癌术后随访，应用外周血中AFP mRNA的检测方法较血清AFP水平更加敏感。     

TACE联合PEI治疗原发性肝癌血液循环性肝癌细胞的变化及意义

目的：探讨联合经肝动脉化疗栓塞术(TACE)及B超引导下肿瘤局部无水酒精注射术(PEI),治疗原发性肝癌周围静脉血液循环性肝癌细胞的变化及其意义.方法:应用巢式RT-PCR检测12例原发性肝癌患者血液循环性肝癌细胞,并经TACE及PEI联合治疗,观察其血液循环性肝癌细胞的变化.结果:血液循环性肝癌细胞表达阳性的5例原发性肝癌患者(41.67%),经TACE及PEI联合治疗后,其血液循环性肝癌细胞均转为阴性(100%,P<0.01).结论:联合TACE及PEI治疗原发性肝癌可有效地杀灭血液中播散的循环性肝癌细胞,可预防肝癌的复发和转移.     

大肠癌术后血路播散的动态追踪监测

目的 研究大肠癌血路播散在监测大肠癌患者术后复发转移中的意义。方法 使用靶向ＣＫ２０的ＲＴ－ＰＣＲ技术,对５８例大肠癌患者外周血和骨髓微转移癌细胞在术前和术后不同时间进行了动态检测。结果 术后肿瘤无复发转移的大肠癌患者ＣＫ２０的阳性率（１６.３％）显著低于复发转移者（８８.９％）。血路播散有四种情况：①术后ＣＫ２０检测曾有一度转阴;②ＣＫ２０检测持续阳性;③ＣＫ２０在术后才转阳;④ＣＫ２０术后一直阴性。死亡的６例患者术前ＣＫ２０检测均为阳性。结论 大肠癌血路播散在术后复发转移中起重要作用,动态追踪检测大肠癌ＣＫ２０的变化有助于预测肿瘤的复发转移、术前存在血路播散者预后差。     

大肠癌术中门静脉血CK20 mRNA检测临床意义的探讨

目的检测大肠癌患者门静脉和外周血中细胞角蛋白(CK20)mRNA,探讨它作为大肠癌肿瘤细胞血行播散标志的临床意义。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测63例大肠癌患者术中抽取的门静脉和外周血中CK20 mRNA和癌胚抗原(CEA)表达的阳性率,并对所测结果进行分析和比较。结果Ducks A,B期和Ducks C,D期患者门静脉血CK20 mRNA阳性表达均明显高于外周血,差异有统计学意义。随着病情进展,门静脉和外周血中CK20 mRNA表达均显著提高(65% vs 96%;33% vs 54%),但仅门静脉结果差异有统计学意义(P<0.005,χ2=8.65)。比较不同时期不同部位CK20 mRNA与CEA表达差异时,除Ducks A,B期患者门静脉血中CK20 mRNA阳性率较CEA阳性率为高且具有统计学意义外,Ducks C,D期门静脉组和各期外周血组中CK20 mRNA阳性率和CEA阳性率差异无统计学意义。结论大肠癌患者门静脉中CK20 mRNA含量高于外周血,门静脉和外周血中CK20 mRNA的阳性表达可随病情进展而增加,因此可作为大肠癌肿瘤细胞血行播散标志,应用于手术后预后判断。